7.2 色譜術(shù)語(yǔ)及色譜理論

色譜術(shù)語(yǔ)及色譜理論1色譜流出曲線和色譜峰由檢測(cè)器輸出的信號(hào)強(qiáng)度對(duì)時(shí)間作圖，所得曲線稱為色譜流出曲線。曲線上突起部分就是色譜峰。

231.基線無(wú)試樣通過(guò)檢測(cè)器時(shí)，檢測(cè)到的信號(hào)即為基線。2.峰高色譜峰頂點(diǎn)與基線之間的垂直距離，以（h）表示。一.色譜圖及常用術(shù)語(yǔ)基線漂移4（1）時(shí)間表示的保留值

3.保留值5a.死時(shí)間(tM)：不與固定相作用的組分(如空氣)的保留時(shí)間；因?yàn)檫@種物質(zhì)不被固定相吸附或溶解，故其流動(dòng)速度將與流動(dòng)相流動(dòng)速度相近。測(cè)定流動(dòng)相平均線速ū時(shí)，可用柱長(zhǎng)L與tM的比值計(jì)算，即

ū=L/tM6c.調(diào)整保留時(shí)間（tR＇）：某組分的保留時(shí)間扣除死時(shí)間后，稱為該組分的調(diào)整保留時(shí)間

tR＇=tR-tM

b.保留時(shí)間(tR)：組分從進(jìn)樣到柱后出現(xiàn)濃度極大值時(shí)所需的時(shí)間；7保留時(shí)間是色譜法定性的基本依據(jù)，但同一組分的保留時(shí)間常受到

的影響，流動(dòng)相流速因此色譜工作者有時(shí)用保留體積來(lái)表示保留值。8（2）用體積表示的保留值死體積：指色譜柱在填充后，柱管內(nèi)固定相顆粒間所剩留的空間、色譜儀中管路和連接頭間的空間以及檢測(cè)器的空間的總和。當(dāng)后兩項(xiàng)很小可忽略不計(jì)時(shí)，死體積（VM）：

VM=tM×F0F0:柱出口處的載氣流量，單位：mL/min。9

保留體積（VR）：指從進(jìn)樣開(kāi)始到被測(cè)組分在柱后出現(xiàn)濃度極大點(diǎn)時(shí)所通過(guò)的流動(dòng)相的體積

VR=tR×F0F0為柱出口處的載氣流量，單位：mL/min。

調(diào)整保留體積(VR＇)：某組分的保留體積扣除死體積的值

V

R＇=VR-VM

10（3）

相對(duì)保留值r21組分2與組分1調(diào)整保留值之比：r21=t′R2

/t′R1=V′R2/V′R1

相對(duì)保留值只與柱溫和固定相性質(zhì)有關(guān)，與其他色譜操作條件（柱徑、柱長(zhǎng)、填充情況及流動(dòng)相流速）無(wú)關(guān)，它表示了固定相對(duì)這兩種組分的選擇性。11色譜峰的區(qū)域?qū)挾仁巧V流出曲線的重要參數(shù)之一，用于衡量柱效率及反映色譜操作條件的動(dòng)力學(xué)因素。4.區(qū)域?qū)挾?24.區(qū)域?qū)挾?/p>

衡量色譜峰寬度的參數(shù)，

三種表示方法：（1）標(biāo)準(zhǔn)偏差(

)：即0.607倍峰高處色譜峰寬度的一半。（2）半峰寬(Y1/2)：色譜峰高一半處的寬度Y1/2=2.354

。（3）峰底寬(Wb)：Wb=4

。13從色譜流出曲線中，可得到哪些重要信息？14從色譜流出曲線中，可得許多重要信息：(i)根據(jù)色譜峰的個(gè)數(shù)，可以判斷樣品中所含組分的最少個(gè)數(shù)；(ii)根據(jù)色譜峰的保留值，可以進(jìn)行定性分析；(iii)根據(jù)色譜峰的面積或峰高，可以進(jìn)行定量分析；(iv)色譜峰的保留值及其區(qū)域?qū)挾?，是評(píng)價(jià)色譜柱分離效能的依據(jù)；(v)色譜峰兩峰間的距離，是評(píng)價(jià)固定相（或流動(dòng)相）選擇是否合適的依據(jù)。15二、色譜分離過(guò)程基本關(guān)系式1.分配系數(shù)K平衡常數(shù)，一定的溫度和壓力下，組分在兩相間達(dá)到分配平衡時(shí)，組分在固定相中的濃度Cs與在流動(dòng)相中的濃度Cm之比.影響K值的因素：溫度、壓力、組分的性質(zhì)、固定相和流動(dòng)相的性質(zhì)16分配系數(shù)KK值的大小表明組分與固定相作用力的大小K值大：組分與固定相的親和力

，組分在柱中滯留的時(shí)間

。組分在柱中移動(dòng)速度與其分配系數(shù)成

。分配系數(shù)是色譜分離的依據(jù)。大長(zhǎng)反比172.分配比k一定溫度下，組分在兩相間分配達(dá)到平衡時(shí)的物質(zhì)的量比。分配比也稱：容量因子；容量比；k值越大，說(shuō)明組分在固定相中的量越

，相當(dāng)于柱的容量

，因此又稱分配容量或容量因子。大多18

k=ns/nM=CsVs/CMVM

VM為流動(dòng)相體積，即柱內(nèi)固定相顆粒間的空隙體積；

VS為固定相體積，對(duì)不同類型色譜柱，VS含義不同；

氣-液色譜柱：VS為

；

氣-固色譜柱：VS為

。固定液體積吸附劑表面容量19（1）分配系數(shù)與分配比都是與組分及固定相的熱力學(xué)性質(zhì)有關(guān)的常數(shù)，隨分離柱溫度、柱壓的改變而變化。（2）分配系數(shù)與分配比都是衡量色譜柱對(duì)組分保留能力的參數(shù)，數(shù)值越大，該組分的保留時(shí)間越長(zhǎng)。203.分配比與分配系數(shù)的關(guān)系

β為相比：β=VM/Vs

,

反映各種色譜柱柱型特點(diǎn)的參數(shù)填充柱相比：6～35；毛細(xì)管柱的相比：50～1500。

214.分配比與保留時(shí)間的關(guān)系

滯留因子：us：組分在分離柱內(nèi)的線速度；u：流動(dòng)相在分離柱內(nèi)的線速度；滯留因子RS也可以用物質(zhì)的量的比值表示：若組分和流動(dòng)相通過(guò)長(zhǎng)度為L(zhǎng)的分離柱，需要的時(shí)間分別為tR和tM，則：22tR=tM(1+k)可直接由實(shí)驗(yàn)獲得的保留值求出分配比。23TMTR5.分離因子

分離因子（也稱為選擇性因子）也可用來(lái)衡量?jī)晌镔|(zhì)的分離程度，用

表示。

如果兩組分的K或k值相等，則α=1，兩個(gè)組分的色譜峰必將重合，說(shuō)明分不開(kāi)。兩組分的K或k值相差越大，則分離得越好。

因此兩組分具有不同的分配系數(shù)是色譜分離的先決條件。相對(duì)保留值24濃度沿柱移動(dòng)距離LABABKA<KB若要使A、B組分完全分離，必須滿足以下三點(diǎn)：第一，兩組分的分配系數(shù)必須有差異；第二，區(qū)域擴(kuò)寬的速率應(yīng)小于區(qū)域分離的速度；第三，在保證快速分離的前提下，提供足夠長(zhǎng)的色譜柱。25三、塔板理論

塔板理論的假設(shè)：每一個(gè)平衡過(guò)程間隔（理論塔板高度H）內(nèi)，平衡可以迅速達(dá)到；(2)將流動(dòng)相看作成脈動(dòng)（間歇）過(guò)程，每次進(jìn)樣為一個(gè)塔板體積（ΔVm）

；(3)試樣沿色譜柱方向（縱）的擴(kuò)散可忽略；(4)每次分配的分配系數(shù)相同，在所有塔板上是常數(shù)，與組分在某一塔板上的量無(wú)關(guān)。。

1.塔板理論（platetheory）——

適用：分配色譜將色譜分離過(guò)程比擬作蒸餾過(guò)程，將連續(xù)的色譜分離過(guò)程分割成多次的平衡過(guò)程的重復(fù)。2627色譜柱長(zhǎng)：L，虛擬的塔板間距離：H，色譜柱的理論塔板數(shù)：n，則三者的關(guān)系為：n=L/H平衡次數(shù)與精餾塔一樣，色譜柱的柱效隨理論塔板數(shù)n的增加而

，隨板高H的增大而

。

減小增加30（3）理論塔板數(shù)與色譜參數(shù)之間的關(guān)系為：

塔板理論指出：

（1）理論塔板數(shù)n大于50時(shí)，可得到基本對(duì)稱的峰形曲線（正態(tài)分布曲線）。氣相色譜柱的n約為103-106

（2）各組分在兩相間的分配系數(shù)有微小差異，經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的分配平衡后，可獲得良好的分離。312.有效塔板數(shù)和有效塔板高度用調(diào)整保留時(shí)間代替保留時(shí)間進(jìn)行計(jì)算。n理與n有效關(guān)系：tR=tM(1+k)32計(jì)算柱效時(shí)，要注明：色譜條件，用什么物質(zhì)進(jìn)行測(cè)量。例：已知某組分峰的峰底寬為40s，保留時(shí)間為400s，計(jì)算此色譜柱的理論塔板數(shù)。

解：n=16(tR/Y)2=16

（400/40）2

=1600塊333.塔板理論優(yōu)缺點(diǎn)塔板理論是一種半經(jīng)驗(yàn)性的平衡理論解決的問(wèn)題：1）用熱力學(xué)的觀點(diǎn)定量闡明了溶質(zhì)在色譜柱中移動(dòng)的速率2）解釋了流出曲線的形狀、濃度極大的位置3）提出了計(jì)算評(píng)價(jià)柱效高低的理論塔板數(shù)的公式存在問(wèn)題：定性地給出了板高的概念，卻不能解釋影響塔板高度的原因，更無(wú)法提出降低塔板高度的途徑。34四、速率理論

1.氣相色譜速率理論1956年荷蘭學(xué)者范第姆特(VanDeemter)等人將塔板高度的概念、影響塔板高度的擴(kuò)散和傳質(zhì)等因素結(jié)合，給出理論塔板高度關(guān)系式：1）范第姆特方程式

H=A+B/u+C·u

H：理論塔板高度，

u：載氣的線速度(cm/s)A、B、C、為常數(shù)，A：渦流擴(kuò)散系數(shù)；B：分子擴(kuò)散項(xiàng)系數(shù);C:傳質(zhì)阻力項(xiàng)系數(shù)。35A─渦流擴(kuò)散項(xiàng)由于填充物顆粒大小的不同及填充物的不均勻性，使組分在色譜柱中路徑長(zhǎng)短不一，因而同時(shí)進(jìn)色譜柱的相同組分到達(dá)柱口時(shí)間并不一致，引起了色譜峰的變寬。36

A=2λdp

dp：固定相的平均顆粒直徑λ：固定相的填充不均勻因子

固定相顆粒越小dp↓，填充的越均勻，A↓，H↓，柱效n↑。表現(xiàn)在渦流擴(kuò)散所引起的色譜峰變寬現(xiàn)象減輕，色譜峰較窄。色譜峰變寬的程度由下式?jīng)Q定：37

固定相粒度大小對(duì)板高的影響

38B/u—分子擴(kuò)散項(xiàng)縱向分子擴(kuò)散是由濃度梯度造成的。組分從柱入口加入，隨著流動(dòng)相向前推進(jìn)，其濃度分布的構(gòu)型呈“塞子”狀。由于存在濃度梯度,組分必然自發(fā)的向前和向后擴(kuò)散，造成譜帶展寬?！阜肿友厣V柱軸向擴(kuò)散引起的色譜譜帶展寬39B/u—分子擴(kuò)散項(xiàng)

B=2γ

Dgγ：彎曲因子，填充柱色譜，γ

<1?？招闹?1Dg：試樣組分分子在氣相中的擴(kuò)散系數(shù)（cm2·s-1）

組分在液相中的擴(kuò)散系數(shù)只有氣體中的1/105，因此在液相色譜中B可以忽略。40B/u—分子擴(kuò)散項(xiàng)

B=2γ

Dg

(1)存在著濃度差，產(chǎn)生縱向擴(kuò)散;(2)擴(kuò)散導(dǎo)致色譜峰變寬，H↑(n↓)，分離變差;(3)B/u與流速有關(guān)，流速↓，滯留時(shí)間↑，擴(kuò)散↑;(4)擴(kuò)散系數(shù)：Dg

∝(M載氣)-1/2；M載氣↑，B值↓。

(5)Dg隨柱溫增高而增加，但反比于柱壓。41C·u—傳質(zhì)阻力項(xiàng)傳質(zhì)阻力包括氣相傳質(zhì)阻力Cg和液相傳質(zhì)阻力CL即：

C=（Cg+CL）氣相傳質(zhì)過(guò)程:試樣組分從氣相移動(dòng)到固定相表面的過(guò)程液相傳質(zhì)過(guò)程：試樣組分從固定相的氣/液界面移動(dòng)到液相內(nèi)部不能瞬間達(dá)到分配平衡，色譜峰變寬42

k為容量因子；df為填充物粒度；Dg

為擴(kuò)散系數(shù)。

C·u—傳質(zhì)阻力項(xiàng)傳質(zhì)阻力包括氣相傳質(zhì)阻力Cg和液相傳質(zhì)阻力CL即：

C=（Cg+CL）填充柱氣相傳質(zhì)阻力系數(shù)Cg為：減小填充物粒度，選擇小分子量的氣體作載氣如何提高柱效？43

k為容量因子；df為固定相的液膜厚度；DL為擴(kuò)散系數(shù)。C·u—傳質(zhì)阻力項(xiàng)傳質(zhì)阻力包括氣相傳質(zhì)阻力Cg和液相傳質(zhì)阻力CL即：

C=（Cg+CL）液相傳質(zhì)阻力系數(shù)CL為：如何提高柱效？減小液膜厚度，k值也變小，CL增大提高柱溫可增大DL，但會(huì)使k值減小44將上面式總結(jié)，即可得

氣液色譜速率板高方程

這一方程對(duì)選擇色譜分離條件具有實(shí)際指導(dǎo)意義，它指出了色譜柱填充的均勻程度，填料顆粒的大小，流動(dòng)相的種類及流速，固定相的液膜厚度等對(duì)柱效的影響。45☆氣相色譜范氏方程曲線載氣流速低時(shí)：

分子擴(kuò)散項(xiàng)成為影響柱效的主要因素，流速

,柱效

。載氣流速高時(shí)：

傳質(zhì)阻力項(xiàng)是影響柱效的主要因素，流速

，柱效

。H-u曲線與最佳流速：

流速對(duì)這兩項(xiàng)完全相反的作用，存在著一個(gè)最佳流速值。以塔板高度H對(duì)應(yīng)載氣流速u(mài)作圖，曲線最低點(diǎn)的流速即為最佳流速。H=A+B/u+C·u

462.液相色譜速率理論1）液相色譜速率方程H=A+B/u+C·uI項(xiàng)：渦流擴(kuò)散項(xiàng)II項(xiàng)：流動(dòng)相傳質(zhì)阻力III項(xiàng)：分子擴(kuò)散項(xiàng)IV項(xiàng)：流動(dòng)相停滯區(qū)域內(nèi)的傳質(zhì)阻力項(xiàng)V項(xiàng)：固定相傳質(zhì)阻力47

該式與氣液色譜速率方程的形式基本一致，主要區(qū)別在液液色譜中分子擴(kuò)散項(xiàng)可忽略不計(jì)，影響柱效的主要因素是傳質(zhì)阻力項(xiàng)。綜上所述，對(duì)液液色譜的VanDeemter方程式可表達(dá)為：

48在液相色譜中，提高柱效的方法

(1)減小填料顆粒粒度；

(2)減小填料孔穴深度；

(3)采用低流速流動(dòng)相；

(4)用粘度低的溶劑作流動(dòng)相；

(5)適當(dāng)提高柱溫。現(xiàn)代高效液相色譜的柱填料粒徑都小于10μm。492）液相色譜范氏曲線不同粒徑ODS填料對(duì)液相色譜H-u曲線影響50u在上述方程各項(xiàng)中存在矛盾，因此，應(yīng)求出最佳值：uHminuopt51分子擴(kuò)散項(xiàng)和傳質(zhì)阻力項(xiàng)對(duì)板高的貢獻(xiàn)52LC板高極小值比GC的極小值小一個(gè)數(shù)量級(jí)以上，說(shuō)明液相色譜的柱效比氣相色譜高得多；LC的板高最低點(diǎn)相應(yīng)流速比起GC的流速亦小一個(gè)數(shù)量級(jí)，說(shuō)明對(duì)于LC，為了取得良好的柱效，流速不一定要很高。53色譜分離中的四種情況：①柱效較高，△K(分配系數(shù))較大,完全分離；②△K不是很大，柱效較高，峰較窄，基本上完全分離；③△K較大,柱效較低，但分離的不好；④△K小，柱效低，分離效果更差。54五、分離度

分離度是既能反映柱效率又能反映選擇性的指標(biāo)，稱總分離效能指標(biāo),又叫分辨率難分離物質(zhì)對(duì)的分離受色譜過(guò)程中兩種因素的綜合影響：保留值之差；區(qū)域?qū)挾取?5五、分離度1.分離度的定義色譜圖中相鄰兩峰分離程度的量度。56R=0.8：兩峰的分離程度可達(dá)89%；R=1：分離程度98%；R=1.5：達(dá)99.7%（相鄰兩峰完全分離的標(biāo)準(zhǔn)）。572.分離度公式n=16（tR/Y）21/Y=（

n/4）（1/tR

）582.分離度公式色譜法中最重要的方程式之一它說(shuō)明了分離度與重要色譜參數(shù)n、

和k之間的關(guān)系n：動(dòng)力學(xué)因素項(xiàng)，表現(xiàn)在色譜峰寬度，由柱性能決定

：熱力學(xué)因素項(xiàng)，決定于色譜峰間的距離k：影響組分的保留時(shí)間59經(jīng)推導(dǎo)：3、分離度的最佳化不同分析目的對(duì)分離度的要求：定性分析時(shí)，需要準(zhǔn)確測(cè)量tR值，最低要求R＝0.8用峰高法進(jìn)行定量分析時(shí)，要求R

1.0用測(cè)量峰面積法進(jìn)行定量分析時(shí)，要求R

1.2560分離度公式R是n、

和k等色譜參數(shù)的函數(shù)

(1)分離度與柱效n的關(guān)系分離度R與n1/2成正比。提高分離度的最有效的手段：增大理論塔板數(shù)。增大理論塔板數(shù)途徑：增加柱長(zhǎng)和提高柱效。降低板高，提高柱效，是提高分離度的最好方法。采用直徑小、粒度均勻的固定相。均勻填充色譜柱。分配色譜還需控制較薄的液膜厚度。61(2)分離度與

的關(guān)系R與(

-1)/

成正比，

值越大，(

-1)/

值越大，R也隨著增大。當(dāng)

=1時(shí)，R＝0，不能實(shí)現(xiàn)分離。

值的微小變化都對(duì)R有很大影響，

從1.1改變?yōu)?.2時(shí)，可以提高分離度大約一倍，增大

值是改善分離度最有力的手段在氣相色譜中，

值主要取決于固定相的性質(zhì)，并對(duì)溫度有很大的依賴性，一般降低柱溫可使

值增大。在液相色譜中，主要通過(guò)改變流動(dòng)相和固定相的性質(zhì)來(lái)調(diào)整

值，溫度的作用很小。62(3)分離度與k的關(guān)系分離度R與k/(1十k)成正比當(dāng)k趨于0時(shí)，RS也趨于0；當(dāng)k值增大時(shí)，k/(1十k)項(xiàng)增大，R隨之增大；當(dāng)k值太大時(shí)，k增大對(duì)R增大的貢獻(xiàn)極小，分析時(shí)間大大延長(zhǎng)，導(dǎo)致譜峰擴(kuò)展嚴(yán)重，有時(shí)甚至造成譜帶檢測(cè)的困難。k＞5后，R增大很慢k＞10時(shí)，R增大不多，分析時(shí)間明顯延長(zhǎng)。洗脫時(shí)間曲線的極小值位于k＝2-3之間。k的最佳值在2—5之間氣相色譜中，增加固定液的用量、降低柱溫，k值增大。液相色譜中，通過(guò)控制流動(dòng)相強(qiáng)度(極性)來(lái)改變k63氣相色譜柱溫的確定

首先應(yīng)使柱溫控制在固定液的最高使用溫度（超過(guò)該溫度固定液易流失）和最低使用溫度（低于此溫度固定液以固體形式存在）范圍之內(nèi)。

柱溫升高，分離度下降，色譜峰變窄變高。柱溫↑，被測(cè)組分的揮發(fā)度↑，即被測(cè)組分在氣相中的濃度↑，K↓，tR↓，低沸點(diǎn)組份峰易產(chǎn)生重疊。

柱溫↓，分離度↑，分析時(shí)間↑。對(duì)于難分離物質(zhì)對(duì)，降低柱溫雖然可在一定程度內(nèi)使分離得到改善，但是不可能使之完全分離，這是由于兩組分的相對(duì)保留值增大的同時(shí)，兩組分的峰寬也在增加，當(dāng)后者的增加速度大于前者時(shí)，兩峰的交疊更為嚴(yán)重。

柱溫一般選擇在接近或略低于組分平均沸點(diǎn)時(shí)的溫度。組分復(fù)雜，沸程寬的試樣，采用程序升溫。64程序升溫652.4色譜定性和定量分析

一、定性分析保留值作為一種定性指標(biāo)。不同物質(zhì)在同一色譜條件下，可能具有相似或相同的保留值，保留值并非專屬。66

一、定性分析1.純物質(zhì)對(duì)照定性相同的色譜條件下，測(cè)已知純物質(zhì)保留時(shí)間、未知物保留時(shí)間，進(jìn)行比較：相同：可能是已知純物質(zhì)；不同：不是該純物質(zhì)適用于組分性質(zhì)已有所了解，組成比較簡(jiǎn)單，且有純物質(zhì)的未知物定性。672.相對(duì)保留值法利用相對(duì)保留值進(jìn)行定性。相對(duì)保留值αis:組分i與基準(zhǔn)物質(zhì)s調(diào)整保留值的比值

αis=tri

/trS′=Vri

/Vrs

測(cè)定方法：在某一固定相及柱溫下，分別測(cè)出組分i和基準(zhǔn)物s的調(diào)整保留值，按上式計(jì)算。用已求出的

與文獻(xiàn)相應(yīng)值比較即可定性?；鶞?zhǔn)物的選擇：容易得到純品的、而且與被分析組分保留值相近的物質(zhì),如正丁烷、環(huán)己烷、正戊烷、苯、對(duì)二甲苯、環(huán)己醇、環(huán)己酮等。683.加入已知物增加峰高法先測(cè)未知樣品色譜圖，然后在未知樣品中加入某已知物，測(cè)色譜圖。峰高增加的組分即可能為這種已知物。適用于未知樣品中組分較多，所得峰過(guò)密，或僅作未知樣品指定項(xiàng)目分析。694.

保留指數(shù)定性法保留指數(shù)又稱為柯瓦（Kováts）指數(shù)，它表示物質(zhì)在固定液上的保留行為，是目前使用最廣泛并被國(guó)際上公認(rèn)的定性指標(biāo)。它具有重現(xiàn)性好、標(biāo)準(zhǔn)統(tǒng)一及溫度系數(shù)小等優(yōu)點(diǎn)。704.

保留指數(shù)定性法是一種重現(xiàn)性較好的定性參數(shù)。保留指數(shù)測(cè)定方法：將正構(gòu)烷烴作為標(biāo)準(zhǔn)，規(guī)定其保留指數(shù)為分子中碳原子個(gè)數(shù)乘以100（如正己烷的保留指數(shù)為600）。

選定兩個(gè)相鄰的正構(gòu)烷烴，其分別具有Z和Z＋1個(gè)碳原子。被測(cè)物質(zhì)X的調(diào)整保留時(shí)間應(yīng)在相鄰兩個(gè)正構(gòu)烷烴的調(diào)整保留值之間。71未知物保留指數(shù)（IX）的計(jì)算：計(jì)算出保留指數(shù)與文獻(xiàn)值比較，即可定性。72若在測(cè)定物質(zhì)i的保留指數(shù)時(shí)，所選兩個(gè)正構(gòu)烷烴的碳原子數(shù)相差n，調(diào)整保留時(shí)間為t’R(Z)<t’R(i)<t’R(Z+n)保留指數(shù)的物理意義在于：它是與被測(cè)物質(zhì)具有相同調(diào)整保留時(shí)間的假想的正構(gòu)烷烴的碳數(shù)乘以100。保留指數(shù)僅與固定相的性質(zhì)、柱溫有關(guān)，與其它實(shí)驗(yàn)條件無(wú)關(guān)。其準(zhǔn)確度和重現(xiàn)性都很好。只要柱溫與固定相相同，就可應(yīng)用文獻(xiàn)值進(jìn)行鑒定，而不必用純物質(zhì)相對(duì)照。735.與其他分析儀器聯(lián)用的定性方法

小型化的臺(tái)式色質(zhì)譜聯(lián)用儀（GC-MS；LC-MS）色譜-紅外光譜儀聯(lián)用儀；組分的結(jié)構(gòu)鑒定74二、定量分析色譜定量的依據(jù)——當(dāng)操作條件一致時(shí)，被測(cè)組分的質(zhì)量（或濃度）與檢測(cè)器給出的響應(yīng)信號(hào)成正比。即：

mi=fi

Ai

式中mi為被測(cè)組分i的質(zhì)量；Ai為被測(cè)組分i的峰面積；

fi為被測(cè)組分i的校正因子。75二、定量分析1.峰面積的測(cè)量

（1）峰高（h）乘半峰寬（Y1/2）法：近似將色譜峰當(dāng)作等腰三角形。

A=1.064h·Y1/2

（2）峰高乘平均峰寬法：當(dāng)峰形不對(duì)稱時(shí)，可在峰高0.15和0.85處分別測(cè)定峰寬，由下式計(jì)算峰面積：

A=h·（Y

0.15+Y

0.85

）/2

（3）峰高乘保留時(shí)間法：在一定操作條件下，同系物的半峰寬與保留時(shí)間成正比，對(duì)于難于測(cè)量半峰寬的窄峰、重疊峰（未完全重疊），可用此法測(cè)定峰面積：

A=h·b·tR

（4）自動(dòng)積分法762.定量校正因子

試樣中各組分質(zhì)量與其色譜峰面積成正比，即：

mi=fi·Ai峰面積的大小不僅取決于組分的質(zhì)量，而且還與它的性質(zhì)有關(guān)。即當(dāng)兩個(gè)質(zhì)量相同的不同組分在相同條件下使用同一檢測(cè)器進(jìn)行測(cè)定時(shí)，所得的峰面積卻不相同。因此，混合物中某一組分的百分含量并不等于該組分的峰面積在各組分峰面積總和中所占的百分率。這樣，就不能直接利用峰面積計(jì)算物質(zhì)的含量。為了使峰面積能真實(shí)反映出物質(zhì)的質(zhì)量，就要對(duì)峰面積進(jìn)行校正，即在定量計(jì)算是引入校正因子。772.定量校正因子絕對(duì)校正因子：fi

，單位面積對(duì)應(yīng)的物質(zhì)量：

f

i=mi/Ai

定量校正因子與檢測(cè)器響應(yīng)值成倒數(shù)關(guān)系：

f

i=1/Si

相對(duì)校正因子f’i

：即組分的絕對(duì)校正因子與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的絕對(duì)校正因子之比。78

可見(jiàn)，相對(duì)校正因子fi

就是當(dāng)組分i的質(zhì)量與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)s相等時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的峰面積是組分i峰面積的倍數(shù)。若某組分質(zhì)量為mi，峰面積Ai

，則fi

Ai的數(shù)值與質(zhì)量為mi的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的峰面積相等。也就是說(shuō)，通過(guò)相對(duì)校正因子，可以把各個(gè)組分的峰面積分別換算成與其質(zhì)量相等的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的峰面積，于是比較標(biāo)準(zhǔn)