第九至十一章食品中副溶血性弧菌的檢驗(yàn)

第九至十一章食品中副溶血性弧菌的檢驗(yàn)第1頁(yè)，課件共13頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月一、概況

副溶血性弧菌（V。parahemolyticus）于1950年從日本一次暴發(fā)性食物中毒中分離發(fā)現(xiàn)。該菌存在于近海的海水、海底沉積物和魚(yú)類、貝殼等海產(chǎn)品中。根據(jù)菌體O抗原不同，現(xiàn)已有13個(gè)血清群。主要引起食物中毒，尤以日本、東南亞、美國(guó)及我國(guó)臺(tái)北地區(qū)多見(jiàn)，也是我國(guó)大陸沿海地區(qū)食物中毒中最常見(jiàn)的一種病原菌。本菌廣泛存在于海水中，偶亦見(jiàn)淡水。在海水中能存活47日以上，淡水中生存1～2日。在37℃、pH7.7、含氯化鈉3～4%的環(huán)境中生長(zhǎng)最好。本菌嗜鹽畏酸，在無(wú)鹽培養(yǎng)基上，不能生長(zhǎng)，3%～6%食鹽水繁殖迅速，每8～9分鐘為1周期，低于0.5%或高于8%鹽水中停止生長(zhǎng)。對(duì)酸敏感，在2%醋酸中或50%的食醋中1分鐘即可死亡。不耐熱，56℃、5分鐘即可殺死，90℃、1分鐘滅活。對(duì)低溫及高濃度氯代鈉抵抗力甚強(qiáng)。

第2頁(yè)，課件共13頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月目前已發(fā)現(xiàn)本菌有12種菌分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型。從患者糞便分離出菌株屬于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型，自致病食物分離的菌株90%以上屬于Ⅳ、Ⅴ型。致病性菌株能溶解人及家兔紅細(xì)胞，稱為“神奈川”試驗(yàn)（kanagawatest）陽(yáng)性。其致病力與其溶血能力平行，這是由一種不耐熱的溶血素（分子量42000）所致。本菌能否產(chǎn)生腸毒素尚待證明。媒介食品副溶廣泛存在于海岸和海水中，海生動(dòng)植物常會(huì)受到污染而帶菌。海魚(yú)、蝦、蟹、蛤等海產(chǎn)品帶菌率極高；被海水污染的食物、某些地區(qū)的淡水產(chǎn)品如鯽魚(yú)、鯉魚(yú)等及被污染其他含鹽量較高的食物如咸菜、咸肉、咸蛋亦可帶菌，也可因受到污染而引起中毒。帶用少量該菌的食物，在適宜的溫度下，經(jīng)3～4小時(shí)細(xì)菌可急劇增加至中毒數(shù)量。進(jìn)食肉類或蔬菜而致病者，多因食物容器或砧板污染所引起。臨床表現(xiàn)潛伏期多為10小時(shí)左右，一般8～40小時(shí)，主要癥狀有惡心、嘔吐、上腹部陣發(fā)性劇烈腹痛、頻繁腹瀉、洗肉水樣或帶粘液便，無(wú)里急后重，每日5～6次，體溫39℃。重癥病人可有脫水、血壓下降、意識(shí)不清等。病程2～4天，一般預(yù)后良好，無(wú)后遺癥，少數(shù)病人因休克、昏迷而死亡.第3頁(yè)，課件共13頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月二、生物學(xué)特性（一）形態(tài)與染色

1、革蘭氏陰性無(wú)芽胞多形態(tài)桿菌，單端鞭毛、兩端濃染。桿狀、棒狀、甚至球狀、絲狀等第4頁(yè)，課件共13頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（二）培養(yǎng)特性：1、需氧或兼性厭氧：生長(zhǎng)最好2、在2～３%NaCL培養(yǎng)基中生長(zhǎng)最好，無(wú)鹽或食鹽>10%不能生長(zhǎng)。

3、最適溫度36℃，PH7.5—7.8（7.7）4、在專用選擇性平板上，菌落呈圓形凸起，混濁不透明，表面光滑，較濕潤(rùn)，邊緣不整齊。5、血平板：可見(jiàn)溶血環(huán)。

第5頁(yè)，課件共13頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（三）生化特性

1、分解GLU產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，不分解乳糖，蔗糖。

2、H2S（－）、V-P（－）、靛基質(zhì)（－）、精氨酸（－）

3、甲基紅（＋）、賴氨酸（＋）、溶血＋/-第6頁(yè)，課件共13頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（四）抗原結(jié)構(gòu)：O抗原O1—O1313個(gè)群。H抗原：K抗原：K1—K7065個(gè)型缺：K2K14K17K35K62第7頁(yè)，課件共13頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月三、檢驗(yàn)操作要點(diǎn)

采樣→樣品處理→增菌培養(yǎng)→分離培養(yǎng)→3.5%氯化鈉三糖鐵培養(yǎng)基→嗜鹽性試驗(yàn)→生化鑒定→動(dòng)物試驗(yàn)→結(jié)果報(bào)告第8頁(yè)，課件共13頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月1、采樣：患者糞便、嘔吐物、可凝食品。從海產(chǎn)品的體表面，腸內(nèi)容物，鰓等取樣包裝物，炊具用具。快，不宜低溫保存。2、增菌培養(yǎng)：Nacl結(jié)晶紫增菌液，37℃8～16小時(shí)。第9頁(yè)，課件共13頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月3、分離培養(yǎng)：Nacl蔗糖平板：圓形，半透明或不透明，無(wú)粘性，(綠)蘭色，直徑2—4mm

嗜鹽選擇性平板：直徑2.5mm，圓整或不齊，隆起混濁，無(wú)粘性，無(wú)色，濕潤(rùn)。4、3.5%Nacl-TSI培養(yǎng)37℃24小時(shí)5、鏡檢：應(yīng)為革蘭氏陰性，無(wú)芽胞多形態(tài)，兩端濃染。第10頁(yè)，課件共13頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第11頁(yè)，課件共13頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

6、嗜鹽性試驗(yàn)：

將可疑培養(yǎng)物接種于不同鹽濃度的鹽胨水中，37℃24小時(shí)，觀查生長(zhǎng)情況。鹽含量0、3、7、9、11%

，在3～7%生長(zhǎng)良好。０３７９11第12頁(yè)，課件共13頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月思考題：

1、副溶血性弧菌的形態(tài)與染色有何特點(diǎn)。

2、