江蘇省南通市海安市2023-2024學(xué)年高三上學(xué)期開(kāi)學(xué)生物試題(無(wú)答案)

第第頁(yè)江蘇省南通市海安市2023-2024學(xué)年高三上學(xué)期開(kāi)學(xué)生物試題(無(wú)答案)2024屆高三期初學(xué)業(yè)質(zhì)量監(jiān)測(cè)試卷

生物

注意事項(xiàng)

考生在答題前請(qǐng)認(rèn)真閱讀本注意事項(xiàng)及各題答題要求

1.本試卷共8頁(yè)，滿分100分，考試時(shí)間為75分鐘。考試結(jié)束后，請(qǐng)將答題卷交回。

2.答題前，請(qǐng)您務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)、座位號(hào)用0.5毫米黑色字跡簽字筆填寫(xiě)在答題卷上。

3.請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)監(jiān)考員在答題卡上所粘貼的條形碼上的姓名、考試證號(hào)與你本人的是否相符。

4.作答選擇題必須用2B鉛筆把答題卡對(duì)應(yīng)題目的答案標(biāo)號(hào)涂黑。如需改動(dòng)，請(qǐng)用橡皮擦干凈后，再選涂其它答案。作答非選擇題必須用書(shū)寫(xiě)黑色字跡的0.5毫米的簽字筆寫(xiě)在答題卷上的指定位置，在其它位置作答一律無(wú)效。

一、單項(xiàng)選擇題：本部分包括14題，每題2分，共計(jì)28分。每題只有一個(gè)選項(xiàng)最符合題意。

1.下列科學(xué)史實(shí)驗(yàn)中沒(méi)有使用同位素標(biāo)記技術(shù)的是

A．魯賓和卡門(mén)研究光合作用過(guò)程中氧氣的來(lái)源B．達(dá)爾文探討植物向光性的原因

C．卡爾文等探明CO2轉(zhuǎn)化為有機(jī)物的途徑D．科學(xué)家研究分泌蛋白的合成和分泌

2.蛋白質(zhì)是決定生物體結(jié)構(gòu)和功能的重要物質(zhì)，相關(guān)敘述正確的是

A．組成血紅蛋白的某些氨基酸含F(xiàn)e

B．雞蛋的卵清蛋白中所有N的質(zhì)量分?jǐn)?shù)高于C

C．類囊體膜上某些蛋白質(zhì)參與了電子的傳遞、ATP的合成

D．用化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)的酶處理污染物可克服營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、溫度等條件的限制

3.右圖是中性粒細(xì)胞吞噬和消化細(xì)菌的示意圖，相關(guān)敘述正確的是

A．結(jié)構(gòu)①是線粒體，徹底氧化分解葡萄糖為該細(xì)胞供能

B．結(jié)構(gòu)③是細(xì)胞膜，具有一定的流動(dòng)性，參與殘?jiān)呐懦?/p>

C．結(jié)構(gòu)④是高爾基體，參與⑤中水解酶的合成、加工和運(yùn)輸

D．結(jié)構(gòu)①②③④⑤構(gòu)成細(xì)胞的生物膜系統(tǒng)

4.細(xì)胞膜上的離子通道可控制離子進(jìn)出細(xì)胞，相關(guān)敘述正確的是

A．離子通道對(duì)離子的選擇具有相對(duì)性且運(yùn)輸過(guò)程消耗ATP

B．離子通道的選擇性與其大小、形狀以及帶電荷氨基酸的分布有關(guān)

C．Na+通過(guò)離子通道進(jìn)入神經(jīng)細(xì)胞時(shí)，需要與通道蛋白結(jié)合

D．鈉鉀泵是一種離子通道既可以運(yùn)輸Na+又可以運(yùn)輸K+

5.腦脊液是腦細(xì)胞和脊髓細(xì)胞直接生活的環(huán)境，血液中的CO2能透過(guò)“血-腦脊液屏障”進(jìn)入腦脊液，引起呼吸中樞興奮，使呼吸運(yùn)動(dòng)加深加快。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是

A．大腦深度思考時(shí)呼吸作用釋放的CO2能使腦脊液pH明顯降低

B．CO2調(diào)節(jié)呼吸運(yùn)動(dòng)使其加深加快的過(guò)程依賴完整的反射弧

C．腦脊液與血漿之間，很多物質(zhì)的運(yùn)輸是雙向的

D．腦脊液循環(huán)通路受阻會(huì)導(dǎo)致顱內(nèi)壓升高

6.某中青年患者，甲狀腺單側(cè)腺葉切除術(shù)半年后，血清中甲狀腺激素的水平仍處于正常范圍對(duì)于出現(xiàn)這種現(xiàn)象的原因，下列解釋不合理的是

A．下丘腦可分泌促甲狀腺激素，促進(jìn)甲狀腺激素的分泌

B．垂體可接受下丘腦分泌的激素信號(hào)，促進(jìn)甲狀腺激素的分泌功能

C．切除手術(shù)后，對(duì)側(cè)甲狀腺代償增生，提高了甲狀腺激素的分泌量

D．下丘腦可以感受到甲狀腺激素水平的變化，發(fā)揮調(diào)節(jié)功能

7.植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑在生產(chǎn)實(shí)踐中有著廣泛的應(yīng)用，相關(guān)敘述正確的是

A．對(duì)大麥種子用適宜濃度的乙烯利處理可以促進(jìn)其產(chǎn)生α-淀粉酶

B．對(duì)西瓜、草莓等使用一定濃度的膨大劑處理，會(huì)使得水果的長(zhǎng)勢(shì)加快

C．對(duì)棉花植株噴施一定濃度的2，4-D，可以解除頂端優(yōu)勢(shì)

D．對(duì)欲播種的種子用適宜濃度的脫落酸浸泡可以促進(jìn)其萌發(fā)

8.某同學(xué)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)探究小球藻種群數(shù)量的變化，方法步驟如下。已知吸光度值與容器中小球藻的葉綠素總含量呈正相關(guān)，相關(guān)敘述正確的是

A．①中設(shè)置的空白對(duì)照組錐形瓶中應(yīng)直接加入不含小球藻的100mL培養(yǎng)液

B．②中每次取樣前應(yīng)保持錐形瓶靜置，且每次測(cè)定用同一儀器和比色皿

C．結(jié)果顯示小球藻種群數(shù)量在第4天左右達(dá)到K值

D．溫度、小球藻初始密度、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)等非密度制約因素能制約小球藻種群的增長(zhǎng)

9.化感作用是生物通過(guò)向周圍環(huán)境釋放特定的化學(xué)物質(zhì)從而影響鄰近生物生長(zhǎng)發(fā)育的現(xiàn)象。以下實(shí)例不屬于化感作用的是

A．馬纓丹向環(huán)境中釋放傘花內(nèi)酯抑制鄰近馬纓丹根的生長(zhǎng)

B．花生根分泌三十烷醇促進(jìn)水稻、玉米等的生長(zhǎng)

C．入侵植物蔥芥釋放黃酮類物質(zhì)抑制入侵地其他植物的生長(zhǎng)

D．水稻產(chǎn)生赤霉素促進(jìn)細(xì)胞伸長(zhǎng)從而促進(jìn)植株增高

10.2023年9月，鄱陽(yáng)湖水體面積與近十年同期平均值相比減小約29.1%。豐水期（7~8月）煙波浩渺、水天一色的湖面，如今已變成一片草原。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是

A．鄱陽(yáng)湖中所有的生物構(gòu)成一個(gè)群落

B．鄱陽(yáng)湖群落的重要特征是群落的物種組成

C．豐水期可用標(biāo)記重捕法調(diào)查鄱陽(yáng)湖中魚(yú)類的豐富度

D．夏季鄱陽(yáng)湖濕地群落的空間結(jié)構(gòu)會(huì)發(fā)生改變，這屬于群落的季節(jié)性

11.科學(xué)家探究不同濃度PEG對(duì)東方百合和云南大百合融合成功的影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表，相關(guān)敘述正確的是

組別PEG濃度(%)處理?xiàng)l件融合率(%)

125黑暗27±3℃15min10

23012

33515

44030

54520

A．百合組織經(jīng)鹽酸解離后再用酶解法處理可獲得更多原生質(zhì)體

B．獲得原生質(zhì)體可在光學(xué)顯微鏡下用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板進(jìn)行計(jì)數(shù)

C．低濃度PEG促進(jìn)原生質(zhì)體融合，高濃度抑制融合

D．融合后的原生質(zhì)體直接經(jīng)再分化發(fā)育成雜種百合

12.反應(yīng)器細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是以反應(yīng)器懸浮培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞生產(chǎn)或研制生物制品的一種通用平臺(tái)技術(shù)，相關(guān)敘述正確的是

A．懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞會(huì)因密度過(guò)大等因素使細(xì)胞分裂受阻

B．細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需通入一定量的二氧化碳刺激細(xì)胞進(jìn)行有氧呼吸

C．傳代培養(yǎng)時(shí)，懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞需用胰蛋白酶處理，再用離心法收集

D．為了保證細(xì)胞培養(yǎng)的無(wú)毒條件，可以添加適量的抗生素

13.下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”“DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定”的實(shí)驗(yàn)敘述錯(cuò)誤的是

A．選取細(xì)胞分裂旺盛的菜花表層花進(jìn)行研磨是因?yàn)镈NA含量高

B．研磨時(shí)需加入緩沖液，防止DNA在pH發(fā)生變化時(shí)降解或變性

C．在凝膠中，DNA分子的遷移速率與DNA分子的大小、構(gòu)象等有關(guān)

D．PCR產(chǎn)物出現(xiàn)拖尾可能是非特異性擴(kuò)增過(guò)多，可適當(dāng)降低退火溫度（

14.甲型流感單克隆抗體的制備過(guò)程中，雜交瘤細(xì)胞在克隆化培養(yǎng)過(guò)程中來(lái)自B淋巴細(xì)胞的染色體往往出現(xiàn)隨機(jī)丟失現(xiàn)象，不考慮基因互作和其他變異，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是

A．可從多次間歇注射甲型流感疫苗的動(dòng)物脾臟中篩選獲得已免疫的B淋巴細(xì)胞

B．在HAT選擇培養(yǎng)基上，B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞均無(wú)法長(zhǎng)期存活

C．用96孔板培養(yǎng)和篩選雜交瘤細(xì)胞時(shí)每一個(gè)孔盡量只接種一個(gè)細(xì)胞

D．抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性的雜交瘤細(xì)胞即具有持續(xù)產(chǎn)生甲型流感抗體的能力

二、多項(xiàng)選擇題：本部分包括4題，每題3分，共計(jì)12分。每題有不止一個(gè)選項(xiàng)符合題意。每題全選對(duì)者得3分，選對(duì)但選不全的得1分，錯(cuò)選或者不答的得0分。

15.下列有關(guān)實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹⒉牧系倪x擇和所用試劑正確的有

選項(xiàng)實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)材料化學(xué)試劑

A檢測(cè)生物組織中是否含有還原糖白色洋蔥鱗片葉勻漿斐林試劑

B觀察細(xì)胞的吸水和失水哺乳動(dòng)物的紅細(xì)胞不同濃度的氯化鈉溶液

C綠葉中色素的提取和分離紫色洋蔥的管狀葉95%的乙醇、層析液、無(wú)水碳酸鈉、二氧化硅、碳酸鈣

D探究淀粉酶對(duì)淀粉和蔗糖的水解作用淀粉酶溶液、淀粉溶液、蔗糖溶液碘液

16.科研人員利用溴甲酚紫變色圈法（溴甲酚紫在pH為5.2-6.8范圍內(nèi)，顏色會(huì)由黃色變?yōu)樽仙逆?zhèn)江香醋的醋醅中分離出一株優(yōu)良菌株H3，將菌株接種在不同濃度乙醇溶液中觀察產(chǎn)酸量，結(jié)果如右圖，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是

A．黃色的平板上出現(xiàn)紫色的變色圈，從中挑取長(zhǎng)勢(shì)良好的單菌落分離純化

B．將菌株接種在不同濃度乙醇溶液中通入氧氣進(jìn)行醋發(fā)酵

C．乙醇的體積分?jǐn)?shù)過(guò)高的會(huì)損傷醋酸菌的線粒體，不利于其進(jìn)行有氧呼吸

D．獲得最大產(chǎn)酸量的乙醇體積分?jǐn)?shù)在3%-6%之間

17.補(bǔ)體系統(tǒng)包括30多種蛋白，被激活后可以調(diào)理吞噬、溶解細(xì)胞、調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答和清除免疫復(fù)合物等?？扇苄悦庖邚?fù)合物體積小，難以被吞噬細(xì)胞捕獲，但其可激活補(bǔ)體，從而黏附于紅細(xì)胞，最終到達(dá)肝臟和脾臟被巨噬細(xì)胞吞噬和清除，相關(guān)敘述正確的是

A．免疫復(fù)合物中的抗體是由漿細(xì)胞合成和分泌

B．紅細(xì)胞在此過(guò)程中具有運(yùn)送免疫復(fù)合物的功能

C．紅細(xì)胞表面的CR1可以與免疫復(fù)合物中的抗體特異性結(jié)合

D．一種巨噬細(xì)胞能識(shí)別多種免疫復(fù)合物

18.活性污泥法是處理城市生活污水時(shí)應(yīng)用最為廣泛的生物技術(shù)，其原理是利用微生物的代謝作用使污染物降解。該項(xiàng)目的裝置主要是由曝氣池、二次沉淀池、曝氣系統(tǒng)以及污泥回流系統(tǒng)等組成。相關(guān)敘述正確的是

A．曝氣是為了給活性污泥中的需氧型微生物的代謝提供大量的氧氣

B．曝氣池中的多種細(xì)菌充當(dāng)著分解者的功能，它們?cè)谖镔|(zhì)循環(huán)中起主要作用

C．在活性污泥中通常會(huì)存在硝化細(xì)菌，它們的主要作用將污水中無(wú)機(jī)氮轉(zhuǎn)化成有機(jī)氮

D．使用過(guò)的活性污泥可通過(guò)紫外線進(jìn)行滅菌避免對(duì)環(huán)境造成影響

三、非選擇題：本部分包括5小題，共計(jì)60分。

19.（13分）線粒體是細(xì)胞的動(dòng)力車間，下圖表示核基因編碼的參與有氧呼吸過(guò)程中三羧酸循環(huán)和呼吸鏈的前體蛋白從細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)輸入線粒體的過(guò)程，圖中A表示靶向序列識(shí)別的輸入受體，B、C分別表示線粒體外膜和內(nèi)膜的蛋白輸入通道，請(qǐng)回答：

（1）組成mRNA的基本單位是，前體蛋白的合成場(chǎng)所是。

（2）圖中A的功能有（2分）。線粒體基質(zhì)的酶可以催化鍵斷裂，切割去除前體蛋白的靶向序列。

（3）活化蛋白主要參與有氧呼吸第階段。三羧酸循環(huán)為呼吸鏈提供，其釋放的電子最終被所接受。

（4）科學(xué)家利用對(duì)溫度敏感的化學(xué)探針MTY來(lái)測(cè)定線粒體中的溫度。該探針是一種熒光分子，可以附著在線粒體的產(chǎn)能區(qū)，熒光與周圍溫度呈負(fù)相關(guān)，因此可以通過(guò)測(cè)量線粒體周圍的熒光強(qiáng)度估算線粒體的溫度。實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前先將細(xì)胞在38℃無(wú)氧條件下培養(yǎng)10min，然后迅速置于含有一定氧氣的封閉的緩沖液中，結(jié)果如右圖：

①第Ⅰ階段MTY熒光強(qiáng)度急劇下降的原因是（2分）。

②第Ⅱ階段線粒體內(nèi)的溫度穩(wěn)定在℃左右。

③第Ⅴ階段熒光強(qiáng)度的變化趨勢(shì)是（2分）。

20.（13分）植物的蒸騰作用對(duì)植物有重要的意義，氣孔是植物蒸騰作用的主要通道。雙子葉植物表皮上的氣孔由兩個(gè)腎形保衛(wèi)細(xì)胞構(gòu)成，如下圖，請(qǐng)回答：

（1）當(dāng)保衛(wèi)細(xì)胞滲透壓（填“變大”或“變小”）時(shí)細(xì)胞吸水，由于較薄的細(xì)胞外壁（靠近表皮細(xì)胞一側(cè)）易于伸長(zhǎng)而向外擴(kuò)展，但微纖絲長(zhǎng)度相對(duì)穩(wěn)定，于是保衛(wèi)細(xì)胞內(nèi)壁外移，導(dǎo)致氣孔導(dǎo)度（填“變大”或“變小”）。

（2）適當(dāng)降低蒸騰速率以減少水分損耗，在生產(chǎn)實(shí)踐上是有意義的。但人為地過(guò)分抑制蒸騰作用對(duì)植物反而有害，因?yàn)檎趄v作用在生命活動(dòng)中具有的意義有（2分）

A．是水分吸收和運(yùn)輸?shù)闹饕獎(jiǎng)恿．有助于無(wú)機(jī)鹽的吸收和運(yùn)輸

C．有助于根系產(chǎn)生的激素等運(yùn)輸?shù)降厣系钠鞴俸徒M織D．有助于降低葉片的溫度

（3）氣孔開(kāi)度的調(diào)節(jié)主要受保衛(wèi)細(xì)胞中細(xì)胞液的滲透壓調(diào)節(jié)。參與氣孔開(kāi)度調(diào)節(jié)的滲透物質(zhì)主要有鉀離子和對(duì)應(yīng)的陰離子，以及蔗糖和蘋(píng)果酸，下圖表示保衛(wèi)細(xì)胞滲透物質(zhì)濃度的提高導(dǎo)致氣孔張開(kāi)的途徑：

①保衛(wèi)細(xì)胞常表現(xiàn)為膜內(nèi)負(fù)電位膜外正電位的極化狀態(tài)，膜上ATP驅(qū)動(dòng)的質(zhì)子泵將H泵到細(xì)胞外，導(dǎo)致保衛(wèi)細(xì)胞質(zhì)膜（填“去極化”或“超極化”），質(zhì)膜內(nèi)側(cè)的電勢(shì)變得更負(fù)，驅(qū)動(dòng)K+從表皮細(xì)胞經(jīng)過(guò)保衛(wèi)細(xì)胞質(zhì)膜上的鉀通道進(jìn)入保衛(wèi)細(xì)胞，再進(jìn)入液泡。K+進(jìn)入細(xì)胞的同時(shí)，還伴隨著的進(jìn)入，以保持保衛(wèi)細(xì)胞的電中性。已知脫落酸可以抑制保衛(wèi)細(xì)胞質(zhì)膜上的內(nèi)向K通道活性，活化外向K、Cl-通道，請(qǐng)分析其促進(jìn)氣孔關(guān)閉的機(jī)理（2分）。

②保衛(wèi)細(xì)胞中進(jìn)行卡爾文循環(huán)的場(chǎng)所是。圖中固定CO2的產(chǎn)物有。液泡中的蘋(píng)果酸增加也是促進(jìn)氣孔開(kāi)放的因素之一，推測(cè)氣孔開(kāi)放時(shí)保衛(wèi)細(xì)胞中的淀粉含量會(huì)。

③蔗糖也是氣孔運(yùn)動(dòng)的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)之一，由圖分析其來(lái)源主要有（2分）。

A．保衛(wèi)細(xì)胞葉綠體內(nèi)暫時(shí)儲(chǔ)存的淀粉水解轉(zhuǎn)變成蔗糖

B．保衛(wèi)細(xì)胞通過(guò)碳固定和光合作用合成蔗糖

C．保衛(wèi)細(xì)胞從細(xì)胞間隙吸收葉肉細(xì)胞產(chǎn)生的蔗糖

D．保衛(wèi)細(xì)胞液泡中的蘋(píng)果酸合成蔗糖

21.（11分）阿爾茲海默癥（AD）是一種發(fā)生于老年和老年前期的中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病。研究發(fā)現(xiàn)AD與腦部的β淀粉樣蛋白（Aβ）寡聚有關(guān)，Aβ寡聚體能引起一系列的神經(jīng)細(xì)胞毒性反應(yīng)，造成神經(jīng)細(xì)胞死亡。相關(guān)機(jī)制如下圖，請(qǐng)回答：

（1）淀粉樣前體蛋白（APP）是一種跨膜蛋白，其加工的場(chǎng)所是。Aβ單體是由APP經(jīng)酶水解產(chǎn)生的39-43個(gè)氨基酸的小肽。

（2）神經(jīng)遞質(zhì)通過(guò)（方式）釋放，與突觸后膜上的NMDA受體結(jié)合引起Ca2+通道打開(kāi)。Aβ寡聚體與NMDA受體結(jié)合導(dǎo)致（2分），從而使得突觸后膜不能興奮。

（3）研究發(fā)現(xiàn)AD與糖尿病有一定的相關(guān)性，嘗試據(jù)圖解釋其機(jī)理（2分）。AD患者的神經(jīng)纖維常常出現(xiàn)纏結(jié)原因是Aβ寡聚體導(dǎo)致微管穩(wěn)定性丟失，由微管蛋白組成的（細(xì)胞結(jié)構(gòu)）被破壞，不能維持細(xì)胞的正常形態(tài)。

（4）已知NEP是常見(jiàn)的降解Aβ的酶，組蛋白乙?；軌虼龠M(jìn)NEP基因的轉(zhuǎn)錄，而HDACs是生物體內(nèi)的一種組蛋白去乙?；福芤种平M蛋白乙?；健Ｎ鬟_(dá)苯胺是我國(guó)原創(chuàng)的新型HDACs抑制劑，科研人員研究了不同濃度的西達(dá)苯胺對(duì)同種細(xì)胞中NEP表達(dá)量的影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下圖：

①據(jù)圖可知不同濃度的西達(dá)苯胺對(duì)細(xì)胞中NEP的表達(dá)起作用。已知GAPDH是糖酵解反應(yīng)中的一種酶，用其作為對(duì)照是因?yàn)槠湓诩?xì)胞中。

②根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果推測(cè)濃度為的西達(dá)苯胺組，細(xì)胞中HDACs含量最低。

22.（12分）表皮生長(zhǎng)因子受體（EGFR）是原癌基因表達(dá)的產(chǎn)物。EGFR由胞外區(qū)、跨膜區(qū)、胞內(nèi)區(qū)三部分組成，EGFR與其配體結(jié)合后能引起一系列基因活化，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞增殖。DNEGFR基因是EGFR基因缺失了胞內(nèi)區(qū)的突變基因，科研人員研究了DNEGFR基因表達(dá)和定位情況，流程如下圖，請(qǐng)回答：

（1）從人結(jié)腸癌組織中提取總RNA，經(jīng)過(guò)程合成cDNA．根據(jù)人EGFR前體cDNA的序列設(shè)計(jì)合成引物，擴(kuò)增得到DNEGFRcDNA，其表達(dá)產(chǎn)物因缺失胞內(nèi)區(qū)而沒(méi)有信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)功能，但其能夠與競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合配體，從而達(dá)到抑制腫瘤細(xì)胞增殖的作用。

（2）RT-PCR過(guò)程所用引物如下，據(jù)上圖可知，構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)使用的兩種限制酶是（2分）。研究人員將DNEGFR和EGFP融合在一起的目的是。

（3）本實(shí)驗(yàn)將EGFP序列融合在DNEGFR序列的下游而不是上游，原因是若將EGFP序列放在上游，（2分）。

①DNEGFR基因表達(dá)的前體蛋白的信號(hào)肽段不能發(fā)揮定位作用

②會(huì)影響配體與胞外區(qū)的結(jié)合

③會(huì)影響EGFP基因的表達(dá)

④會(huì)影響質(zhì)粒的復(fù)制

（4）向感受態(tài)細(xì)菌懸浮液中加入重組質(zhì)?；靹?。擴(kuò)大培養(yǎng)后取菌液涂布于卡那霉素篩選LB平板上，37℃正向放置0.5h，正向放置0.5h的目的是，然后倒置平皿37℃培養(yǎng)12~16h。挑選菌落分別擴(kuò)增、鑒定，待鑒定正確后大量提取質(zhì)粒。

（5）將重組質(zhì)粒pEGFP-N1-DNEGFR包裹到主要由構(gòu)成的脂質(zhì)體內(nèi)，與動(dòng)物細(xì)胞發(fā)生融合，重組質(zhì)粒最終發(fā)生轉(zhuǎn)化。72h后再利用