細胞劃痕實驗

細胞劃痕實驗實驗原理細胞劃痕（woundhealing）法是簡捷測定細胞遷移運動和修復能力的方法，類似體外傷口愈合模型，在體外培養(yǎng)皿或平板培養(yǎng)的單層貼壁細胞上，用微量槍頭或其它硬物在細胞生長的中央?yún)^(qū)域劃線，去除中央部分的細胞，然后繼續(xù)培養(yǎng)細胞至實驗設定的時間，取出細胞培養(yǎng)板，觀察周邊細胞的生長遷移能力，實驗通常需設定正常對照組和實驗組，實驗組是加了某種處理因素或藥物、外源性基因等的組別，通過不同分組之間的細胞對于劃痕區(qū)修復能力的不同，可以判斷各組細胞的遷移與修復能力。實驗步驟1、所有要滅菌，直尺和marker筆在操作前紫外照射30min。2、1）先用marker筆在6孔板背后，用直尺比著，大約每隔0.5-1cm一道，橫穿過孔，每孔至少穿過5條線。2）在空中加入約5×105個細胞（具體數(shù)量因細胞不同而不同，掌握為過夜能鋪滿），37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)。3）第二天用10μl槍頭比著直尺，與標記線垂直的方向劃兩條平行線，槍頭要垂直，不能傾斜。4）用PBS洗細胞3次，去除劃下的細胞，加入無血清培養(yǎng)基。5）放入37℃5%CO2培養(yǎng)箱，按0、6、12、24h倒置顯微鏡觀察，拍照。三、注意事項1、在用PBS緩沖液沖洗時，注意貼壁慢慢加入，以免沖散單層貼壁細胞，影響實驗拍照結果。2、一般做劃痕實驗，都是無血清或者低血清（<2%），否則細胞增殖就不能忽略。（也可用絲裂酶處理一小時）3、按照6孔板背后畫線的垂直方向劃痕，可以形成若干交叉點，作為固定的檢測點，以解決了前后觀察時位置不固定的問題。項目立項申請書項目名稱：申請部門：項目負責人：申報人：申請立項日期：項目名稱項目簡稱所屬上級項目項目類型□移動應用□前端項目√企業(yè)級項目生命周期瀑布模型項目起止日期自年月日起至年月日止是否重點項目□是□否項目承擔部門部門名稱聯(lián)系人電話項目背景項目依據(jù)為了豐富我們校園生活，豐富我們的校園文化，讓我們在校園閑事生活中更加的豐富多彩，故突發(fā)此想法，做一個類似學校官方的學生平臺，服務我們自己。項目的意義此項目有利于提高我們的個人能力，對日后的個人發(fā)展有著重大意義，包括以后對軟件工程綜合實踐課程更好的提高個人成績，如果本項目做的比較成功，可以作為個人的畢業(yè)設計。項目市場分析市場規(guī)模及競爭情況：目前市場上針對學生的生活方面的平臺，還是有所欠缺的，所以我們的校園生活平臺的潛在市場還是特別的大，有利于我們的開發(fā)和推廣。收益分析項目如果最后成功的做出來的話，不但能提高我們個人的能力，還讓我們對企業(yè)級開發(fā)這樣的開發(fā)有個更深入的了解，相信對我們以后的收益是巨大的。項目技術分析項目工作基礎和已取得的工作成績：目前前臺的開發(fā)技術已經(jīng)成熟，所以我們有著很大的優(yōu)勢，然而在每年的小學期方面，我們均有校級獎項。技術架構：主要以先搭框架，然后把框架填充為主。技術路線：數(shù)據(jù)庫，HTML，JAVA，等項目目標和范圍項目的目標a.技術目標：能后實現(xiàn)數(shù)據(jù)庫，HTML，JAVA，三者的完美結合。b.產品目標：做夠做出來一個讓學生愿意使用，廣告愿意推廣的網(wǎng)站。c.團隊成長目標：能夠讓每個成員都能提高自己的個人能力、項目的內容和范圍本校園生活平臺主要分為6個組成模塊，（學習、飲食、兼職、出行、娛樂、鏈接），其中每個模塊，對應的不同的模塊功能：A學習模塊：有著討論區(qū)，資料區(qū)（目前設想可以下載和上傳資料），在線閱讀區(qū)。B.飲食：主要是點餐功能C.兼職：只要是發(fā)布兼職信息和應聘信息。D.出行：目前只是設想可以在蕪湖部分地區(qū)實現(xiàn)點對點的查詢公交乘坐信息。E.娛樂：主要是發(fā)布聊天室。F.超鏈接：鏈接一些對學生有益或者與學校有關的網(wǎng)站。項目驗收指標完成《項目的內容和范圍》中所列功能。項目實施規(guī)劃版本里程碑開始時間完成時間備注V1.0完成項目立項書撰寫及評審2016/10/102016/10/28第6、7、8周V1.0完成需求規(guī)格說明書撰寫及評審2016/10/312016/11/13第9、10周V1.0完成概要設計及評審2016/11/142016/11/25第11、12周V1.0完成詳細設計及評審2016/11/282016/12/10第13、14周V1.0完成測試用例撰寫及評審2016/11/282016/12/10第13、14周V1.0完成代碼開發(fā)及測試2016/12/122016/12/30第15、16、17周項目資源1.人力資源姓名所屬部門角色工作時間工作量Java4項目負責人2016.10.10-2016.12.1220%Java4組員2016.10.10-2016.12.1220%Java4組員2016.10.10-2016.12.1215%Java4組員2016.10.10-2016.12.1215%Java4組員2016.10.10-2016.12.1215%Java4組員2016.10.10-2016.12.1215%項目風險分析及應對措施風險內容應對措施【技術風險】團隊大多是新組合，對彼此不熟悉，會增加溝通成本及工期組員多多交流，快速磨合，早點開啟項目計劃【進度風險】我們小組的功能較多，后期可能實現(xiàn)不了。計劃是完成AB兩個模塊，其他的根據(jù)項目的情況待定。項目評審委員會成員名單姓名所屬部門評審組職務主要評審內容老師組長組長組長評審委員會審批意見：簽字年月日一級項目專家組長審核意見（二級產品類項目必須的審批環(huán)節(jié)）：項目負責人簽字年月