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文檔簡介
第七章
臨床尿液檢驗儀器
教學(xué)要求
掌握試劑帶的反應(yīng)原理;掌握尿液分析儀的檢測原理;掌握流式細(xì)胞術(shù)尿有形成分分析儀的工作原理;熟悉尿液分析儀、流式細(xì)胞術(shù)尿有形成分分析儀的結(jié)構(gòu)
;熟悉尿液分析儀、尿有形成分分析的維護(hù)和保養(yǎng)。
主要內(nèi)容
第一節(jié)尿液分析儀一、尿液分析儀的分類二、尿液分析儀工作原理三、尿液分析儀儀器的結(jié)構(gòu)與功能四、尿液分析儀的安裝、調(diào)校
五、尿液分析儀的使用注意事項及維護(hù)與保養(yǎng)
六、尿液分析儀的質(zhì)量控制第二節(jié)尿有形成分分析儀一、流式細(xì)胞術(shù)尿有形成分分析儀二、影像式尿有形成分分析儀
第一節(jié)尿液分析儀尿液自動分析儀的發(fā)展史尿液分析儀的分類尿液分析儀測試原理尿液分析儀結(jié)構(gòu)安裝、調(diào)校、維護(hù)干化學(xué)檢查與顯微鏡檢查干化學(xué)尿液分析技術(shù)操作的局限性影響干化學(xué)檢測結(jié)果的因素一、自動尿液分析儀的發(fā)展史干化學(xué)尿液分析儀是測定尿中某些化學(xué)成份的自動化儀器,是醫(yī)學(xué)實(shí)驗室尿液自動化檢查的重要工具。20世紀(jì)50年代即有人采用單一干化學(xué)試帶法測定尿中蛋白質(zhì)和糖。尿液分析儀的出現(xiàn)給臨床實(shí)驗室尿液分析帶來了一個飛躍。20世紀(jì)60年代,世界上許多公司也開始研制生產(chǎn)尿液干化學(xué)試劑帶,如德國寶靈曼公司于1964年代推出COMBUR-TEST試劑帶。
20世紀(jì)70年代,隨著自動化程度不斷的提高,半自動尿液分析儀的問世,替代了肉眼觀察的結(jié)果,減少了人為誤差,提高了檢測的敏感度和特異性。一、自動尿液分析儀的發(fā)展史一、自動尿液分析儀的發(fā)展史
到了20世紀(jì)80年代中期,由于計算機(jī)技術(shù)的高度發(fā)展和廣泛使用,尿液分析儀的自動化才能得到迅猛發(fā)展,由半自動發(fā)展到全自動。我國尿干化學(xué)試帶的研制開始于20世紀(jì)60年代。1985年廣西桂林醫(yī)療電子儀器廠從日本引進(jìn)了當(dāng)時先進(jìn)的MA-4210型尿液自動分析儀和專用試劑帶的生產(chǎn)技術(shù)和設(shè)備,以后幾年,經(jīng)過我國專家的努力,于1990年達(dá)到了全部國產(chǎn)化。一、自動尿液分析儀的發(fā)展史但是,在尿液分析儀的使用中,使用不當(dāng)和許多中間環(huán)節(jié)及影響因素卻直接影響自動化分析結(jié)果的準(zhǔn)確性,會引起實(shí)驗結(jié)果的誤差,以致作出錯誤的診斷。因此,要求操作者對自動化儀器的原理、性能、注意事項及影響因素的方面的知識要有充分的了解,正確的使用自動化儀器,才能使尿液分析儀得出的結(jié)果更可靠、準(zhǔn)確。
二、尿液分析儀的分類按工作方式分類按測試項目將尿液分析儀分類按自動化程度將尿液分析儀分類二、尿液分析儀的分類二、尿液分析儀的分類(一)按工作方式可分為濕式尿液分析儀干式尿液分析儀二、尿液分析儀的分類(二)按測試項目可分為8項尿液分析儀9項尿液分析儀10項尿液分析儀11項尿液分析儀12項尿液分析儀13項尿液分析儀二、尿液分析儀的分類1.8項尿液分析儀代表儀器:日本或國產(chǎn)的MA-4210型檢測項目:尿蛋白、尿糖、PH、酮體、膽紅素、尿膽原、尿隱血、尿亞硝酸鹽。二、尿液分析儀的分類2.9項尿液分析儀代表儀器:德國產(chǎn)的RL-9型檢測項目:尿蛋白、尿糖、PH、酮體、膽紅素、尿膽原、尿亞硝酸鹽、尿隱血、尿白細(xì)胞。二、尿液分析儀的分類3.10項尿液分析儀代表儀器:德國的MIDITRON型或美國的CLINITEK200型檢測項目:蛋白、糖、PH、酮體、膽紅素、尿膽原、尿亞硝酸鹽、尿紅細(xì)胞、白細(xì)胞、尿比密二、尿液分析儀的分類4.11項尿分析儀代表儀器:美國的CLINITEK500型檢測項目:蛋白、糖、PH、酮體、尿膽紅素、尿膽原、尿亞硝酸鹽、尿隱血、白細(xì)胞、比密、維生素C二、尿液分析儀的分類(三)按自動化程度可分為半自動尿液分析儀:代表儀器是德國的MIDITRON型、美國的CLINITEK200型
全自動尿液分析儀:代表儀器是德國的SUPERTRON型、美國的CLINTEKAT-LAS型二、尿液分析儀的分類二、尿液分析儀的分類三、尿液分析儀測試原理尿液分析儀的測試原理主要有以下三個方面:尿液分析儀的試劑帶原理尿液分析儀測量原理尿液分析儀計算原理三、尿液分析儀測試原理試劑帶原理多聯(lián)試劑帶是將多種項目的試劑塊集成在一個試劑帶,使用多聯(lián)試劑帶,浸入一次尿液可同時測定多個項目。圖為德國寶靈曼公司的COMBURTEST試劑帶。它采用了多層模結(jié)構(gòu);尼龍膜:防止大分子物質(zhì)對反應(yīng)的污染;三、尿液分析儀測試原理絨制層:包括碘酸鹽層和試劑層:碘酸鹽層可以破壞維生素C等干擾物質(zhì),試劑層含有試劑成分,主要與尿液中測定物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng),產(chǎn)生顏色變化;吸水層:可使尿液均勻快速的浸入,并能抑制尿液流到相鄰的反應(yīng)區(qū);塑料底層:作支持體。
多聯(lián)試劑帶結(jié)構(gòu)圖
三、尿液分析儀測試原理三、尿液分析儀測試原理
另外,試劑帶中還有另一個墊-“補(bǔ)償區(qū)”,作為尿液本底顏色,以對有色尿及儀器變化等產(chǎn)生的誤差進(jìn)行補(bǔ)償。試劑帶按一定的順序排列,各個廠家不一樣,尿液中的各種成分被各測定塊吸收,引起化學(xué)反應(yīng)及酶反應(yīng),使試劑塊顏色根據(jù)尿液中各成分的比例而變化。三、尿液分析儀測試原理項目縮寫符號反應(yīng)原理膽紅素BIL偶氮反應(yīng)法尿膽原URO醛反應(yīng)法,重氮反應(yīng)法酮體KET硝基鐵氫化鈉法亞硝酸鹽NIT亞硝酸鹽還原法白細(xì)胞LEU脂酶法比密D(SG)多聚電解質(zhì)離子解離法
各項目測定原理表三、尿液分析儀測試原理項目縮寫符號反應(yīng)原理膽紅素BIL偶氮反應(yīng)法尿膽原URO醛反應(yīng)法,重氮反應(yīng)法酮體KET硝基鐵氫化鈉法亞硝酸鹽NIT亞硝酸鹽還原法白細(xì)胞LEU脂酶法比密D(SG)多聚電解質(zhì)離子解離法隱血實(shí)驗原理:利用Hb中亞鐵血紅素有類似過氧化物酶的作用,在供氫體(如無色的鄰聯(lián)甲苯胺)的存在下,使過氧化物還原成為水,而無色的鄰聯(lián)甲苯胺被氧化成為有色的產(chǎn)物。AH2-H2O2過氧化物酶A2-H2O2(無色)(有色)三、尿液分析儀測試原理干化學(xué)分析試帶使用說明操作人員必須仔細(xì)閱讀試帶性能和儀器的操作方法;操作中應(yīng)充分混勻新鮮尿液標(biāo)本;將試帶全部迅速浸入尿液標(biāo)本;試帶從標(biāo)本中取出時,除去多余的尿液;可疑結(jié)果必須進(jìn)行確診實(shí)驗;干化學(xué)實(shí)驗結(jié)果應(yīng)與理學(xué)、顯微鏡結(jié)果相關(guān)聯(lián)。三、尿液分析儀測試原理試帶保存方法:試帶貯存在干燥、不透明、有蓋的容器中,不能取出容器中的干燥劑;放置于陰涼干燥的地方,不要放冰箱;不能暴露于揮發(fā)性的煙霧中;不能使用過期的試帶,通常打開后6個月內(nèi)用完,不能使用已褪色的化學(xué)試帶。三、尿液分析儀測試原理三、尿液分析儀測試原理測量原理此類儀器一般用微電腦控制,將浸有尿液的試劑帶放在儀器比色槽內(nèi),試帶上已產(chǎn)生的化學(xué)反應(yīng)的各種試劑墊被光源照射,其反射光被球面積分儀接收,球面積分儀的光電管被反射的雙波長光(包括通過濾光片的測定光和一束參考光)照射。測定每種試劑帶塊反射光的光量值與空白塊的反射光量值進(jìn)行比較,通過計算機(jī)求出反射率,換算成濃度值,便可由分析儀打印出半定量的數(shù)值。三、尿液分析儀測試原理
各波長的比例由檢測項目決定在幾十秒鐘(根據(jù)不同分析儀自己的設(shè)定時間而定)的反應(yīng)時間內(nèi),各個項目(空白塊不參加反應(yīng),只作標(biāo)準(zhǔn)參考用)的試劑帶塊由于化學(xué)反應(yīng)而呈現(xiàn)顏色變化,并吸收照射的單色光。三、尿液分析儀測試原理各波長的選擇由檢測項目決定,球面積分儀上有三個光電管和特定波長濾光片:參比光為深紅色濾片(λ=720nm)。在測量光電管中:一個加有綠色濾光片(550nm)對亞硝酸鹽、酮體、膽紅素、尿膽原作測量。另一個紅色濾光片(620nm),對葡萄糖、蛋白質(zhì)、PH和隱血作測量。三、尿液分析儀測試原理儀器的檢測過程為:光源燈發(fā)出的光通過積分球照射在試劑帶的膜塊上。試劑帶膜塊顏色的深淺對光的吸收和反射是不一樣的,顏色越深,吸收的光量值越大,反射光量值越小,則反射率越小。儀器按下列公式自動計算出反射率,然后與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較,自動打印出各成分的相應(yīng)結(jié)果。三、尿液分析儀測試原理計算原理R(%):反射率Tm:試劑墊對測定波長的反射強(qiáng)度Ts:試劑墊對參考波長的反射強(qiáng)度Cs:標(biāo)準(zhǔn)墊對參考波長的反射強(qiáng)度Cm:標(biāo)準(zhǔn)墊對測定波長的反射強(qiáng)度四、尿液分析儀結(jié)構(gòu)
尿液分析儀由:機(jī)械系統(tǒng)、光學(xué)系統(tǒng)、電路系統(tǒng)三部分組成。四、尿液分析儀結(jié)構(gòu)(一)機(jī)械系統(tǒng)
主要功能是將待測的試劑帶傳送到位。光電管球面積分儀濾光片光源
(二)光電系統(tǒng)結(jié)構(gòu)圖四、尿液分析儀結(jié)構(gòu)四、尿液分析儀結(jié)構(gòu)(三)電路系統(tǒng)其作用是將光電檢測器的信號進(jìn)行放大和運(yùn)算處理。五、安裝、調(diào)校、維護(hù)
安裝條件:遠(yuǎn)離電磁干擾源、電源、防止陽光照射、防潮、通風(fēng)好、溫度10~30℃,濕度<80%;
調(diào)校:新儀器安裝后,或每次大維修之后,必須對儀器技術(shù)性能進(jìn)行測試,評價,這對保證檢驗質(zhì)量起到重要的作用。五、安裝、調(diào)校、維護(hù)日常應(yīng)用和維護(hù)
尿液分析儀的日常應(yīng)用和維護(hù):每臺尿液分析儀應(yīng)建立操作程序,并嚴(yán)格按操作規(guī)程進(jìn)行操作;專人負(fù)責(zé)管理,健全專用的儀器登記本,對每天儀器操作的情況,出現(xiàn)的問題,以及維護(hù),維修的情況予以登記;
五、安裝、調(diào)校、維護(hù)每天開機(jī)測定前,要對儀器進(jìn)行全面檢查,測定完畢要對儀器進(jìn)行全面清理保養(yǎng);做到每日、每周、每月的維護(hù).五、安裝、調(diào)校、維護(hù)
一般評價程序
1.首先應(yīng)該對尿液分析儀進(jìn)行校正,校正的目的是讓儀器進(jìn)入廠商規(guī)定的狀態(tài)。其操作是用標(biāo)準(zhǔn)的校正條對儀器進(jìn)行測定儀器的光路,狀態(tài)進(jìn)行校正,以達(dá)到最佳狀態(tài),有些廠家的校正條是一次性的,不能重復(fù)使用,以免影響試驗結(jié)果,有些廠家的校正條可重復(fù)使用,尿液分析儀只有在校正通過時才能進(jìn)行實(shí)驗,否則要停機(jī)。五、安裝、調(diào)校、維護(hù)2.應(yīng)該對尿液分析儀及試紙條的準(zhǔn)確度進(jìn)行評價。準(zhǔn)確度指的是測定值與真值的接近程度,由于尿液分析儀是一個半定量的儀器,因此它的準(zhǔn)確度的評價只有根據(jù)儀器制造商規(guī)定的測定范圍配制成一定濃度的標(biāo)準(zhǔn)物,在儀器上嚴(yán)格按說明書操作,每份標(biāo)準(zhǔn)物測定3次,觀察測定結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)物濃度相符合程度。五、安裝、調(diào)校、維護(hù)3.用傳統(tǒng)的方法與尿液分析儀測定作對比分析,對尿液分析儀的敏感性和特異性進(jìn)行評價。4.了解該儀器對每項測試指標(biāo)的測試范圍,并建立該儀器的參考范圍。六、干化學(xué)與鏡檢中華醫(yī)學(xué)會經(jīng)過三次專家研討會,尋求一個簡單、快速的篩選方法,對干化學(xué)尿液分析提供了篩選的試驗手段。在干化學(xué)尿試帶質(zhì)量合格,尿液分析儀運(yùn)轉(zhuǎn)正常情況下,試驗中滿足以下條件時,可免去鏡檢:白細(xì)胞、紅細(xì)胞、蛋白質(zhì)及亞硝酸鹽為陰性。六、干化學(xué)與鏡檢另外,對腎臟疾病的患者不適合干化學(xué)檢查篩選法,對以鏡檢結(jié)果作為診斷依據(jù)和觀察療效指標(biāo)時,不宜作篩選,如:結(jié)石、結(jié)晶、寄生蟲的檢查。
七、干化學(xué)尿液分析技術(shù)操作的局限性干化學(xué)尿液分析技術(shù)操作簡便,檢測項目多,診斷過篩面大,儀器價廉等諸多優(yōu)點(diǎn),很快在臨床推廣應(yīng)用,但這類儀器檢測的結(jié)果受許多因素的影響,務(wù)必嚴(yán)格控制才能獲得好的結(jié)果。八、影響干化學(xué)檢測結(jié)果的因素影響檢測結(jié)果的因素大致來自如下幾方面:試紙條因素尿標(biāo)本因素操作因素:包括儀器的校驗和維護(hù),操作程序,環(huán)境因素等。第二節(jié)尿有形成分分析儀第二節(jié)尿有形成分分析儀尿有形成分檢驗方法學(xué)進(jìn)展尿有形成分分析儀分類一、尿有形成分檢驗方法學(xué)進(jìn)展尿有形成分檢驗包括有形成分計數(shù)和形態(tài)學(xué)分析兩方面的檢驗。尿液因物理性質(zhì)改變(滲透壓)引起被檢細(xì)胞形態(tài)學(xué)變異,鑒定技術(shù)較難,自動化和機(jī)械化檢驗發(fā)展很慢。但由于有血細(xì)胞自動計數(shù)儀的開發(fā)經(jīng)驗,在美國和日本已有尿有形成分自動分析儀的應(yīng)用,在我國,在較大的檢驗科室,已有了各種檔次的尿有形成分分析儀在應(yīng)用。
一、尿有形成分檢驗方法學(xué)進(jìn)展尿液化學(xué)自動分析儀的出現(xiàn),對尿液化學(xué)成分和部分有形成分的檢查提供了可靠和重要的數(shù)據(jù),但對尿液有形成分的定量計數(shù)和形態(tài)學(xué)的分析還沒有完全解決,隨著計算機(jī)的高速發(fā)展,尿有形成分自動分析儀的問世,較好的解決了顯微鏡鏡檢尿有形成分所存在的問題。一、尿有形成分檢驗方法學(xué)進(jìn)展尿有形成分檢查雖然已有一個多世紀(jì)的歷史,但發(fā)展遠(yuǎn)不如尿化學(xué)成分的檢查迅速,其主要是人工進(jìn)行尿有形成分檢查存在以下問題:檢查方法不統(tǒng)一,也無統(tǒng)一的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn);檢查所需的時間長;檢查重復(fù)性差,檢查人員之間的個體差異大,各檢查機(jī)構(gòu)之間的差異也大。全自動尿有形成分分析儀是目前比較滿意的檢測尿有形成分的分析儀。手工制片鏡檢尿有形成分定量分析板的應(yīng)用尿有形成分自動化分析儀一、尿有形成分檢驗方法學(xué)進(jìn)展一、尿有形成分檢驗方法學(xué)進(jìn)展一、尿有形成分檢驗方法學(xué)進(jìn)展(1)開展利用干化學(xué)法檢測尿中WBC、RBC,進(jìn)行顯微鏡檢查的篩選。(2)利用圖象攝影系統(tǒng)攝制尿有形成分的靜止圖象,對尿有形成分進(jìn)行自動分類、計算及儲存等,形成尿有形成分自動分析系統(tǒng)。(3)利用流式細(xì)胞術(shù)結(jié)合電阻抗原理檢測尿中成分進(jìn)行定量分析的全自動尿有形成分分析儀。一、尿有形成分檢驗方法學(xué)進(jìn)展(4)除利用普通顯微鏡外,還可采用干涉、相差、偏振光、掃描及透射電鏡等觀察。(5)現(xiàn)已采用尿沉渣活體染色及細(xì)胞化學(xué)等多染色法來識別各種細(xì)胞和管型。(6)近年來應(yīng)用單克隆抗體技術(shù)識別各種細(xì)胞成分。一、尿有形成分檢驗方法學(xué)進(jìn)展一、尿有形成分檢驗方法學(xué)進(jìn)展1988年美國國際遙控影像系統(tǒng)有限公司生產(chǎn)了世界上第一臺“YELLOWIRIS”高速攝影機(jī)式的尿有形成分自動分析儀,簡稱Y-1尿自動分析儀,這種儀器是將標(biāo)本的粒子影像展示在計算機(jī)的屏幕上,由檢驗人員加以鑒別。一、尿有形成分檢驗方法學(xué)進(jìn)展1990年日本東亞醫(yī)療電子有限公司與美國國際遙控影像系統(tǒng)有限公司合作,對原有的尿有形成分分析儀進(jìn)行改進(jìn),生產(chǎn)出影像流式細(xì)胞儀式的UA-1000型和UA-2000型尿有形成分自動分析儀。
一、尿有形成分檢驗方法學(xué)進(jìn)展1995年日本東亞醫(yī)療電子有限公司在原來影象流式細(xì)胞儀式的尿有形成分分析儀的基礎(chǔ)上,將流式細(xì)胞和電阻抗技術(shù)結(jié)合起來,生產(chǎn)出新一代的UF-100(fullyautomatedurinecellanalyzer)型尿有形成分自動分析儀。這種儀器具有快速、操作方便,同時給出尿有形成分的數(shù)量結(jié)果和RBC、WBC散射光分布直方圖,便于臨床及科研工作。二、尿有形成分分析儀分類(一)流式細(xì)胞術(shù)尿有形成分分析儀(二)影像式尿有形成分分析儀(三)尿有形成分分析工作站(四)尿有形成分分析儀與顯微鏡檢查二、尿有形成分分析儀分類(一)流式細(xì)胞術(shù)尿有形成分分析儀分析原理儀器結(jié)構(gòu)尿有形成分細(xì)胞資料的綜合分析尿有形成分分析儀檢測項目尿有形成分自動分析儀的評價紅細(xì)胞、白細(xì)胞的參考值儀器的安裝、使用及保養(yǎng)二、尿有形成分分析儀分類二、尿有形成分分析儀分類分析原理1.稀釋、染色的標(biāo)本通過鞘液池2.氬激光照射3.測定熒光、散射光和電阻抗二、尿有形成分分析儀分類UF-100分析原理稀釋、染色的標(biāo)本通過鞘液池當(dāng)一個尿液標(biāo)本被稀釋液稀釋和染液染色后,它靠液壓作用通過鞘液流動池,當(dāng)反應(yīng)樣品從噴嘴出口進(jìn)入鞘液流動室時,它被一種無粒子顆粒的鞘液包圍,使每個細(xì)胞以單個縱列的形式通過流動池的中心(豎直)軸線。二、尿有形成分分析儀分類氬激光照射在這里每個尿液細(xì)胞將被氬激光光束照射。每個細(xì)胞有不同程度的:熒光強(qiáng)度(FL,fluorescentlight)是從染色尿液細(xì)胞發(fā)出的熒光強(qiáng)度,主要反映細(xì)胞的定量特性,如細(xì)胞膜、核膜、線粒體、核酸)、散射光強(qiáng)度(這種儀器測定的是前向角散射光Fsc,forwardscatterelight,它成比例的反映細(xì)胞的大?。╇娮杩沟拇笮。娮杩闺娦盘栔饕c細(xì)胞的體積成正比)。二、尿有形成分分析儀分類測定熒光、散射光和電阻抗儀器正是將這種熒光、散射光和電阻抗的信號轉(zhuǎn)變成電信號,分析這些電信號,才能使得每個尿液標(biāo)本產(chǎn)生出直方圖和散射圖,然后分析這些圖形,即可區(qū)別出每個細(xì)胞并得出每個細(xì)胞的形態(tài)。二、尿有形成分分析儀分類儀器結(jié)構(gòu)流式細(xì)胞術(shù)尿有形成分分析儀包括:檢測系統(tǒng)液流系統(tǒng)電路系統(tǒng)自動進(jìn)樣系統(tǒng)二、尿有形成分分析儀分類檢測系統(tǒng):
1.光學(xué)系統(tǒng)由氬激光(波長488nm)、激光反射系統(tǒng)、流動池、前向光采集、前向光檢測器組成。
2.電阻抗檢測系統(tǒng)
二、尿有形成分分析儀分類激光作為光源用于流式細(xì)胞分析系統(tǒng),它被雙色反射鏡反射,然后被聚光器收集形成射束點(diǎn),而聚集于流動池的中央。樣品流到流動池,每個細(xì)胞被激光光束照射,產(chǎn)生前向散射光和前向熒光的光信號。散射光信號被光電二極管轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?,被輸送到微處理器。二、尿有形成分分析儀分類根據(jù)光散射定律,在分析尿標(biāo)本時,由于細(xì)胞的種類不同和分布不均,光的反射和散射主要取決于細(xì)胞表面,因此散射光的強(qiáng)度主要取決于細(xì)胞的大小,所以儀器可以從散射光的強(qiáng)度得出測定細(xì)胞大小的資料。二、尿有形成分分析儀分類熒光通過濾光片濾過一定波長的熒光后,輸送到光電倍增管,將光信號放大再轉(zhuǎn)變成電信號,然后輸送到微處理器,得出細(xì)胞的定量特性。二、尿有形成分分析儀分類UF-100尿有形成分分析儀使用兩種熒光染料:一種為菲啶染料,主要染細(xì)胞的核酸成分(DNA),在480nm光波激發(fā)時,產(chǎn)生610nm的橙黃色光波,用于區(qū)別有核的細(xì)胞和無核的細(xì)胞(如RBC與WBC,病理管型和透明管型);二、尿有形成分分析儀分類
另一種為羧花氰染料,它穿透能力強(qiáng),與細(xì)胞質(zhì)膜(細(xì)胞膜、核膜和線粒體)的脂層成分發(fā)生反應(yīng)結(jié)合,在460nm的光波激發(fā)時產(chǎn)生505nm的綠色光波,主要用于區(qū)別細(xì)胞的大?。ㄈ缟掀ぜ?xì)胞和白細(xì)胞的區(qū)別)。二、尿有形成分分析儀分類這兩種染料具有下列特性:反應(yīng)快速:背景熒光低:從細(xì)胞發(fā)生的熒光與染料和細(xì)胞的結(jié)合程度成比例。二、尿有形成分分析儀分類電阻抗檢測系統(tǒng):●電阻抗測定系統(tǒng)包括測定細(xì)胞體積的電阻抗系統(tǒng)和測定尿液導(dǎo)電率的傳導(dǎo)系統(tǒng)。電阻抗測定的方法:與血細(xì)胞分析義的電阻抗原理相同●部分標(biāo)本含有某些結(jié)晶,影響電阻抗測定的敏感性,為了保證尿液標(biāo)本傳導(dǎo)性穩(wěn)定,可以在稀釋液中使用含EDTA鹽化合物或加熱使結(jié)晶溶解。二、尿有形成分分析儀分類液流(鞘液流動)系統(tǒng):反應(yīng)池染色標(biāo)本隨著真空作用吸入到鞘液流動池。為了使尿液細(xì)胞進(jìn)入流動池不凝固成團(tuán)。而使單細(xì)胞流通過加壓的鞘液輸送到流動池,使染色的樣品通過流動池的中央,鞘液形成一股液渦流,使尿液細(xì)胞排成單個縱隊通過鞘液中心。二、尿有形成分分析儀分類電路系統(tǒng):
從樣品細(xì)胞中得到的前向散射光很強(qiáng),不需要極敏感光檢測器,光電二極管能夠?qū)⒐庑盘栟D(zhuǎn)變成電信號。但從樣品細(xì)胞中得到的前向熒光很弱,因此需要使用極敏感的光電倍增管。這種光電倍增管能夠吸收在光電表面光子的能量,并使用金屬光電效應(yīng)發(fā)出光電子。二、尿有形成分分析儀分類
發(fā)出的光電子能夠被外加電壓促進(jìn),導(dǎo)致許多繼發(fā)電子放大。這種放大的前向熒光轉(zhuǎn)變成電信號。從樣品中得到的電阻抗信號和傳導(dǎo)性信號被感受器接受后直接放大輸送給微處理器。二、尿有形成分分析儀分類自動進(jìn)樣裝置:自動進(jìn)樣裝置主要由自動進(jìn)樣傳輸裝置、樣本混勻器、定量吸樣裝置和樣品傳輸裝置組成。二、尿有形成分分析儀分類光學(xué)分析系統(tǒng)分析原理流程圖二、尿有形成分分析儀分類二、尿有形成分分析儀分類UF-100細(xì)胞分析過程尿液有形成分的脈沖圖形二、尿有形成分分析儀分類二、尿有形成分分析儀分類尿有形成分細(xì)胞資料的綜合分析儀器通過對前向散射光的波形(強(qiáng)度和散射光的脈沖寬度)、前向熒光波形(熒光強(qiáng)度和熒光脈沖寬度)和電阻抗值的大小綜合分析,得出細(xì)胞的形態(tài)、細(xì)胞橫截面積、染色片段的長度、細(xì)胞容積等信息并繪出直方圖和散射圖。儀器通過分析每個細(xì)胞信號波形的特性來對其進(jìn)行分類。二、尿有形成分分析儀分類前向散射光信號主要反應(yīng)細(xì)胞體積的大小。前向散射光強(qiáng)度FSC反應(yīng)細(xì)胞的橫截面積;前向散射光脈沖寬度FSCW主要反應(yīng)細(xì)胞的長度;FSCW=CL+BW/VCL——細(xì)胞長度BW——激光束寬度V——流動速度二、尿有形成分分析儀分類前向熒光信號主要反應(yīng)細(xì)胞染色質(zhì)塊的大小熒光強(qiáng)度FL主要反應(yīng)細(xì)胞染色質(zhì)的強(qiáng)度;前向熒光脈沖寬度FLW反映細(xì)胞染色質(zhì)的長度。FLW可以用下列等式表示:FLW=NL+BW/VNL——細(xì)胞核長度BW——激光束寬度V——流動速度二、尿有形成分分析儀分類尿有形成分分析儀檢測項目UF-100型全自動尿有形成分分析儀采集標(biāo)本體積為9ml,自動進(jìn)樣模式所需標(biāo)本體積不少于4ml,實(shí)際吸取標(biāo)本體積為0.8ml,檢測標(biāo)本體積為9.0微升,每小時可檢測100個尿標(biāo)本,可報告以下參數(shù):二、尿有形成分分析儀分類檢測項目-紅細(xì)胞分析白細(xì)胞分析上皮細(xì)胞(EC)管型(CAST)細(xì)菌(BACT)其他的檢測導(dǎo)電率的測定二、尿有形成分分析儀分類1.紅細(xì)胞分析RBC直徑為8微米,無核和線粒體,所以RBC熒光強(qiáng)度(F1)很弱。另外,RBC在尿液標(biāo)本中大小不均,且部分溶解成小RBC碎片,或者在腎臟疾患時排出的RBC也大小不等,因此,可以看見RBC前向散射光強(qiáng)度(FSC)差異較大。一般來說,F(xiàn)1極低和FSC大小不等均為RBC。二、尿有形成分分析儀分類儀器除給出尿RBC定量(每微升的細(xì)胞數(shù)和每高倍視野的平均細(xì)胞數(shù))參數(shù)外,還可報告尿形態(tài)均一性RBC和形態(tài)非均一性RBC的百分比,非溶血性RBC的數(shù)量和百分比,平均紅細(xì)胞前向熒光強(qiáng)度、平均紅細(xì)胞前向散射光強(qiáng)度和紅細(xì)胞熒光強(qiáng)度分布寬度。二、尿有形成分分析儀分類這種分類方法主要根據(jù)RBC形態(tài)的變化,將均一性的RBC歸為非腎性血尿;非均一性的RBC歸為腎性血尿,全自動尿有形成分分析儀也具有此項功能,其規(guī)定:80%紅細(xì)胞前向散射光強(qiáng)度(Fsc)≥126ch;稱為均一性紅細(xì)胞;80%紅細(xì)胞前向散射光強(qiáng)度(Fsc)≤84ch稱為非均一性紅細(xì)胞(變異性紅細(xì)胞);介于二者之間即為混合性紅細(xì)胞。
ch(channel):為檢測到的脈沖信號強(qiáng)度及寬度二、尿有形成分分析儀分類2.白細(xì)胞分析WBC在尿液的分布直徑大約為10um,約比RBC大,因此前向散射光強(qiáng)度也比RBC稍大一些,但WBC含有核而RBC無核,因此它有高強(qiáng)度的前向熒光,就能將RBC和WBC區(qū)別開來。當(dāng)WBC存活時,會呈現(xiàn)前向散射光強(qiáng)和前向熒光弱;當(dāng)WBC損害或死亡時,呈現(xiàn)前向散射光弱和前向熒光強(qiáng)。二、尿有形成分分析儀分類利用尿液WBC激光散射光強(qiáng)度和熒光強(qiáng)度的技術(shù)識別WBC高活性和低活性的不同程度,來進(jìn)一步對急性感染和慢性感染,以及恢復(fù)期做出判斷。急性泌尿系感染W(wǎng)BC>60/ul,且白細(xì)胞前向散射光強(qiáng)度強(qiáng)和熒光強(qiáng)度弱;慢性泌尿系感染W(wǎng)BC>10/ul,且白細(xì)胞前向散射光強(qiáng)度弱和熒光強(qiáng)度強(qiáng)。二、尿有形成分分析儀分類3.上皮細(xì)胞(EC)由泌尿道的上皮細(xì)胞脫落而來,種類多,大小不等。上皮細(xì)胞胞體大,散射光強(qiáng),都含有細(xì)胞核、線粒體等,熒光也比較強(qiáng)。儀器除給出上皮細(xì)胞數(shù)量參數(shù)外,還標(biāo)出腎小管上皮細(xì)胞(SRC),并在第二個屏幕上顯示出每微升細(xì)胞數(shù)。二、尿有形成分分析儀分類小圓上皮細(xì)胞是指細(xì)胞大小與白細(xì)胞相似或略大,形態(tài)較圓的上皮細(xì)胞,它包括腎小管上皮細(xì)胞、中層和底層移行上皮細(xì)胞。由于這些細(xì)胞散射光、熒光及電阻的信號變化大,儀器不能完全區(qū)分出哪一類細(xì)胞,因此當(dāng)這類細(xì)胞的細(xì)胞數(shù)儀器標(biāo)出未到達(dá)一定濃度時,還需通過離心染色鏡檢得出準(zhǔn)確的結(jié)果。
二、尿有形成分分析儀分類4.管型(CAST)由于管型種類較多,且形態(tài)各不相同,儀器不能完全區(qū)分這些管型的性質(zhì);只能檢測出透明管型和標(biāo)出有病理管型的存在。二、尿有形成分分析儀分類透明管型由于不含有內(nèi)含物有極高的前向散射光脈沖寬度和微弱的熒光脈沖寬度出現(xiàn)在第二個散射圖的中下區(qū)域;而病理性管型,由于它們的體積與透明管型相等,但含有內(nèi)含物(如線粒體、細(xì)胞核等);所以有極高的前向散射光脈沖寬度和熒光脈沖寬度,出現(xiàn)在第二個散射圖的中上區(qū)域。二、尿有形成分分析儀分類借助于熒光脈沖寬度,即可區(qū)分出透明管型和病理管型,當(dāng)儀器標(biāo)明有病理性管型時,由于儀器只能起過篩作用,不能完全判定就是病理管型,只有通過離心鏡檢才能確認(rèn)是哪一類管型。二、尿有形成分分析儀分類5.細(xì)菌(BACT)細(xì)菌由于體積小并含有DNA和RNA,所以前向散射光強(qiáng)度要比紅、白細(xì)胞弱,但熒光強(qiáng)度要比紅細(xì)胞強(qiáng),又比白細(xì)胞弱。因此,細(xì)菌分布在第1個散射圖紅細(xì)胞和白細(xì)胞之間的下方區(qū)域。此儀器較好地解決了上述缺陷,能夠檢測出所有的細(xì)菌。細(xì)菌檢查臨床意義主要用于泌尿系細(xì)菌感染的診斷。二、尿有形成分分析儀分類6.其他的檢測全自動尿有形成分分析儀除檢測上述五項參數(shù)外,還能標(biāo)記出酵母細(xì)胞(YLC)精子細(xì)胞(SPERM)結(jié)晶(X-TAL)二、尿有形成分分析儀分類酵母細(xì)胞(YLC)精子細(xì)胞(SPERM)類酵母細(xì)胞和精子細(xì)胞由于含有RNA和DNA,熒光強(qiáng)度很高,由于類酵母細(xì)胞的前向散射光脈沖寬度小于精子細(xì)胞的,因此,根椐前向散射光脈沖寬度,可將類酵母細(xì)胞和精子細(xì)胞區(qū)別開來。但在低濃度時,精子細(xì)胞與酵母細(xì)胞區(qū)分有一定的難度;在高濃度時,部分酵母細(xì)胞對紅細(xì)胞計數(shù)有交叉。二、尿有形成分分析儀分類
結(jié)晶(X-TAL)結(jié)晶出現(xiàn)在散射圖紅細(xì)胞區(qū)域,由于結(jié)晶的多樣性,所以其散射光強(qiáng)度分布很寬,如草酸鹽在散射圖上分布接近FSC軸,尿酸鹽依靠自己的熒光分布區(qū)域和紅細(xì)胞重復(fù)在一起,因結(jié)晶的中心分布不穩(wěn)定,所以它和紅細(xì)胞能夠被區(qū)分開。二、尿有形成分分析儀分類當(dāng)尿酸鹽濃度增多時,部分結(jié)晶會影響紅細(xì)胞計數(shù)。因此,當(dāng)儀器對酵母細(xì)胞子、精子細(xì)胞和結(jié)晶有標(biāo)示時,都應(yīng)離心鏡檢,才能真正的區(qū)分。二、尿有形成分分析儀分類二、尿有形成分分析儀分類二、尿有形成分分析儀分類7.導(dǎo)電率測定概述導(dǎo)電率與滲透量有密切的關(guān)系:導(dǎo)電率代表溶液中溶質(zhì)的質(zhì)點(diǎn)電荷,與質(zhì)點(diǎn)的種類、大小無關(guān);滲透量代表溶液中溶質(zhì)的質(zhì)點(diǎn)(滲透活性粒子)數(shù)量,而與質(zhì)點(diǎn)的種類、大小及所帶的電荷無關(guān)。所以導(dǎo)電率與滲透量又有差異,如溶液中含有葡萄糖時,由于葡萄糖是無機(jī)物,它沒有電荷,與導(dǎo)電無關(guān),但與滲量有關(guān)。二、尿有形成分分析儀分類導(dǎo)電率測定臨床意義對糖尿病、尿崩癥的鑒別診斷、治療都具有十分重要的意義;通過對尿?qū)щ娐实母叩捅O(jiān)控,可以預(yù)防某些結(jié)石疾病的發(fā)生,有利于結(jié)石疾病的治療。
二、尿有形成分分析儀分類尿有形成分分析儀檢測評價全自動尿有形成分分析儀的優(yōu)點(diǎn)嶄新的流式細(xì)胞學(xué)技術(shù)應(yīng)用于尿檢獨(dú)特的有形成分鑒別系統(tǒng)UF-100結(jié)合流式細(xì)胞學(xué)技術(shù)與電阻抗測定對尿成份進(jìn)行直接鑒別及計數(shù),將染色的有形成份加壓使其通過鞘流室的小孔。用激光光束照射有形成份,光便產(chǎn)生散射,而尿液有形成份則發(fā)出熒光,然后對散射光、熒光及電阻抗的變化進(jìn)行測定和分析,使用這一已經(jīng)證實(shí)的流式細(xì)胞新技術(shù),是自動化尿檢獲得了重大突破,即實(shí)現(xiàn)真正的無人檢驗!二、尿有形成分分析儀分類1.嶄新的流式細(xì)胞學(xué)技術(shù)應(yīng)用于尿檢將從每個粒子上所產(chǎn)生的散射光,熒光及電阻抗變化轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘栠M(jìn)行分析,并將粒子分布制成簡明易懂的散射圖和直方圖。利用先進(jìn)的自適應(yīng)凝聚體分析系統(tǒng)(A.C.A.S)確定有形成份的類型,從而以自動分析代替了主觀鑒別。二、尿有形成分分析儀分類2.獨(dú)特的有形成份鑒別系統(tǒng)二、尿有形成分分析儀分類3.全自動尿有形成分分析儀的優(yōu)點(diǎn)1)可對血尿中紅細(xì)胞進(jìn)行定量計數(shù),同時對其形態(tài)進(jìn)行鑒別,有助于臨床分析泌尿系統(tǒng)出血部位。2)對尿中白細(xì)胞也可進(jìn)行定量計數(shù),可同NIT及細(xì)菌數(shù)結(jié)合分析,有助于尿路感染患者的診斷和療效監(jiān)控。二、尿有形成分分析儀分類3)儀器提供尿滲透壓的信息,對尿液狀態(tài)有更多了解。4)和尿化學(xué)分析一起使用,將更有利于臨床。5)可滿足大批尿液常規(guī)檢查單位的需要,減輕勞動強(qiáng)度。 二、尿有形成分分析儀分類紅細(xì)胞、白細(xì)胞參考值由于尿液常規(guī)有形成分的檢查一般都使用顯微鏡檢查,該法操作要求高、費(fèi)時、重復(fù)性差,結(jié)果不宜臨床動態(tài)觀察。干化學(xué)尿
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