獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室生物安全技術(shù)管理規(guī)范

獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室生物安全技術(shù)

管理規(guī)范（2003年10月15日農(nóng)業(yè)部第302號(hào)公告發(fā)布）1適用范圍

本規(guī)范規(guī)定了獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)的基本原則、實(shí)驗(yàn)室的分級(jí)、各級(jí)實(shí)驗(yàn)室的基本要求和管理。本規(guī)范為最低要求。本規(guī)范適用于各級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)、使用和管理。2引用標(biāo)準(zhǔn)《中華人民共和國動(dòng)物防疫法》（1997）《中華人民共和國進(jìn)出境動(dòng)植物檢疫法》（1992）《中華人民共和國進(jìn)出境動(dòng)植物檢疫法實(shí)施條例》（1995）《農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全管理?xiàng)l例》（2001國務(wù)院304號(hào)令）《農(nóng)業(yè)生物基因工程安全管理實(shí)施辦法》（1996農(nóng)業(yè)部7號(hào)令）3定義

獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室（VeterinaryLaboratory）：一切從事獸醫(yī)病原微生物、寄生蟲研究與使用，以及獸醫(yī)臨床診療和疫病檢疫監(jiān)測(cè)的實(shí)驗(yàn)室。

獸醫(yī)微生物（VeterinaryMicroorganisms）：一切能引起動(dòng)物傳染病或人畜共患病的細(xì)菌、病毒和真菌等病原體。人畜共患?。╖oonosis）：可以由動(dòng)物傳播給人并引起人類發(fā)病的傳染性疾病。

外來?。‥xoticDiseases）：在國外存在或流行的，但在國內(nèi)尚未證實(shí)存在或已消滅的動(dòng)物疫病。3定義

實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)（BiosafetyContainmentofLaborato-ries）：實(shí)驗(yàn)室工作人員在處理病原微生物、含有病原微生物的實(shí)驗(yàn)材料或寄生蟲時(shí)，為確保實(shí)驗(yàn)對(duì)象不對(duì)人和動(dòng)物造成生物傷害，確保周圍環(huán)境不受其污染，在實(shí)驗(yàn)室和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)與建造、使用個(gè)體防護(hù)裝置、嚴(yán)格遵守標(biāo)準(zhǔn)化的工作及操作程序和規(guī)程等方面所采取的綜合防護(hù)措施。3定義

微生物危害評(píng)估（HazardAssessmentofMicrobes）：對(duì)病原微生物或寄生蟲可能給人、動(dòng)物和環(huán)境帶來的危害所進(jìn)行的評(píng)估。3定義

氣溶膠（Aerosol）：懸浮于氣體介質(zhì)中粒徑為0.001—100μｍ的固體、液體微小粒子形成的膠溶狀態(tài)分散體系。

通風(fēng)櫥（ChemicalHood）：是通過管道直接排出操作化學(xué)藥品時(shí)所產(chǎn)生的有害或揮發(fā)性氣體、氣溶膠和微粒的通風(fēng)裝置。高效空氣過濾器（HEPA，HighEfficiencyParticulateAir-fil-ter）：在額定風(fēng)量下，對(duì)粒徑大于等于0.3μｍ的粒子捕集效率在99.97％以上及氣流阻力在245Pa以下的空氣過濾器。生物安全柜（Biosafety

Ｃabinet）：處理危險(xiǎn)性微生物時(shí)所用的箱形負(fù)壓空氣凈化安全設(shè)備。分為Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ級(jí)。

4實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)的基本原則總則獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)內(nèi)容包括：安全設(shè)備、個(gè)體防護(hù)裝置和措施（一級(jí)防護(hù)）；實(shí)驗(yàn)室的特殊設(shè)計(jì)和建設(shè)要求（二級(jí)防護(hù)）；嚴(yán)格的管理制度和標(biāo)準(zhǔn)化的操作程序與規(guī)程。獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室除了防范病原體對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員的感染外，還必須采取相應(yīng)措施防止病原體的逃逸

4實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)的基本原則總則對(duì)每一特定實(shí)驗(yàn)室，應(yīng)制定有關(guān)生物安全防護(hù)綜合措施，編寫各實(shí)驗(yàn)室的生物安全管理手冊(cè)，并有專人負(fù)責(zé)生物安全工作。生物安全水平根據(jù)微生物的危害程度和防護(hù)要求分為４個(gè)等級(jí)，即Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ級(jí)。有關(guān)ＤＮＡ重組操作和遺傳工程體的生物安全應(yīng)參照《農(nóng)業(yè)生物基因工程安全管理實(shí)施辦法》執(zhí)行。

4實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)的基本原則安全設(shè)備和個(gè)體防護(hù)實(shí)驗(yàn)室必須配備相應(yīng)級(jí)別的生物安全設(shè)備。所有可能使病原微生物逸出或產(chǎn)生氣溶膠的操作，必須在相應(yīng)等級(jí)的生物安全控制條件下進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)室工作人員必須配備個(gè)體防護(hù)用品（防護(hù)帽、護(hù)目鏡、口罩、工作服、手套等）。

4實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)的基本原則實(shí)驗(yàn)室選址、設(shè)計(jì)和建造的要求實(shí)驗(yàn)室必須依據(jù)所需要的防護(hù)級(jí)別和標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行設(shè)計(jì)和建造，并滿足本規(guī)范中的最低設(shè)計(jì)要求和運(yùn)行條件。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室除滿足相應(yīng)生物安全級(jí)別要求外，還應(yīng)隔離，并根據(jù)其相應(yīng)生物安全級(jí)別，保持與中心實(shí)驗(yàn)室的相應(yīng)壓差。

4實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)的基本原則生物安全操作規(guī)程本規(guī)范規(guī)定了不同級(jí)別的獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室生物安全操作規(guī)程，必須在各實(shí)驗(yàn)室的生物安全管理手冊(cè)中明列，并結(jié)合實(shí)際制定相應(yīng)的實(shí)施方案。本規(guī)范對(duì)各種病原微生物均有明確的生物危害分類，各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)其操作的對(duì)象，制定相應(yīng)的特殊生物安全操作規(guī)程，并列入其生物安全管理手冊(cè)。

4實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)的基本原則危害性微生物及其毒素樣品的引進(jìn)、采集、包裝、標(biāo)識(shí)、傳遞和保存采集的樣品應(yīng)放入安全的防漏容器內(nèi)，傳遞時(shí)必須包裝結(jié)實(shí)嚴(yán)密，標(biāo)識(shí)清楚牢固，容器表面消毒后由專人送遞或郵寄至相應(yīng)實(shí)驗(yàn)室。危害性微生物及其毒素樣品的保存應(yīng)根據(jù)其危害等級(jí)分級(jí)保存。進(jìn)口危害性微生物及其毒素樣品時(shí)，申請(qǐng)者必須要有與該微生物危害等級(jí)相應(yīng)的生物安全實(shí)驗(yàn)室，并經(jīng)國務(wù)院畜牧獸醫(yī)行政管理部門批準(zhǔn)。

4實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)的基本原則使用放射性同位素的生物安全防護(hù)要求參照《放射性同位素與射線裝置放射防護(hù)條例》執(zhí)行。

◆國務(wù)院第449號(hào)令《放射性同位素與射線裝置安全和防護(hù)條例》

自2005年12月1日起施行照射狀態(tài)指示燈當(dāng)心電離輻射不同射線的穿透能力輻射所致各組織器官病變組織器官

效應(yīng)

單次照射劑量閾值（Gy）皮膚紅斑（X、γ線）5—8暫時(shí)性脫毛3—5永久性脫毛7造血系統(tǒng)受照者50%死亡2—3眼睛晶體混濁（X線)2白內(nèi)障（100%）7.5白內(nèi)障（X線,隨訪35年）5睪丸暫時(shí)性不育0.15永久性不育3.5卵巢不育2.5—6

電離輻射防護(hù)的基本手段時(shí)間防護(hù)距離防護(hù)屏蔽防護(hù)

4實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)的基本原則污染與廢棄物（廢氣、廢液和固形物）處理去污染包括滅菌（徹底殺滅所有微生物）和消毒（殺滅特殊種類的病原體），是防止病原體擴(kuò)散造成生物危害的重要防護(hù)屏障。被污染的廢棄物或各種器皿在廢棄或清洗前必須進(jìn)行滅菌處理；實(shí)驗(yàn)室在病原體意外泄漏、重新布置或維修、可疑污染設(shè)備的搬運(yùn)以及空氣過濾系統(tǒng)檢修時(shí)，均應(yīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)室設(shè)施及儀器設(shè)備進(jìn)行消毒處理。

4實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)的基本原則污染與廢棄物（廢氣、廢液和固形物）處理根據(jù)被處理物的性質(zhì)選擇適當(dāng)?shù)奶幚矸椒ǎ绺邏簻缇?、化學(xué)消毒、熏蒸、γ—射線照射或焚燒等。對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物尸體及動(dòng)物產(chǎn)品應(yīng)按規(guī)定作無害化處理。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)盡量減少用水，污染區(qū)、半污染區(qū)產(chǎn)生的廢水必須排入專門配備的廢水處理系統(tǒng)，經(jīng)處理達(dá)標(biāo)后方可排放。

4實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)的基本原則管理制度獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室必須建立健全管理制度。

4實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)的基本原則微生物危害評(píng)估按照微生物危害分為４級(jí)。在建設(shè)實(shí)驗(yàn)室之前，必須對(duì)擬操作的病原微生物進(jìn)行危害評(píng)估，結(jié)合人和動(dòng)物對(duì)其易感性、氣溶膠傳播的可能性、預(yù)防和治療的獲得性等因素，確定相應(yīng)生物安全水平等級(jí)。危害程度評(píng)估應(yīng)該由適當(dāng)?shù)挠薪?jīng)驗(yàn)的專業(yè)人員進(jìn)行

5微生物危害分級(jí)微生物危害通常分為以下4級(jí)生物危害１級(jí)：對(duì)個(gè)體和群體危害程度低，已知的不能對(duì)健康成年人和動(dòng)物致病的微生物。生物危害２級(jí)：對(duì)個(gè)體危害程度為中度，對(duì)群體危害較低，主要通過皮膚、粘膜、消化道傳播。對(duì)人和動(dòng)物有致病性，但對(duì)實(shí)驗(yàn)人員、動(dòng)物和環(huán)境不會(huì)造成嚴(yán)重危害的動(dòng)物致病微生物，具有有效的預(yù)防和治療措施。

5微生物危害分級(jí)微生物危害通常分為以下4級(jí)生物危害３級(jí)：對(duì)個(gè)體危害程度高，對(duì)群體危害程度較高。能通過氣溶膠傳播的，引起嚴(yán)重或致死性疫病，導(dǎo)致嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失的動(dòng)物致病微生物，或外來的動(dòng)物致病微生物。對(duì)人引發(fā)的疾病具有有效的預(yù)防和治療措施。生物危害４級(jí)：對(duì)個(gè)體和群體的危害程度高，通常引起嚴(yán)重疫病的、暫無有效預(yù)防和治療措施的動(dòng)物致病微生物。通過氣溶膠傳播的，有高度傳染性、致死性的動(dòng)物致病微生物；或未知的危險(xiǎn)的動(dòng)物致病微生物。

5微生物危害分級(jí)根據(jù)對(duì)象微生物本身的致病特征確定微生物的危害等級(jí)時(shí)必須考慮下列因素微生物的致病性和毒力宿主范圍所引起疾病的發(fā)病率和死亡率疾病的傳播媒介動(dòng)物體內(nèi)或環(huán)境中病原的量和濃度

5微生物危害分級(jí)根據(jù)對(duì)象微生物本身的致病特征確定微生物的危害等級(jí)時(shí)必須考慮下列因素排出物傳播的可能性病原在自然環(huán)境中的存活時(shí)間病原的地方流行特性交叉污染的可能性獲得有效疫苗、預(yù)防和治療藥物的程度

5微生物危害分級(jí)除考慮特定微生物固有的致病危害外，危害評(píng)估還應(yīng)包括產(chǎn)生氣溶膠的可能性操作方法（體外、體內(nèi)或攻毒）對(duì)重組微生物還應(yīng)評(píng)估其基因特征（毒力基因和毒素基因）、宿主適應(yīng)性改變、基因整合、增殖力和回復(fù)野生型的能力等。

5獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的分類、分級(jí)及

其適用范圍分類基礎(chǔ)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室

是指對(duì)病原微生物進(jìn)行試驗(yàn)操作時(shí)所產(chǎn)生的生物危害具有物理防護(hù)能力的獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室。適用于獸醫(yī)微生物的臨床檢驗(yàn)檢測(cè)、分離培養(yǎng)、鑒定以及各種生物制劑的研究等工作。生物安全動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室

是指對(duì)病原微生物的動(dòng)物生物學(xué)試驗(yàn)研究時(shí)所產(chǎn)生的生物危害具有物理防護(hù)能力的獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室。也適用于動(dòng)物傳染病臨床診斷、治療、預(yù)防研究等工作。

5獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的分類、分級(jí)及

其適用范圍分級(jí)（生物安全水平分級(jí)依據(jù)）一級(jí)生物安全水平（BSL－1）二級(jí)生物安全水平（BSL－2）三級(jí)生物安全水平（BSL－3）四級(jí)生物安全水平（BSL－4）能夠安全地從事國內(nèi)和國外的，能通過氣溶膠傳播，實(shí)驗(yàn)室感染高度危險(xiǎn)，嚴(yán)重危害人和動(dòng)物生命和環(huán)境的，沒有特效預(yù)防和治療方法的微生物工作的生物安全水平。與上述相近的或有抗原關(guān)系的，但尚未完全認(rèn)識(shí)的病原體也應(yīng)在此種水平條件下進(jìn)行操作，直到取得足夠的數(shù)據(jù)后，才能決定是繼續(xù)在此種安全水平下工作還是在低一級(jí)安全水平下工作

5獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的分類、分級(jí)及

其適用范圍分級(jí)（動(dòng)物實(shí)驗(yàn)生物安全水平）一級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)生物安全水平（ABSL－1）二級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)生物安全水平（ABSL－2）三級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)生物安全水平（ABSL－3）四級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)生物安全水平（ABSL－4）

6實(shí)驗(yàn)室生物安全的物理防護(hù)分級(jí)和組合初級(jí)物理防護(hù)屏障實(shí)驗(yàn)室生物安全必須配備初級(jí)物理防護(hù)屏障，它包括各級(jí)生物安全設(shè)備和個(gè)人防護(hù)器具。

6實(shí)驗(yàn)室生物安全的物理防護(hù)分級(jí)和組合次級(jí)物理防護(hù)屏障實(shí)驗(yàn)室的設(shè)施結(jié)構(gòu)和通風(fēng)設(shè)計(jì)構(gòu)成次級(jí)物理防護(hù)屏障。一般把實(shí)驗(yàn)室分為潔凈、半污染和污染三個(gè)區(qū)。實(shí)驗(yàn)室保持密閉，通風(fēng)的氣流方向始終保持：外界→ＨＥＰＡ→潔凈區(qū)→半污染區(qū)→污染區(qū)→ＨＥＰＡ→外界。三級(jí)和四級(jí)生物安全水平的實(shí)驗(yàn)室中，污染區(qū)和半污染區(qū)的氣壓相對(duì)于大氣壓的壓差分別不應(yīng)小于－50Pa和－30Pa

6實(shí)驗(yàn)室生物安全的物理防護(hù)分級(jí)和組合生物安全水平（BSL）的構(gòu)成生物安全水平依賴于初級(jí)防護(hù)屏障、次級(jí)防護(hù)屏障和操作規(guī)程。三者不同形式的組合構(gòu)成了４個(gè)級(jí)別生物安全水平，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ級(jí)安全水平逐級(jí)提高，從而構(gòu)成Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ級(jí)實(shí)驗(yàn)室生物安全。應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)的生物安全要求進(jìn)行各種組合的設(shè)計(jì)。

7各級(jí)動(dòng)物安全實(shí)驗(yàn)室要求一級(jí)動(dòng)物安全實(shí)驗(yàn)室指按照BSL-1標(biāo)準(zhǔn)建造的實(shí)驗(yàn)室，也稱基礎(chǔ)生物實(shí)驗(yàn)室。在建筑物中，實(shí)驗(yàn)室無需與一般區(qū)域隔離。實(shí)驗(yàn)室人員需經(jīng)一般生物專業(yè)訓(xùn)練。其具體標(biāo)準(zhǔn)、微生物操作、安全設(shè)備、實(shí)驗(yàn)室設(shè)施要求如下：

7各級(jí)動(dòng)物安全實(shí)驗(yàn)室要求一級(jí)動(dòng)物安全實(shí)驗(yàn)室工作一般在桌面上進(jìn)行，采用微生物的常規(guī)操作。工作臺(tái)面至少每天消毒一次。工作區(qū)內(nèi)不準(zhǔn)吃、喝、抽煙、用手接觸隱形眼鏡、存放個(gè)人物品（化妝品、食品等）。嚴(yán)禁用嘴吸取試驗(yàn)液體，應(yīng)該使用專用的移液管。防止皮膚損傷。所有操作均需小心，避免外溢和氣溶膠的產(chǎn)生。所有廢棄物在處理之前用公認(rèn)有效的方法滅菌消毒。

7各級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室要求一級(jí)動(dòng)物安全實(shí)驗(yàn)室工作一般在桌面上進(jìn)行，采用微生物的常規(guī)操作。工作臺(tái)面至少每天消毒一次。工作區(qū)內(nèi)不準(zhǔn)吃、喝、抽煙、用手接觸隱形眼鏡、存放個(gè)人物品（化妝品、食品等）。嚴(yán)禁用嘴吸取試驗(yàn)液體，應(yīng)該使用專用的移液管。防止皮膚損傷。所有操作均需小心，避免外溢和氣溶膠的產(chǎn)生。所有廢棄物在處理之前用公認(rèn)有效的方法滅菌消毒。

7各級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室要求一級(jí)動(dòng)物安全實(shí)驗(yàn)室工作時(shí)應(yīng)穿著實(shí)驗(yàn)室專用長工作服。戴乳膠手套?？膳宕鞣雷o(hù)眼鏡或面罩

7各級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室要求四級(jí)動(dòng)物安全實(shí)驗(yàn)室指按照ABSL－４標(biāo)準(zhǔn)建造的實(shí)驗(yàn)室，適用于本國和外來的、通過氣溶膠傳播或不知其傳播途徑的、引起致死性疾病的高度危害病原體的操作。必須使用Ⅲ級(jí)生物安全柜系列的特殊操作和正壓防護(hù)服的操作。

7各級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室要求四級(jí)動(dòng)物安全實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該制定特殊的生物安全手冊(cè)或措施未經(jīng)培訓(xùn)的人員不得進(jìn)入動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室。所有進(jìn)入ＡＢＳＬ－４設(shè)施的人必須建立醫(yī)療監(jiān)督，監(jiān)督項(xiàng)目必須包括適當(dāng)免疫接種、血清收集及暴露危險(xiǎn)等有效性協(xié)議和潛在危害預(yù)防措施。負(fù)責(zé)人要告知工作人員工作中特殊的危險(xiǎn)，讓他們熟讀安全規(guī)程并遵照?qǐng)?zhí)行。設(shè)施內(nèi)禁止吃、喝、抽煙、處理隱形眼鏡、使用化妝品和儲(chǔ)藏食品。

7各級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室要求四級(jí)動(dòng)物安全實(shí)驗(yàn)室外溢污染一旦發(fā)生，應(yīng)由具有從事傳染性實(shí)驗(yàn)工作訓(xùn)練和有經(jīng)驗(yàn)的人處理。全部廢棄物（含動(dòng)物組織、尸體和污染墊料）、其它處理物和需要洗的衣服均需用安裝在次級(jí)屏障墻壁上的雙扉高壓蒸汽滅菌器消毒。廢棄物要焚燒。進(jìn)行傳染性實(shí)驗(yàn)必須指派２名以上的實(shí)驗(yàn)人員。獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室標(biāo)志設(shè)置原則