丹莪婦康煎膏對(duì)大鼠憤怒模型行為學(xué)及下丘腦單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的影響

丹莪婦康煎膏對(duì)大鼠憤怒模型行為學(xué)及下丘腦單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的影響

婦科疾病引起的疼痛和不育常導(dǎo)致患者情緒障礙。臨床上，它容易受到自發(fā)和煩人的影響。中醫(yī)認(rèn)為:肝在志為怒,主疏泄,具有調(diào)暢情志的功能,情緒失調(diào)是肝郁氣滯的表現(xiàn)。丹莪婦康煎膏具有疏肝理氣、活血化瘀的功效。本研究通過(guò)對(duì)憤怒模型大鼠曠場(chǎng)試驗(yàn)和下丘腦多巴胺、去甲腎上腺素及5-羥色胺含量的測(cè)定,探索丹莪婦康煎膏改善患者情緒的機(jī)制。1材料表面1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及其他日金學(xué)元素入侵鼠:SPF級(jí)SD大鼠,10周齡,體質(zhì)量(180±32)g,共8只,居住鼠:SPF級(jí)Wistar大鼠,10周齡,體質(zhì)量(255±51)g,共30只,從昆明醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心購(gòu)買。1.2實(shí)驗(yàn)設(shè)備曠場(chǎng)箱(自制),高效液相色譜儀(Agilent1100),高速離心機(jī)(LGR16-W)。1.3數(shù)字吡啶da,dhba丹莪婦康煎膏(滇虹藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司生產(chǎn),批號(hào):120311),多巴胺(DA),去甲腎上腺素(NE),5-羥色胺(5-HT),3,4二羥基芐胺(DHBA)標(biāo)準(zhǔn)品,購(gòu)自sigma公司。2實(shí)驗(yàn)方法2.1利用張指導(dǎo)的模型評(píng)價(jià)其建模30只大鼠隨即分為三組:正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、觀察組,每組10只。制備憤怒模型,根據(jù)張紅梅的方法,對(duì)模型對(duì)照組和觀察組模,造模1周后進(jìn)行曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)評(píng)分,記錄曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)評(píng)分。給藥組給予5g/kg,灌胃,正常對(duì)照組和模型組給予等體積的生理鹽水灌胃,給藥1周后再次進(jìn)行曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)評(píng)分。2.2供試品的制備參考文獻(xiàn)方法,結(jié)合實(shí)際設(shè)備情況進(jìn)行調(diào)整,曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)后評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)后,每只大鼠迅速斷頭取腦,并剝離出下丘腦,精確稱量后移至玻璃勻漿器中,加入預(yù)冷的5%HCLO41mL,制成勻漿,經(jīng)12000rpm,4℃離心,取上清液,再次12000rpm,4℃離心,取上清液,合并兩次的上清液,過(guò)0.22μm微孔濾膜過(guò)濾,即得供試品。2.3v/v-乙二胺四乙酸鈉色譜柱:ZORBA×SB-C18柱(5μm,4.6mmAgilent);流動(dòng)相:甲醇18%(V/V)-乙酸鈉100mmol/L,檸檬酸85mmol/L,二正丁胺0.4mmol/L;辛烷基磺酸鈉1.5mmol/L,乙二胺四乙酸(EDTA)0.2mmol/L,調(diào)PH值為3.7。流速:0.9mL/min;進(jìn)樣量:20μL;柱溫:35℃;工作電壓:0.4mV、量程:1μA。2.4樣品測(cè)定以樣品峰的保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)物保留時(shí)間對(duì)照定性。以DHBA為內(nèi)標(biāo)物,以樣品峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積的比值進(jìn)行定量分析。進(jìn)樣量為20μL。2.5統(tǒng)計(jì)處理實(shí)驗(yàn)結(jié)果以表示。采用SPSS17.0,軟件進(jìn)行單因素方差分析和t檢驗(yàn)。3結(jié)果3.1表1和表2顯示了實(shí)地行為檢測(cè)的結(jié)果4丹不同配方的治療宮理血?dú)夂蜖I(yíng)養(yǎng)成分的作用曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)?zāi)軌蛴行гu(píng)價(jià)動(dòng)物對(duì)新異環(huán)境的興奮性、適應(yīng)性、探究、緊張、記憶等多種行為。本研究的結(jié)果顯示,丹莪婦康煎膏能夠糾正憤怒模型大鼠的各種行為,顯示出了對(duì)憤怒大鼠模型情緒的改善療效?，F(xiàn)在大量的研究表明,單胺類神經(jīng)遞質(zhì)去甲腎上腺素、多巴胺、5-羥色胺等均參與人和動(dòng)物的行為及精神情緒活動(dòng)。本研究顯示,憤怒模型大鼠與正常對(duì)照組大鼠相比,下丘腦內(nèi)去甲腎上腺素、多巴胺增加明顯,5-羥色胺減少,丹莪婦康煎膏治療后這種改變得以糾正?，F(xiàn)代研究顯示,經(jīng)期的情緒波動(dòng)是與子宮內(nèi)膜異位癥相關(guān)度最高的危險(xiǎn)因素,在臨床上也發(fā)現(xiàn)婦科疾病患者往往伴隨有情緒問(wèn)題。從中醫(yī)角度來(lái)說(shuō),子宮內(nèi)膜異位癥的本質(zhì)是“血瘀”,故臨床常用的中成藥都具有“活血化瘀”的作用,但是,患者所伴有的疼痛、不孕問(wèn)題,往往會(huì)導(dǎo)致“肝郁氣滯”,中醫(yī)稱為“因病致郁”,而“氣為血之帥”,“氣郁則血不行而為瘀”,又會(huì)進(jìn)一步加重“血瘀內(nèi)阻”,故對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥的治療僅僅“活血化瘀”是不夠的,還需要“疏肝理氣”,丹莪婦康煎膏是唯一一個(gè)具有“疏肝理氣”和“活血化瘀”功效的治療子宮內(nèi)膜異位癥的中成藥。有報(bào)道發(fā)現(xiàn),丹莪婦康煎膏對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥患者的療效與孕三烯酮等效,而心理功能的改善優(yōu)于孕三烯酮,本研究中的曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)也印證了丹莪婦康煎膏對(duì)情緒的改善作用,并通過(guò)對(duì)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)去甲腎上腺素、多巴胺、5-羥色胺的研究探討了丹莪婦康煎膏的作用機(jī)制。3.2去