實(shí)驗：園藝植物花粉生活力測定

花粉生活力測定技術(shù)一、目的和要求學(xué)習(xí)花粉采集、干燥方法，掌握花粉貯藏和花粉生活力測定的技術(shù)。二、材料和用具材料：果樹、蔬菜或花卉的花粉。用具：顯微鏡、天平、鑷子、載玻片、蓋玻片、培養(yǎng)皿、干燥器、滴瓶、濾紙、紗布。藥品：聯(lián)苯胺、α-萘酚、碳酸鈉、過氧化氫、碘、碘化鉀、乙醇等。三、說明：父母本花期不一致時，花粉需要經(jīng)過一段時間的貯藏；從外地采集花粉做父本時，花粉要經(jīng)過運(yùn)輸、郵寄過程。因此在雜交前應(yīng)檢驗花粉的生活力，以免應(yīng)用無生活力的花粉而造成雜交工作的失敗。四、實(shí)驗原理：

1.碘-碘化鉀染色法

正常的花粉積累淀粉較多，而不正常的花粉則較少。正?；ǚ塾肐-KI染色后呈藍(lán)色，而發(fā)育不良無生活力的花粉則不積累淀粉，I-KI染色時呈黃褐色。2.過氧化物酶測定法

具有生活力的花粉含有活躍的過氧化物酶，酶能利用過氧化物使多酚及芳香族胺發(fā)生氧化而產(chǎn)生紅色的雜環(huán)氧化物。生活力愈強(qiáng)，染色愈深。無生活力花粉不染色。五、方法步驟：（一）花粉采集、貯藏

從發(fā)育良好的植株上采下即將開放的花朵，取出花藥放在紙上或培養(yǎng)皿中，放于干燥的室內(nèi)，花藥裂開后將花粉倒入小玻璃瓶中，瓶口上塞以棉花或橡皮塞，貼上寫有品種名稱的標(biāo)簽。把花粉瓶放于干燥器內(nèi)，使花粉在相對濕度較低（一般0～40%）、低溫（0～4℃）黑暗的條件下貯藏。用室溫、正?？諝鉂穸荣A藏的花粉作對照。五、方法步驟：（二）藥品配制稱取0.8克碘和1.3克碘化鉀溶于100毫升的蒸餾水中，即成碘-碘化鉀溶液，存于棕色瓶中。a．0.2克聯(lián)苯胺溶于100毫升50%的酒精溶液中；b．0.15克a-萘酚溶于100毫升50%酒精溶液中；c．0.25克的碳酸鈉溶解在100毫升的蒸餾水中。以上三種溶液分別存于棕色瓶中放在冰箱中備用，使用時將這三種溶液等量配成試劑Ⅰ，放入棕色滴瓶中。在使用前配制0.3%的過氧化氫水溶液作為試劑Ⅱ（現(xiàn)用現(xiàn)配）。五、方法步驟：（三）花粉生活力試驗1.先在載玻片上加少量待測花粉，然后在花粉上滴一滴蒸餾水，仔細(xì)攪勻。蓋上蓋玻片，在顯微鏡下檢查花粉形態(tài)、顏色。2.在上述載玻片上，從蓋玻片一側(cè)加入一滴I-KI溶液，然后從另一側(cè)用濾紙將I-KI溶液吸入蓋玻片，經(jīng)2～3分鐘后，在顯微鏡下檢查。凡被染色呈藍(lán)色的表示具有生活力，呈黃褐色或不染色者為發(fā)育不良、生活力弱的花粉。觀察3~4個視野，記錄有生活力、發(fā)育不良及生活力弱的花粉數(shù)。五、方法步驟：（三）花粉生活力試驗3.取另一載玻片，加少量同種待測花粉，然后在花粉上滴試劑Ⅰ和試劑Ⅱ各一滴，仔細(xì)攪勻，蓋上蓋玻片，用鑷子輕輕壓實(shí)。經(jīng)3～4分鐘后，放在顯微鏡下檢查。有生活力的花粉呈紅色或玫瑰色，無生活力的花粉為黃色或無色，連續(xù)觀察3～4個視野，分別記錄有生活力及無生活力的花粉數(shù)。六、作業(yè)：1.描述不同種類花粉形態(tài)；記錄有生活力及無生活力花粉的顏色。2．計算2種有生活力花粉的百分率。3.統(tǒng)計不同測定方法有生活力花粉的百分率。3．比較不同測定方法有生活力花粉的百分率，分析其差異原因。

備注：花粉自備?；ǚ垭婄R照片瑞士攝影師馬丁-奧格里利(MartinOeggerli)用掃描電子顯微鏡拍攝的花粉照片百合花的花粉捕蠅草的花粉瑞士攝影師馬丁-奧格里利(MartinOeggerli)用掃描電子顯微鏡拍攝的花粉照片水浮蓮的花粉木棉樹的花粉瑞士攝影師馬丁-奧格里利(MartinOeggerli)用掃描電子顯微鏡拍攝的花粉照片花錦葵屬植物的花粉瑞士攝影師馬丁-奧格里利(MartinOeggerli)用掃描電子顯微鏡拍攝的花粉照片樺樹的花粉瑞士攝影師馬丁-奧格里利(MartinOeggerli)用掃描電子顯微鏡拍攝的花粉照片柳樹花粉粒瑞士攝影師馬丁-奧格里利(MartinOeggerli)用掃描電子顯微鏡拍攝的花粉照片爵床屬植物的花粉瑞士攝影師馬丁-奧格里利(MartinOeggerli)用掃描電子顯微鏡拍攝的花粉照片榿木(樺樹家族成員)的花粉瑞士攝影師馬丁-奧格里利(MartinOeggerli)用掃描電子顯微鏡拍攝的花粉照片松樹的花粉瑞士攝影師馬丁-奧格里利(MartinOeggerli)用掃描電子顯微鏡拍攝的花粉照片銀葉樹花粉瑞士攝影師馬丁-奧格里利(MartinOeggerli)用掃描電子顯微鏡拍攝的花粉照片鳳梨科植物的花粉瑞士攝影師馬丁-奧格里利(MartinOeggerli)用掃描電子顯微鏡拍攝的花粉照片銀葉樹花粉瑞士攝影師馬丁-奧格里利(MartinOeggerli)用掃描電子顯微鏡拍攝的花粉照片天竺葵柱頭上的花粉粒瑞士攝影師馬丁-奧格里利(MartinOeggerli)用掃描電子顯微鏡拍攝的花粉照片蒂氏莢蒾花粉（灰色)其中一個已開始萌發(fā)瑞士攝影師馬丁-奧格里利(MartinOeggerli)用掃描電子顯微鏡拍攝的花粉照片勿忘草的花粉最小的花粉粒之一，直徑只有0