分光光度法測(cè)定對(duì)乙酰氨基酚

分光光度法測(cè)定對(duì)乙酰氨基酚

乙酰氨酚（app）也被稱為醋氨酚，是一種抗熱和疼痛的化學(xué)成分。這種化學(xué)被稱為n-（4-羥基苯基）乙酰胺（圖1）。它是一種白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末,無臭,味微苦,在熱水或乙醇中易溶,在丙酮中溶解,幾乎不溶于冷水或石油醚。對(duì)乙酰氨基酚是一種常用的解熱鎮(zhèn)痛藥,其解熱作用緩慢而持久,與阿司匹林相比,具有刺激性小、極少有過敏反應(yīng)等優(yōu)點(diǎn)。此外,它用途廣泛,可用于藥物撲炎痛的合成、作為有機(jī)合成中間體如:新型祛痰藥鹽酸氨溴索,鎮(zhèn)痛藥丙帕他莫等、照相用化學(xué)藥品和過氧化氫的穩(wěn)定劑等。目前,對(duì)乙酰氨基酚是已成為全世界應(yīng)用最廣泛的藥物之一,是國(guó)際醫(yī)藥市場(chǎng)上頭號(hào)解熱鎮(zhèn)痛藥。APAP的合成方法很多,一般可分為二步法和一步法,傳統(tǒng)的二步法是將對(duì)硝基苯酚(簡(jiǎn)稱PNP)等原料還原成對(duì)氨基苯酚(簡(jiǎn)稱PAP),再酰化成APAP。一步法是在同一反應(yīng)器中,不分離出還原產(chǎn)物PAP的情況下直接進(jìn)行酰化合成APAP,還原與?；瑫r(shí)進(jìn)行的合成路線。近年來,隨著APAP的新用途的開發(fā),其需求量相應(yīng)的增加,原有的生產(chǎn)工藝和生產(chǎn)規(guī)模已經(jīng)不能滿足當(dāng)前的需要。因此開發(fā)新的工藝提高其產(chǎn)量,減少環(huán)境污染成為亟待解決的問題。對(duì)于二步法無論如何改進(jìn)PAP的生產(chǎn)方法,都難以克服其生產(chǎn)過程中以及精制PAP所產(chǎn)生的大量三廢污染。此外分離出來的PAP極易被氧化,這將降低APAP的產(chǎn)率。采用一步法,在不分離出PAP的情況下直接進(jìn)行?；墙鉀Q上述問題的理想方法。我國(guó)現(xiàn)在生產(chǎn)APAP大都采用PNP鐵粉還原,?；?。發(fā)達(dá)國(guó)家采用了加氫工藝代替鐵屑還原。特別是催化加氫一步合成工藝,具有生產(chǎn)工序少,產(chǎn)品收率高,節(jié)省能源,環(huán)境污染小,生產(chǎn)成本低等特點(diǎn)。但由于Pt、Pd等催化劑昂貴,無疑將提高生產(chǎn)成本。若能用較廉價(jià)的催化劑(如鎳等)進(jìn)行一步合成勢(shì)必成為最有發(fā)展前途的合成工藝。此外還有重排法和生化合成等其它路線。對(duì)羥基苯乙酮肟重排法是一個(gè)環(huán)境友好的新型合成工藝,沒有副產(chǎn)物產(chǎn)生,產(chǎn)品后處理簡(jiǎn)單,生產(chǎn)成本低,對(duì)于提高對(duì)乙酰胺基酚生產(chǎn)企業(yè)工藝水平,降低成本,減少污染,促進(jìn)發(fā)展具有重要意義,因此,極具推廣和應(yīng)用價(jià)值。本實(shí)驗(yàn)采用的藥片是對(duì)乙酰氨基酚片,對(duì)乙酰氨基酚片是一種解熱鎮(zhèn)痛類的非處方藥藥品。對(duì)乙酰氨基酚作為對(duì)乙酰氨基酚片藥品中含量的一種重要活性成分,極具有研究意義。本次研究對(duì)該藥品中對(duì)乙酰氨基酚含量的測(cè)定做一個(gè)方法考察,目的是尋找出一種簡(jiǎn)便、快速、高效、經(jīng)濟(jì)測(cè)定對(duì)乙酰氨基酚片中對(duì)乙酰氨基酚含量的方法。從而讓人們更加了解該藥品,更好地使用對(duì)乙酰氨基酚片。目前普遍應(yīng)用的測(cè)定對(duì)乙酰氨基酚含量的方法有很多種,如分光光度法、亞硝酸鈉法、高效氣相色譜法、電化學(xué)方法等,但除了分光光度法外,其他操作方法麻煩、測(cè)定時(shí)間長(zhǎng)。本實(shí)驗(yàn)在這些測(cè)定方法的基礎(chǔ)上,利用亞硝基鐵氰化鈉試液為顯色劑,將分光光度法應(yīng)用于“對(duì)乙酰氨基酚片”中對(duì)乙酰氨基酚含量的測(cè)定。1實(shí)驗(yàn)部分1.1試劑:酚、apap721可見光分光光度計(jì),上海菁華科技儀器有限公司;電子分析天平;對(duì)乙酰氨基酚/APAP(AR);鹽酸(AR,36%～38%),廉江市愛廉化試劑有限公司,500mL;亞硝基鐵氰化鈉(化學(xué)純),廣州化學(xué)試劑廠,25mg;無水碳酸鈉(AR),中國(guó),天津市巴斯夫化工有限公司,500g;對(duì)乙酰氨基酚片。1.2溶液的制備1.2.1na2co3溶液的制備準(zhǔn)確稱取Na2CO35.3035g,置于1000mL容量瓶中,加純水標(biāo)定至刻度,搖勻。1.2.2解液的制備。在聯(lián)通的基礎(chǔ)上,把解水床打造成水浴用水浴熱。在添加鹽酸7.準(zhǔn)確稱取對(duì)乙酰氨基酚0.1023g,置于100mL的燒杯中,加濃鹽酸10mL,純水10mL,在70℃水浴加熱75min,冷卻至室溫,將水解液轉(zhuǎn)移到1000mL的容量瓶中。用Na2CO3溶液稀釋至刻度,搖勻。1.2.3顯色劑1%亞硝基鐵氰化鈉的制備準(zhǔn)確稱取Na2CO31.0019g,亞硝基鐵氰化鈉1.0043g,置于100mL容量瓶中加純水標(biāo)定到刻度,搖勻。1.3對(duì)氨基酚溶液先以一定濃度的對(duì)乙酰氨基酚溶液充分水解全部生成對(duì)氨基酚溶液,對(duì)氨基酚溶液在堿性條件下與亞硝基鐵氫化鈉試劑作用,生成藍(lán)色配位化合物。利用721-分光光度計(jì)測(cè)定其波長(zhǎng)確定最大吸收,并通過分光光度計(jì)進(jìn)行條件優(yōu)化,依據(jù)比爾定律繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。2結(jié)果與討論2.1顯色劑的選擇精確吸取對(duì)乙酰氨基酚溶液100mL,放入1000mL的容量瓶中,加水至刻度線,搖勻,定為溶液(Ⅰ)。精確吸取溶液(Ⅰ)各5mL,分別放入兩支25mL的比色管中,在一支比色管中加入0.7mL的顯色劑使溶液由淡黃色變成靛藍(lán)色,加水標(biāo)定至刻度,此為樣品溶液。另一支未加顯色劑的溶液,加水標(biāo)定至刻度為空白。在721-分光光度計(jì)上測(cè)定波長(zhǎng)范圍,選擇出最大波長(zhǎng),如圖2所示。由圖2可看出對(duì)氨基酚顯色液在700nm有最大吸收峰,因此本實(shí)驗(yàn)選擇700nm為測(cè)定波長(zhǎng)。2.2加標(biāo)回收、搖勻精確吸取溶液(Ⅰ)各5mL,依次放入10支25mL的比色管中。分別加入顯色劑0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0mL,再分別加水至刻度線,搖勻。再吸取溶液(Ⅰ)5mL放入比色管加水至刻度作為空白對(duì)照。利用721-分光光度計(jì)于700nm波長(zhǎng)處測(cè)定其吸收度以確定顯色劑的用量,結(jié)果見圖3。由圖3可知,當(dāng)顯色劑的用量為0.7mL并繼續(xù)增加時(shí),其吸收光度變化不大,并維持在一定小范圍的數(shù)值上。本實(shí)驗(yàn)選擇顯色劑的加入量為0.7mL。2.3靜置時(shí)間的影響精確吸取溶液(Ⅰ)各5mL分別放入兩支25mL的比色管中,在一支比色管中加入0.7mL的顯色劑,使溶液由淡黃色變成靛藍(lán)色,并加入純水標(biāo)定至刻度線,此靛藍(lán)色溶液為樣品溶液,另一支未加顯色劑的溶液加水至刻度線為空白,用721-分光光度計(jì)測(cè)定其樣品溶液不同時(shí)間下(在5～40min內(nèi))的吸光度,結(jié)果見圖4。由圖4可知,當(dāng)靜置時(shí)間到25min并繼續(xù)延長(zhǎng)時(shí),吸光度值將不會(huì)有再大的增長(zhǎng),并維持穩(wěn)定。結(jié)果表明,加入顯色劑后靜置25min,其測(cè)定結(jié)果較為理想。2.4測(cè)定氨基酚含量時(shí)比對(duì)在上述最優(yōu)化條件下,按實(shí)驗(yàn)方法改變?nèi)芤褐袑?duì)氨基酚的加入量,測(cè)定吸光度并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,其測(cè)定結(jié)果見圖5。實(shí)驗(yàn)表明對(duì)氨基酚含量在3～23μg/mL時(shí)符合比爾定律,吸光度與濃度呈良好的線性關(guān)系。線性方程:A=0.1094×C[SA]+0.0077,R2=0.9973。2.5碳酸鈉溶液配制取藥品“對(duì)乙酰氨基酚片”一片,將藥品碾碎,精確稱取其質(zhì)量(2.3759g),放入100mL燒杯中,加10mL濃鹽酸,加10mL水,水浴加熱75min,置于1000mL容量瓶中,用按1.2.1的方法配制的碳酸鈉溶液標(biāo)定至刻度線。精確吸取溶液各5mL依次放入5支比色管中,加入顯色劑0.7mL,加水至刻度線,另做一份空白溶液,靜置25min后,利用721-分光光度計(jì)于700nm處,測(cè)定吸光度,其測(cè)定結(jié)果表1。由表可知,該藥品“對(duì)乙酰氨基酚片”的對(duì)氨基酚平均濃度為12.7μg/mL,最大相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.6%。2.6重現(xiàn)性及溶液穩(wěn)定性精確吸取3.5配置的溶液各5mL,分別放入兩支比色管中,一支加入0.7mL的顯色劑,加水稀釋至刻度線,另一只加蒸餾水稀釋至刻度線做空白,靜置25min,在最大吸收波長(zhǎng)700nm處,利用721-分光光度計(jì)測(cè)定其吸光度,結(jié)果見表2。由表2可知,其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.7%,實(shí)驗(yàn)表明該方法的重現(xiàn)性及溶液穩(wěn)定性良好。可以進(jìn)入下一步實(shí)驗(yàn),回收率實(shí)驗(yàn)。2.7顯色劑用量的測(cè)定由1.2.2溶液配制出濃度為0.004mg/mL的對(duì)乙酰氨基酚溶液a,并測(cè)定其吸光度,再以2.5的溶液配制出濃度為0.005、0.01、0.015mg/mL并標(biāo)記為A,B,C三組溶液。精確吸取a溶液各5mL分別放入6支25mL的比色管中,另取A溶液各5mL加入比色管中,再取顯色劑各0.7mL置于5支比色管中,分別以蒸餾水標(biāo)定至刻度線,另外一支做空白對(duì)照,靜置25min,在波長(zhǎng)700nm處測(cè)定其吸光度。分別對(duì)B,C溶液做以上步驟,根據(jù)線性方程求出測(cè)得量,結(jié)果如表3。由表3可知,各個(gè)濃度的回收率在98.5%～99.5%之間,其結(jié)果表明此方法的回收率良好。3吸光度的測(cè)定