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2014-06-26解。從哪里說起呢,剛開始,我準備做一個qPCR驗室準備做一個qPCR了。他們都說師兄只會瞎侃,但我覺得神師兄是僅次于莫愁師姐的,特別有智慧且靠譜的一個。聊著聊著,師兄就問我:小林子啊,你為啥要做SYBRgreen染料法的文章介紹過,SYBRgreen來做qPCR的話,是會有很嚴重問題的。因為SYBRgreen會抑制PCR反應,得出來的結果沒有探針來的效果好,其實價于是一周后,我迷迷瞪瞪地就設計Taqman的時候,師兄正好又順路來了一趟實驗室。聊著聊著他就說:小林子啊,你為啥要檢測mRNA呢?檢測蛋白表達才是王道嘛!mRNA表蛋白表達會降低呢!因為如果蛋白的泛素化停滯,蛋白就會累積;又或者蛋白的磷酸化不斷激活,也會導致蛋白作用的變化。所以用Taqman如用WesternBlot來得直接,直接檢測蛋白表達、磷酸化、泛素化的變于是一周后,我忽忽悠悠地就查了各種抗體的供應商,但剛要下單的時候,師兄又來了。他看到我定抗體,要做Western。于是又開始跟我聊了起來:我說小林子啊,你要研究基因表達變化,干嘛不就做一張芯片呢?一下子就出來全部基因組里的表達變化,多好!想要啥就有啥,里面2w隨你挑!跟這個基因表達相關的上下游通路,啥都一清二楚,絕對是居家旅片、miRNA芯片、LNCRNA芯片,剛詢完價,你猜的沒錯,神師兄又出現1、SYBRGreen是會抑制PCR反應,但是是在高濃度
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