11《 dna重組技術的基本工具》課件

2016.11.20---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHighSchool---詔安縣實驗高級中學-------------------生物選修三《現(xiàn)代生物科技專題》專題1基因工程2016.11.20---Zhao‘a(chǎn)nExperime1---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHighSchool---詔安縣實驗高級中學-------------------１.１《ＤＮＡ重組技術的基本工具》---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHigh2---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHighSchool---詔安縣實驗高級中學-------------------學習目標：1、了解基因工程的概念2、了解基因工程的誕生3、理解基因工程中三種基本工具的作用---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHigh3---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHighSchool---詔安縣實驗高級中學-------------------一、基因工程的概念1、原理：2、操作水平：3、又稱：4、優(yōu)點：基因重組DNA重組技術或基因拼接技術⑴定向改造生物性狀⑵克服遠緣雜交不親和的障礙⑶育種周期短---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHigh4---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHighSchool---詔安縣實驗高級中學-------------------二、基因工程的誕生（一）基礎理論：1、DNA是遺傳物質(zhì)的證明2、DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)和中心法則的確立3、遺傳密碼的破譯（二）技術發(fā)明：---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHigh5---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHighSchool---詔安縣實驗高級中學-------------------1、基因轉(zhuǎn)移載體的發(fā)現(xiàn)2、工具酶的發(fā)明3、DNA合成和測序技術的發(fā)明4、DNA體外重組的實現(xiàn)5、重組DNA表達實驗的成功6、第一例轉(zhuǎn)基因生物的問世7、PCR技術的發(fā)明（二）技術發(fā)明：---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHigh6---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHighSchool---詔安縣實驗高級中學-------------------三、基因工程的基本工具請同學們看書(P4-6)，思考以下問題：1、基因工程中三種基本工具的作用分別是什么？2、工具酶的作用部位分別在哪？3、具備什么條件才能充當“分子運輸車”？---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHigh7---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHighSchool---詔安縣實驗高級中學-------------------（一）“分子手術刀”——限制性核酸內(nèi)切酶1、來源：主要來自原核生物2、特點：具有專一性（特異性）表現(xiàn)在兩方面：(1)識別雙鏈DNA中特定核苷酸序列(2)切割特定序列中的特定位點3、作用：特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開4、結(jié)果：產(chǎn)生黏性末端或平末端---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHigh8SmaⅠ平末端平末端---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHighSchool---詔安縣實驗高級中學-------------------SmaⅠ平末端平末端---Zhao‘a(chǎn)nExper9

EcoRⅠ黏性末端黏性末端---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHighSchool---詔安縣實驗高級中學-------------------EcoRⅠ黏性末端黏性末端---Zhao‘a(chǎn)n10（二）“分子縫合針”——DNA連接酶1、種類：⑴E·coliDNA連接酶⑵T4DNA連接酶2、作用：---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHighSchool---詔安縣實驗高級中學-------------------大腸桿菌T4噬菌體只連接黏性末端既連接黏性末端，又連接平末端。（二）“分子縫合針”——DNA連接酶1、種類：⑴E·col11可把黏性末端之間的縫隙“縫合”起來，E·coliDNA連接酶或T4DNA連接酶即恢復被限制酶切開的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHighSchool---詔安縣實驗高級中學-------------------可把黏性末端之間的縫隙“縫合”起來，E·coliDNA12

DNA連接酶與DNA聚合酶是一回事嗎？T4DNA連接酶還可把平末端之間的縫隙“縫合”起來，但效率較低---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHighSchool---詔安縣實驗高級中學-------------------DNA連接酶與DNA聚合酶是一回事嗎？T4DNA連接酶還13（三）“分子運輸車”——運載體2、種類：1、需要具備的條件：（1）在受體細胞中穩(wěn)定存在，能自我復制（2）有一個或多個切割位點（3）有標記基因（4）對受體細胞無害質(zhì)粒、λ噬菌體衍生物、動植物病毒等---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHighSchool---詔安縣實驗高級中學-------------------天然質(zhì)粒需經(jīng)人工改造后方可用作運載體。（三）“分子運輸車”——運載體2、種類：1、需要具備的條件：14最常用的質(zhì)?！竽c桿菌的質(zhì)粒試分析其作為載體的優(yōu)點？---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHighSchool---詔安縣實驗高級中學-------------------最常用的質(zhì)?！竽c桿菌的質(zhì)粒試分析其作為載體的優(yōu)點？---151、關于限制酶說法中，正確的是（）A．限制酶是一種酶，只識別GAATTC堿基序列B．EcoRI切割的是G—A之間的氫鍵C．限制酶一般不切割自身的DNA分子，只切割外源DNAD．限制酶只存在于原核生物中課堂反饋---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHighSchool---詔安縣實驗高級中學-------------------C1、關于限制酶說法中，正確的是（）課堂反饋---Zha162.（多選）有關基因工程的敘述中，錯誤的是（）A、基因工程技術能定向地改造生物的遺傳性狀，培育生物新品種B、重組DNA的形成在細胞內(nèi)完成C、目的基因須由運載體導入受體細胞D、質(zhì)粒都可作為運載體---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHighSchool---詔安縣實驗高級中學-------------