抗微生物藥物和敏感性試驗(yàn)

抗微生物藥物敏感實(shí)驗(yàn)1整理ppt第一節(jié)臨床常用抗菌藥物一、抗細(xì)菌藥物二、抗厭氧菌藥物2整理ppt抗菌藥物是指具有殺菌或抑菌活性的抗生素和化學(xué)合成藥物。前者是真菌、放線菌、細(xì)菌等的代謝產(chǎn)物，后者是經(jīng)化學(xué)改造的半合成抗生素和化學(xué)合成藥物。3整理ppt（一）β-內(nèi)酰胺類1.青霉素類2.頭孢菌素類3.單環(huán)類4.頭霉素類5.碳青霉烯類6.β-內(nèi)酰胺類/β-內(nèi)酰胺酶抑制劑

4整理ppt（二）糖肽類

（三）氯霉素

（四）氨基糖苷類

（五）大環(huán)內(nèi)酯類

（六）四環(huán)素類（七）氟喹諾酮類（八）磺胺類

5整理ppt（九）利福霉素類（十）林可酰胺類

（十一）惡唑烷酮類（十二）鏈陽菌素類（十三）抗分枝桿菌藥物

返回6整理ppt二、抗厭氧菌藥物硝基咪唑類甲硝唑（Metronidazole）替硝唑（Tinidazole）奧硝唑（ornidazole）返回7整理ppt第二節(jié)體外抗菌藥物敏感試驗(yàn)8整理ppt一、抗菌藥物敏感性試驗(yàn)

（antimicrobialsusceptibilitytest,AST）（一）定義：AST是一個(gè)檢測細(xì)菌耐藥性的體外抑菌試驗(yàn)（ART）9整理pptAST（二）目的檢出細(xì)菌對抗生素的耐藥性，預(yù)測臨床治療結(jié)果預(yù)測不是指體外測得的數(shù)據(jù)，強(qiáng)調(diào)對數(shù)據(jù)的解釋臨床不是指體外AST的結(jié)果，強(qiáng)調(diào)病人用藥后的療效治療結(jié)果用成功或失敗衡量，強(qiáng)調(diào)實(shí)驗(yàn)室與臨床的統(tǒng)一10整理ppt實(shí)驗(yàn)室

臨床

評價(jià)

S成功正確的預(yù)測R失敗正確的預(yù)測S（FS？）失敗錯(cuò)誤的預(yù)測AST11整理pptAST體外R≈體內(nèi)R，對R的結(jié)果可以相信體外S≠體內(nèi)S，對S的結(jié)果應(yīng)持懷疑態(tài)度12整理ppt（三）重要性如果沒有細(xì)菌耐藥性檢測治療過度：用藥不當(dāng)，過度使用高檔抗生素治療錯(cuò)誤：用藥錯(cuò)誤，危重患者喪失搶救時(shí)機(jī)增加不必要的副作用增加不必要的費(fèi)用增加細(xì)菌的耐藥性降低醫(yī)療服務(wù)的質(zhì)量13整理ppt（四）方法（1）手工試驗(yàn)1.紙片擴(kuò)散法（S，I，R）2.稀釋法（MIC）3.Etest（MIC）（2）自動儀器Vitek，Microscan，Phoenix（3）分子試驗(yàn)PCR直接檢測mecA基因（4）酶試驗(yàn)Nitrocefin、ESBL檢測14整理ppt（五）結(jié)果的解釋和報(bào)告R、I、S、MIC時(shí)間依賴性：β-內(nèi)酰胺類，縮短投藥間隔濃度依賴性：氨基糖苷類，日劑量1次應(yīng)用15整理ppt三要素藥物、機(jī)體、病原菌相關(guān)性體外和體內(nèi)，抑菌和殺菌，單獨(dú)和聯(lián)合預(yù)測性耐藥表型(個(gè)體)→耐藥機(jī)制→耐藥表型(同類)(預(yù)測藥物)(同類藥物)重點(diǎn)監(jiān)測的耐藥菌株：MRS,PRP,VRE,ESBL發(fā)出有選擇、有解釋的報(bào)告，與醫(yī)師直接對話16整理ppt小結(jié)藥敏試驗(yàn)

ASTART，用體外試驗(yàn)預(yù)測體內(nèi)結(jié)果未經(jīng)解釋、就事論事的報(bào)告經(jīng)過解釋、全面的報(bào)告表型的檢測耐藥機(jī)制的檢測、耐藥流行病學(xué)分析臨床用藥

MedicalchoiceBacteriologicalchoice

17整理ppt二、AST的意義***可預(yù)測抗菌藥物治療的效果，即AST實(shí)驗(yàn)“敏感”時(shí)，治療可能有效；實(shí)驗(yàn)結(jié)果為耐藥時(shí)，使用該藥物治療肯定失?。恢笇?dǎo)臨床醫(yī)生選擇使用抗生素，AST的結(jié)果往往在給予病人經(jīng)驗(yàn)性治療24～48h之后，若AST結(jié)果為“敏感”，該治療有效，若結(jié)果為“耐藥”，即應(yīng)更換藥物；提供所選用藥物的依據(jù)；監(jiān)測耐藥性，分析耐藥菌的變遷，掌握耐藥菌感染病流行病學(xué)，控制和預(yù)防耐藥菌感染的發(fā)生和流行。18整理ppt第三節(jié)抗菌藥物的敏感性試驗(yàn)19整理ppt一、抗菌藥物的選擇

在標(biāo)準(zhǔn)中分成A、B、C、U四組,A組所列的抗生素為常規(guī)首選藥敏試驗(yàn)藥物,B組為臨床使用主要抗生素,尤其在醫(yī)院感染時(shí)使用的抗生素，可在下列情況下使用：①對A組同類抗生素耐藥；②標(biāo)本來源不同時(shí)，如三代頭孢菌素使用于腦脊液中的腸桿菌，磺胺甲惡唑使用于尿道分離的細(xì)菌；20整理ppt③多種微生物感染；④多部位感染；⑤感染流行的控制；⑤對A組抗生素過敏、耐受或無反應(yīng)。C組藥物用于對A組藥物耐藥的流行菌株或?qū)組藥物過敏的病人和某些不常見的細(xì)菌（如腸外分離的沙門菌屬或耐萬古霉素腸球菌）。U組僅用于尿道中分離的細(xì)菌，不作為尿道外分離菌的常規(guī)藥敏試驗(yàn)。21整理ppt(一）非苛養(yǎng)菌藥敏試驗(yàn)抗生素的選用

A組一級試驗(yàn)并常規(guī)報(bào)告的抗微生物藥,如葡萄球菌屬用苯唑西林和青霉素。B組一級試驗(yàn)有選擇報(bào)告的抗微生物藥,如腸球菌屬用萬古霉素。C組補(bǔ)充試驗(yàn)有選擇報(bào)告的抗微生物藥，如葡萄球菌屬用氯霉素。U組僅用于泌尿道的補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)的抗微生物藥，如葡萄球菌屬用洛美沙星和諾氟沙星。22整理ppt(二）苛養(yǎng)菌藥敏試驗(yàn)抗生素的選用A組一級試驗(yàn)并常規(guī)報(bào)告的抗微生物藥,如肺炎鏈球菌用紅霉素和青霉素。B組一級試驗(yàn)有選擇報(bào)告的抗微生物藥,如肺炎鏈球菌用頭孢噻肟或頭孢曲松。C組補(bǔ)充試驗(yàn)有選擇報(bào)告的抗微生物藥，如肺炎鏈球菌用頭孢呋辛

。23整理ppt返回二、紙片擴(kuò)散法***（Kirby-Bauer法）***24整理ppt（一）實(shí)驗(yàn)原理將含有定量抗菌藥物的紙片貼在已接種測試菌的瓊脂平板上，紙片中所含的藥物吸收瓊脂中水分溶解后不斷向紙片周圍擴(kuò)散形成遞減的梯度濃度，在紙片周圍抑菌濃度范圍內(nèi)測試菌的生長被抑制，從而形成無菌生長的透明圈即為抑菌圈。抑菌圈的大小反映測試菌對測定藥物的敏感程度，并與該藥對測試菌的MIC呈負(fù)相關(guān)。25整理ppt26整理ppt27整理ppt(二)培養(yǎng)基和抗菌藥物紙片【抗菌藥物紙片】

直徑為6.35mm，吸水量為20μl的專用藥敏紙片.含藥紙片密封貯存2℃～8℃且不超過1周。【培養(yǎng)基】水解酪蛋白（MH）培養(yǎng)基，pH為7.2~7.4，瓊脂厚度為4mm,4℃保存。28整理ppt（三）實(shí)驗(yàn)方法29整理ppt1.將在約56℃恒溫的無菌M-H瓊脂傾注直徑為90mm的平板，其厚度4mm。30整理ppt2.無菌挑取孵育16～24h的血平板上4~5個(gè)菌落。31整理ppt3.置于無菌生理鹽水中，校正其濁度于0.5McFarland氏比濁管濃度，細(xì)菌數(shù)量約為1.5×108cfu/ml32整理ppt4.用無菌棉簽浸入細(xì)菌懸液中，將拭子在試管上壁輕輕擠壓以擠去過多的菌液。33整理ppt4.棉簽在三個(gè)方向均勻抹瓊脂表面（每次轉(zhuǎn)60℃）使菌液均勻分布，最后沿平板內(nèi)緣涂抹一周。34整理ppt5.根據(jù)選擇的菌株挑選相應(yīng)的抗菌紙片。腸桿菌科：氨芐西林、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢噻肟、環(huán)丙沙星、亞胺培南、氨曲南、慶大霉素；銅綠假單胞菌：頭孢他啶、慶大霉素、哌拉西林、阿米卡星、環(huán)丙沙星、頭孢吡肟、亞胺培南；葡萄球菌屬：頭孢西丁、青霉素、紅霉素、萬古霉素、環(huán)丙沙星、慶大霉素、利福平；35整理ppt腸球菌屬：青霉素、萬古霉素、甲氧芐啶/磺胺異噁唑、慶大霉素、環(huán)丙沙星、紅霉素、氨芐西林不動桿菌屬：頭孢他啶、亞胺培南、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢吡肟、頭孢曲松、環(huán)丙沙星、米諾環(huán)素；洋蔥伯克霍德菌：頭孢他啶、米諾環(huán)素、甲氧芐啶/磺胺異噁唑、美羅培南；36整理ppt嗜麥芽窄食單胞菌：甲氧芐啶/磺胺異噁唑、左氧氟沙星、米諾環(huán)素；嗜血桿菌屬：氨芐西林、甲氧芐啶/磺胺異噁唑、頭孢他啶、美羅培南、阿奇霉素、環(huán)丙沙星、頭孢克洛；淋病奈瑟菌：頭孢曲松、環(huán)丙沙星、青霉素、大觀霉素、四環(huán)素；肺炎鏈球菌：紅霉素、苯唑西林、甲氧芐啶/磺胺異噁唑、克林霉素、左氧氟沙星、四環(huán)素、萬古霉素；除肺炎鏈球菌外的其他鏈球菌：紅霉素、青霉素、克林霉素、萬古霉素、頭孢曲松、左氧氟沙星。37整理ppt6.用無菌鑷子或紙片分配器將抗菌紙片粘貼于M-H瓊脂的表面，一旦紙片貼上，不能移動；各抗菌紙片中心距離應(yīng)大于24mm，紙片距平板內(nèi)緣應(yīng)大于15mm。38整理ppt7.經(jīng)過35℃16～24h孵育。39整理ppt（四