第12章-微生物的進化、系統(tǒng)發(fā)育和分類鑒定

第12章

微生物的進化、系統(tǒng)發(fā)育和分類鑒定目的要求：通過本章學習，要求學生掌握：1、進化指征的選擇2、微生物分類學的基本知識

3、微生物的分類鑒定方法重點：

微生物的分類依據(jù)及方法。難點：代表原核微生物的拉丁學名和主要特點。

第一節(jié)微生物的進化和系統(tǒng)發(fā)育

微生物分類是按微生物的親緣關系和相似程度把微生物歸入各分類單元或分類群(taxon)，以得到一個反映微生物進化的自然分類系統(tǒng)、可供鑒定用的檢索表以及可給出符合邏輯的名稱的命名系統(tǒng)。所以微生物分類的具體任務就是分類（classification）、鑒定（identification）與命名（nomenclature）。

一、進化的測量指征1.合適的進化指征應滿足的條件存在的普遍性序列的同源性序列的線性序列的保守性蛋白質、RNA和DNA序列進化變化的顯著特點是進化速率相對恒定，也就是說，分子序列進化的改變量(氨基酸或核苷酸替換數(shù)或替換百分率)與分子進化的時間成正比。大量的資料表明：功能重要的大分子、或者大分子中功能重要的區(qū)域，比功能不重要的分子或分子區(qū)域進化變化速度低。16SrRNA被普遍公認為是一把好的譜系分析的“分子尺”或“分子計時器”：1）rRNA具有重要且恒定的生理功能；2）在16SrRNA分子中，既含有高度保守的序列區(qū)域，又有中度保守和高度變化的序列區(qū)域，因而它適用于進化距離不同的各類生物親緣關系的研究；3）16SrRNA分子量大小適中(1540nt)，便于序列分析；4）rRNA在細胞中含量大(約占細胞中RNA的90%)，也易于提?。?）16SrRNA普遍存在于真核生物和原核生物中(真核生物中其同源分子是18SrRNA)。因此它可以作為測量各類生物進化的工具。2.rRNA作為進化的指征缺陷：rRNA普遍高的保守性使得其在相近種、型分類鑒定時分辨力較差；操作相對較復雜。3.rRNA的順序和進化培養(yǎng)微生物提取總的DNA作為模板rDNA序列測定分析比較微生物之間的系統(tǒng)發(fā)育關系PCR反應擴增16SrDNA片段4.基于rRNA的系統(tǒng)發(fā)育樹系統(tǒng)發(fā)育樹（phylogenetictree）：在研究生物進化和系統(tǒng)分類中，用以概括各種（類）生物之間親緣關系的樹狀分枝的圖形。分為有根樹和無根樹兩種。一般系統(tǒng)發(fā)育樹伍斯等根據(jù)某些代表生物16SrRNA(或18SrRNA)序列比較，首次提出了一個涵蓋整個生命界的系統(tǒng)樹。這是一顆有根樹，rRNA序列分析表明，它最初先分成兩支：一支發(fā)展成為今天的細菌(真細菌)；另一支是古生菌--真核生物分支，進化過程中進一步分叉分別發(fā)展成古生菌和真核生物。Eubacteria（真細菌界）Archaebacteria

（古細菌界）

Eukarya

（真核生物界）CarlWoese利用16SrRNA建立分子進化樹進化樹意義：將生物分為三界（細菌、古生菌、真核生物）隨著資料的進一步積累，系統(tǒng)樹還會做進一步修改生物間存在廣泛的水平的或橫向的基因交換基因的垂直傳遞不是影響生物進化的唯一過程CarlWoose的rRNA進化樹完美無缺？界（Kingodm）門(phylum)

(亞門)

綱(Class)

(亞綱)目(order)(亞目)科(family)(亞科)族(group)(亞族)屬(genus)(亞屬)種(species)微生物分類的基本單位是“種”第二節(jié)微生物的分類單元和命名一、生物的分類單元種：分類特征高度相似、而又與同屬內(nèi)的其它種存在明顯差異的菌株群。微生物的種具有如下特征:1.形態(tài)、生理特征相同。2.有共同的起源。3.是分類的基本單位，也是進化的單位。4.是繁殖的單位，同種才能產(chǎn)生后代，不同的種不能產(chǎn)生后代。5.種有遺傳的穩(wěn)定性，同時也存在變異性。6.目前，DNA同源性在70%以上，16srRNA同源性達97%以上的菌株定位一個種1、亞種（subspecies，subsp，ssp．）是種的進一步細分的單元，是正式分類單元中最低的分類等級。一般是指菌種在某一個特征上與模式種有明顯而穩(wěn)定的差異，但又不足以區(qū)分為新種。2、型（type）

是同一細菌種內(nèi)顯示很小生物化學與生物學差異的菌株，常用于細菌（尤其是致病菌）中緊密相關菌株的區(qū)分。

化學型(chemovar):產(chǎn)生某種化合物或其產(chǎn)量異常。致病型(pathovar):對一個或多個寄主的致病反應。噬菌體型(phayovar):對噬菌體的反應。血清型(serovar):抗原特性。

種以下的分類術語：4、菌株（strain）從自然界中分離得到的任何一種微生物的純培養(yǎng)物都可以稱為微生物的一個菌株；用實驗方法（誘變等）所獲得的某一菌株的變異型，也可以稱為一個新的菌株，以便與原來的菌株相區(qū)別。3、群（population)：在自然界中有些微生物的種類其特征介于兩個種之間,彼此不易嚴格區(qū)分,于是我們就把這兩個種和介于它們中間的一些微生物統(tǒng)稱為一個“群”。8、克隆:是從單個親本細胞得來的細胞群體。

6、培養(yǎng)物：指一定時間一定空間內(nèi)微生物的細胞群或生長物。7、純培養(yǎng)物：某一培養(yǎng)物是由單一微生物細胞繁殖產(chǎn)生的，就稱為該微生物的純培養(yǎng)物。5、標準菌株：又稱模式菌株，通常是人們最先發(fā)現(xiàn)，并進行過描述具有典型特征的菌株。1新種的命名不應與已發(fā)表的真菌，藻類、原生動物同名。2.種名要用拉丁文,用雙名法表示，新種要有典型菌株，新屬要有典型種，并要同時發(fā)表菌種的保藏號。3.新種(屬)要在“國際系統(tǒng)分類細菌學雜志”(IJSB)上發(fā)表。4.菌名的更改要得到仲裁委員會同意，并發(fā)表在IJSB上才能有效。

國際細菌命名法規(guī)

：二、微生物的命名雙名法規(guī)定:一個生物的種名,由“屬名+種名”構成，用斜體表示。原核微生物的學名，除了“屬名+種名”外，還要在學名后面用正體寫出最先定名的人名和時間(年代)。

StaphylococcusaureusRosenbach1884如果發(fā)現(xiàn)了一個原核生物，通過初步研究只知屬于哪一個屬，不知是何種時可用下列方式表示：屬名+sp.(單數(shù))或spp(復數(shù))。

“雙名法”種名用來描述顏色、形狀、來源或科學家的名字。種名第一個字母小寫。如：Escherichiacoli屬名用來描述主要特征、構造或者科學家的名字。屬名第一個字母要大寫。新名稱的發(fā)表Gilvimarinuschinensis

gen.nov.,sp.nov.

中國黃海菌

Wenxiniamarinagen.nov.,sp.nov以中國農(nóng)業(yè)大學陳文新院士名字命名的新屬Corynebacteriummarinumsp.nov.

海洋棒狀桿菌第三節(jié)微生物在自然界的地位生物的界級分類學說：是在認識發(fā)展過程中存在的對生物分類的不同階段的不同觀點。如：二界系統(tǒng)、三界系統(tǒng)、四界系統(tǒng)、五界系統(tǒng)、六界系統(tǒng)和三原界系統(tǒng)。陰影部分為微生物五界系統(tǒng)真菌植物動物原生生物原核生物惠特克(Whittaker，1969)在前人分類研究的基礎上提出了生物的五界系統(tǒng)。三原界系統(tǒng)Woese（1977）對16SrRNA核苷酸順序的同源性進行測定后，1978年由R．H．Whittaker和L．Margulis提出了一個嶄新的三原界（Urkingdom）學說。

所有生物存在一個共同祖先，由它分三條進化路線，就形成了三個原界：古細菌原界（Archaebacter）、真細菌原界、真核生物原界。該系統(tǒng)樹表明古生菌和真核生物屬“姊妹群”，它們之間的關系比它們與真細菌之間的關系更密切。三原界學說還吸收了關于真核生物是起源于原核細胞間的內(nèi)共生即“內(nèi)共生學說”的精髓，并使其內(nèi)容更加完善了。系統(tǒng)地提出內(nèi)共生學說者主要是Margulis。她在《真核細胞的起源》（1970）一書中，曾論述了真核細胞進化中的線粒體、葉綠體和鞭毛的共生起源。

古生菌真核生物真細菌三原界系統(tǒng)細菌的分類和伯杰氏手冊原核生物分類系統(tǒng)綱要——伯杰氏系統(tǒng)細菌學手冊真菌界分類系統(tǒng)很多，各國采用不同的系統(tǒng)，比較混亂。近年來為較多人接受的是Ainsworth的綱要。

關于細菌的分類系統(tǒng)，世界比較權威的細菌分類系統(tǒng)有三個：①、前蘇聯(lián)克拉西尼柯夫系統(tǒng)②、法國的普雷沃系統(tǒng)③、美國的伯杰氏系統(tǒng)一、細菌的分類系統(tǒng)《伯杰氏鑒定細菌學手冊》美國賓夕法尼亞大學的細菌學教授伯杰(D.Bergey)(1860-1937)1957年第七版后，由于越來越廣泛地吸收了國際上細菌分類學家參加編寫(如1974年第八版，撰稿人多達130多位，涉及15個國家；現(xiàn)行版本撰稿人多達300多人，涉及近20個國家)，所以它的近代版本反映了出版年代細菌分類學的最新成果，因而逐漸確立了在國際上對細菌進行全面分類的權威地位?！恫苁舷到y(tǒng)細菌學手冊》(Bergey’sManualofSystematicBacteriology)伯杰氏手冊是目前進行細菌分類、鑒定的最重要依據(jù)，其特點是描述非常詳細，包括對細菌各個屬種的特征及進行鑒定所需做的實驗的具體方法。（20世紀80年代末期）《伯杰氏鑒定細菌學手冊》(Bergey’sManualofDeterminativeBacteriology)1、《伯杰氏系統(tǒng)細菌學手冊》第一版（1984－1989）的分類《系統(tǒng)細菌學手冊》第一版增加了一些核酸雜交、16SrRNA寡核苷酸序列等系統(tǒng)發(fā)育方面的資料。但總體上，細菌系統(tǒng)發(fā)育資料較零碎，未能按照界、門、綱、目、科、屬、種系統(tǒng)分類體系進行安排，而是從實用需要出發(fā)，主要根據(jù)表型特征將整個原核生物分為33組，以4卷進行安排。

《伯杰氏細菌鑒定手冊(第九版)》將原核微生物分為35群，歸納為四大類(或四個門)：第一類，具細胞壁的革蘭氏陰性真細菌；第二類，具細胞壁的革蘭氏陽性真細菌；第三類，無細胞壁的真細菌；第四類，古細菌。2、《伯杰氏鑒定細菌學手冊》(第九版)（1994）的分類《伯杰氏系統(tǒng)細菌學手冊》第二版將原核生物分為古細菌和真細菌2個界，下設25門，39綱，89目，207科，包括852屬，5000余種，分為五卷本出版。2、《伯杰氏系統(tǒng)細菌學手冊》第二版（2001）第一卷，古菌、藍細菌、綠色光合細菌和最先分化的屬第二卷，變形細菌第三卷，低G＋C含量的革蘭氏陽性細菌第四卷，高G＋C含量的革蘭氏陽性細菌第五卷，浮霉狀菌、螺旋體、絲桿菌、擬桿菌和梭桿菌Ainsworth系統(tǒng)真菌界黏菌門真菌門鞭毛菌亞門接合菌亞門子囊菌亞門擔子菌亞門半知菌亞門二、真菌的分類系統(tǒng)安斯沃思(Ainsworth,1973)的分類系統(tǒng)：

真菌界的門和亞門分類檢索表1有原生質團或假原生質團………………粘菌門Mycomycota

1無原生質團或假原生質團，同化階段為典型的菌絲體

………真菌門Eumycota

2有能動細胞(游動孢子或游動配子)，有性階段產(chǎn)生典型的卵孢子…鞭毛菌亞門Mastigomycotina

2無能動細胞

3有有性階段

4有性階段產(chǎn)生接合孢子……接合菌亞門Zygomycotina

4有性階段產(chǎn)生子囊孢子……子囊菌亞門Ascomycotina

4有性階段產(chǎn)生擔子孢子……擔子菌亞門Basidiomycotina

3無有性階段……半知菌亞門Deuteromycotina

Ainsworth系統(tǒng)各主要類群的特征類群是否有隔膜無性孢子形成有性孢子形成低等真菌鞭毛菌亞門無可運動的游動孢子合子、卵孢子接合菌亞門無非游動性的孢囊孢子接合孢子高等真菌子囊菌亞門有分生孢子子囊孢子擔子菌亞門有罕見擔孢子半知菌亞