血管內(nèi)皮細胞功能的研究進展

血管內(nèi)皮細胞功能的研究進展

血管內(nèi)皮細胞（vc）位于出血區(qū)和血管壁組織之間。它的作用不僅是一個機械障礙，而且是維持血液的正常流動，調(diào)節(jié)血管內(nèi)外物質(zhì)的交換。vec是人體最大、高度特異性和功能異?；钴S的內(nèi)因、附屬器官和代謝器官。它可以分泌各種活性物質(zhì)，并通過提取、轉(zhuǎn)化或殺死一些活動的遺傳因素來運輸、消除和切除。在許多生理病理過程中，血管生成、止血、血栓形成、動脈粥樣硬化和其他調(diào)節(jié)功能中發(fā)揮著重要的治療作用。由于血管內(nèi)皮細胞直接和血液接觸，很容易受到血液中病理生理變化的影響，具有易損傷的功能性界面，凡接受損傷刺激和心血管危險因素，均首先作用于血管內(nèi)皮，導(dǎo)致內(nèi)皮細胞功能障礙(endonthelialdysfunction,ED)。血管內(nèi)皮功能障礙的治療目前已經(jīng)取得了長足的進步。西藥在改善血管內(nèi)皮功能方面發(fā)展迅速，血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑、血管緊張素Ⅱ受體阻斷劑、他汀類藥物、抗血小板藥、內(nèi)皮素受體拮抗藥和血栓素A2(TXA2)拮抗藥等都可通過不同途徑如抑制氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)等防治ED并得到了一定的認可，但并沒有專門防治ED的藥物。近幾年來，中藥無論單味藥及其提取物還是復(fù)方，在保護VEC方面取得顯著療效，并且在臨床和實驗研究中得到驗證，現(xiàn)將國內(nèi)近幾年的研究進展綜述如下。1中醫(yī)藥對血管皮膚的保護諸多研究表明，中藥對血管內(nèi)皮功能具有保護作用。但不同證型其血管內(nèi)皮功能的改變有所不同，因此不同治法對內(nèi)皮功能的影響也不盡相同。1.1促進血管正常運行丹參具有活血化瘀的功效，諸玉芳等觀察了丹參藥物血清對脂多糖(LPS)刺激下VEC分泌內(nèi)皮素(endothelin,ET)和NO(nitricoxidized,NO)的影響，發(fā)現(xiàn)丹參能抑制ET和NO升高，維持NO與ET的動態(tài)平衡，去除自由基，維持血管正常生理功能，從而能有效防治血瘀證。中藥復(fù)方制劑腦心通由水蛭、地龍、全蝎、川芎、丹參、赤芍、紅花等成分組成，具有益氣活血、化瘀通脈的功效。研究發(fā)現(xiàn)腦心通能夠抑制動脈粥樣硬化兔VCAM-1蛋白及基因的表達，這表明腦心通能夠通過抑制黏附分子的表達，抑制局部炎癥反應(yīng)而有保護內(nèi)皮細胞的作用。何賽萍等用內(nèi)毒素誘發(fā)建立蓄血證大鼠模型并用桃核承氣湯進行干預(yù)，發(fā)現(xiàn)桃核承氣湯通過增強蓄血證模型大鼠SOD的含量和抑制NOS的基因表達，增強抗自由基的作用，降低NO濃度，使血管內(nèi)皮細胞免受損害，從而起到保護血管內(nèi)皮胞的作用。1.2逆湯治療冠心病心絞痛合并心臟病改療法金旭鵬等觀察參附注射液對慢性充血性心力衰竭患者內(nèi)皮功能的影響并探討其作用機制，發(fā)現(xiàn)參附注射液能降低ET、MDA水平，升高NO、SOD活性，具有改善慢性充血性心衰時自由基介導(dǎo)的內(nèi)皮功能紊亂作用。金明華等也對60例老年冠心病心絞痛病人進行臨床實驗研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)四逆湯具有抗血管內(nèi)皮功能氧化損傷及調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮細胞功能的作用，其效果與維生素E相似。此外還發(fā)現(xiàn)四逆湯能夠提高血漿SOD活性、降低MDA含量，減輕家兔實驗性動脈粥樣硬化時血管內(nèi)皮的氧化損傷，進而提高血清的NO水平，降低血漿ET濃度，以調(diào)節(jié)NO/ET的平衡，改善血管舒縮功能;四逆湯還能有效調(diào)節(jié)脂代謝紊亂，減少了高膽固醇血癥對血管內(nèi)皮的氧化損傷。1.3天麻鉤藤飲對血管緊張素和血管間質(zhì)的影響周端等活觀察到血潛鎮(zhèn)膠囊對高血壓病血瘀陽亢癥患者降壓有效，并可能有逆轉(zhuǎn)左心室肥厚的作用，同時降低ATⅡ、內(nèi)皮素含量，升高NO含量，改善全血低切黏度，提示活血潛鎮(zhèn)膠囊可通過改善血管內(nèi)皮細胞功能而產(chǎn)生較好的降壓療效。孟云輝等觀察天麻鉤藤飲對血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)致人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVECs)損傷的保護作用。研究發(fā)現(xiàn)AngⅡ刺激HUVECs24h，可增加TNF-α含量，且在轉(zhuǎn)錄水平減弱PPARγ表達。天麻鉤藤飲含藥血清可拮抗AngⅡ作用，減少TNF-α含量，促進PPARγmRNA的表達。因此，天麻鉤藤飲可能通過激活PPARγ表達從而降低TNF-α分泌，減輕炎癥反應(yīng)，減少VEC損傷。1.4對腦梗死區(qū)的保護作用與牛黃有相似的藥效活性的豬膽酸具有鎮(zhèn)靜開竅、清熱解毒之功。豬膽酸可顯著降低氧糖剝奪法模擬缺血再灌注損傷的大鼠腦微血管內(nèi)皮細胞ICAM-1的表達而阻抑腦缺血損傷炎癥反應(yīng)。其機理可能在于抑制黏附分子表達，從而干擾白細胞的黏附，避免由于白細胞黏附和微血栓形成的無復(fù)流，防止腦梗死區(qū)擴大。袁拯忠等發(fā)現(xiàn)適當濃度的梔子苷、黃芩苷和小檗堿等黃連解毒湯主要成分可在缺氧/復(fù)氧損傷時，增加腦微血管內(nèi)皮細胞的活性，使腦微血管內(nèi)皮細胞在受到缺氧/復(fù)氧損傷時可以受到良好的保護作用。王敏等觀察加減清營湯對H2O2損傷的血管內(nèi)皮細胞存活率和SOD活力的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)加減清營湯含藥血清ECV304MTT的OD值增高，并能顯著地提高SOD的活力，降低H2O2對ECV304的損傷程度，其機理可能與保護細胞免受自由基損傷，抗氧化作用有關(guān)。1.5對炎癥相關(guān)基因的調(diào)節(jié)作用益氣代表藥黃芪之提取物黃芪多糖可抑制由缺氧再復(fù)氧造成的人心臟微血管內(nèi)皮細胞(HCMEC)缺血再灌注損傷中NF-κB的核轉(zhuǎn)位，并降低NF-κBmRNA的表達，從而降低炎癥相關(guān)基因的激活，從而減輕心肌缺血再灌注損傷時的炎癥反應(yīng)。益氣活血之補陽還五湯能使缺氧-復(fù)氧損傷的內(nèi)皮細胞ET-1、MDA、LDH明顯下降，NO含量顯著升高。這表明補陽還五湯可通過抗氧化途徑使血管內(nèi)皮細胞免受自由基的損傷，保護血管內(nèi)皮細胞。1.6味地黃丸對小鼠血清內(nèi)毒素損傷的保護作用陳雪霞等建立內(nèi)毒素損傷HU-VEC模型，發(fā)現(xiàn)麥冬含藥血清作用于HUVEC后，可降低其MDA水平并增加SOD含量，使活細胞數(shù)目明顯增多，凋亡和死亡細胞數(shù)目明顯減少。麥冬除具有一般所認為的養(yǎng)陰生津作用外，尚因其性味寒涼，故可清解營血分之熱毒，具有祛除致瘀之因的作用，體現(xiàn)了古人所謂“以補陰之品為退熱之用”的思想。麥冬藥血清可以保護內(nèi)毒素損傷的HUVEC，其作用機理與減少自由基、增加超氧化物歧化酶有關(guān)。張旭等用LPS造成HUVEC凋亡的模型，通過激光共聚焦顯微鏡觀察六味地黃丸對胞內(nèi)鈣離子的影響。實驗表明，六味地黃丸藥物血清具有拮抗LPS，升高胞內(nèi)鈣離子濃度的作用，提示對LPS造成的HUVEC損傷有抑制作用。卞慧敏等利用大腸桿菌內(nèi)毒素致VEC凋亡模型，并通過MTT比色法、細胞周期和凋亡細胞的檢測，觀察六味地黃湯及其藥物血清對VEC損傷模型的保護作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)六味地黃湯藥物血清可減輕大腸桿菌內(nèi)毒素對VEC的損傷，抑制VEC凋亡發(fā)生，促進VEC增殖;并可通過增加VEC分泌SOD，清除MDA，而達到其減輕大腸桿菌內(nèi)毒素對內(nèi)皮細胞損傷的目的。1.7通心絡(luò)對高血壓大鼠血管內(nèi)皮功能的保護作用絡(luò)脈和絡(luò)病是中醫(yī)理論體系的重要組成部分，各種內(nèi)外傷病因傷及絡(luò)脈而導(dǎo)致絡(luò)病時其病機特點為易滯易瘀、易入難出、易積成形，出現(xiàn)絡(luò)氣郁滯(或虛滯)、絡(luò)脈瘀阻、絡(luò)脈絀急、絡(luò)脈瘀塞等病機變化。在“絡(luò)以通為用”的絡(luò)病治療原則指導(dǎo)下，通絡(luò)藥物代表方通心絡(luò)集中應(yīng)用絡(luò)虛通補、化瘀通絡(luò)藥、搜風通絡(luò)藥和流氣暢絡(luò)藥組方，無論在臨床研究還是實驗研究中均發(fā)現(xiàn)其有很好的保護血管內(nèi)皮的作用。臨床研究結(jié)果顯示，通心絡(luò)能有效降低急性腦梗死患者血漿ET和HCY水平，調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮功能，緩解腦血管痙攣。通心絡(luò)還可通過降低不穩(wěn)定型心絞痛患者血清ET、vWF和部分細胞黏附分子水平，提高NO水平等途徑改善不穩(wěn)定型心絞痛患者血管內(nèi)皮功能。實驗研究結(jié)果表明，通心絡(luò)可促進高血壓大鼠血清NO和抑制血漿ET-1的合成與釋放，抑制血管組織VEGF表達增強，改善高血壓大鼠的血管內(nèi)皮功能。通心絡(luò)可抑制自由基的過量生成及調(diào)節(jié)內(nèi)皮舒縮因子的平衡，使同型半胱氨酸所致血管內(nèi)皮依賴性舒張功能的異常明顯改善。同時，人參、雙參、通心絡(luò)等通絡(luò)方藥可通過增加絡(luò)氣虛滯大鼠內(nèi)源性CO發(fā)揮細胞保護作用，該作用可能與其改善或修復(fù)HO系統(tǒng)、提高HO-1表達有關(guān)，這可能是通絡(luò)方藥保護血管組織免遭損傷的機制之一。2中醫(yī)的血管舒張功能是由中醫(yī)藥來保護的中藥對血管內(nèi)皮功能的保護十分復(fù)雜，是多層次、多方面、多途徑的。2.1復(fù)方促進肱動脈內(nèi)皮素功能的改善血管內(nèi)皮細胞除具有天然的屏障作用之外，還是強大的內(nèi)分泌代謝器官，能分泌幾十種活性物質(zhì)。NO和ET就是兩種主要的內(nèi)皮源性血管活性因子，兩者作用相反。NO可擴張血管，調(diào)節(jié)血壓，抑制血小板聚集，抗平滑肌細胞增殖。一氧化氮合酶是NO生成的唯一限速酶。給予一氧化氮合酶的抑制劑(EDNO)，血流介導(dǎo)的內(nèi)皮依賴性血管舒張現(xiàn)象可消失。內(nèi)皮素1是已知最強的縮血管和加壓物質(zhì)，血管內(nèi)皮通過調(diào)控內(nèi)皮素1和NO的平衡來調(diào)節(jié)血管的功能。中醫(yī)血瘀證也表現(xiàn)出NO和NO/ET比值明顯降低。臨床研究結(jié)果顯示復(fù)方丹參注射液能明顯改善冠心病患者血管內(nèi)皮舒張功能，使內(nèi)皮型一氧化氮合酶mRNA的表達明顯增強，而內(nèi)皮素1的表達減弱，血漿NO水平升高，內(nèi)皮素1水平降低，由此認為復(fù)方丹參注射液改善肱動脈的內(nèi)皮依賴性舒張功能的機制與內(nèi)皮型一氧化氮合酶和內(nèi)皮素1mRNA表達有關(guān)。滕雅軒等研究發(fā)現(xiàn)絡(luò)病理論代表方藥通心絡(luò)可增加穩(wěn)定心絞痛患者NO、NOS水平，降低ET濃度，調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝，明顯改善穩(wěn)定心絞痛患者的內(nèi)皮功能。離體細胞實驗也表明，川芎內(nèi)酯A能提高細胞培養(yǎng)液中NO,NOS的活性，減少細胞培養(yǎng)液中ET的活性，上調(diào)內(nèi)皮細胞中iNOSmRNA的表達，下調(diào)內(nèi)皮細胞中ETmRNA的表達，可以減輕內(nèi)皮細胞損傷，對心肌的血管內(nèi)皮細胞具有保護作用。2.2通心絡(luò)膠囊對血管內(nèi)皮功能的影響研究認為，黏附分子與血管內(nèi)皮細胞黏附是炎癥反應(yīng)的起始，黏附分子能協(xié)助白細胞黏附并跨越內(nèi)皮細胞遷移。黏附分子與血管內(nèi)皮細胞黏附后介導(dǎo)單核細胞等黏附與血管壁，嵌塞血管，直接損傷內(nèi)皮細胞，并游出到周圍組織，釋放細胞因子、氧自由基、酶類等有毒物質(zhì)，加劇細胞和組織損傷。單核細胞與血管內(nèi)皮細胞黏附后產(chǎn)生胞內(nèi)信號，引起細胞骨架的重新排列，使細胞間隙增大，導(dǎo)致血管通透性增加及血管壁屏障功能受損。在體實驗研究表明頸動脈粥樣硬化患者在常規(guī)治療基礎(chǔ)上加用通心絡(luò)膠囊能明顯降低血清炎癥因子CRP、sICAM-1、P-選擇素、MCP-1、MMP-9等的濃度，從而減輕對血管內(nèi)皮的炎癥損害作用，進一步恢復(fù)內(nèi)皮功能。高永紅等發(fā)現(xiàn)新清開靈注射液能顯著性降低大鼠腦缺血再灌注損傷微血管內(nèi)皮細胞細胞間黏附分子和血管內(nèi)皮黏附分子ICAM-1、VCAM-1蛋白和mRNA表達;這表明新清開靈注射液能通過干預(yù)黏附分子表達而阻抑腦缺血損傷炎癥反應(yīng)。中藥在離體細胞實驗中也顯示出良好的抗炎作用:張旭等人用LPS造成HUVEC凋亡的細胞模型，通過流式細胞儀及激光共聚焦顯微鏡觀察丹參藥物血清對ICAM-1表達及胞內(nèi)鈣離子的濃度。結(jié)果發(fā)現(xiàn)丹參藥物血清可明顯降低內(nèi)皮細胞的ICAM-1表達的上升，拮抗LPS的升高胞漿內(nèi)鈣離子濃度的作用，從而對LPS造成的HUVEC損傷有抑制作用。張建初等人發(fā)現(xiàn)紅花有效成分紅花黃素可通過抑制缺氧復(fù)氧條件下肺血管內(nèi)皮細胞Ps及ICAM-1的過度表達，從而保護血管內(nèi)皮，明顯減少大鼠肺血栓再通時白細胞的浸潤，并顯著減輕肺組織的損傷。同時，復(fù)方中藥也有類似作用。朱莉等發(fā)現(xiàn)麝香保心丸能抑制植物血凝素樣氧化低密度脂蛋白受體-1的表達，使單核細胞和內(nèi)皮細胞的黏附率降低，從而降低局部炎癥反應(yīng)，保護血管內(nèi)皮細胞。2.3銀杏葉提取物對人組織型心肌病患者的抗氧化作用當細胞正常的氧化還原穩(wěn)態(tài)失衡時，氧自由基過度產(chǎn)生而聚積，引起氧化應(yīng)激。氧自由基不僅使細胞膜不飽和脂肪酸過氧化引起細胞損傷，還能通過脂質(zhì)過氧化物的分解產(chǎn)物引起細胞損傷。復(fù)方丹參可顯著改善1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)或次黃嘌呤(HX)和黃嘌呤氧化酶(XO)所致心肌損傷，表現(xiàn)為可明顯升高LVP、+dp/dtmax，降低LV-EDP，增加CF，減少CK釋放和MDA生成，改善心功能的作用，這可能與清除體內(nèi)的自由基和抗脂質(zhì)過氧化損傷有關(guān)。高血脂是公認的心血管疾病的危險因素，其誘發(fā)的氧化應(yīng)激也進行了深入研究。LOX-1是介導(dǎo)氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)的識別、內(nèi)攝和傳到血管反應(yīng)的清道夫受體，內(nèi)皮細胞可通過LOX-1攝取。ox-LDL與LOX-1結(jié)合后激活細胞內(nèi)多條信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路參與細胞的損傷反應(yīng)。對氧磷酶是體內(nèi)重要的抗氧化酶，具有抗氧化作用和過氧化物酶樣作用，能阻止脂蛋白氧化，減少ox-LDL的形成，降解脂蛋白中的脂質(zhì)過氧化物。在體研究中，伍海濤等人發(fā)現(xiàn)銀杏葉提取物能改善高脂血癥大鼠胸主動脈舒張功能，升高血清一氧化氮濃度和對氧磷酶活性，降低血清丙二醛濃度。這提示銀杏葉提取物能通過抗抗脂質(zhì)過氧化與保護對氧磷酶活性改善血管內(nèi)皮功能。吳以嶺等人的研究結(jié)果顯示通心絡(luò)可通過抗氧化、抑制NF-κB核轉(zhuǎn)位進而降低ICAM-1蛋白表達保護高脂飲食兔血管內(nèi)皮功能。離體實驗中，何翠瑤用氧化低密度脂蛋白損傷的HUVEC，發(fā)現(xiàn)三七皂苷能使血管內(nèi)皮細胞形態(tài)趨于正常，并能升高細胞活性，抑制LDH釋放;升高NO含量，降低ET含量。提示三七皂苷可調(diào)節(jié)內(nèi)皮細胞活性物質(zhì)NO、ET的分泌，對OxLDL損傷的血管內(nèi)皮細胞具有一定的保護作用。梁燕玲等用同型半胱氨酸誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細胞血凝素樣氧化型低密度脂蛋白受體-1(LOX-1)mRNA的表達升高，并發(fā)現(xiàn)銀杏葉提取物能通過抗氧化作用減弱NF-κB的活性，拮抗LOX-1mRNA的表達升高，有效防止ox-LDL的攝取及氧化應(yīng)激的發(fā)生，保護血管內(nèi)皮功能。2.4含?？Ｑ獙ρ軆?nèi)皮功能的調(diào)控凋亡的發(fā)生是細胞受促進性和抑制性雙向因素和基因共同調(diào)節(jié)的結(jié)果。Fas和Bcl-2是凋亡調(diào)控基因，分別發(fā)揮著促進和抑制細胞凋亡的作用，他們分別通過不同的傳遞和調(diào)控途徑改變著細胞的凋亡狀態(tài)。接傳紅等發(fā)現(xiàn)含川芎血清可以顯著提高高糖誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細胞Bcl-2和Caspase-3基因的表達。這表明川芎抑制血管內(nèi)皮細胞凋亡，保護血管內(nèi)皮功能的分子機制之一可能是通過調(diào)節(jié)Bcl-2和Caspase-3基因的表達，影響Caspase凋亡信號傳導(dǎo)系統(tǒng)，抑制血管內(nèi)皮細胞的凋亡。馮月秋等發(fā)現(xiàn)乙酰葛根素能抑制血管緊張素Ⅱ引起的血管內(nèi)皮細胞凋亡及Fas、Bcl-2的表達。表明乙酰葛根素能保護血管內(nèi)皮細胞，調(diào)節(jié)細胞的凋亡。曾和松等用缺氧方法誘導(dǎo)牛主動脈內(nèi)皮細胞凋亡并用通心絡(luò)進行干預(yù)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)通心絡(luò)能明顯減少缺氧所致血管內(nèi)皮細胞凋亡，并且認為這與抑