乳及乳制品常規(guī)理化指標(biāo)檢驗(yàn)硝酸鹽亞硝酸鹽檢測

10/16乳與乳制品老例理化指標(biāo)查驗(yàn)硝酸鹽亞硝酸鹽的檢測YLNB2.11范圍本方法例定了承受鎘復(fù)原和光度分析法測定硝酸鹽和亞硝酸鹽的方法。本方法適用于乳粉、液體奶、乳清粉及嬰兒配方粉中硝酸鹽和亞硝酸鹽的測定。本方法的檢出極限分別為： 硝酸鹽1.5mg/kg；亞硝酸鹽0.2mg/kg。原理將樣品溶解于水中，積淀脂肪和蛋白后，進(jìn)展過濾。用鍍銅鎘粒使局部濾液中的硝酸鹽復(fù)原為亞硝酸鹽。在未復(fù)原的濾液和已復(fù)原的濾液中，參與磺胺和 N-1萘基-乙二胺二538nm將測得的吸光度與亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的吸光度進(jìn)展比較，即可計(jì)算出樣品中的亞硝酸鹽含量和硝酸鹽復(fù)原后的亞硝酸鹽總量，從兩者之間的差值能夠計(jì)算出硝酸鹽的含量。試劑測定用水應(yīng)是不含硝酸鹽和亞硝酸鹽的蒸餾水或去離子水。注：為防范鍍銅鎘粒〔 4.10〕中混入小氣泡，柱制備〔 5.1〕、柱復(fù)原力氣的檢查〔5.2〕和柱的重生〔5.3〕時(shí)所用的蒸餾水或去離子水，最好是剛煮沸過并冷卻至室溫的。鍍銅鎘粒：直徑。也可下述方法制備。將適合的鋅棒放入燒杯中，用8H2O〕溶液漂移鋅棒。在24h

40g/L 的硫酸鎘〔 CdSO4刮下來。取出鋅棒，潷出燒杯中節(jié)余的溶液，剩下的溶液能漂移鎘即可。用蒸餾水沖刷海綿狀鎘小型攪拌器中，同時(shí)參與

400ml0.1mol/L

2-3

次，此后把鎘移入的鹽酸攪拌幾秒鐘，以獵取所需粒度的顆粒。將攪拌器中的鎘粒連同溶液一起倒回?zé)?，靜置幾小時(shí)，這時(shí)期要攪拌幾次以除去氣泡。傾出大多數(shù)溶液，馬上按至 中表達(dá)的方法鍍銅。硫酸銅溶液：溶解20g五水硫酸銅〔CuSO45H2O〕于水中，稀釋至 1000ml。600ml75ml濃鹽酸[ρ201.19g/mL，質(zhì)量分?jǐn)?shù)約為 38%]?；靹蚝?。再參與135ml水]

濃氨水 [ ρ200.91g/mL ，質(zhì)量分?jǐn)?shù)等于 25%的穎的氨

1000ml，混勻。用精巧的

PH。鹽酸溶液：c〔H+〕2mol/L160ml〔ρ201.98g/mL〕1000ml。鹽酸溶液：c〔H+〕約為0.1mol/L50ml2mol/L鹽酸溶液用水稀釋到 1000ml。積淀蛋白和脂肪的溶液：

硫酸鋅溶液：將100ml。

53.5g

的七水硫酸鋅〔 ZnSO47H2O〕亞鐵氰化鉀溶液：將 17.2g 的三水亞鐵氰化鉀[K2FeCN〕63H2O100ml。EDTA 溶液：用水將33.5g 的二水乙二胺四乙酸二鈉Na2C10H14N2O32H2O〕溶解，稀釋至1000ml。1450：550450ml550ml顯色液 2：5g/L的磺胺溶液。在 75ml的水中參與 5ml濃鹽酸，此后在水浴上加熱，用其溶解0.5g磺胺NH2C6H4SO2NH2〕100ml。必要時(shí)進(jìn)展過濾。3：1g/L0.1gN-1100ml。如有必要過濾。注：此溶液應(yīng)少量配制，裝于密閉的棕色瓶中，冰箱中2~5℃保存。亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液：相當(dāng)于亞硝酸鹽的濃度為0.001g/L。將亞硝酸鈉〔NaNO2〕110℃-120℃的范圍內(nèi)枯燥至恒重。冷卻后稱取 0.150g，溶于1000ml的容量瓶中，用水定容。在使用的當(dāng)天配制該溶液。1000ml10ml20ml沖溶液〔3.3〕，用水定容。－1毫升此標(biāo)準(zhǔn)溶液含 1.00μg的NO。2硝酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液，相當(dāng)于硝酸鹽的濃度為 0.0045g/L。將硝酸鉀〔KNO3〕在110℃-120℃的范圍內(nèi)枯燥至恒重。冷卻后稱取 1.4680g，溶于1000ml的容量瓶中，用水定容。在使用當(dāng)天，與 1000mL的容量瓶中，取5ml上述溶液20ml〔3.3〕，用水定容。－1mL的該標(biāo)準(zhǔn)溶液含有 4.50μg的NO。3儀器及器材全部玻璃儀要用蒸餾水沖刷，以保證不帶有硝酸鹽和亞硝酸鹽。分析天平。燒杯：100ml。錐形瓶：250ml，500ml。容量瓶：體積為 100ml，500ml，1000ml。移液管：2ml，5ml，10ml，20ml。吸量管：2ml，5ml，10ml，25ml。量筒：依照需要承受。玻璃漏斗：直徑約為 9cm，短頸。定性濾紙：直徑約18cm。復(fù)原反響柱：簡稱鎘柱。538nm1-2cm色皿。pH 計(jì)，精度為±0.01，pH7pH9液進(jìn)展校準(zhǔn)。方法制備鍍銅鎘柱置鎘?！?.1〕于錐形燒瓶〔4.3〕中〔所用鎘粒的量以到達(dá)要求的鎘柱高度為準(zhǔn)〕。加足量的鹽酸〔 3.4〕以漂移鎘粒，搖擺幾分鐘。潷出溶液，在錐形燒瓶中用水屢次沖刷，直到把氯化物全部沖刷掉。在鎘粒上鍍銅。向鎘粒中參與硫酸銅溶液〔 克鎘粒約需 2.5ml〕，搖擺1min。潷出溶液，馬上用水沖刷鍍銅鎘粒，留意鎘粒要始終用水漂移。當(dāng)沖刷水中不再有銅積淀時(shí)即可停頓沖刷。在用于盛裝鍍銅鎘粒的玻璃柱的底部裝上幾厘米高的玻璃纖維。在玻璃柱中裝入水，排凈氣泡。將鍍銅鎘粒趕快地裝入玻璃柱，使其暴露于空氣的時(shí)間盡量短。鍍銅鎘粒的高度應(yīng)在 的范圍內(nèi)。注：1防范在顆粒之間遺留空氣。留意不能夠讓液面低于鍍銅鎘粒的頂部。6ml/min750ml水、225ml〔3.12〕、20ml〔3.3〕20mlEDTA〔3.7〕50ml檢查柱的復(fù)原力氣這種檢查每日最少要進(jìn)展兩次，一般在開頭時(shí)和一系列測定此后。用移液管將 20ml 3.12〕移入還的硝酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液〔原柱頂部的貯液杯中，再馬上向該貯液杯中增加液〔3.3〕。用一個(gè)100ml的容量瓶收集洗提液。洗提液的流量不應(yīng)高出 6ml/min。在貯液杯將要排空時(shí)，用約 15mL水沖刷杯壁。沖刷水流完后，再用 15ml水重復(fù)沖刷。當(dāng)其次次沖刷水也流完后，將貯液杯灌滿水，并使水以最大流量流過柱子。100ml量瓶，用水定容至刻度，混淆平均。移取10ml洗提液于100ml容量瓶中,加水至60ml左右。此后按、、 操作。

5ml 緩沖溶依照測得的吸光度，經(jīng)過回歸方程〔釋洗提液〔〕中的亞硝酸鹽含量〔μ

〕計(jì)算出稀g/mL〕。據(jù)此可計(jì)算出以百分率表示的柱復(fù)原力氣〔NO2－0.067μg/mL時(shí)復(fù)原力氣為100%〕。假設(shè)是復(fù)原力氣小于 95%或大于105％，柱子就需要重生。柱子重生柱子使用后，及鎘柱的復(fù)原力氣低于 95%或高于 105％時(shí)，按以下步驟進(jìn)展重生。在100ml水中參與約 5mlEDTA溶液〔3.7〕和2ml鹽酸溶液〔3.5〕。以10ml/min左右的速度過柱。當(dāng)貯液杯中混淆液排空后，按次次用 25ml 水、25ml鹽酸〔3.5〕和25ml水沖刷柱子。檢查柱子的復(fù)原力氣，如低于 95%或高于 105％，要重復(fù)重生。樣品的稱取和溶解90ml500ml22ml50-55℃的水分?jǐn)?shù)次沖刷樣品量筒，沖刷液傾入錐形瓶中，混勻。乳粉樣品：在100ml燒杯中稱取 10g樣品，正確至0.001g

112ml50-55℃的水將樣品洗入

500ml乳清粉及乳清粉為原料生產(chǎn)的嬰兒配方粉樣品：在100ml燒杯中稱取 10g樣品，正確至0.001g。用112ml50-55℃的水將樣品洗入 500ml錐形瓶中，混勻。用鋁箔紙蓋好錐形瓶瓶口，將溶好的樣品在開水中煮 15min此后冷卻至約50℃。脂肪和蛋白的去除按次次參與 24ml硫酸鋅溶液〔〕、24ml亞鐵氰化鉀溶液〔〕40ml〔5.3〕，參與時(shí)要邊加邊搖，每加完一種溶液都要充分搖勻。15min-1h。此后用濾紙〔4.9〕250ml錐形瓶收集。硝酸鹽復(fù)原為亞硝酸鹽移取液〔3.3

20ml 濾液于 100ml 小燒杯中，參與

5ml 緩沖溶〕混勻，倒入鎘柱頂部的貯液杯中，以小于的流速過柱。洗提液〔過柱后的液體〕100ml15ml入貯液杯中。沖刷水流完后，再用15ml次沖刷水快流完時(shí)，將貯液杯裝滿水，以最大流速過柱。100ml水定容，混勻。測定分別移取20ml洗提液〔〕和20ml濾液〔于100ml容量瓶中，加水至約 60ml。在每個(gè)容量瓶中先參與 6ml顯色液1〔3.8〕，邊加邊搖；再參與 5ml顯色液2〔3.9〕留神混淆溶液，使其在室溫5min，防范陽光直射。

6ml/min〕2ml3〔3.10〕，留神混淆，使其在室溫下5min，防范陽光直射。用水定容至刻度，混勻。15min538nm定上述樣品溶液的吸光度。標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作分別移取〔或用滴定管放出〕0，2，4，6，8，10，12，16，20ml〔3.11〕100ml瓶中。在每個(gè)容量瓶中加水，使其體積約為 60ml。在每個(gè)容量瓶中先參與 6ml顯色液1〔3.8〕，邊加邊混；再參與 5ml顯色液2〔3.9〕。留神混淆溶液，使其在室溫下靜置5min，防范陽光直射。2ml3〔3.10〕，留神混淆，使其在室溫下5min，防范陽光直射。用水定容至刻度，混勻。15min538nm〔不含亞硝酸鈉〕為比較測定其他八個(gè)溶液的吸光度。將測得的吸光度和亞硝酸根質(zhì)量濃度兩組數(shù)據(jù)分別輸excelexcelμg/ml〔亞硝酸根的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)?！辰Y(jié)果計(jì)算亞硝酸鹽的含量樣品中亞硝酸根含量 〔mg/kg〕=20230C1----------m V1

------(1)式中：c1—依照濾液〔〕的吸光度〔〕，經(jīng)過回歸2－方程計(jì)算出的 的濃度，μg/ml；m—樣品的質(zhì)量，g；V1—所取濾液〔〕的體積〔 〕。樣品中以亞硝酸鈉表示的亞硝酸鹽含量W 〔NaNO2〕=1.5

×W〔NO2 －〕(2)－式中：W〔NO 〕—樣品中亞硝酸根的含量，2W〔NaNO2〕—樣品中以亞硝酸鈉表示的亞硝酸鹽的含量，mg/kg。0.1mg/kg。硝酸鹽含量樣 品中 硝 酸 根 含 量

mg/kg；〔 mg/kg〕=100000C21.35 WNO2mV

--------2式中：c2—依照洗提液〔 〕的吸光度〔〕，經(jīng)過回歸方程計(jì)算出的亞硝酸根離子的濃度，μ g/ml；m—樣品的質(zhì)量， g；V2—所取洗提液〔 〕的體積〔〕。W〔NO2－〕—依照式〔1〕計(jì)算出的亞硝酸根含量。假設(shè)考慮柱的復(fù)原力氣 ,樣 品 中 硝 酸 根 含 量 〔mg/kg 〕100000C21001.35 WNO= 2m V r2式中：r—測定一系列樣品后的復(fù)原力氣樣品中以硝酸鈉表示的硝酸鹽含量=1.371

W〔WNO3

NaNO3〕式中：W〔NO3－〕—樣品中硝酸根的含量， mg/kg；W〔NaNO3〕—樣品中以硝酸鈉計(jì)的硝酸鹽的含量，mg/kg。報(bào)告測定結(jié)果正確至 0.1mg/kg。贊同差重復(fù)性由同一分析人員在短時(shí)間間隔內(nèi)測定的兩個(gè)亞硝酸鹽結(jié)果之間的差值，不應(yīng)高出 1mg/kg。由同一分析人員在短時(shí)間間隔內(nèi)測定的兩個(gè)硝酸鹽結(jié)果之間的差值，在硝酸鹽含量小于 時(shí)，不應(yīng)高出3mg/kg；在硝酸鹽含量大于 30mg/kg時(shí)，不應(yīng)高出結(jié)果平均10%。重現(xiàn)性由不同樣試驗(yàn)室的兩個(gè)分析人員對同同樣品測得的兩個(gè)硝酸鹽結(jié)果之差，在硝酸鹽含量小于 時(shí)，差值不應(yīng)高出8mg/kg；在硝酸鹽含量大于或等于30mg/kg時(shí)，該差值不應(yīng)高出結(jié)果平均值的 25%。2.留意事項(xiàng)鎘是有害元素，在辦理鎘粒時(shí)，不要用手直接接觸，同時(shí)留意不要弄到皮膚上，一旦接觸馬上用水沖刷。試驗(yàn)用水必定不含有亞硝酸根和硝酸根。氨緩沖液除把握溶液的 pH外，還可緩解鎘對亞硝酸根的復(fù)原。關(guān)于顏色較深的樣品 ,在辦理時(shí),應(yīng)加脫色劑進(jìn)展脫色辦理,以防范由于樣品自己的顏色攪亂影響檢測結(jié)果 .為了檢查試驗(yàn)的正確性，要如期進(jìn)展回收率測定步驟：做樣品的同時(shí)，其他取同樣的樣品進(jìn)展