血脂檢測(cè)方法及臨床意義課件

血脂及血漿脂蛋白測(cè)定血脂是血漿中的中性脂肪（TG和TC）和類脂（磷脂、糖脂、固醇、類固醇）的總稱。

TG參與人體內(nèi)能量代謝，而膽固醇主要用于合成細(xì)胞膜性物質(zhì)、類固醇激素和膽汁酸血脂及血漿脂蛋白測(cè)定1血漿脂蛋白的分類1、乳糜微粒2、極低密度脂蛋白3、低密度脂蛋白4、高密度脂蛋白在病理狀態(tài)下，在VLDL和LDL之間出現(xiàn)中間密度脂蛋白（IDL）。顆粒依次變小血漿脂蛋白的分類1、乳糜微粒顆粒依次變小2血漿脂蛋白的組成與結(jié)構(gòu)血漿脂蛋白的組成與結(jié)構(gòu)3載脂蛋白脂蛋白的蛋白部分稱為載脂蛋白，具有結(jié)合與轉(zhuǎn)運(yùn)脂質(zhì)及穩(wěn)定脂蛋白結(jié)構(gòu)的功能載脂蛋白4血漿脂蛋白的代謝甘油三酯的代謝途徑血漿脂蛋白的代謝甘油三酯的代謝途徑5膽固醇代謝途徑膽固醇代謝途徑6膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)途徑膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)途徑7高脂蛋白血癥WHO分型高脂蛋白血癥WHO分型8引起繼發(fā)性高脂血癥的病因1、糖尿病常表現(xiàn)為IV型高脂蛋白血癥。（胰島素的缺乏，不僅促使肝臟生成VLDL增加，而且因LPL活性降低，導(dǎo)致VLDL清除減少，主要表現(xiàn)為血清TG、VLDL水平升高，TG嚴(yán)重升高者有發(fā)生急性胰腺炎的危險(xiǎn)性。）2、甲減常表現(xiàn)為IIa或IIb型高脂蛋白血癥患者血TC水平升高可同時(shí)血TG水平升高（LPL活力降低，IDL代謝障礙、LDL受體功能下降、血漿LDL清除減慢等）3、腎臟疾病腎病綜合征時(shí)的高脂蛋白血癥由脂蛋白降解障礙和合成過(guò)多雙重機(jī)制引起。引起繼發(fā)性高脂血癥的病因1、糖尿病常表現(xiàn)為IV型高脂蛋9高脂蛋白血癥的因素4、藥物：降壓藥，利尿劑，β受體阻滯劑可TG和HDL長(zhǎng)期應(yīng)用糖皮質(zhì)激素治療可使TG、TC升高5、其他：肝膽系統(tǒng)疾病、胰腺炎、長(zhǎng)期過(guò)量飲酒高脂蛋白血癥的因素4、藥物：降壓藥，利尿劑，β受體阻滯劑可T10低脂蛋白血癥表現(xiàn)1、家族性低β-脂蛋白血癥（肝臟LDL受體上調(diào)，伴膽汁酸過(guò)度合成，使血漿中VLDL在轉(zhuǎn)化為L(zhǎng)DL前已被肝臟分解代謝。）2、β-脂蛋白缺乏血癥（ApoB合成分泌缺陷，使含ApoB的脂蛋白如CM、VLDL、LDL合成代謝障礙，伴隨脂肪吸收和代謝紊亂，血漿TC也非常低）低脂蛋白血癥表現(xiàn)1、家族性低β-脂蛋白血癥（肝臟LDL受11血脂檢測(cè)方法及臨床意義總膽固醇(TC)甘油三酯(TG)高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)載脂蛋白A1(ApoA1)載脂蛋白B(ApoB)血脂檢測(cè)方法及臨床意義總膽固醇(TC)12總膽固醇（TC）化學(xué)測(cè)定法L-B（ALBK）和Zak法ALBK（美國(guó)CDC的脂類標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)室協(xié)同有關(guān)學(xué)術(shù)組織對(duì)Abell法作了評(píng)價(jià)和實(shí)驗(yàn)條件最適化）采用正己烷抽提，L-B顯色Abell法（血清加入醇溶性氫氧化鉀，使膽固醇從脂蛋白中分離出來(lái)，同時(shí)使膽固醇酯加水分解成游離膽固醇，加石油醚振搖、抽提，使膽固醇移入石油醚層，分離并取一定量的石油醚層，蒸發(fā)至干，再進(jìn)行Liebermann-Burchard顯色反應(yīng)，620nm比色定量。該法可用于基本功訓(xùn)練及組織細(xì)胞膽固醇的提取定量。

）酶法CEH-COD-PAP法（優(yōu)點(diǎn)：靈敏度，精確度，線性范圍寬。缺點(diǎn)：1.膽固醇酯酶對(duì)膽固醇酯水解不完全2.表面活性劑吐溫-40干擾酯酶的作用3.受還原性物質(zhì)影響如尿酸，膽紅素，VC）總膽固醇（TC）化學(xué)測(cè)定法13CEH-COD-PAP法原理用膽固醇酯酶水解膽固醇酯生成脂肪酸和膽固醇，膽固醇被膽固醇氧化酶氧化生成△4-膽淄烯酮和過(guò)氧化氫，然后在過(guò)氧化物酶催化下，H2O2與4-氨基安替比林及酚結(jié)合，生成紅色醌亞胺。醌亞胺的最大吸收峰在500nm左右，吸光度與標(biāo)本中的膽固醇含量成正比。反應(yīng)方程式如下：膽固醇酯+H2O膽固醇+游離脂肪酸膽固醇+O2→△4-膽甾烯酮+H2O22H2O2+4-氨基安替比林+酚→醌亞胺CEHCODPODCEH-COD-PAP法原理用膽固醇酯酶水解膽固醇酯生成脂肪14血清膽固醇參考范圍TC≤5.20mmol/L邊緣升高：5.23—5.69mmol/L升高：≥5.72mmol/L血清膽固醇參考范圍15臨床意義TC除了作為高膽固醇血癥的診斷指標(biāo)之外，不能作為其他任何疾病的診斷指標(biāo)，對(duì)于動(dòng)脈粥樣硬化和冠心病而言，TC是一個(gè)明確的危險(xiǎn)因子，與冠心病的發(fā)病率呈正相關(guān)。影響TC水平的因素：1、年齡與性別，(上升)2、長(zhǎng)期高膽固醇、高飽和脂肪酸、高熱量的飲食3、遺傳4、缺少運(yùn)動(dòng)，精神緊張等臨床意義TC除了作為高膽固醇血癥的診斷指標(biāo)之外，不能作為其他16相關(guān)疾病高TC血癥有原發(fā)和繼發(fā)兩類，原發(fā)的如家族性高膽固醇血癥，家族性apoB缺陷癥，多源性高TC，混合性高脂蛋白血癥等，繼發(fā)的見(jiàn)于腎病綜合征，甲減，糖尿病，妊娠等。低TC血癥原發(fā)和繼發(fā)，原發(fā)如家族性無(wú)β或低β脂蛋白血癥，繼發(fā)如甲亢，營(yíng)養(yǎng)不良，慢性消耗性疾病等。相關(guān)疾病高TC血癥有原發(fā)和繼發(fā)兩類，原發(fā)的如家族性高膽固醇血17血清甘油三酯測(cè)定酶法測(cè)定磷酸甘油氧化酶法（靈敏度高，試劑穩(wěn)定，線性范圍比較寬）乳酸脫氫酶法（結(jié)果準(zhǔn)確，靈敏度低，試劑不穩(wěn)定）甘油氧化酶法（直接測(cè)定甘油的方法）血清甘油三酯測(cè)定酶法測(cè)定18磷酸甘油氧化酶法原理用脂蛋白酯酶（LPL）使血清中TG水解成脂肪酸和甘油，甘油激酶（GK）及三磷酸腺苷（ATP）將甘油磷酸化，以磷酸甘油氧化酶（GPO）氧化3-磷酸甘油（G-3-P）產(chǎn)生H2O2，最后以Trinder反應(yīng)顯色，A500nm的值與TG濃度成正比。TG+H2O→甘油+脂肪酸甘油+ATP→G-3-P+ADPG-3-P+O2→磷酸二羥丙酮+H2O2H202+4-AAP+4-氯酚→苯醌亞胺非那腙+H2O2磷酸甘油氧化酶法原理用脂蛋白酯酶（LPL）使血清中TG水解成19甘油三酯臨床意義原發(fā)性高TG血癥多有遺傳因素，包括家族性高TG血癥與家族性型高脂蛋白血癥等。繼發(fā)性高TG血癥見(jiàn)于糖尿病，糖原累積病，甲減，腎病綜合征，妊娠，口服避孕藥，酗酒等。富含TG的脂蛋白是冠心病的獨(dú)立的危險(xiǎn)因子，TG增加表明患者存在代謝綜合征，需進(jìn)行治療。甘油三酯降低很少見(jiàn)，甲亢，腎上腺皮質(zhì)功能減退和肝功能?chē)?yán)重?fù)p傷時(shí)可以見(jiàn)到甘油三酯降低。甘油三酯臨床意義原發(fā)性高TG血癥多有遺傳因素，包括家族性高T20甘油三酯的參考范圍TG≤1.70mmol/L升高：＞1.70mmol/L甘油三酯的參考范圍21血清脂蛋白測(cè)定HDL-C測(cè)定LDL-C測(cè)定血清脂蛋白測(cè)定22HDL-C測(cè)定方法及原理HDL直接測(cè)定法分三類1、聚乙二醇/抗體包裹法2、酶修飾法3、選擇性抑制法（國(guó)內(nèi)應(yīng)用最多）HDL-C測(cè)定方法及原理HDL直接測(cè)定法分三類23選擇性抑制法原理分兩步：第一試劑用聚陰離子及分散型表面活性劑（反應(yīng)抑制劑），后者與LDL、VLDL、CM表面的疏水基團(tuán)有高度親和力，吸附在這些脂蛋白表面形成掩蔽層，但不發(fā)生沉淀，能抑制這類脂蛋白中的膽固醇與酶試劑反應(yīng)。第二試劑含膽固醇測(cè)定酶及具有對(duì)HDL表面的親水基團(tuán)有親和力的表面活性劑（反應(yīng)促進(jìn)劑），使酶與HDL中的膽固醇起反應(yīng)選擇性抑制法原理分兩步：第一試劑用聚陰離子及分散型表面活性劑24HDL臨床意義HDL-C與冠心病發(fā)病呈負(fù)相關(guān)，HDL-C低于0.9mmol/L是冠心病危險(xiǎn)因素。HDL-C大于1.55mmol/L被認(rèn)為是冠心病的“負(fù)”危險(xiǎn)因素。HDL-C降低多見(jiàn)于腦血管病、糖尿病、肝炎、肝硬化病人。高TG血癥往往伴以低HDL-C，肥胖者的HDL-C也多偏低。吸煙減低，適量飲酒、長(zhǎng)期體力勞動(dòng)和運(yùn)動(dòng)會(huì)使HDL-C升高。HDL臨床意義HDL-C與冠心病發(fā)病呈負(fù)相關(guān)，HDL-C低于25HDL-C參考范圍HDL-C≥1.04mmol/L減低：＜0.91mmol/LHDL-C參考范圍26LDL測(cè)定方法及原理直接勻相法一類是以α-環(huán)糊精、硫酸葡聚糖、聚氧乙烯-聚氧丙烯封閉共聚多醚（POE-POP），抑制非LDL脂蛋白以膽固醇酯酶和膽固醇氧化酶的反應(yīng)（選擇性抑制），從而使LDL-C被酶水解并測(cè)定。另一類是以不同的表面活性劑的雙試劑使非LDL-C與LDL-C分兩步水解，因先消除非LDL-C而被稱為消除法，（目前應(yīng)用較廣的）LDL測(cè)定方法及原理直接勻相法27LDL臨床意義LDL-C增高是動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展的主要脂類危險(xiǎn)因素。由于TC水平同時(shí)也受HDL-C水平影響，所以最好以LDL-C代替TC作為冠心病危險(xiǎn)因素指標(biāo)。LDL臨床意義LDL-C增高是動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展的主要脂類28LDL-C的參考范圍LDL-C≤3.12mmol/L邊緣升高：3.15—3.61mmol/L升高：≥3.64mmol/LLDL-C的參考范圍29血清載脂蛋白測(cè)定免疫散射比濁法免疫透射比濁法血清載脂蛋白測(cè)定30臨床意義ApoA1是HDL的主要結(jié)構(gòu)蛋白，ApoB是LDL的主要結(jié)構(gòu)蛋白，因此，可以反映HDL/LDL的含量。在某些病理情況下，ApoA1與HDL和ApoB與LDL并非成正相關(guān)，同時(shí)測(cè)定載脂蛋白和脂蛋白對(duì)病理發(fā)生狀態(tài)的分析很有幫助。冠心病、腎病綜合征、糖尿病等都有ApoA1下降和ApoB升高。臨床上常將ApoA1和ApoB比值作為冠心病的危險(xiǎn)指標(biāo)。臨床意義ApoA1是HDL的主要結(jié)構(gòu)蛋白，ApoB是LDL的31載脂蛋白參考值A(chǔ)poA1：1.00—1.5g/LApoB：0.8—1.00g/L載脂蛋白參考值32糖的來(lái)源與去路糖的來(lái)源與去路33葡萄糖的測(cè)定葡萄糖氧化酶法（首選方法）己糖激酶法葡萄糖脫氫酶法葡萄糖的測(cè)定34葡萄糖氧化酶法原理葡萄糖氧化酶（GOD）將葡萄糖水解為葡萄糖酸和過(guò)氧化氫，后者在過(guò)氧化物酶（POD）和色素原性氧受體存在下，將過(guò)氧化氫分解為水和氧，同時(shí)使色素原性氧受體4-氨基安替比林和酚去氫縮合為紅色醌類化合物，即Trider反應(yīng)。其色澤深淺在一定范圍內(nèi)與葡萄糖濃度成正比。葡萄糖+O2+H2O→葡萄糖酸內(nèi)酯+H2O22H2O2+4-氨基安替比林+酚→紅色醌類化合物葡萄糖氧化酶法原理葡萄糖氧化酶（GOD）將葡萄糖水解為葡萄糖35血糖的臨床意義生理性或暫時(shí)性增高：餐后，攝入高糖飲食，情緒激動(dòng)等病理性高血糖：①糖尿?、诩卓?，腎上腺皮質(zhì)功能亢進(jìn)等③應(yīng)激性高血糖，如顱腦損傷，顱內(nèi)壓增高等④脫水引起的血液濃縮，如嘔吐、腹瀉、高熱等⑤嚴(yán)重的肝硬化不能使糖轉(zhuǎn)化為肝糖原儲(chǔ)存⑥胰腺病變血糖的臨床意義生理性或暫時(shí)性增高：餐后，攝入高糖飲食，情緒激36血糖的臨床意義生理性或暫時(shí)性低血糖饑餓和劇烈運(yùn)動(dòng)等病理性低血糖可見(jiàn)于胰島β細(xì)胞增生或腫瘤引起的胰島素分泌過(guò)多、嚴(yán)重肝病不能調(diào)節(jié)血糖。藥物的影響①血糖升高的藥物：口服避孕藥，兒茶酚胺，咖啡因，甲狀腺素，腎上腺素等②血糖降低的藥物：降糖藥，酒精，普萘洛爾等血糖的臨床意義生理性或暫時(shí)性低血糖饑餓和劇烈運(yùn)動(dòng)等37血糖參考值成人：3.9—5.9mmol/L血糖參考值38糖耐量實(shí)驗(yàn)口服葡萄糖耐量試驗(yàn)適應(yīng)癥：空腹血糖水平在臨界值（6—7mmol/L）而又疑為糖尿病患者空腹或餐后血糖正常，但有發(fā)展為糖尿病可能的人群以前耐量試驗(yàn)異常的人群妊娠性糖尿病的診斷臨床上出現(xiàn)腎病，神經(jīng)病變，視網(wǎng)膜病無(wú)法給出解釋的糖耐量實(shí)驗(yàn)口服葡萄糖耐量試驗(yàn)39WHO標(biāo)準(zhǔn)化的OGTT1.實(shí)驗(yàn)前三天，受試者每日食物中糖含量應(yīng)不低于150g，且維持正?；顒?dòng)。2.影響藥物應(yīng)在三天前停用，空腹10-16小時(shí)。3.坐位去血后5