天然藥物化學(xué)課件-第五章-黃酮總結(jié)

第五章

黃酮類化合物

（Flavonoids）

天然藥物化學(xué)第五章

黃酮類化合物

（Flavonoids）

天然藥物基本內(nèi)容黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)特征、分類；主要性質(zhì)、及酸性與羥基取代位置、數(shù)目的關(guān)系；呈色反應(yīng)在鑒別及結(jié)構(gòu)測(cè)定工作中的用途和意義；黃酮類化合物的提取分離原理：聚酰胺柱色譜分析法（酚類化合物）梯度PH萃取法（酚酸類化合物）鉛鹽沉淀法（分子中具有羧酸、鄰二酚羥基及特殊絡(luò)合結(jié)構(gòu)）黃酮類化合物的譜學(xué)特征，UV、1H-NMR、13C-NMR及MS規(guī)律及在結(jié)構(gòu)測(cè)定中的重要意義。基本內(nèi)容黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)特征、分類；基本要求掌握黃酮類化合物結(jié)構(gòu)分類，酸性判別及鑒別方法；熟悉酚酸類化合物提取分離方法的原理和應(yīng)用；及黃酮類化合物結(jié)構(gòu)鑒定方法和譜學(xué)特征?；疽笳莆拯S酮類化合物結(jié)構(gòu)分類，酸性判別及鑒別方法；本章內(nèi)容第一節(jié)緒論第二節(jié)理化性質(zhì)與顏色反應(yīng)第三節(jié)提取分離方法第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定第五節(jié)結(jié)構(gòu)研究實(shí)例本章內(nèi)容第一節(jié)緒論一、定義：

黃酮類化合物是泛指兩個(gè)苯環(huán)通過(guò)三碳相互連接而成的一系列化合物。第一節(jié)緒論二、生物合成途徑及分類：桂皮酸－莽草酸途徑一、定義：第一節(jié)緒論二、生物合成途徑及分類：第一節(jié)緒論第一節(jié)緒論查耳酮查耳酮C3-位：有OH

黃酮醇

(Flavonol)

無(wú)OH

黃酮(Flavone)C2－3飽和：二氫黃酮（醇）(Flavanone)C3與B環(huán)相連：異黃酮（Isoflavone）C環(huán)開(kāi)環(huán)：查耳酮（Chalcone）第一節(jié)緒論C環(huán)還原：黃烷類其它類型：花色素類、橙酮類、奧弄類、高異黃酮、山酮類

C3-位：有OH黃酮醇(Flavonol)第一節(jié)緒論１．黃酮類（flavones）木犀草素（luteolin），存在于忍冬藤、菊花、浮萍中，具有抗菌作用。

１．黃酮類（flavones）木犀草素（luteolin），天然藥物化學(xué)ppt課件——第五章_黃酮總結(jié)黃芩為清熱解毒類中藥，抗菌成分主要有黃芩苷(baicalin)、次黃芩素(wogonin)等。黃芩為清熱解毒類中藥，抗菌成分主要有黃芩苷(baicalin

黃芩苷具有抗菌、解毒、降壓作用，是‘銀黃片’的主要成分；黃芩苷還有降轉(zhuǎn)氨酶的作用。

黃芩苷具有抗菌、解毒、降壓作用，是‘銀黃片’的主２．黃酮醇類（flavonols）黃酮醇黃酮２．黃酮醇類（flavonols）黃酮醇黃酮２．黃酮醇類（flavonols）

槲皮素(quercetin)具有抗炎、止咳祛痰等作用。槲皮素片用于治療支氣管炎。此外還有降低血壓、增強(qiáng)毛細(xì)血管抵抗力、減少毛細(xì)血管脆性、降血脂、擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈、增加冠脈血流量等作用。蘆丁(rutin)是槲皮素的３－O蕓香糖苷。用于治療毛細(xì)管脆弱引起的出血病，并用作高血壓的輔助治療劑。２．黃酮醇類（flavonols）槲皮素(

豆科植物槐米中含有蘆丁和槲皮素。豆科植物槐米中含有蘆丁和槲皮素。３．二氫黃酮類(flavanones)二氫黃酮黃酮黃酮醇３．二氫黃酮類(flavanones)二氫黃酮黃酮黃酮醇３．二氫黃酮類(flavanones)３．二氫黃酮類(flavanones)甘草含黃酮類化合物，主要有甘草苷（Liquiritin）、甘草苷元（Liquiritigenin）、異甘草苷（Iso-Liquiritin）、新甘草苷（Neo-Liquiritin）異甘草苷元（Iso-Liquiritigenin）、新異甘草苷（Neoisoliquiritin）等。甘草含黃酮類化合物，主要有甘草苷（Liquiritin）、甘

柚皮素（Naringenin）：來(lái)源于蕓香科植物柚(CitrusparadisiMacfadyen)的果實(shí)；具有抗菌,抗炎,抗癌,解痙和利膽作用.

結(jié)構(gòu)式：

柚皮素（Naringenin）：來(lái)源于蕓香科植物柚(4．二氫黃酮醇類(flavanonols)二氫黃酮醇二氫黃酮4．二氫黃酮醇類(flavanonols)二氫黃酮醇二氫黃酮4．二氫黃酮醇類(flavanonols)

水飛薊素具有保肝作用，用于治療急、慢性肝炎及肝硬化，代謝中毒性肝損傷。4．二氫黃酮醇類(flavanonols)水飛薊素具5．查爾酮類（chalcones）

查爾酮為苯甲醛縮苯乙酮類化合物。5．查爾酮類（chalcones）

二氫黃酮的吡酮環(huán)在堿的作用下易開(kāi)環(huán)生成6’-羥基查耳酮，由無(wú)色轉(zhuǎn)為深黃色;6’-羥基查耳酮經(jīng)酸化又能轉(zhuǎn)化為原來(lái)的二氫黃酮。二氫黃酮的吡酮環(huán)在堿的作用下易開(kāi)環(huán)生成菊科植物紅花功效應(yīng)用

活血祛瘀,用于婦女血瘀引起的閉經(jīng)、痛經(jīng)、產(chǎn)后瘀阻腹痛及癥瘕積聚;淤血所致之頭痛，胸痛，脘腹痛及風(fēng)濕痹證，關(guān)節(jié)疼痛;外傷瘀腫作痛、瘡癰腫痛及血分瘀熱、斑疹暗紫等。化學(xué)成分含紅花苷（carthamin）、新紅花苷（neocarthamin）、紅花醌苷（carthamone）、紅花多糖、棕櫚酸、肉桂酸、月桂酸。菊科植物紅花

紅花所含的色素紅花苷是第一個(gè)發(fā)現(xiàn)的查耳酮類成分。紅花在開(kāi)花初期，花冠呈淡黃色；開(kāi)花中期，花冠呈深黃色；開(kāi)花后期或采收干燥過(guò)程中由于酶的作用，氧化成紅色。紅花所含的色素紅花苷是第一個(gè)發(fā)現(xiàn)的查耳酮類成分。6．異黃酮類(isoflavones)

主要存在于豆科、鳶尾科等植物中。異黃酮黃酮6．異黃酮類(isoflavones)主要存在于豆科葛根總黃酮具有擴(kuò)冠、增加冠脈流量及降低心肌耗氧量等作用。大豆素具有類似罌粟堿的解痙作用。大豆苷、葛根素及大豆素均能緩解高血壓患者的頭痛等癥狀。葛根總黃酮具有擴(kuò)冠、增加冠脈流量及降低心肌耗氧量等作用。7．二氫異黃酮類二氫異黃酮異黃酮7．二氫異黃酮類二氫異黃酮異黃酮8．雙黃酮類

由二分子黃酮衍生物聚合生成的二聚物，多分布于裸子植物中。銀杏中含有多種雙黃酮，如銀杏素。

8．雙黃酮類由二分子黃酮衍生物聚合生成的二9．花色苷類(anthocyanidins)

是使花、葉、果、莖等呈現(xiàn)藍(lán)、紫、紅等顏色的色素。以苷的形式存在于細(xì)胞液中，經(jīng)水解可生成苷元——花色素及糖。9．花色苷類(anthocyanidins)是使花、葉10．黃烷-3-醇(flavan-3-ols)及黃烷-3，4-二醇(flavan-3,4-diols)類（-）表兒茶素（+）兒茶素10．黃烷-3-醇(flavan-3-ols)及黃烷-3，411．苯駢色酮(xanthanes)

異芒果素(isomengiferin)石韋中的異芒果素具有止咳祛痰的功效。

11．苯駢色酮(xanthanes)12．橙酮類化合物硫磺菊素(sulphuretin)12．橙酮類化合物硫磺菊素(sulphuretin)34黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)和分類黃酮苷元取代基：OH，OMe，Me，異戊烯基等黃酮苷氧苷和碳苷存在形式34黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)和分類黃酮苷元存在形式35黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)和分類取代基：-OH,-OMe,-Me,以及各種糖等取代基取代位置規(guī)律取代基A環(huán)B環(huán)-OH,-OMe5,7位3’,4’位-Me,6,8位3’位35黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)和分類取代基：-OH,-OMe,-36黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)和分類天然黃酮類化合物多以苷類形式存在。由于糖

的種類、數(shù)量、聯(lián)接位置及聯(lián)接方式不同，組成各種各樣的黃酮苷。組成苷類的糖有：

單糖：D-glc、D-gal、D-xyl、L-rha、L-ara、

D-glucuronicacid

雙糖：槐糖（glcβ1-2glc),蕓香糖（rhaα1-6glc)等。

三糖：龍膽三糖（glcβ1-6glcβ1–2fru)

槐三糖（glcβ1-2glcβ1-2glc)黃酮苷36黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)和分類天然黃酮類化合物多以苷類形式存在37氧苷碳苷

黃酮異黃酮黃酮苷黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)和分類37氧苷碳苷黃酮異黃酮黃酮苷黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)和分類本章內(nèi)容第一節(jié)緒論第二節(jié)理化性質(zhì)與顏色反應(yīng)第三節(jié)提取分離方法第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定第五節(jié)結(jié)構(gòu)研究實(shí)例本章內(nèi)容第一節(jié)緒論一、一般性狀形態(tài)：多為結(jié)晶，少數(shù)為無(wú)定形粉末。顏色：結(jié)構(gòu)存在交叉共軛體系，因此化合物多有顏色。

黃酮（醇）及其苷：呈黃色-灰黃色

查耳酮：黃-橙色

二氫黃酮（醇）：無(wú)色

異黃酮：微黃色

花色素可隨著pH值的變化顏色有所不同：紅色（pH<7），紫色(pH8.5)，藍(lán)色(pH>8.5)第二節(jié)理化性質(zhì)與顏色反應(yīng)一、一般性狀第二節(jié)理化性質(zhì)與顏色反應(yīng)溶解度黃酮(醇),查耳酮：平面型分子二氫黃酮(醇)：非平面型分子花色素：離子苷元：難溶于水，易溶于乙酸乙酯，乙醚等有機(jī)溶劑中

苷：易溶于水、乙醇、甲醇中，糖鏈越長(zhǎng)水溶性越大。第二節(jié)理化性質(zhì)與顏色反應(yīng)水中溶解度增加溶解度黃酮(醇),查耳酮：平面型分子苷元：難溶于水，易二、酸堿性酸性：來(lái)源分子中的酚羥基；可溶于堿性水溶液、吡啶、甲酰胺及二甲基甲酰胺。酸性強(qiáng)弱的比較：取決于羥基的數(shù)目和位置：

7,4′-OH>7-或4′-OH>一般OH>5-OH第二節(jié)理化性質(zhì)與顏色反應(yīng)（可用于提取、分離及鑒定工作）7534'3'二、酸堿性酸性：來(lái)源分子中的酚羥基；第二節(jié)理化性質(zhì)與顏色二、酸堿性來(lái)源：1-位氧原子的未共用電子對(duì)，顯微弱的堿性，可與強(qiáng)酸生成（金羊）鹽而溶于酸水中。第二節(jié)理化性質(zhì)與顏色反應(yīng)堿性：H+二、酸堿性來(lái)源：1-位氧原子的未共用電子對(duì)，顯微弱的堿性，可三、顯色反應(yīng)（一）還原反應(yīng)HCl-Mg反應(yīng)HCl-Zn四氫硼鈉（NaBH4)

為（+）的反應(yīng)，顏色多為橙紅-紫紅

第二節(jié)理化性質(zhì)與顏色反應(yīng)三、顯色反應(yīng)（一）還原反應(yīng)第二節(jié)理化性質(zhì)與顏色反應(yīng)HCl+MgHCl＋ZnNaBH4

＋

－＋－＋－黃酮(醇)類(苷)異黃酮（少數(shù)顯色）黃酮醇-3-O-糖苷黃酮醇二氫黃酮類注：二氫黃酮與磷鉬酸試劑反應(yīng)呈棕褐色其它黃酮類化合物二氫黃酮類（苷）黃烷醇類二氫黃酮醇二氫黃酮醇-3-O-糖苷查耳酮橙酮應(yīng)用：可用于各類化合物的鑒別HCl+MgHCl＋ZnNaBH4＋－＋－＋－黃酮(醇第二節(jié)理化性質(zhì)與顏色反應(yīng)三、顯色反應(yīng)（二）絡(luò)合反應(yīng)黃酮類化合物分子結(jié)構(gòu)中多具有下列結(jié)構(gòu)：可與金屬鹽類試劑產(chǎn)生絡(luò)合反應(yīng)（1）鋯鹽（4）鎂鹽（2）鋁鹽（5）氯化鍶（3）鉛鹽（6）三氯化鐵反應(yīng)第二節(jié)理化性質(zhì)與顏色反應(yīng)三、顯色反應(yīng)黃酮類化合物分子結(jié)構(gòu)（1）鋯鹽第二節(jié)理化性質(zhì)與顏色反應(yīng)（1）鋯鹽第二節(jié)理化性質(zhì)與顏色反應(yīng)（2）鋁鹽（3）鉛鹽黃紅第二節(jié)理化性質(zhì)與顏色反應(yīng)醋酸鉛可沉淀具有鄰二酚羥基或兼有3-OH,4=O或5-OH,4=O者。

堿式醋酸鉛可沉淀具有一般酚類化合物。（2）鋁鹽（3）鉛鹽黃紅第二節(jié)理化性質(zhì)與顏色反應(yīng)醋酸鉛可（4）鎂鹽二氫黃酮(醇),顯天藍(lán)色熒光,有5-OH更明顯黃酮(醇)、異黃酮，顯黃~橙、黃~褐色第二節(jié)理化性質(zhì)與顏色反應(yīng)（5）氯化鍶（4）鎂鹽二氫黃酮(醇),顯天藍(lán)色熒光,有5（三）硼酸顯色反應(yīng)——鑒別5-OH黃酮和2′－羥基查耳酮在酸存在下，生成亮黃色。（四）堿性試劑

NH3蒸氣：顏色加深，可逆；Na2CO3反應(yīng)不可逆。

二氫黃酮遇堿開(kāi)環(huán)：生成查耳酮，顯橙黃色。

黃酮類有鄰二酚羥基或3，4′-二羥基：在OH-中易氧化。生成由黃色、深紅色至綠棕色沉淀。第二節(jié)理化性質(zhì)與顏色反應(yīng)三、顯色反應(yīng)（三）硼酸顯色反應(yīng)——鑒別5-OH黃酮和2′－羥基查耳酮在

HCl-Mg反應(yīng)HCl-Zn反應(yīng)NaBH4反應(yīng)鋯-枸櫞酸反應(yīng)SrCl2反應(yīng)硼酸+草酸反應(yīng)Molish反應(yīng)（+）（+）（-）黃色，加枸櫞酸,褪色（+）（+）黃色（+）第二節(jié)理化性質(zhì)與顏色反應(yīng)練習(xí)一：下面的一個(gè)化合物可能發(fā)生的反應(yīng)蘆丁（rutin）

HCl-Mg反應(yīng)（+）第二節(jié)理化性質(zhì)與顏色反應(yīng)練習(xí)一：51練習(xí)二----鑒別(化學(xué)方法)ABCD51練習(xí)二----鑒別(化學(xué)方法)ABCD本章內(nèi)容第一節(jié)緒論第二節(jié)理化性質(zhì)與顏色反應(yīng)第三節(jié)提取分離方法第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定第五節(jié)結(jié)構(gòu)研究實(shí)例本章內(nèi)容第一節(jié)緒論

一、提取精制

根據(jù)化合物的性質(zhì)，可采取以下提取方法

化合物：極性——溶劑萃取

酸性——堿提酸沉

解離性—離子交換碳粉吸附法第三節(jié)提取分離方法1.溶劑萃取法一、提取精制第三節(jié)提取分離方法1.溶劑萃取法藥材甲醇或乙醇提取，回收醇浸膏加水溶解水溶液分別以不同極性溶劑萃?。ㄊ兔眩确?，乙酸乙酯，正丁醇）石油醚層（小極性）氯仿層（苷元）乙酸乙酯層（大極性苷元及單糖苷）正丁醇層（黃酮苷）水層（多糖等）第三節(jié)提取分離方法藥材甲醇或乙醇提取，回收醇浸膏加水溶解水溶液分別以不同極性溶原理：酚羥基與堿成鹽，溶于水；加酸后析出。堿：常用Ca(OH)2，或CaO水溶液。優(yōu)點(diǎn)：可使含酚羥基化合物成鹽溶解，另一方面可使含COOH的果膠、粘液質(zhì)、蛋白質(zhì)等雜質(zhì)形成沉淀而除去。注意：堿性不宜過(guò)強(qiáng)，以免破壞黃酮母核；酸化時(shí)，酸性不宜過(guò)強(qiáng)，pH3~4即可，以免形成鹽而溶解。第三節(jié)提取分離方法2.堿提酸沉法原理：酚羥基與堿成鹽，溶于水；加酸后析出。第三節(jié)提取分離第三節(jié)提取分離方法2.堿提酸沉法攪拌下加入石灰乳加水300ml槐花米（15g）調(diào)節(jié)PH8-9直火加熱保持微沸30min雙層濾紙趁熱抽濾濾液殘?jiān)?0-70度下，用濃鹽酸調(diào)PH3-4靜置實(shí)例操作第三節(jié)提取分離方法2.堿提酸沉法攪拌下加入石灰乳加水30第三節(jié)提取分離方法3.離子交換原理：酚羥基與堿成鹽，溶于水；采用陰離子交換樹(shù)脂交換，加酸后析出，用有機(jī)溶劑回流提取。第三節(jié)提取分離方法3.離子交換原理：酚羥基與堿成鹽第三節(jié)提取分離方法4.炭粉吸附法藥材甲醇提取物分次加入活性炭，攪拌，靜置，檢查上清液有無(wú)黃酮反應(yīng)，過(guò)濾濾液吸附后活性炭粉依次用沸水、沸甲醇、7%酚/水、15%酚/醇洗脫沸水沸甲醇7%酚/水15%酚/醇濃縮，加乙醚乙醚層（酚）水層（黃酮苷）第三節(jié)提取分離方法4.炭粉吸附法藥材甲醇提取物分次加入活二、分離

（一）采用各種色譜方法：硅膠色譜：按極性大小分離，主要分離極性小和中等極性的化合物?？捎肅C，PTLC。

聚酰胺色譜：原理：氫鍵吸附

葡聚糖凝膠色譜：原理：分子篩結(jié)合吸附

第三節(jié)提取分離方法二、分離（一）采用各種色譜方法：第三節(jié)提取分離方法聚酰胺：其洗脫順序先—后

(1)苷元相同,三糖苷>雙糖苷>單糖苷>苷元(2)母核上羥基增加，洗脫速度減慢(3)羥基數(shù)目相同,有締合羥基>無(wú)締合羥基(4)不同類型黃酮的洗脫順序：

異黃酮>二氫黃酮（醇）>查耳酮>黃酮>黃酮醇（芳香核、共軛雙鍵多者吸附力強(qiáng)）第三節(jié)提取分離方法聚酰胺：第三節(jié)提取分離方法第三節(jié)提取分離方法習(xí)題：下列黃酮化合物，

（1）用聚酰胺柱色譜，含水甲醇梯度洗脫，（2）用硅膠柱色譜分離，氯仿-甲醇梯度洗脫，分別寫(xiě)出洗脫順序第三節(jié)提取分離方法習(xí)題：下列黃酮化合物，

（1）用聚第三節(jié)提取分離方法答案：聚酰胺柱色譜洗脫順序：由先到后

D，E，C，B，A2.用硅膠柱色譜洗脫順序：由先到后

A，B，C，D，E第三節(jié)提取分離方法答案：聚酰胺柱色譜洗脫順序：由先到后常用型號(hào)：Sephadex-G，Sephadex-LH20機(jī)理：

分離游離黃酮－－靠吸附作用。吸附程度取決于游離酚羥基數(shù)目，苷元的羥基數(shù)越多,越難洗脫。

分離黃酮苷－－分子篩起主導(dǎo)作用。在洗脫時(shí)，黃酮苷類按分子量由大到小的順序流出柱體。葡聚糖凝膠第三節(jié)提取分離方法常用型號(hào)：Sephadex-G，Sephadex-LH20葡

應(yīng)用：分離酸性強(qiáng)弱不同的黃酮苷元酸性比較：7,4’-OH>7-或4’-OH>一般OH>5-OH溶于NaHCO3Na2CO3

不同濃度的NaOH樣品乙醚乙醚液依次萃取5%NaHCO35%Na2CO30.2%NaOH4%NaOH分別酸化各部分黃酮第三節(jié)提取分離方法（二）梯度pH萃取法應(yīng)用：分離酸性強(qiáng)弱不同的黃酮苷元溶于NaHC醋酸鉛沉淀法：鄰二酚羥基黃酮＋醋酸鉛沉淀不具有鄰二酚羥基＋堿式醋酸鉛沉淀硼酸沉淀法：鄰二酚羥基＋硼酸絡(luò)合物溶于水，與其它黃酮分離。第三節(jié)提取分離方法（三）利用分子中的特定基團(tuán)醋酸鉛沉淀法：第三節(jié)提取分離方法（三）利用分子中的特定基習(xí)題：從某植物中分離出四種化合物，其結(jié)構(gòu)如下：(1)試比較四種化合物的酸性，(2)比較極性大小(3)比較它們的Rf值大小順序：硅膠TLC

聚酰胺TLCAR1=R2=HBR1=H,R2=RhaCR1=Glc,R2=HDR1=Glc,R2=Rha酸性A>C>B>D極性D>C>B>ARf：A>B>C>DD>B>C>A第三節(jié)提取分離方法習(xí)題：從某植物中分離出四種化合物，其結(jié)構(gòu)如下：(1)試比較本章內(nèi)容第一節(jié)緒論第二節(jié)理化性質(zhì)與顏色反應(yīng)第三節(jié)提取分離方法第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定第五節(jié)結(jié)構(gòu)研究實(shí)例本章內(nèi)容第一節(jié)緒論一、色譜法的應(yīng)用硅膠TLC聚酰胺TLC雙向紙色譜法第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定一、色譜法的應(yīng)用第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定

第一向展開(kāi)：分配作用，醇性溶劑為展開(kāi)劑。如：n-BuOH-HAc-H2O上層溶液。

Rf：苷元>單糖苷>雙糖苷第二向展開(kāi)：吸附作用。水性溶劑為展開(kāi)劑。如：2~6%HAc，3%NaCl等。

Rf：(1)苷元在原點(diǎn)附近，糖鏈越長(zhǎng)，Rf越大；

(2)苷元：黃酮(醇)，查耳酮<二氫黃酮(醇)，二氫查耳酮雙向紙色譜法第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定第一向展開(kāi)：分配作用，醇性溶劑為二、紫外光譜法

黃酮存在桂皮?；氨郊柞；M成的交叉共軛系統(tǒng)，在200~400nm間，有兩個(gè)主要的紫外吸收帶A環(huán)苯甲酰系統(tǒng)峰帶II，220~280nmB環(huán)桂皮酰基系統(tǒng)峰帶I，300~400nm共性：

B環(huán)OH增加，峰帶I

紅移，特別是4‘-OH，紅移大；

A環(huán)OH增加，峰帶II紅移。第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定（一）二、紫外光譜法黃酮存在桂皮?；氨郊柞；M成的1.黃酮、黃酮醇類帶I

：黃酮類304~350nm

黃酮醇（3-OH被取代）328~357

黃酮醇（3-OH游離）352~385帶II

：240~285nm第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定峰帶I和II強(qiáng)度相似nmIII1.黃酮、黃酮醇類帶I：黃酮類304~350n黃酮及黃酮醇類化合物的紫外光譜帶（λMeOHmax，nm）槲皮素在甲醇中的紫外光譜黃酮及黃酮醇類化合物槲皮素在甲醇中的紫外光譜

取代基的影響：

帶I：母核上的－OH、-OCH3等供電基，可引起相應(yīng)吸收帶紅移。氧取代程度越高，帶I紅移越大。羥基甲基化或苷化，將引起紫移。

帶II：峰位主要受A-環(huán)氧取代程度的影響，氧取代程度越高，帶II越向紅移。B環(huán)的取代基只影響峰形。如：只有4'-OR時(shí)，為單峰；3',4'-OR時(shí)，為雙峰。第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定取代基的影響：第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定2.查耳酮、橙酮類nmIII

查耳酮

帶I340~390nm(有裂分)帶II220~270nm

橙酮370~430nm(3~4個(gè)峰)第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定帶I強(qiáng)，帶II次強(qiáng)峰2.查耳酮、橙酮類nmIII查耳酮查耳酮---橙酮---異黃酮--二氫黃酮---查耳酮---異黃酮--3.異黃酮、二氫黃酮(醇)類nmIII只有A-環(huán)苯甲酰系統(tǒng)，帶II為主峰帶II：異黃酮245~270nm

二氫黃酮（醇）270~295nm帶I：肩峰第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定帶I弱，帶II強(qiáng)峰3.異黃酮、二氫黃酮(醇)類nmIII只有A-環(huán)苯甲酰系統(tǒng)，77不同類型黃酮的UV基本特征峰形帶II（240~285nm，苯甲酰系統(tǒng)）帶I（300~400nm，桂皮酰系統(tǒng)）類型取代240-285304-350黃酮類OH取代可以使相應(yīng)的帶I或II紅移，Ｂ環(huán)具有３’,4’羥基，帶II為雙峰328-385黃酮醇類（3-OR）352-385黃酮醇類（3-OH）245-270300-400異黃酮類B環(huán)OH和OMe對(duì)帶I影響不大270-295二氫黃酮220-270340-390查爾酮類2’-OH使帶I紅移370-430橙酮類帶I有3-4個(gè)小峰77不同類型黃酮的UV基本特征峰形帶II（240~285nm（二）利用診斷試劑，判斷羥基位置1.甲醇鈉（NaOMe）黃酮類化合物上所有酚羥基，均可在NaOMe中成鹽，引起紅移。第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定黃酮醇類：

a.帶I位移40~60nm,強(qiáng)度不降。示有4’-OH.b.帶I紅移50~60nm,強(qiáng)度下降。示有3-OH,但無(wú)

4’-OH。

確定4'-OH（二）利用診斷試劑，判斷羥基位置1.甲醇鈉（NaOMe）第四二氫黃酮（醇）、異黃酮類:

a.帶II紅移35~40nm。示有5,7-OH。

b.帶I移至400nm。示無(wú)5-OH。第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定c.320~330nm,有峰，7-OH。d.3,4’-OH,3,3’,4’-OH,3’,4’,5’-OH等,隨時(shí)間延長(zhǎng),

峰衰退.黃酮醇類：二氫黃酮（醇）、異黃酮類:第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定c.320~32.醋酸鈉（NaOAc）

NaOAc堿性較NaOMe弱，只能使7-OH，4’-OH解離。由于未熔融的NaOAc中含微量HOAc，限制4’-OH的解離。第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定（二）利用診斷試劑，判斷羥基位置黃酮（醇）：帶II紅移5~20nm，示有7-OH，6，8氧取代時(shí)影響位移幅度。二氫黃酮（醇）：帶II紅移60nm，示有7-OH。帶II紅移35nm，示有5，7-OH。確定7-OH2.醋酸鈉（NaOAc）第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定（二）利用診斷試劑第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定異黃酮：帶II紅移6~20nm，示有

7-OH，。有5,6,7-三OH，6,7,8-三OH或3,3‘,4’-三OH時(shí)，峰隨時(shí)間衰退。2.醋酸鈉（NaOAc）3.NaOAc/H3BO3

鄰二酚羥基在NaOAc堿性下，可與H3BO3螯合，引起紅移。黃酮（醇）：帶I紅移12~30nm；B環(huán)具鄰二酚羥基帶II紅移5~10nmA環(huán)具鄰二酚羥基

(除5,6-二OH)確定鄰二羥基第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定異黃酮：帶II紅移6~20nm，示有7第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定異黃酮，二氫黃酮（醇）：帶II紅移10~15nm，A環(huán)具鄰二酚羥基(除5,6-二OH)。3.NaOAc/H3BO34.AlCl3及AlCl3/HCl

AlCl3與引起絡(luò)合。第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定異黃酮，二氫黃酮（醇）：3.NaOAc/生成鋁絡(luò)合物的穩(wěn)定性順序：

3-OH(黃酮醇)>5-OH(黃酮)>5-OH(二氫黃酮)>鄰二酚OH>3-OH(二氫黃酮醇)第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定生成鋁絡(luò)合物的穩(wěn)定性順序：第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定鄰二酚OH和二氫黃酮醇的3-OH形成的絡(luò)合物遇酸分解。當(dāng)3-OH與5-OH共存時(shí)，優(yōu)先生成3-OH-4-酮基絡(luò)合物。3-OH或5-OH及鄰二酚OH同時(shí)存在，形成二絡(luò)合物。第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定應(yīng)注意以下規(guī)律：鄰二酚OH和二氫黃酮醇的3-OH形成的絡(luò)合物遇酸分解。a.AlCl3/HCl與MeOH中光譜比較

相同時(shí)：示無(wú)3-OH或5-OH。

不同時(shí)：帶I紅移33~55nm，示只有5-OH，無(wú)3-OH時(shí)。帶I紅移17~20nm，示有5-OH，且6-氧代；帶I紅移50~60nm，示有5-OH、3-OH；帶I紅移60nm，示只有3-OH時(shí)。3-OH,5-OH第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定4.AlCl3及AlCl3/HCla.AlCl3/HCl與MeOH中光譜比較3-OH,5-b.AlCl3/HCl與AlCl3中光譜比較

相同時(shí)：無(wú)鄰二酚羥基；

不同時(shí)：帶I紫移30~40nm，示B環(huán)有鄰二酚羥基；帶I紫移50~60nm，示A，B環(huán)同時(shí)有鄰二酚羥基。第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定4.AlCl3及AlCl3/HClb.AlCl3/HCl與AlCl3中光譜比較第四節(jié)結(jié)構(gòu)練習(xí)：UV

max,nm:MeOH259,266sh,299sh,359NaOMe272,327,410NaOAc271,325,393NaOAc/H3BO3262,298,387AlCl3275,303sh,433AlCl3/HCl271,300,364sh,402某化合物HCl-Mg反應(yīng)（+），Molish反應(yīng)（+），ZrOCl2反應(yīng)黃色，加入枸櫞酸褪色，酸水解檢出Glc。紫外譜圖數(shù)據(jù)如下，試推斷其結(jié)構(gòu)第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定練習(xí)：UVmax,nm:某化合物HCl-Mg反應(yīng)（+）黃酮或3-O-苷

I=410-359=51nm，4'-OHII=271-259=12nm,7-OHI=387-359=28nm,B環(huán)有鄰二OHAlCl3/HCl與AlCl3相比，

I=402-433=-31nm,B環(huán)有鄰二OHAlCl3/HCl與MeOH相比，

I=402-359=43nm,有5-OH，無(wú)3-OH第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定分析：黃酮或3-O-苷第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定分析：1.核磁共振氫譜（1HNMR）A環(huán)質(zhì)子(1).5,7-二OH

H-6,85.7~6.9,d,J=2.5Hz

H-8>H-6第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定三核磁共振法1.核磁共振氫譜（1HNMR）A環(huán)質(zhì)子(1).5,6.196.446.426.836.196.446.426.83(2).7-OH

H-5：7.7~8.2,d,J=8Hz

H-6：6.4~7.1,dd,J=8and2Hz

H-8：6.3~7.0,d,J=2HzH-5受C環(huán)C=O的去屏蔽作用而處于低場(chǎng)，化學(xué)位移大。第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定A環(huán)質(zhì)子1.核磁共振氫譜（1HNMR）(2).7-OH第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定A環(huán)質(zhì)子1.核磁共振B環(huán)質(zhì)子4?-OR

2?,6?-H7.1~8.1,d,J=8Hz3?,5?-H6.5~7.1,d,J=8Hz（兩組峰，每個(gè)峰有兩個(gè)H，AA’BB’系統(tǒng)）第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定6.938.10B環(huán)質(zhì)子4?-OR第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定6.938.10第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定3?,4?–二OR

1)黃酮（醇）

H-5’6.7~7.1,d,J=8.5HzH-6’~7.9,dd,J=8.5,2.5HzH-2’~7.2,d,J=2.5Hz

2)異黃酮，二氫黃酮（醇）

H-2’,5’,6’6.7~7.1m（峰復(fù)雜）B環(huán)質(zhì)子第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定3?,4?–二ORB環(huán)質(zhì)子7.606.97,6.997.606.97,6.993',4',5'-三OR

H-2',6'

：6.5~7.5R=R",為一個(gè)單峰s(2H);RR"，間位偶合為兩個(gè)二重峰d(J=2Hz)第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定B環(huán)質(zhì)子3',4',5'-三OR第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定B環(huán)質(zhì)子C環(huán)質(zhì)子區(qū)別各類黃酮的主要依據(jù)1)黃酮

H-36.3s(常與A環(huán)質(zhì)子重疊)2)異黃酮

H-27.6~7.8(用DMSO-d6作溶劑時(shí)為8.5~8.7)第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定C環(huán)質(zhì)子區(qū)別各類黃酮的主要依據(jù)1)黃3)二氫黃酮(2位為S構(gòu)型)

H-25.2,dd,J=11and5Hz

Ha-32.8~3.0,dd,J=17and11HzHe-32.8,dd,J=17and5Hz(

Ha-3>He-3)C環(huán)質(zhì)子第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定3)二氫黃酮(2位為S構(gòu)型)C環(huán)質(zhì)子第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定5.423.252.685.423.252.68

4）二氫黃酮醇

H-24.9,d,J=11Hz

H-34.3,d,J=11Hz(絕對(duì)構(gòu)型用CD或ORD測(cè)定)5）查耳酮

H-

6.7~7.4,d,J=17Hz

H-7.3~7.7,d,J=17Hz6）橙酮芐基質(zhì)子

6.5~6.7s第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定αβ4）二氫黃酮醇5）查耳酮6）橙酮第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒

1）黃酮苷類化合物上糖的端基質(zhì)子信號(hào)

黃酮醇-3-O-葡萄糖苷

5.70~6.00

黃酮醇-3-O-鼠李糖苷5.00~5.10

黃酮類-7-O-葡萄糖苷4.80~5.20

黃酮類-4’-O-葡萄糖苷黃酮類-5-O-葡萄糖苷黃酮類-6及8-C-糖苷糖上質(zhì)子第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定1）黃酮苷類化合物上糖的端基質(zhì)子信號(hào)糖上質(zhì)子第四節(jié)

2）端基以外的糖上質(zhì)子:3~4,

鼠李糖C5-CH3:0.8~1.2,d,J=6.5Hz第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定其它取代基

CH3CO-

脂肪族乙酰氧基1.65~2.10(確定糖數(shù))

芳香族乙酰氧基2.30~2.50(確定酚羥基數(shù))

2）端基以外的糖上質(zhì)子:3~4,

CH3O-

甲氧基質(zhì)子信號(hào)一般在：

3.50~4.10

可通過(guò)NOE核磁共振技術(shù)及二維技術(shù)確定基位置。

第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定－OH溶劑一般采用DMSO-d6(無(wú)水)作測(cè)試溶劑

5-OH12.40；7-OH10.9；3-OH9.7；4’-OH>10(這些信號(hào)加D2O后消失)其它取代基CH3O-第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定－OH其它取代基四、黃酮類化合物的1H-NMR黃酮B環(huán)δH>3-H>A環(huán)原因：A環(huán)常為隱間苯三酚結(jié)構(gòu)>C=O離A環(huán)近，使A環(huán)電子云>B環(huán)C環(huán)的去屏蔽作用對(duì)B環(huán)作用>A環(huán)5-H：所受去屏蔽作用強(qiáng)烈δH≈86,8-H：常在最高場(chǎng)，而δH-8>δH-6，因?yàn)镠-8所受C環(huán)去屏蔽作用更強(qiáng)些13C-NMR中則相反二氫黃酮δH-8≈δH-6，因?yàn)镃環(huán)非共軛3-H：有時(shí)和H-8，H-6較接近，但為單峰四、黃酮類化合物的1H-NMR黃酮黃酮類化合物的1H-NMRDMSO作為溶劑時(shí)，活潑質(zhì)子的信號(hào)也能作為參考5-OH:~12.407-OH:~10.933-OH:~9.704’-OH:~9.703’-及其它OH:~9.10或更高場(chǎng)黃酮類化合物的1H-NMRDMSO作為溶劑時(shí)，活潑質(zhì)子的信號(hào)Apigenin(DMSO-d6)5-OH-OH×2A環(huán)5,7-二羥基取代C環(huán)黃酮3-HB環(huán)4’-OH取代Apigenin(DMSO-d6)5-OH-OH×2A環(huán)53-methylquercetin(DMSO-d6)5-OH-OH×3-OCH33-methylquercetin(DMSO-d6)5-3-methylquercetin(DMSO-d6)3-methylquercetin(DMSO-d6)黃酮類化合物的1H-NMR二氫黃酮構(gòu)型：大多為2S型，即2-ph在e鍵特征：2-H：δH~5.20(1H，dd,J=11.0,4.0)3-Ha：δH~2.80(1H，dd,J=11.0,17.0)3-He：δH~2.80(1H，dd,J=17.0,4.0)黃酮類化合物的1H-NMR二氫黃酮108CAS:480-41-1(DMSO+CDCl3)CAS:480-41-1(DMSO+CDCl3)黃酮類化合物的1H-NMR二氫黃酮醇構(gòu)型：2-ph與3-OH在大多e鍵(2R,3R型)，但可能為(2S,2S)型特征：2-H：δH~4.90(1H，d,J=11.0)3-H

：δH~4.30(1H，d,J=11.0)黃酮類化合物的1H-NMR二氫黃酮醇110Aromadendrin[270MHz,(CD3)2CO]5-OHB環(huán)4’-OH取代A環(huán)5,7-二羥基取代C環(huán),二氫黃酮醇Aromadendrin[270MHz,(CD3)2C黃酮類化合物的1H-NMR異黃酮2-H：δH=8.5~8.7(1H，s)查耳酮Hα：δH=6.70~7.40(1H,d,J=17.0)Hβ：δH=7.30~8.10(1H,d,J=17.0)二氫查耳酮Hα：δH=~3.2(2H,t,J=7.0)Hβ：δH=~2.8(2H,t,J=7.0)AuronesδH-3=6.37~6.94(1H,s)黃酮類化合物的1H-NMR異黃酮112Irigenin(DMSO-d6)5-OH-OH×2-OCH3×3Isoflavonoid,2-HB環(huán)H(間)A環(huán)，6,or8-H8-H相對(duì)低場(chǎng)Irigenin(DMSO-d6)5-OH-OH×2-OC4’-甲氧基-4-羥基-查耳酮(CD3OD)8.10(1H,d,J=16Hz)8.01(2H,d,J=9.0Hz)7.66(2H,d,J=9.0Hz)7.62(1H,d,J=16Hz)6.93(2H,d,J=9.0Hz)6.48(2H,d,J=9.0Hz)3.95(3H,s)b-H2’,6’-H2,6-Ha-H3,5-H3’,5’-H4’-OCH34’-甲氧基-4-羥基-查耳酮(CD3OD)8.10(1Phloretin(DMSO-d6)-OH×2-CH2-CH2-Phloretin(DMSO-d6)-OH×2-CH2-CPhloretin(DMSO-d6)B環(huán)4-OH取代A環(huán)2’,4’,6’-OH取代Phloretin(DMSO-d6)B環(huán)4-OH取代A環(huán)2黃酮苷的1H-NMR糖端基質(zhì)子J值用于判斷其的構(gòu)型J1-2≈7.0：β型J1-2≈3.0：α型僅限于2-OH處于a鍵的糖糖與黃酮成苷，常于3,7,4’-，利用糖端基質(zhì)子的δH

值可判斷其構(gòu)型β型：3-成苷，δH>5.3；4’-成苷，δH<5.2α型：無(wú)論3-或4’-成苷，δH~4.0因?yàn)?-成苷的β型端基質(zhì)子與>C=O、C-O鍵共平面，受>C=O的影響為去屏蔽作用，δH↑雙糖苷：外側(cè)糖離母核遠(yuǎn)，受各向異性影響小，δH↓黃酮苷的1H-NMR糖端基質(zhì)子J值用于判斷其的構(gòu)型117第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定三核磁共振法2.核磁共振碳譜（13CNMR）

根據(jù)C＝O的化學(xué)位移確定黃酮骨架

a.174~184黃酮(醇),異黃酮,橙酮

b.188~197查耳酮,二氫黃酮(醇)第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定三核磁共振法2.核磁共振碳譜（13CN黃酮104~112異黃酮122~126黃酮醇136橙酮111~112查耳酮116~130二氫黃酮42~45二氫黃酮醇712.核磁共振碳譜（13CNMR）第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定

根據(jù)C-3的化學(xué)位移細(xì)分黃酮104~112查耳酮116~1302.核磁共振碳譜取代基位移第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定2.核磁共振碳譜（13CNMR）取代基位移第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定2.核磁共振碳譜（13C第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定例：下列一個(gè)化合物的碳信號(hào)歸屬第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定例：下列一個(gè)化合物的碳信號(hào)歸屬四、質(zhì)譜（MS）1.電子轟擊質(zhì)譜（EI-MS）苷元：可得到M+，且為基峰；苷：得不到M+，可得苷元碎片，可制備衍生物。2.場(chǎng)解析質(zhì)譜（FD-MS）和快原子轟擊質(zhì)譜（FAB-MS）用于測(cè)定極性較強(qiáng)的苷類化合物，可得到M+

，M++1，M++Na，M++K峰，且給出糖基碎片峰。第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定四、質(zhì)譜（MS）1.電子轟擊質(zhì)譜（EI-MS）第四節(jié)結(jié)3.黃酮類化合物苷元的EI-MS裂解途徑途徑I

（RDA裂解）第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定3.黃酮類化合物苷元的EI-MS裂解途徑途徑I（RDA裂利用A1+和B1+可確定A環(huán)和B環(huán)的取代情況

A1+.B1+.5,7-二羥基黃酮1521025,7,4??-三羥基黃酮(芹菜素)1521185,7-二羥基,4?-甲氧基黃酮(刺槐素)152132第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定利用A1+和B1+可確定A環(huán)和B環(huán)的取代情況第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒途徑-II：

黃酮類:途徑-I為主

M+常為基峰,還有[M-28]+,A1+(s),B1+(s),及[A1+H]+,[A1-28]+,B2+,[B2-28]+等。黃酮醇類:主要按途徑-II進(jìn)行

M+常為基峰,碎片離子主要有B2+和[B2-28]+及[A1+H]+,此外還有[M-H]+,[M-15]+等。第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定途徑-II：黃酮類:途徑-I為主第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定五、Wessely-Moser重排

黃酮類6-及8-C-糖苷在常規(guī)酸水解條件下不被水解，但可發(fā)生互變，成為6-和8-C-糖苷的混合物。第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定五、Wessely-Moser重排本章內(nèi)容第一節(jié)緒論第二節(jié)理化性質(zhì)與顏色反應(yīng)第三節(jié)提取分離方法第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定第五節(jié)結(jié)構(gòu)研究實(shí)例本章內(nèi)容第一節(jié)緒論

例1：某黃色結(jié)晶I，鹽酸鎂粉反應(yīng)(＋)，Molish反應(yīng)(＋)，F(xiàn)eCl3反應(yīng)(＋)，ZrOCl2反應(yīng)呈黃色，但加入枸櫞酸后黃色褪去。

I的UV

nm如下:MeOH252267(sh)346NaOMe261399AlCl3272426 AlCl3/HCl260274357385NaOAc254400NaOAc/H3BO3256378例1：某黃色結(jié)晶I，鹽酸鎂粉反應(yīng)(＋)，M