水產(chǎn)品有機(jī)有害物的檢測-鏈霉素類的測定

水產(chǎn)品中阿維菌素殘留量的測定阿維菌素簡介一檢測原理二提取步驟三目錄檢測范圍四

一阿維菌素簡介

阿維菌素是由日本北里大學(xué)大村智等和美國Merck公司首先開發(fā)的一類具有殺菌、殺蟲、殺螨、殺線蟲活性的十六元大環(huán)內(nèi)酯化合物。

一阿維菌素簡介

阿維菌素是水產(chǎn)養(yǎng)殖中常見和常用的一種廣譜、高效、用量小的殺蟲劑，其性狀為白色或微黃結(jié)晶粉末或淡黃色溶液，廣泛應(yīng)用于殺滅各種魚、蝦、蟹、貝類等的單養(yǎng)和混養(yǎng)池塘及增殖水體。

阿維菌素對養(yǎng)殖動物具有高毒性，如果使用過量，魚表現(xiàn)為神經(jīng)中毒癥狀：起初興奮亂竄，然后變安靜，魚體發(fā)黑，逐漸失去平衡，側(cè)翻、仰泳，陣發(fā)性抽搐顫抖，鰓蓋長大，呼吸困難，最后死亡。1.高效液相色譜測定測定（熒光）。2.外標(biāo)法定量定量。試料中殘留的阿維菌素，用乙腈提取，正己烷除脂，通過堿性氧化鋁柱凈化，再與N-甲基咪唑和三氟乙酸酐反應(yīng)衍生化。提取原理定量方法二檢測原理1.提取過程：三提取步驟稱取試料5g士0.05g，于50mL聚丙烯離心管中；加乙腈15mL，旋渦混合1min,超聲30min；4000r/min離心5min，取上清液于另一50mL聚丙烯離心管中。殘渣中加人乙腈10mL，重復(fù)提取一次，合并兩次提取液；在提取液中加正已烷10mL，充分渦旋混合1min，4000r/min離心5min，棄上層正已烷層。提取液中再加正已烷10mL,重復(fù)提取一次,棄正己烷層,備用。2.凈化過程：三提取步驟活化：加入10mL乙腈；上樣（除雜）：取備用液過柱并收集；洗脫：再用乙腈10mL洗脫；濃縮：合并濾液，45℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干；復(fù)容：3mL乙腈分兩次溶解殘余物；再濃縮：

45℃~55℃水浴氮氣吹干；3.衍生化：三提取步驟加衍生化試劑A100μL（50%N-甲基咪唑乙腈溶液）,蓋緊塞子，旋渦混合30s；再加衍生化試劑B150μL（35%三氟乙酸酐乙腈溶液）,蓋緊塞子，旋渦混合30s；密封避光,室溫下術(shù)生15min；加甲醇750μL，旋渦混合30s，過濾，供高效液相色譜測定。范圍：四檢測范圍水產(chǎn)品。阿維菌素和伊維菌素。水產(chǎn)品中鏈霉素殘留量的測定

鏈霉素是1943年美國加州大學(xué)伯克利分校博士、羅格斯大學(xué)教授賽爾曼·A·瓦克斯曼從鏈霉菌中分離得到的，是繼青霉素后第二個生產(chǎn)并用于臨床的抗生素，瓦克斯曼也因此獲得1952年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎。一鏈霉素的發(fā)現(xiàn)

鏈霉素（streptomycin）是一種氨基糖苷類抗生素，屬于氨基糖甙堿性化合物，它與結(jié)核桿菌菌體核糖核酸蛋白體蛋白質(zhì)結(jié)合，起到了干擾結(jié)核桿菌蛋白質(zhì)合成的作用，從而殺滅或者抑制結(jié)核桿菌生長的作用。它的抗結(jié)核桿菌的特效作用，開創(chuàng)了結(jié)核病治療的新紀(jì)元。

鏈霉素在水產(chǎn)品中應(yīng)用一般都是來治療細(xì)菌性疾病，主要是針對革蘭氏陰性菌造成的疾病。一鏈霉素的作用

相色譜——熒光檢測器：在堿性條件下柱后衍生外標(biāo)法定量。以三氯乙酸提取樣品中的鏈霉素，經(jīng)過C18固相萃取柱凈化。提取原理定量方法二檢測原理1.提取過程：三提取步驟稱取試樣(5±0.02g)于50mL離心管中，加人10mL三氯乙酸溶液，10000r/min均質(zhì)1min，振蕩5min，4500r/min離心15min，上清液轉(zhuǎn)移至燒杯中殘渣重復(fù)提取，合并提取液定容至25mL，待凈化2.凈化過程：三提取步驟活化：5mL甲醇和10mL水。上樣：將提取液過C18固相萃取柱。洗滌：依次用10mL水和4mL叔丁基甲醚-正己烷溶液淋洗。洗脫：用5mL甲醇洗脫。濃縮：洗脫液氮吹至近干(≤40℃)。復(fù)容：2mL庚烷磺酸鈉溶液溶解，過0.45μm濾膜測定。四結(jié)果計算式中:X——試樣中鏈霉素含量，單位為微克每千克(ug/kg);Cs——標(biāo)準(zhǔn)溶液中鏈霉素含量，單位為微克每毫升(ug/mL);A——試樣液中鏈霉素的峰面積;V——提取液最終定容體積，單位為毫升(mL);As——溶液中鏈霉索的峰面積;m——試樣質(zhì)量,單位為克(g)。計算結(jié)果需扣除空白值，結(jié)果保留三位有效數(shù)字。參數(shù)范圍：五注意事項靈敏度：本方法最低定量限100