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腦脊液流式細(xì)胞學(xué)檢查在鑒別診斷小兒急性淋巴細(xì)胞白血病并中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病中價值
急性淋巴結(jié)出血是兒童常見的腫瘤疾病,約占兒童病變的70%。隨著化療和分級治療的改善,80%的兒童可能能有更長的生活時間。1數(shù)據(jù)和方法1.1選取治療患兒選取2013年6月30日至2018年6月30日本院收治的98例首診ALL患兒。選取標(biāo)準(zhǔn):在我院首診為ALL,既往未接受其他白血病相關(guān)治療;符合ALL診斷標(biāo)準(zhǔn)1.2瞳視和細(xì)胞學(xué)檢查可存在中樞神經(jīng)系統(tǒng)臨床特征:頭痛、抽搐、嘔吐、視網(wǎng)膜出血、口角歪斜、視物模糊以及視乳頭水腫等;腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查見白血病細(xì)胞;排除其他疾?。ㄈ缒X炎)等引起的相似性改變;顱內(nèi)壓>0.02kPa,腦脊液中白細(xì)胞>101.3常規(guī)生化檢測患兒均接受腰椎穿刺取腦脊液樣本,要求一次成功,避免穿刺損傷對樣本造成影響。對腦脊液樣本進(jìn)行常規(guī)生化檢測。取第一次腦脊液檢查的標(biāo)本進(jìn)行FCM和CC檢查。1.3.1心組織形態(tài)觀察取0.1ml腦脊液樣本吹打混合均勻,放入離心管,離心1min(200×g),制作腦脊液涂片,并進(jìn)行瑞氏染色,待自然晾干后放于顯微鏡下觀察涂片中細(xì)胞形態(tài)。CC陽性指涂片中見幼稚原始白血病細(xì)胞,否則為陰性。1.3.2fcm檢測取約2ml腦脊液樣本,離心后取沉淀細(xì)胞放入試管中,加入紅細(xì)胞裂解液。根據(jù)免疫分型結(jié)果(初診時免疫表型表達(dá)最強(qiáng)者)選擇20μl單克隆抗體(美國BD公司提供)加入試管中,室溫避光15min后加PBS定容,進(jìn)行FCM檢測?;純壕褂肅D34及CD45單抗標(biāo)記。FCM陽性指腦脊液未被血液污染且可檢測到白血病細(xì)胞免疫表型或腦脊液混血后白血病細(xì)胞免疫表型高于外周血中幼稚細(xì)胞,否則為陰性。1.4cc影像學(xué)表現(xiàn)⑴兩種檢測方法對異形細(xì)胞的檢出率。⑵兩種檢查方法對CNS狀態(tài)的檢出情況,根據(jù)患兒臨床表現(xiàn)、影像學(xué)結(jié)果及CC結(jié)果將ALL分為CNS-1、CNS-2、CNS-3。CNS-1指CC陰性且無CNS相關(guān)臨床及影像學(xué)表現(xiàn);CNS-2:腰穿無損傷時CC檢測中白細(xì)胞數(shù)≤5/μl,且可見白血病細(xì)胞,腰穿損傷時CC檢測結(jié)果可見白血病細(xì)胞或血性腦脊液中白細(xì)胞數(shù)>50×101.5統(tǒng)計方法采用SPSS23.0分析數(shù)據(jù),F(xiàn)CM和CC檢出率比較使用卡方檢驗,P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。2結(jié)果2.1中位隨訪結(jié)果98例ALL患兒年齡3~14歲,平均(6.5±2.1)歲,男51例,女47例,隨訪時間12~42月,中位隨訪時間32個月,死亡14例,復(fù)發(fā)8例,4例放棄治療。共4例患兒確診為中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病,其中3例FCM陽性且CC陽性,1例FCM陰性且CC陰性。特殊融合基因Tel/AML115例,Bcr/ab1p2102例,Bcr/ab1p1905例,TKD2例,MLL/AF45例。2.2%是抗混紡絲網(wǎng)絡(luò)攻擊描述FCM檢出24例患兒腦脊液中存在異形細(xì)胞,檢出率為24.5%;CC檢出11例患兒腦脊液中存在異常細(xì)胞,檢出率為11.2%,FCM對異形細(xì)胞檢出率高于CC,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),表1。2.3cc與cc患兒形細(xì)胞檢出率比較在腦脊液蛋白質(zhì)陽性、腦壓升高、腦脊液血糖增高患兒中,F(xiàn)CM對異形細(xì)胞的檢出率均高于CC患兒,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。而兩種檢查方法在腦脊液蛋白質(zhì)陰性、腦壓正常、腦脊液血糖正常患兒中對異形細(xì)胞的檢出率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),表2。2.4fcm和ccm對cns-1、中性患者檢出情況FCM和CC陽性患者CNS狀態(tài)及危險度分布差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),但FCM對CNS-1、中度患者檢出率高于CC,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。表3。3fcm和cc對男性患者臨床病理性狀及危險度分布的診斷價值中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病是小兒ALL治療失敗和疾病進(jìn)展的重要因素,早期診斷和治療可提高生存期、降低患兒死亡率本研究共納入98例ALL患兒,共4例患兒確診為中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病,發(fā)病率為4.0%,既往研究報道,ALL發(fā)生中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病幾率為2.0%~6.6%,本研究與既往研究報道相符既往研究報道,F(xiàn)CM在成人ALL患者中樞神經(jīng)系統(tǒng)受累的診斷效果優(yōu)于傳統(tǒng)細(xì)胞學(xué)檢查,敏感性更高本研究中,F(xiàn)CM和CC陽性患者CNS狀態(tài)及危險度分布差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),提示FCM和CC陽性對CNS狀態(tài)及危險度分布診斷價值相當(dāng),但FCM對CNS-1、中度患者檢出率高于CC,提示FCM對CNS-1及中度危險患兒的敏感性更高。而FCM對CNS-
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