奶牛性控凍精對(duì)人工授精性能的影響

奶牛性控凍精對(duì)人工授精性能的影響

人類在牛生產(chǎn)中使用性別控制液體的歷史悠久，人們希望該技術(shù)在近年來進(jìn)行開發(fā)。1999年,利用冷凍的性控精液和人工授精技術(shù)獲得了世界首例性控犢牛。性控精液的出現(xiàn)不但使動(dòng)物繁殖在性別上實(shí)現(xiàn)了人為的控制,而且使人們對(duì)動(dòng)物繁殖在數(shù)量上和質(zhì)量上的控制更加容易實(shí)現(xiàn)。它在奶牛上的推廣和應(yīng)用將進(jìn)一步的縮短世代間隔,使得優(yōu)質(zhì)奶牛群體在短時(shí)間內(nèi)實(shí)現(xiàn)快速擴(kuò)繁。本試驗(yàn)針對(duì)目前行業(yè)內(nèi)對(duì)奶牛性控精液存活時(shí)間短和受胎率低等問題,開展了性控精液對(duì)奶牛人工授精情期受胎率及母犢率的影響研究。1材料和方法1.1x、y精子分離性控凍精由內(nèi)蒙古蒙牛繁育生物技術(shù)有限公司生產(chǎn),X、Y精子分離后的性控凍精冷凍解凍后的技術(shù)指標(biāo)為精子活力0.4以上、精液密度200萬個(gè)/0.25mL、X精子純度85%~95%。1.2與祖母配伍研究過程主要在300~10000頭的規(guī)模化奶牛場進(jìn)行,經(jīng)直腸檢查無生殖系統(tǒng)疾病的青年牛和經(jīng)產(chǎn)牛。1.3牛肉的典型試驗(yàn)每天定時(shí)對(duì)待配母牛進(jìn)行發(fā)情觀察,即早晨(6∶00左右)、午前(10∶00左右)、午后(14∶00左右)、晚上(20∶00左右)進(jìn)行4次發(fā)情觀察。從母牛煩躁、哞叫、不安到開始接受其他牛爬跨時(shí),記作發(fā)情開始,至不接受爬跨時(shí),記作發(fā)情結(jié)束。通過直腸檢查子宮、卵巢推斷卵泡的發(fā)育情況及排卵時(shí)間,從而確定輸精時(shí)間。1.4在水中做大發(fā)酵將所需精液細(xì)管從液氮罐中取出,在空氣中停留3~5s,放入事先準(zhǔn)備好的37℃水中水浴約8~10s,待細(xì)管內(nèi)精液冰晶溶解后,將細(xì)管取出,用滅菌干棉球?qū)⒓?xì)管表面的水滴擦干,然后將細(xì)管裝入滅菌的輸精槍內(nèi),套上硬外套及軟外套待用。1.5規(guī)范操作,基于試驗(yàn)設(shè)計(jì)人工輸精操作按照內(nèi)蒙古蒙牛繁育生物技術(shù)有限公司制定的《人工授精技術(shù)操作規(guī)程》進(jìn)行規(guī)范操作,并按試驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)發(fā)情母牛進(jìn)行不同時(shí)間、不同部位輸精。1.6數(shù)據(jù)計(jì)數(shù)用SPSS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,并用LSD方法進(jìn)行多重比較。2結(jié)果與分析2.1情期受胎率及受胎率由表1可見,使用性控凍精組母牛情期受胎率為56.6%,使用常規(guī)凍精組母牛的情期受胎率為59.1%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析二者差異不顯著(P>0.05)。2.2不同年齡的適應(yīng)性控制2.2.1情期受胎率比較由表2可見,應(yīng)用性控凍精的青年牛和經(jīng)產(chǎn)牛情期受胎率分別為69%和49.2%,青年牛應(yīng)用性控凍精進(jìn)行人工授精的情期受胎率明顯高于經(jīng)產(chǎn)牛的情期受胎率,兩者差異顯著(P<0.05)。2.2.2不同受胎率對(duì)人工精神強(qiáng)度的影響由表3可見,應(yīng)用性控凍精母牛不同時(shí)間授精的情期受胎率分別為46.1%和56.8%,兩者差異顯著(P<0.05),表明應(yīng)用性控凍精進(jìn)行人工授精時(shí),準(zhǔn)確掌握發(fā)情時(shí)間和輸精時(shí)間非常關(guān)鍵。2.2.3正雙側(cè)蓮子角輸精情期受胎情況由表4可見,應(yīng)用性控凍精母牛單側(cè)子宮角輸精情期受胎率為56.6%,雙側(cè)子宮角輸精情期受胎率為45.3%,兩者差異顯著(P<0.05)。表明在生產(chǎn)實(shí)際中,如果能夠準(zhǔn)確判斷卵巢上卵泡的發(fā)育狀態(tài),將一支性控凍精全部輸入母牛發(fā)育側(cè)子宮角深部,可明顯提高與配母牛的情期受胎率。2.3產(chǎn)選母寶寶的母合情況由性控凍精輸精受胎的母牛已于2005年7月陸續(xù)產(chǎn)犢,截止到2007年10月為止,產(chǎn)犢2067頭,其中母犢1922頭,母犢率93%,極顯著地高于對(duì)照組48.8%的母犢率(P<0.01)。(表5)3對(duì)性控冷凍香精的效果眾所周知,奶牛與其他畜種相比繁殖力較低。因此,提高奶牛、特別是高產(chǎn)奶牛的繁殖力是促進(jìn)奶牛數(shù)量增加的重要措施。性控精液技術(shù)通過提高母牛比例,理論上可以成倍提高母牛的繁殖效率,對(duì)加速高產(chǎn)奶牛的繁育和縮短奶牛世代間隔具有重要意義。Seidel等報(bào)道:子宮角輸精(每劑量有效精子數(shù)300萬)情期受胎率為54.17%,這與本試驗(yàn)使用性控凍精組情期受胎率56.6%基本相似。本試驗(yàn)使用常規(guī)凍精組的受胎率為59.1%,高于使用性控凍精組。但統(tǒng)計(jì)分析上兩者差異不顯著(P>0.05),表明奶牛性控冷凍精液與常規(guī)凍精同樣可應(yīng)用于人工授精。張文等對(duì)2369頭母牛采取偏角輸精其情期受胎率比常規(guī)輸精提高12.9%。奶牛性控凍精與常規(guī)凍精相比有以下特點(diǎn):第一,解凍后精子活力要比常規(guī)冷凍精液高,其主要原因是奶牛X性控精液在分離的過程中,除了保留X精子和篩除Y精子外,還將原精液中的死精子和部分畸形精子篩除掉;第二,精子的密度顯著低于后者(前者230萬個(gè)/0.25mL,后者2500萬個(gè)0.25mL);第三,奶牛性控冷凍精液的存活時(shí)間相對(duì)于常規(guī)冷凍精液要短,因此在使用奶牛性控冷凍精液進(jìn)行人工授精時(shí),對(duì)于技術(shù)的要求更高。另外試驗(yàn)表明青年牛的受胎率顯著高于成年母牛的受胎率(P<0.05),其原因可能是育成牛和成年母牛相比較生殖機(jī)能更旺盛,由于沒有產(chǎn)過犢,生殖系統(tǒng)環(huán)境狀況要優(yōu)于成年母牛。在生產(chǎn)實(shí)踐中育成牛的受胎率也明顯高于成年母牛。通過控制母牛輸精時(shí)間和改進(jìn)輸精部位,可使性控精液情期受胎率達(dá)59.4%,接近常規(guī)