利用人工飼料栽培蛀生性天敵的研究

利用人工飼料栽培蛀生性天敵的研究

在蚜蟲相關(guān)試驗(yàn)中，以往的試驗(yàn)過程首先培育了蚜蟲的寄主植物，然后飼養(yǎng)了蚜蟲，最后進(jìn)行了蚜蟲相關(guān)試驗(yàn)。而寄主植物的種植需要較大的空間,且在氣候不適的條件下,寄主植物生長需要依靠溫室,消耗大量人力、物力和財(cái)力。同時(shí)毒理試驗(yàn)中由于不同的寄主植物上的營養(yǎng)狀況不同,如植物自身的病理因素,亦或土壤肥力不均,均可導(dǎo)致蚜蟲的生理狀況不盡一致,影響試驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。而利用人工飼料進(jìn)行飼養(yǎng),可獲得生理狀況一致的蚜蟲,節(jié)約人力、物力和空間;以人工飼料作為介質(zhì),便于開展蚜蟲傳播病毒機(jī)制、營養(yǎng)生理、共生菌、毒理與殺蟲活性物質(zhì)生物測定等研究,對于定量評價(jià)轉(zhuǎn)基因植物表達(dá)的毒蛋白、農(nóng)藥等毒性物質(zhì)對天敵昆蟲的影響也有一定的借鑒意義。蚜蟲人工飼料的研究始于20世紀(jì)30年代,Hamilton最先嘗試通過將蚜蟲置于含有人工飼料的膜下進(jìn)行飼養(yǎng),對蚜蟲傳播病毒機(jī)制進(jìn)行研究。Bradley首次將石蠟?zāi)?parafilm)應(yīng)用于蚜蟲的人工飼料飼養(yǎng)技術(shù)中,檢測到帶病毒的蚜蟲個(gè)體,并對其口針刺入或穿過惰性基質(zhì)時(shí)病毒的損失情況進(jìn)行了研究。此后的半個(gè)多世紀(jì),眾多科研工作者都致力于蚜蟲人工飼料配方的改進(jìn),分別對氨基酸類、糖類、維生素、無機(jī)鹽和螯合劑(chelatereagent)等營養(yǎng)成分的種類和劑量進(jìn)行了研究,開發(fā)出了多種蚜蟲較理想的飼料配方;繼而利用人工飼料作為介質(zhì)來篩選殺蟲劑以及評價(jià)毒性物質(zhì)對天敵昆蟲的影響。本文從飼料配方的改進(jìn)和相關(guān)應(yīng)用兩方面進(jìn)行概述,為今后蚜蟲人工飼料配方的改進(jìn)和應(yīng)用提供借鑒。1食料中養(yǎng)分的含量與對成蟲生長的影響人工飼料必須滿足昆蟲生長發(fā)育的基本營養(yǎng)需求。一般昆蟲人工飼料包含:碳水化合物、蛋白質(zhì)和氨基酸、脂類和固醇類、維生素、無機(jī)鹽等,有的還需要添加天然營養(yǎng)物。雖然經(jīng)歷了半個(gè)多世紀(jì)的研究,人工飼料飼養(yǎng)的蚜蟲仍擺脫不了個(gè)體小、繁殖率低等弊端,導(dǎo)致這些不足的原因眾多,其中食料中營養(yǎng)物質(zhì)含量的差異是最重要的。不同的營養(yǎng)物質(zhì)在昆蟲的生長發(fā)育中起著不同的作用,如氨基酸、脂類是構(gòu)成昆蟲蟲體的重要物質(zhì),維生素、無機(jī)鹽是眾多輔酶的重要組成部分,參與昆蟲體內(nèi)的生理生化代謝活動等。飼料中營養(yǎng)物質(zhì)的種類和比例是飼料對昆蟲適合與否和營養(yǎng)價(jià)值發(fā)揮的主導(dǎo)因素,確定飼料中的營養(yǎng)成分、含量及各組分的比例顯得尤為重要。1.1沒有降低桃改后氨基酸的活性氨基酸是構(gòu)成昆蟲蟲體的重要物質(zhì),是昆蟲生長發(fā)育的物質(zhì)基礎(chǔ)。Mittler曾報(bào)道當(dāng)總氨基酸濃度低于3%時(shí),桃蚜Myzuspersicae(Sulzer)取食量隨著總氨基酸濃度的增加逐漸增加;超過3%時(shí),取食量即開始下降;總氨基酸濃度低于1%時(shí),桃蚜的取食量極低或?yàn)榱?。Dadd和Krieger利用10種必需氨基酸加半胱氨酸飼喂桃蚜,發(fā)現(xiàn)3%~4%的氨基酸濃度對桃蚜的生長最適合,濃度繼續(xù)增加則對桃蚜有害。但有報(bào)道桃蚜天然寄主韌皮汁液的總氨基酸濃度一般不會超過1%,桃蚜人工飼料中卻需要如此高的氨基酸濃度,可能的原因是:(1)人工飼料上桃蚜的取食率要比在天然寄主上的低,營養(yǎng)物質(zhì)需要較高的濃度來彌補(bǔ)取食不足的缺陷;(2)人工飼料中氨基酸的相對比例整體上是不平衡的,為了提供充足的個(gè)別氨基酸,整體上以較高的濃度可能是必須的,否則可能會使蚜蟲的生長受限。有研究表明豌豆蚜Acyrthosiphonpisum(Harris)在人工飼料上的取食率很低,人工飼料上褐飛虱Nilaparvatalugens(St?l)的取食量僅為感蟲水稻品種(TN1)上的31%,蚜蟲飼養(yǎng)的龜紋瓢蟲Propyleajaponica(Thunberg)的取食量約為人工飼料飼養(yǎng)處理的3~4倍,這些研究結(jié)果均支持了第一種解釋。為明確氨基酸在蚜蟲生長發(fā)育中的作用,在全純?nèi)斯わ暳现刑蕹匦璋被嵊^察蚜蟲生長發(fā)育情況。當(dāng)飼料中缺乏甲硫氨酸時(shí),桃蚜的取食量減少了50%,甚至在第1代即表現(xiàn)出生長停止;飼料中甲硫氨酸濃度從0mg?L-1增加到400mg·L-1,桃蚜的取食量顯著增加,繼續(xù)提高濃度,取食量沒有顯著的變化,說明甲硫氨酸濃度為400mg·L-1時(shí),已完全滿足桃蚜生長發(fā)育的需要,繼續(xù)提高濃度對桃蚜的生長無促進(jìn)作用,只會增加飼料成本。缺乏半胱氨酸時(shí),第1代也表現(xiàn)生長緩慢,但可以利用無機(jī)硫酸鹽或添加甲硫氨酸進(jìn)行補(bǔ)償,這表明半胱氨酸可能只是硫元素的供給源。缺乏半胱氨酸或組氨酸時(shí),桃蚜的取食量減少了15%~33%;缺乏其他氨基酸的處理,對取食量影響較小或幾乎沒有影響。Mittler將若蚜飼養(yǎng)在逐一剔除10種必需氨基酸的飼料上,若蟲體重均明顯下降;當(dāng)缺乏組氨酸、異亮氨酸和甲硫氨酸時(shí),若蟲體重表現(xiàn)出最明顯的下降;當(dāng)飼料中缺乏非必需氨基酸中的一種時(shí),均未對若蚜的體重產(chǎn)生影響,而缺乏天門冬氨酸、谷氨酸、天門冬酰胺和谷氨酰胺這一組混合氨基酸時(shí),極大地限制了桃蚜的生長,即使逐一剔除也有同樣的效果。不同的氨基酸在蚜蟲生長發(fā)育過程中發(fā)揮著不同的作用,缺乏不同氨基酸生長不良表現(xiàn)的時(shí)間也不盡一致,但顯而易見的是,缺乏必需氨基酸時(shí),蚜蟲的不適在短時(shí)間內(nèi)即開始顯現(xiàn)。1.2蔗糖的配合作用糖類是生物體內(nèi)能量的主要來源,對蚜蟲具有刺激取食和提供營養(yǎng)雙重作用,同時(shí)又是營養(yǎng)液滲透壓的調(diào)節(jié)劑。在糖類中,蔗糖的刺激取食作用最顯著、作用范圍最廣泛,其次是果糖和葡萄糖。不同蚜蟲種類對糖類的需求差異較大,除了自身營養(yǎng)需求的差異,有的種類可能只是依靠蔗糖的促食作用。桃蚜的人工飼料中蔗糖的最佳取食濃度為10%~20%,高于20%時(shí),桃蚜的取食量逐漸下降。棉蚜Aphisgossypii(Glover)的飼料中蔗糖最佳濃度為25%~30%,并有試驗(yàn)證實(shí)在飼料中加入20%蔗糖和10%麥芽糖,比單用蔗糖飼養(yǎng)效果要好,尤其是對后代的生長更為有利,可能是來自飼料中的不同營養(yǎng)物的互補(bǔ)作用更有利于蚜蟲的生長發(fā)育。豌豆蚜所需糖濃度為35%,麥長管蚜Macrosiphum(Sitobion)avenae(Fabricius)所需糖濃度為20%~30%,桔二叉蚜Toxopteraaurantii(BoyerdeFonscolombe)所需蔗糖濃度比其它蚜蟲要高,為55%。1.3全純?nèi)斯わ暳咸砑恿康拇_定維生素對昆蟲生長發(fā)育具有重要作用,很多維生素是生物體內(nèi)輔酶的重要組成部分,和酶一起參與昆蟲的生理、生化代謝,是昆蟲生長發(fā)育不可或缺的營養(yǎng)成分。幾乎所有昆蟲都需要從食物中獲得膽堿。肌醇是一種重要的磷脂化合物,有促進(jìn)生長發(fā)育的作用,對大多數(shù)植食性昆蟲是極其重要的。在全純?nèi)斯わ暳现兄鹨惶蕹齻€(gè)別維生素,確定人工飼料中必需的9種水溶性維生素:硫胺素、核黃素、煙酸、吡哆醇、葉酸、泛酸鈣、肌醇、膽堿和生物素。當(dāng)飼料中缺乏硫胺素、煙酸和泛酸鈣時(shí),第1代若蚜的平均體重顯著降低,若蟲的發(fā)育歷期延長;缺乏其他維生素時(shí),第1代若蚜的平均體重也顯著降低,但并未延長若蟲發(fā)育歷期;而試驗(yàn)進(jìn)行至第2代時(shí),缺乏任何1種維生素平均體重增長極其緩慢。Dadd認(rèn)為飼料中核黃素濃度為5mg·L-1時(shí)對桃蚜最合適;而Akey和Beck發(fā)現(xiàn),為了提高飼料對豌豆蚜的適合性,獲得最優(yōu)飼養(yǎng)效果,需要高濃度的核黃素(50mg·L-1),其原因可能是鐵、銅、錳等微量元素消耗了部分核黃素;Markkula和Laurema也提出由于核黃素能夠結(jié)合礦質(zhì)元素,會導(dǎo)致蚜蟲攝取微量元素的減少;在核黃素存在的情況下,可能需要適當(dāng)提高微量元素的含量。而Ehrhardt發(fā)現(xiàn)核黃素濃度為50mg·L-1時(shí)對百合溝新瘤蚜Neomyzuscircumflexus(Buckton)的生長和繁殖都有負(fù)面影響;Mittler通過試驗(yàn)證實(shí)核黃素對桃蚜是有害的,而且核黃素在氯化礦物作為金屬離子螯合劑時(shí)的危害比乙二胺四乙酸(EDTA)處理要明顯。由于不同蚜蟲的生理、生化代謝的不同,導(dǎo)致其對核黃素的需求也表現(xiàn)出較大的差異,但由于核黃素對百合溝新瘤蚜和桃蚜的生長有負(fù)面作用,在其飼料中不宜添加。無機(jī)鹽也是蚜蟲人工飼料中不可缺少的營養(yǎng)成分之一。其中以磷、鉀、鎂、鈣和鈉5種元素最為重要,如飼料中不含這些無機(jī)鹽,蚜蟲3~4d就會死亡。Dadd在研究微量元素對桃蚜生長發(fā)育的影響時(shí)發(fā)現(xiàn),缺失鐵或鋅時(shí),第1代若蟲開始顯現(xiàn)生長不良,缺失錳則在第2代開始顯現(xiàn),而對于銅的需求則在第3代得到表現(xiàn)。當(dāng)添加鐵、錳、銅和鋅4種微量元素時(shí),人工飼料明顯能夠長期滿足桃蚜生長發(fā)育的需求。添加天然的營養(yǎng)物或利用天然營養(yǎng)物來替代全純?nèi)斯わ暳现械拇_定成分,可以彌補(bǔ)全純飼料中純化學(xué)物質(zhì)的缺陷,為蚜蟲提供更加全面的營養(yǎng),增加飼料對昆蟲的適合性。酵母所含的營養(yǎng)物質(zhì)較為豐富,其中蛋白質(zhì)和核酸的含量約為50%,糖類37%~40%,脂類為2%~3%,水溶性維生素可達(dá)0.5%,而且含有B族維生素、氯化膽堿、生物素、微量元素、葉酸和肌醇等營養(yǎng)物質(zhì),是較理想的營養(yǎng)替代物,在昆蟲的人工飼料中添加較為常見。Dadd發(fā)現(xiàn)在全純?nèi)斯わ暳现屑尤?~6g·L-1的天然酵母或核苷酸,能顯著促進(jìn)桃蚜的生長發(fā)育,獲得發(fā)育整齊、生長一致的桃蚜;而Markkula和Laurema則發(fā)現(xiàn)添加20g·L-1酵母處理對蚜蟲的生長發(fā)育促進(jìn)效果最佳,成蚜平均體重達(dá)到600~800μg,而全純?nèi)斯わ暳仙巷曫B(yǎng)的桃蚜平均體重僅為500μg,提高了20%~60%。Dadd通過將煮熟和過濾的芥菜或萵苣汁液添加至飼料中,芥菜和萵苣壓榨的汁液在總飼料中的濃度分別達(dá)到2%和10%時(shí),均獲得了最優(yōu)效果;濃度繼續(xù)提高時(shí),對桃蚜的生長發(fā)育將產(chǎn)生不利影響。1.4edta的飼養(yǎng)效果為了增加昆蟲對礦質(zhì)元素的吸收和利用,尤其是微量元素,常需要添加螯合劑來螯合微量元素,避免微量元素營養(yǎng)成分的喪失,常用的螯合劑有EDTA、氯化離子、檸檬酸和抗壞血酸。Dadd通過試驗(yàn)確定了桃蚜飼料中EDTA含量的最優(yōu)水平。而對其它種類的蚜蟲、飛虱和葉蟬的調(diào)查研究表明,等量的微量元素以氯化物螯合獲得了與EDTA處理同樣的飼養(yǎng)效果,有的處理甚至為最優(yōu)。也有研究表明EDTA對蚜蟲的生長具有負(fù)面效應(yīng),可導(dǎo)致桃蚜定居和產(chǎn)仔較差、影響有翅和無翅蚜的比例、導(dǎo)致飼養(yǎng)在包含EDTA飼料上的蚜蟲代數(shù)減少等。EDTA對微量元素的吸附力較強(qiáng),螯合物較難分離,增加了昆蟲吸收礦質(zhì)元素的難度。此外,EDTA復(fù)合物被吸收后,是與昆蟲的中腸細(xì)胞發(fā)生相互作用,還是同大分子有機(jī)配體保持在細(xì)胞外,尚未得出定論?？箟难岵粌H可以延緩營養(yǎng)物質(zhì)被氧化,還可作為螯合劑與礦質(zhì)元素形成復(fù)合物?？箟难岷蜋幟仕岬姆肿恿匡@著小于EDTA,礦質(zhì)元素與這些天然的配基形成的復(fù)合物比EDTA復(fù)合物更容易進(jìn)入腸道細(xì)胞,這種復(fù)合物形式不僅有利于保持飼料中礦質(zhì)元素的穩(wěn)定,而且有利于蚜蟲對礦質(zhì)元素的消化吸收和利用。Mittler連續(xù)調(diào)查2代桃蚜的生長狀況,在無抗壞血酸的飼料上第1代3日齡的桃蚜若蟲的體重與有抗壞血酸的處理相似,但是第2代無抗壞血酸處理,即使添加檸檬酸,桃蚜的生長狀況也是極差的,說明抗壞血酸不僅僅是簡單的螯合作用,而可能與蚜蟲的某種生理功能相關(guān)。2藥物的篩選目前蚜蟲全純?nèi)斯わ暳系膽?yīng)用主要體現(xiàn)在利用人工飼料作為介質(zhì)來進(jìn)行蚜蟲的生理測定或評價(jià),并以此為基礎(chǔ)研究其營養(yǎng)生理和篩選殺蟲劑;繼而以人工飼料飼養(yǎng)的蚜蟲作為食料,評價(jià)對天敵昆蟲的適合性,乃至在蚜蟲人工飼料中添加毒性物質(zhì),評價(jià)對天敵昆蟲的潛在影響等方面。2.1不同植物生長特性的飼料對桃改后食性的影響由于蚜蟲特殊的取食方式,對其所致危害的檢測難度很大,目前尚未有便捷的檢測方法,而利用人工飼料作為介質(zhì),在人工飼料中添加顯色物質(zhì),顏色的深淺與取食量成正比,通過顏色的深淺與取食量建立關(guān)系方程,從而計(jì)算取食量,可以很好地解決這一難題;同時(shí)蚜蟲分泌的蜜露中化學(xué)物質(zhì)的含量與其取食對象之間存在著一定的相關(guān)性,通過分析人工飼料飼養(yǎng)的蚜蟲分泌的蜜露,建立與蚜蟲飼料成分的關(guān)系,利用此原理可對寄主體內(nèi)某些特定物質(zhì)的濃度進(jìn)行定量分析;通常寄主體內(nèi)存在著對蚜蟲有抗性作用的拮抗物質(zhì),通過在人工飼料中添加這些物質(zhì),判斷其對蚜蟲生長發(fā)育的利弊,可為提煉殺蟲活性物質(zhì)提供借鑒。Parry和Ford在人工飼料中添加0.1%中性紅,利用顏色的深淺來分析蚜蟲的取食量,對桃蚜的危害進(jìn)行定量分析。Merritt利用蚜蟲蜜露與取食物質(zhì)之間的關(guān)系,檢測到黑芥子硫苷酸的濃度在幼葉韌皮部中很高(>10mmol·L-1),這與先前韌皮部中化感物質(zhì)的濃度僅以低濃度存在的觀點(diǎn)相矛盾。由于桃蚜地理種群的不同,甚至寄主植物的不同,對同一飼料的取食能力表現(xiàn)也不盡相同,而且不同亞種對磷銨和中性紅的敏感性也有所不同。在人工飼料里面逐一添加24種植物次生物質(zhì),除了黑芥子硫苷酸鉀和番茄素,其他處理均使得飼料對桃蚜的適合性降低。馬鈴薯含有豐富的甾體類物質(zhì),如:α-茄堿和α-卡茄堿。在桃蚜人工飼料中添加甾體茄堿(Gas)——α-茄堿和α-卡茄堿,成蚜對高濃度處理表現(xiàn)敏感,與空白對照相比,繁殖率下降,取食率降低,死亡率增加。取食飼料的若蚜發(fā)育歷期延長,內(nèi)稟增長率降低。而低濃度處理則改善了蚜蟲的繁殖性能和對飼料的適應(yīng)性。而Sanford等則認(rèn)為茄堿是植物抗蟲特性中防御機(jī)制的組成成分,能夠抑制蚜蟲的生長繁殖。甾體茄堿類物質(zhì)對桃蚜來說是刺激取食因子還是抑制因子,尚未得出定論,有待進(jìn)一步深入研究。2.2根據(jù)人工飼料，評價(jià)毒性物質(zhì)對蚜蟲和天敵的影響2.2.1桃嗪類藥物對桃改后生長和分布的影響在評價(jià)和篩選殺蟲活性物質(zhì)對蚜蟲的影響時(shí),利用人工飼料作為介質(zhì),可以方便快捷地定量添加毒蛋白、抗生素、抗菌肽等殺蟲活性物質(zhì),為相關(guān)試驗(yàn)提供了便利。Down等通過在人工飼料中添加0.1%雪花蓮凝集素(GNA),發(fā)現(xiàn)茄粗額蚜Aulacorthumsolani(Kaltenbach)的繁殖力降低了65%,存活率降低了10%,而且若蚜的體長和體寬的增長率降低了40%,對茄粗額蚜表現(xiàn)出明顯的殺蟲活性;Couty等也通過試驗(yàn)證實(shí),茄粗額蚜取食含GNA的飼料后,蚜蟲生長量降低,死亡率大大升高。GNA對桃蚜的負(fù)面作用,表現(xiàn)在生長量顯著下降,體長和體寬都顯著小于對照。在飼料中添加多殺菌素對甘藍(lán)蚜的繁殖力和生殖力均無負(fù)面作用。而添加不同的抗生素,0.001%、0.01%的金霉素和0.01%的氯霉素顯著影響桃蚜的繁殖力,即使0.0001%的金霉素也可減少桃蚜的生長量,顯著縮短有翅蚜產(chǎn)生的時(shí)間。而扁桃酰胺、青霉素-G、硫酸鏈霉素、硫酸異樣霉素對若蟲的生長影響不大,甚至在濃度高達(dá)0.1%時(shí)影響也不明顯。Le-Feuvre等通過組織學(xué)分析發(fā)現(xiàn),添加抗菌肽indolicidin處理的桃蚜體內(nèi)出現(xiàn)少量變形的含菌細(xì)胞,而對照則含有豐富的圓形飽滿的含菌細(xì)胞;添加抗菌肽處理桃蚜死亡率顯著增加,且致死效果與劑量顯著相關(guān),說明蚜蟲體內(nèi)內(nèi)共生菌與蚜蟲的生理功能直接相關(guān),共生菌的病變或減少直接影響蚜蟲的存活和生長。在人工飼料中添加吡咯里西啶類生物堿,對不同屬昆蟲的影響也各有不同。千里光堿和千里光菲靈堿在與寄主植物相當(dāng)?shù)臐舛葧r(shí)即降低了桃蚜的存活率;野百合堿僅在最高濃度時(shí)(為正常植物2倍)才導(dǎo)致桃蚜的死亡率增加;而腎形千里光堿基本對桃蚜的存活率沒有影響。在可控的光周期和溫度條件下,利用人工飼料作為基質(zhì),添加不同濃度的環(huán)-(脯氨酸-酪氨酸)、環(huán)-(組氨酸-脯氨酸)、阿洛氨菌素和psammaplinA4種幾丁質(zhì)酶抑制劑,除了環(huán)-(脯氨酸-酪氨酸)未改變蚜蟲的族群參數(shù)外,其他幾丁質(zhì)酶抑制劑均產(chǎn)生了不同的殺蚜蟲效果;環(huán)-(組氨酸-脯氨酸)的所有劑量對蚜蟲的日繁殖量、內(nèi)稟增長率和種群倍增時(shí)間均有顯著影響。飼料中添加阿洛氨菌素降低了若蚜的存活率和日繁殖量,種群倍增時(shí)間從1d增加到1.5d;PsammaplinA在50μg·mL-1和100μg·mL-1時(shí),幾乎殺滅了所有蚜蟲。蚜蟲內(nèi)共生菌抗性物質(zhì)和幾丁質(zhì)酶抑制劑在蚜蟲存活和繁殖中起著至關(guān)重要的作用,為控制蚜蟲為害提供了新的思路,在今后殺蟲劑的開發(fā)中要給予重視。2.2.2人工飼料飼養(yǎng)的桃改蜂對不同性別的影響由于人工飼料飼養(yǎng)的蚜蟲體內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)可能與寄主植物上的有較大差異,以其作為食料必然會對天敵昆蟲產(chǎn)生影響,通過比較兩組天敵昆蟲生長發(fā)育的差異,明確利用此方法進(jìn)行天敵昆蟲擴(kuò)繁的可行性。vanEmden和Andrews基于小麥互益素在蚜繭蜂對寄主選擇性中的重要性,預(yù)測利用人工飼料飼養(yǎng)的桃蚜繁育寄生蜂是不可行的。而vanEmden和Kifle利用人工飼料飼養(yǎng)的蚜蟲繁育粗脊蚜繭蜂AphidiuscolemaniViereck,人工飼料飼養(yǎng)的蚜蟲繁育的寄生蜂雖發(fā)育歷期延長了16%,雌蜂后足脛節(jié)的長度減小了2%,但能夠順利完成生長發(fā)育,產(chǎn)卵量也與對照無顯著差異,說明利用人工飼料飼養(yǎng)的桃蚜來飼養(yǎng)寄生蜂是可行的。無論是利用天然寄主或者人工飼料飼養(yǎng)的蚜蟲繁育寄生蜂,雌蜂的產(chǎn)卵量隨著蚜蟲齡期的增加而增加;而對性別進(jìn)行比較時(shí),發(fā)現(xiàn)同等大小的蚜蟲,人工飼料飼養(yǎng)的蚜蟲產(chǎn)生的寄生蜂有更高的偏雌性,可能是雌蜂在產(chǎn)卵時(shí)的選擇性或不同性別抗逆性的差異所致。飼養(yǎng)在人工飼料上的桃蚜被粗脊蚜繭蜂寄生,羽化的寄生蜂后代對飼料、球莖甘藍(lán)、甘藍(lán)和大白菜的氣味無明顯的趨向性,但對于母本經(jīng)歷的氣味有一定的趨向性。作者采用人工飼料飼養(yǎng)的桃蚜飼喂日本通草蛉Chrysoperlanipponensis(Okamoto)[異名:中華通草蛉Chrysoperlasinica(Tjeder)],發(fā)現(xiàn)對草蛉的生長發(fā)育、繁殖以及營養(yǎng)物質(zhì)含量和消化酶活性均有不同程度的影響,雖部分齡期發(fā)育歷期有所延長、蛹重較輕、單雌產(chǎn)卵量有所降低,但整體上其作為擴(kuò)繁日本通草蛉的食料是可行的。由于昆蟲不同發(fā)育階段所需要的關(guān)鍵營養(yǎng)不同,利用人工飼料飼養(yǎng)的蚜蟲繁殖天敵昆蟲所產(chǎn)生的差異,作者認(rèn)為是人工飼料飼養(yǎng)的桃蚜與天然寄主飼養(yǎng)的桃蚜營養(yǎng)物質(zhì)含量的差異,本人的試驗(yàn)結(jié)果證實(shí)這一猜測(待發(fā)表數(shù)據(jù))。2.2.3不同濃度gna對桃雙向生殖發(fā)育的影響在分析轉(zhuǎn)基因作物表達(dá)的毒蛋白對天敵昆蟲的影響時(shí),利用傳統(tǒng)的方法:種植轉(zhuǎn)基因作物-蚜蟲-天敵昆蟲,既耗時(shí)、耗功,毒蛋白含量測定也比較繁瑣;而利用人工飼料作為介質(zhì),可簡單便捷地定量添加毒蛋白,為評價(jià)這些毒性物質(zhì)對天敵昆蟲的影響提供了便利。Couty等利用包含GNA的飼料飼養(yǎng)茄粗額蚜,繼而飼養(yǎng)苜蓿蚜小蜂Aphelinusabdominalis(Dalman),發(fā)現(xiàn)GNA對蚜小蜂并無直接的負(fù)面作用,但由于GNA處理的寄主個(gè)體大小與對照存在差異,對蚜小蜂的性比和個(gè)體大小有間接的影響;同時(shí)通過免疫蛋白印跡技術(shù)分析,蚜小蜂可以排泄出大部分?jǐn)z入的GNA。GNA可以通過營養(yǎng)轉(zhuǎn)移對寄生蜂的生長發(fā)育產(chǎn)生負(fù)面影響,而且與濃度直接相關(guān)。雖然0.02%和0.045%GNA處理的僵蚜重量和性比與對照差異不顯著,但隨著GNA濃度的提高,僵蚜形成率、成蜂羽化率和成蜂獲得率逐漸下降;0.02%GNA處理的成蜂體重顯著低于對照,0.1%GNA處理發(fā)育至僵蚜的時(shí)間顯著長于對照,并且無寄生蜂發(fā)育至成蟲。在桃蚜人工飼料中添加不同濃度的GNA,Down等發(fā)現(xiàn)對二星瓢蟲Adaliabipunctata(L.)成蟲壽命無不利影響,卻有改善其繁殖力的趨勢,產(chǎn)卵量增加到對照的70%,卵孵化率也明顯提高,說明GNA對二星瓢蟲無害,甚至有改善其生長和繁殖的作用。Down等也證實(shí)取食GNA處理的蚜蟲對二星瓢蟲幼蟲未表現(xiàn)出明顯的毒性,反而取食蚜蟲的數(shù)量顯著高于對照,但幼蟲蟲體比對照小8%~15%,4齡幼蟲的發(fā)育歷期延長,發(fā)育至蛹總體上延長了4d。而添加黑芥子硫苷酸鉀則不同,當(dāng)飼料中黑芥子硫苷酸鉀的濃度達(dá)到0.2%時(shí),二星瓢蟲1齡幼蟲即不能存活;相反,飼料中黑芥子硫苷酸鉀的濃度高達(dá)1%時(shí),七星瓢蟲CoccinellaseptempunctataL.1齡幼蟲仍能夠存活,但延長了其發(fā)育歷期。這些結(jié)果表明,黑芥子硫苷酸鉀對二星瓢蟲有強(qiáng)烈的抑制甚至毒殺作用,但對于七星瓢蟲的抑制作用是有限的,而GNA對二星瓢蟲生長發(fā)育的影響十分有限。而GNA可顯著延長普通草蛉Chry