實驗一動物細胞培養(yǎng)液、消化液和冷凍液的配制1_第1頁
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文檔簡介

實驗一動物細胞培養(yǎng)用液的配制培養(yǎng)液：維持動物細胞生存和生長所需要的基本溶液

平衡鹽溶液（BalancedSaltSolution,BSS）用作洗滌組織、細胞以及配制各種培養(yǎng)用液的基礎溶液天然培養(yǎng)基（NaturalMedium）主要來自動物體液（如血清）或組織提取液（如雞胚和牛胚浸液）。在細胞培養(yǎng)中使用最早，也最有效。優(yōu)點：營養(yǎng)成分豐富，培養(yǎng)效果好缺點：來源受限。成分復雜，影響實驗產物的提取和實驗結果的分析。

合成培養(yǎng)基（SyntheticMedium）根據細胞生存所需物質的種類和數量，人工模擬合成，配方恒定。

優(yōu)點：標準化生產，組分和含量相對固定。成本低。缺點：缺少某些成分，不能完全滿足體外細胞生長需要。需補充部分天然培養(yǎng)基，多用血清，效果更好。消化液：分離組織、分散細胞的細胞分離液胰蛋白酶液：使細胞間的蛋白質水解、細胞分散常用濃度為0.25%血清可終止其對細胞的消化作用EDTA液：鰲合Ca2+、Mg2+，使細胞分離，對細胞毒性小常用濃度為0.02%冷凍液：用于細胞的冷凍保存在細胞培養(yǎng)的基礎液中加入一定劑量的血清和冷凍保護劑，如二甲亞砜（DMSO）、甘油或乙二醇。冷凍保護劑可使冰點降低，提高細胞膜對水的通透性，減少細胞內冰晶的形成，從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷。培養(yǎng)細胞生長的條件1細胞的營養(yǎng)需要基本營養(yǎng)物質：氨基酸，維生素，碳水化合物，無機離子。促生長因子等物質：血清中含多種促細胞生長所需的物質。2細胞的生存環(huán)境溫度：37℃氣體：O2和CO2，CO2常用濃度為5%pH值：7.2-7.4滲透壓：260－320mmol/L3無污染及無毒常用實驗用品培養(yǎng)器皿：培養(yǎng)瓶，血清瓶，吸管，離心管，凍存管超凈工作臺，壓力蒸汽消毒器，電熱干燥箱，濾器，酸缸CO2培養(yǎng)箱倒置顯微鏡液氮罐自動雙重純水蒸餾器，純水儀培養(yǎng)瓶血清瓶培養(yǎng)板配制培養(yǎng)液必須使用三蒸水或Millipore超純水，不可用無離子水配制。純水儀全自動高壓滅菌鍋濾器

原理用比細菌直徑(一

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