范氏中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維測定的實驗方案1(修改)

飼料中性洗滌纖維（NDF）和酸性洗滌纖維（ADF）和木質(zhì)素（ADL）的測定實驗方案實驗原理纖維分析法測定中性洗滌纖維（NDF）和酸性洗滌纖維（ADF）。植物性飼料經(jīng)中性洗滌劑煮沸處理，不溶解的殘渣為中性洗滌纖維，主要為細胞壁成分，其中包括半纖維素、纖維素、木質(zhì)素和硅酸鹽。中性洗滌纖維經(jīng)酸性洗滌劑處理，剩余的殘渣為酸性洗滌纖維，其中包括纖維素、木質(zhì)素和硅酸鹽。所需試劑十二烷基硫酸鈉溶液（中性洗滌劑）、乙二胺四乙酸二鈉（EDTA，化學(xué)純）、四硼酸鈉（Na2B4O7.10H2O）s磷酸氫二鈉、乙二醇乙醚十六烷基三甲基溴化銨、硫酸、丙酮，無水亞硫酸鈉，十氫化萘，95%乙醇所需儀器分析天平：感量0.0001g、容量瓶、錐形瓶、滴定管、移液管、洗瓶、洗耳球、滴管、量筒。粗纖維測定儀（SLQ-6）、古氏坩堝、干燥器（以氯化鈣或變色硅膠為干燥劑）、酸度計試劑的配制30g/L十二烷基硫酸鈉（中性洗滌劑）溶液。稱取18.61g乙二胺四乙酸二鈉（EDTA，化學(xué)純）和6.81g四硼酸鈉（Nabo.10HO）24 7 2和10mL已二醇乙醚同放入1000mL燒杯中力口入少量水加熱溶解后，再加入30g十二烷基硫酸鈉。稱取11.9644g磷酸氫二鈉（含12水），置于另一燒杯中，加入少量水，微微加熱溶解后傾入第一個燒杯，稀釋至1000mL。此溶液PH在6.9-7.1.20g/L十六烷三甲基溴化銨（酸性洗滌劑）溶液。稱取20g十六烷三甲基溴化銨，溶于1000mL已經(jīng)標定過的0.5mol/L硫酸溶液中，攪動溶解，必要時過濾。0.5mol/L硫酸溶液。稱取49g（27.87mL）濃硫酸，慢慢加入已有500mL水的燒杯中，冷卻后注入1000mL容量瓶中，定容，標定。（4.3.1標定硫酸的方法稱量1.6g在270-300°C灼燒至恒重的基準無水碳酸鈉，稱準至0.0001g。溶解50mL水中，加入10滴溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑，用配制好的硫酸溶液滴定至溶液有綠色變?yōu)榘导t色，煮沸2min，冷卻后繼續(xù)滴定至溶液再呈暗紅色。同時做空白試驗。4.3.2標定硫酸過程中的主要影響因素

pm標淮中敘述的內(nèi)容苯確定國素對#毘精度影響注意爭頊說明i稱取下述規(guī)定蚤的于270-3WOX：灼燒至恒重的基準無水碳酸納，灼燒多長時間才達到恒吏？稱取H寸的更境溫度.藥品溫度-環(huán)境濕廈是多少？雖然這些都有一般性的規(guī)定-但稱取時環(huán)境濕度及藥品溫度對稱取的質(zhì)?癥有規(guī)龍口否則毎次稱取的質(zhì)輦精度受到影響、標芝的結(jié)果都各不相同口灼燒時M；U,標定出的厳據(jù)偽低；旳燒時達不到怛彰標定出的數(shù)揭懾圮’灼燒時間建巍最好大子3小時。環(huán)境沮虞大，釉取藥弗醐實際質(zhì)童偏小，標定出藥數(shù)扌屈偏妃"蔬好在晴朗的天憲標定、有條件百勺可將化驗舉的濕度控制在3舲踽旳燒設(shè)備；目前化驗室高溫爐，有老式指針控制曙的也亦新式可控磴數(shù)亨控制儀.老式的奇溫臚大多數(shù)控制精屢不自趴不披人們逢意1在灼燒藥品時越溫V新式可控硅高溫爐控制粉度離，克全滿足要求，但控制參數(shù)：比例度要訓(xùn)餌10%?枳分吋間調(diào)到壷小°2''稱準至U.―定是校準好天平3 '濬于SOiiiL水申■加10滴進甲酚竦-甲基紅混合扌旨示攏，化驗室用球館水貳好周電導(dǎo)儀測試一下看是否達到姜求.4用配制好的硫雅溶液_滴定至溶漉由綠色變?yōu)榘导t色r配制好的硫酸溶嶽坳旬程度不蛭過充分妁攪拌和斌置、硫釀溶濾很雅均勻*妾充分攪拌均勻，存放24小時后再進行標定*潰:沸2minf盍沸時逋發(fā)童的大4不確定，M#＜的丸小直接務(wù)響淳液:的顏色r從而影響標定救蕪岌瑩為25mL為宜.6冷卻后繼嫌滴定至溶液再呈暗紅乩冷卻到什么溫度才可再次滴定-沒有說明?分別紂冷卻到5QC、4Q€.309做過試臉，結(jié)舉大不相同=本人建議統(tǒng)一冷卻到409°最后強調(diào)終點是暗紅色，M—會愛為洋紅?7 '同時作空白試驗)4.572%硫酸。取734.69mL濃硫酸，倒入200mL水中，冷卻后稀釋至1000mL。4.6其他試劑。丙酮，無水硫酸鈉，十氫化萘，95%的硫酸操作步驟NDF的測定5.1.1準確稱取40目篩飼料樣品0.5-1.0g（m），置粗纖維測定儀（SLQ-6）坩堝中，加入中性洗滌劑溶液100ml和2ml十氫化萘即萘烷和0.5g無水亞硫酸鈉。打開冷凝裝置，立即置于電爐上煮沸（5-10min）,并微沸1h.5.1.3煮沸完畢，冷卻10min，抽濾，并用沸水沖洗三次，再抽濾，再用95%的乙醇20mL沖洗一次，抽濾，再用20ml丙酮沖洗，抽濾。5.1.4取下坩堝，放置通風(fēng)櫥中揮發(fā)完殘余有機溶劑后，105°C烘干，稱至恒重（m）25.2ADF的測定準確稱取樣品，0.5-1.0g（m）,置坩堝中，加入酸性洗滌劑溶液100ml和數(shù)滴十氫化萘。5.2.2打開冷凝裝置，立即置于電爐上煮沸（5-10min），并微沸1h.用已知質(zhì)量的玻璃坩堝（m3）,在抽濾瓶上抽濾殘渣，并用沸水洗滌殘渣，抽濾反復(fù)3次，并用（藍色）石蕊試紙檢測濾液是否呈現(xiàn)中性，然后用少量丙酮洗滌殘渣，反復(fù)沖洗至濾液無色為止，抽凈全部丙酮。5.2.4取下坩堝，放置通風(fēng)櫥中揮發(fā)完殘余有機溶劑后，105C烘干，稱至恒重(m)25.3ADL的測定將酸性洗滌纖維加入72%硫酸，使得酸性洗滌纖維被淹沒，每隔1h攪拌一次，在20°C消化3h后過濾，并沖洗至中性。將坩堝放置105°C的烘箱中烘2h后m4,將殘渣烘干并灼燒灰分后(500C馬沸爐中灼燒2h或坩堝中無炭粒為止，取出玻璃坩堝，放入干燥器中冷卻至恒重)即可得出酸性洗滌木質(zhì)素和酸不溶灰分m的含量。5計算W(NDF)：=(m2-m1)/mW(ADF)=(m3-m2)/mW(ADL)=(m4-m5)/m七、試劑總用量預(yù)算表用量試劑乙二胺四乙酸二鈉(EDTA，化學(xué)純)18.61*50=930.5g四硼酸鈉(Nabo.10HO)24 7 2 76.81*50=304.5g

十—烷基硫酸鈉溶液30*500=15000g無水磷酸氫二鈉4.65*50=232.5g十六烷三甲基溴化銨20*50=1000g94.766%硫酸28*50=1400mL72%硫酸734.69*50=36734.5mL總硫酸38134.5mL十氫化萘(2+2)*500=2500mL無水亞硫酸鈉0.5*500=250g內(nèi)酮(20+20)*500=2000mL基準無水碳酸鈉1.6*20=32g中性洗滌纖維50000mL酸性洗滌纖維50000mL已醇乙醚500mL參考文獻王佩之，許冠南.一種有待開發(fā)的稀有蔬菜一四棱豆[J].中國蔬菜,1991,(3):30~32.陳東明，艾辛，全妙華，等.四棱豆在湖南懷化地區(qū)的引種試[J].作物研究,2005,19(1):35~37.⑶傅翠真，王佩之.四棱豆的營養(yǎng)價值及利用前景[J].作物雜志,1994,(5):37~38.[4]韋武青，宋春，馬志虎.四棱豆[J].上海蔬菜,2004,(2):21.⑸張麗琴?綠色金子一四棱豆[J].當代蔬菜,2005,(11):39.[6]吳曉杰?不同處理方式對青貯飼料質(zhì)量影響的試驗硏究[D].北京:中國農(nóng)業(yè)大學(xué),2005.⑺黎英華.鄂爾多斯高原主要飼用豆科植物青貯特性的硏究[D].呼和浩特:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué),2010.⑻劉向陽，閻巧娟，韓魯隹等.氨化秸稈飼料的質(zhì)量評定[J].中國農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報,2002,7(6):49~53.薛艷林，玉柱，白春生，等.萎蔫處理對苜蓿草渣青貯品質(zhì)的影響[A].中國草學(xué)會飼料生產(chǎn)委員會第15次飼草生產(chǎn)學(xué)術(shù)硏討會論文集[C],2009:350?354.楊富裕,周禾,韓建國,等.添加甲酸+甲醛對草木樨青貯品質(zhì)的影響[J].草業(yè)學(xué)報,2004,13(1):74?78.楊杰,顧洪如,翟頻,等.凋萎程度與復(fù)合添加劑處理對多花黑麥草青貯品質(zhì)的影響[J].江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報,2008,24(2):185?189.郭庭雙.秸桿畜牧業(yè)[M].上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,1994:43?98.郭玉琴，何欣，孫曉利.不同含水率對苜蓿青貯營養(yǎng)成分的影響[J].當代畜牧,2005,(12):38?39.余汝華?玉米秸稈青貯前后營養(yǎng)成分變化規(guī)律的硏究[D].北京:中國農(nóng)業(yè)大學(xué),2004.BoeverJL,BrbanaderDL,SmetAM,etal.Evaluationofphysiealstuetureofmaizesilage[J].DairySic,1993,(76):1624~1634.王秀奇，秦淑媛,高天慧，等.基礎(chǔ)生物化學(xué)實驗(第二版)[M].北京:高等教育出版社,1999:113~122.張麗英.飼料分析及飼料質(zhì)量檢測技術(shù)(第2版)[M].北京:中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社,1998:46~59.王開強，林宏鳳,郭龍文.椰子果皮粗灰分、鈣、總磷的測定[J].瓊州大學(xué)學(xué)報,2004,11(5):31~33.梁祖鐸.飼料生產(chǎn)學(xué)[M].北京:農(nóng)業(yè)出版社,1979:67.余汝華?玉米秸稈青貯前后營養(yǎng)成分變化規(guī)律的硏究[D].北京:中國農(nóng)業(yè)大學(xué),2004.楊斌;殷引;張浩博;佘永楨;沈軼洗滌劑法測定煙草及煙草制品中中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維、酸性洗滌木質(zhì)素的硏究[M]中國煙草學(xué)報,2012蘇玲玲;申煜;張志軍;纖維袋法測定餅粕類飼料原料中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維含量的研究飼料博覽2013苗志國,侯先志,敖長金,吳庶青.營養(yǎng)補償初期蘇