第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)

第五章

血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)

第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)KEYPOINTS

1.Theintroductionaboutbloodgroup,bloodgroupantibodiesandtheclinicalvaluationofdifferentbloodcellmarkers.2.ThemeasurementofABOantigen/antibody,Rhantigen/antibody,irregularantibodyandHLAantigen,thetestingofbloodcellandserummarkersunderdifferentclinicalconditions.3.Reasonabletransfusionandbloodcomponenttherapyisthesignofmoderntransfusion,thetraditionalandnon-traditionalclinicalapplicationofdifferentbloodcomponents.4.Thetestingofbloodcellandserummarkersbeforeandafterstemcelltransplantation.5.Thetechnologyandapplicationaboutautologoustransfusion,therapeutichematopheresisandtherapeuticbloodcomponentsexchange,thetestingneededtopreventadverseeffectsofbloodtransfusionbeforetransfusion.第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)血型、血型抗原與抗體第一節(jié)紅細(xì)胞血型第二節(jié)紅細(xì)胞血型檢測技術(shù)第三節(jié)白細(xì)胞血型第四節(jié)血小板血型第五節(jié)新生兒溶血病第六節(jié)臨床輸血第七節(jié)發(fā)展趨勢(shì)主要內(nèi)容第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)血型、血型抗原與抗體

血型

是人類血液的主要特征之一，表達(dá)了血液各種成分的遺傳性狀。血型抗原分類1.紅細(xì)胞血型抗原:ABO、Rh、MNS等

2.白細(xì)胞血型抗原:CD、HLA等

3.血小板血型抗原:HPA等

4.其他血型抗原第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)血型抗原第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)完全抗體(completeantibody)

在血型抗原物質(zhì)刺激下可形成，與紅細(xì)胞生理鹽水懸液混合后能引起紅細(xì)胞凝集的特異性抗體。

血型抗體不完全抗體(low-orderantibody)

只可使紅細(xì)胞致敏而不能使紅細(xì)胞凝集的抗體。血型抗體與紅細(xì)胞的表面抗原結(jié)合后，產(chǎn)生血管內(nèi)或血管外溶血。血型抗體(Bloodgroupantibody)

在血型抗原物質(zhì)刺激下可形成的免疫球蛋白。紅細(xì)胞血型抗體可分為完全抗體和不完全抗體。第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)第一節(jié)紅細(xì)胞血型是紅細(xì)胞上的遺傳性標(biāo)志。包括ABO、Rh、MNS、P、Lutheran、Kell等。第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)一、ABO血型系統(tǒng)

1901年，Landsteiner發(fā)現(xiàn)了人類的第一個(gè)血型系統(tǒng)——ABO血型系統(tǒng)，含抗原成分不同將人的紅細(xì)胞分成A、B、O和AB四種血型。第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)ABO血型合成

第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)血型物質(zhì)存在的臨床應(yīng)用：

a.測定唾液中的血型物質(zhì)輔助鑒定血型；

b.中和ABO血型系統(tǒng)中的“天然抗體”；

c.預(yù)測胎兒ABO血型等。發(fā)生及分布:胎兒在5～6周已可測出，表達(dá)相對(duì)穩(wěn)定。存在于多種細(xì)胞的細(xì)胞膜和其他體液中。ABO血型分布及存在的意義第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)ABO血型系統(tǒng)獨(dú)特的性質(zhì)1.血清存在反應(yīng)強(qiáng)的抗體。2.組織細(xì)胞及各種體液中存在著ABH物質(zhì)。第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)ABO亞型紅細(xì)胞上的A抗原第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)1.孟買型：無ABH抗原,血清中有其抗體2.B（A）型和A（B）型：紅細(xì)胞上同時(shí)存在B抗原和很弱的A抗原，容易誤判為AxB型。

其他特殊類型的ABO亞型

第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)

ABO血型的遺傳第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)二、Rh血型系統(tǒng)概述

抗Rh抗體一般指抗-D。Rh血型抗原及抗體

1.Rh抗原：含D、C、E、c和e五種，D抗原性最強(qiáng)。

2.Rh抗體：主要通過輸血或妊娠免疫而產(chǎn)生。Rh抗體臨床意義：引起輸血反應(yīng)或新生兒溶血病。

第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)亮谷絲蘇甘絲胺酸蘇胺酸谷胺酸亮胺酸甘胺酸第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)亮谷絲蘇甘絲胺酸蘇胺酸谷胺酸亮胺酸甘胺酸第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)Rh血型引起的新生兒溶血第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)三、其它血型１.P血型系統(tǒng):

P抗原除存在于紅細(xì)胞，還存在于纖維母細(xì)胞和淋巴細(xì)胞上。通常不引起新生兒溶血病和溶血性輸血反應(yīng)。２.Kell血型系統(tǒng)：

主要抗原是K和k，引起嚴(yán)重溶血性輸血反應(yīng)和新生兒溶血病。３.Kidd血型系統(tǒng)：抗原為Jka，Jkb。第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)第二節(jié)紅細(xì)胞血型檢測技術(shù)凝集反應(yīng)（agglutination）沉淀反應(yīng)（precipitation）溶血反應(yīng)（hemolysis）第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)一、凝集反應(yīng)

第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)二、沉淀反應(yīng)第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)1.單擴(kuò)與雙擴(kuò)原理第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)2.對(duì)流免疫電泳第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)三、溶血反應(yīng)（hemolysis）第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)一、紅細(xì)胞血型鑒定ABO血型鑒定

Rh血型鑒定MN血型鑒定第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)ABO血型鑒定1.正向定型2.反向定型第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)3．結(jié)果判定正定型（細(xì)胞定型）抗-A抗-B抗-A，B反定型（血清定型）ACBCOC檢測結(jié)果—

—

—++—

O+—+—+—

A—++

+—

—

B+++

—

—

—

AB第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)（二）Rh血型鑒定1．原理:（1）單克隆混合試劑檢測法用Rh各抗血清（IgM+IgG型）試劑通過凝集反應(yīng)對(duì)紅細(xì)胞上Rh抗原進(jìn)行鑒定。（2）酶介質(zhì)檢測法酶介質(zhì)可破壞紅細(xì)胞表面的唾液酸，降低紅細(xì)胞表面負(fù)電荷，減少細(xì)胞間的靜電排斥力，使細(xì)胞間的距離縮小，有利于IgG型小分子特異性Rh血型抗體與紅細(xì)胞上的Rh抗原反應(yīng)，形成肉眼可見的凝集。返回第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)（三）MN血型鑒定1．原理:用IgM類特異性抗M、抗N單克隆血清來鑒定紅細(xì)胞上有無相應(yīng)的M抗原和/或N抗原?？?M抗-N血型基因型＋－＋－＋＋MNMNMMNNMN第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)二、交叉配血實(shí)驗(yàn)

概念分類

1.“主側(cè)”配血

2.“次側(cè)”配血

3.自身對(duì)照第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)二、交叉配血實(shí)驗(yàn)技術(shù)1.鹽水介質(zhì)法

2.酶介質(zhì)法

3.抗人球蛋白介質(zhì)法

第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)二、交叉配血實(shí)驗(yàn)技術(shù)4.凝聚胺法5.微柱凝膠免疫技術(shù)

第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)第三節(jié)白細(xì)胞血型1.包括紅細(xì)胞血型抗原2.白細(xì)胞本身所特有的血型抗原3.人類白細(xì)胞抗原（HLA）第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)一、HLA系統(tǒng)基因、抗原結(jié)構(gòu)HLA基因型:

位于6號(hào)染色體短臂6p21.3區(qū)域。HLA抗原

１.分為HLA-Ⅰ類分子

２.HLA-Ⅱ類分子第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)HLA抗原臨床應(yīng)用HLA多態(tài)性的研究;器官和骨髓移植前組織相容性配型;親子鑒定;HLA與某些疾病的關(guān)聯(lián);遺傳學(xué)方面。第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)二、HLA系統(tǒng)抗原的檢測方法１.HLA血清學(xué)技術(shù)(微量淋巴細(xì)胞毒試驗(yàn))分型血清中含有的抗特定HLA抗原的細(xì)胞毒抗體與待檢淋巴細(xì)胞膜表面的HLA抗原結(jié)合后，在補(bǔ)體的參與下?lián)p傷細(xì)胞膜，經(jīng)伊紅或臺(tái)盼藍(lán)染色后，觀察細(xì)胞是否被染色，了解細(xì)胞損傷、死亡的情況。第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)二、HLA系統(tǒng)抗原的檢測方法２.HLA的分子生物學(xué)檢測：PCR-SSP（PCR序列特異性引物）PCR-RFLP（PCR限制性片段長度多態(tài)性）PCR-SBT（PCR-直接測序分型

）第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)三、粒細(xì)胞血型分布：中性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞。分類：

１.HNA-1抗原：目前發(fā)現(xiàn)的唯一具有多態(tài)性的粒細(xì)胞抗原系統(tǒng)。

２.HNA-2抗原：其中HNA-2a具有臨床意義。３.HNA-3抗原：其中HNA-３a表達(dá)于淋巴細(xì)胞、血小板、內(nèi)皮細(xì)胞、脾臟、腎臟、胎盤細(xì)胞，是粒細(xì)胞聚集因子，與輸血相關(guān)性肺損傷相關(guān)。第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)(一)粒細(xì)胞抗原抗體檢測方法1.血清學(xué)方法：

a.粒細(xì)胞凝集試驗(yàn)

b.單克隆抗體特異性粒細(xì)胞抗原捕獲試驗(yàn)

c.粒細(xì)胞免疫熒光試驗(yàn)

d.流式細(xì)胞術(shù)2.DNA分型技術(shù):

PCR-RFLP、PCR-SSP等。第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)（二）粒細(xì)胞抗體的臨床應(yīng)用１.新生兒同種免疫粒細(xì)胞減少癥2.非溶血性發(fā)熱性輸血反應(yīng)3.輸血相關(guān)性肺損傷4.粒細(xì)胞輸注無效5.自身免疫性粒細(xì)胞減少癥第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)第四節(jié)血小板血型第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)一、血小板同種抗體同種血小板抗體一般由輸血、妊娠或骨髓移植等免疫刺激而產(chǎn)生。最常見的抗體是HRA-lb和5b抗體。這和相應(yīng)HPA抗原在群體中的分布頻率有關(guān)。第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)二、血小板血型抗原和抗體的臨床應(yīng)用1.新生兒同種免疫性血小板減少性紫癜

2.輸血后紫癜

3.血小板輸注無效第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)三、血小板輸注的適應(yīng)證及禁忌證

1．預(yù)防性血小板輸注:(1)各種慢性血小板生成不良性疾病。(2)血小板低下并伴有導(dǎo)致血小板破壞或消耗增加的因素存在。2．治療性血小板輸注:（1）血小板生成減少引起的出血

（2）大量輸血所致的血小板稀釋性減少（3）脾腫大（4）感染和彌散性血管內(nèi)凝血（DIC）（5）特發(fā)性血小板減少性紫癜（ITP）（6）藥物引起的免疫性血小板低下（7）血小板功能異常所致嚴(yán)重出血第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)（二）禁忌證1.血栓性血小板減少性紫癜（TTP）2.溶血尿毒綜合征（HUS）3.肝素誘導(dǎo)性血小板減少癥(HIT)第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)四、特制血小板制劑的臨床應(yīng)用1.移除大部分血漿的血小板2.洗滌血小板3.少白細(xì)胞血小板4.輻照血小板5.冰凍血小板第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)第五節(jié)新生兒溶血病第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)(一)ABO新生兒溶血病ABO-HDN是由于母嬰血型不合，母體的IgG抗A(B)經(jīng)過胎盤進(jìn)入胎兒血循環(huán)破壞胎兒紅細(xì)胞所引起。第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)(二)Rh血型引起的新生兒溶血第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)二、實(shí)驗(yàn)室檢查直接抗人球蛋白試驗(yàn)游離試驗(yàn):是檢測新生兒血清中的血型抗體。釋放試驗(yàn):與直接抗球蛋白相同，也是檢測新生兒紅細(xì)胞上是否存在免疫抗體。第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)三、新生兒溶血病治療與預(yù)防1.藥物治療與血漿置換2.提早分娩3.宮內(nèi)換血4.光照治療與換血療法5.預(yù)防第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)第六節(jié)臨床輸血一、全血輸血（一）適應(yīng)證

1．心功能不全或心力衰竭及嬰幼兒、老年人慢性病體質(zhì)。

2．需要長期或反復(fù)輸血的患者，如再障等患者。（二）禁忌證

1．心功能不全或心力衰竭的貧血患者。

2．需要長期或反復(fù)輸血患者，如再生障礙性貧血等患者。

3．對(duì)血漿蛋白已致敏或?qū)ρ獫{內(nèi)某種反應(yīng)原敏感的患者。

4．因以往輸血或妊娠已產(chǎn)生白細(xì)胞或血小板抗體的患者。

5．血容量正常的慢性貧血患者。

6．可能施行骨髓移植及其它器官移植的患者。第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)二、成分輸血概念適應(yīng)證1．補(bǔ)充血容量2．提高攜氧能力3．補(bǔ)充凝血因子，糾正出血4．調(diào)節(jié)免疫機(jī)能，提高機(jī)體抵抗力5．維持膠體滲透壓6．有害物質(zhì)的排除（換血或血漿置換）禁忌證:

無明確的輸血適應(yīng)證就是禁忌證。第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)成分輸血的優(yōu)點(diǎn)1．制劑容量小，純度高，治療效果好2．針對(duì)性強(qiáng)，不良反應(yīng)少3．減少輸血傳播性疾病的發(fā)生4．便于保存，使用方便5．一血多用，節(jié)約血液資源第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)三、自體輸血概念優(yōu)點(diǎn)1.避免經(jīng)輸血傳播的疾病。2.避免同種異體輸血產(chǎn)生的同種免疫反應(yīng)。3.反復(fù)放血可刺激紅細(xì)胞再生，促進(jìn)患者術(shù)后造血速度加快。4.避免異體血液對(duì)受血者免疫功能的抑制。5.緩解血源緊張的矛盾。第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)自體輸血種類根據(jù)血液來源和保存方法主要分為：1.貯存式自體輸血2.稀釋式自體輸血3.回收式自體輸血第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)四、干細(xì)胞移植第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)（二）移植流程１.供者選擇與受者移植前的準(zhǔn)備：組織配型。２.預(yù)處理預(yù)處理：超劑量化療或放療。３.移植物處理：

(1)骨髓和異體外周血造血干細(xì)胞的處理：去除骨髓中的紅細(xì)胞、ABO血型凝集原等。

(2)自體移植物的處理：體外凈化自體移植物。４.移植物的輸注：靜脈滴注，但不能超過3h。５.植活的檢測：靠檢測受者血細(xì)胞和免疫學(xué)的標(biāo)記。第五章血型與輸血學(xué)檢驗(yàn)（三）移植并發(fā)癥及其防治1.感染2.移植物抗宿主?。℅VHD3.巨細(xì)胞病毒（CMV）感染及相關(guān)性間質(zhì)性肺炎（CMV-I