醫(yī)學(xué)免疫學(xué)檢驗(yàn)免疫熒光技術(shù)

技術(shù)支持|瀏覽次數(shù)：416|時(shí)間：-2-PriCells-免疫熒光技術(shù)technique）免疫熒光技術(shù)（Immunofluorescencetechnique）異硫氰酸熒光素(fluoresceinisothiocyanate,FITC)：FITC異構(gòu)體Ⅰ型在效率、穩(wěn)定性與蛋白質(zhì)結(jié)合力等方面都更優(yōu)良。FITC389.4，490～495nm，520～530nm，呈現(xiàn)明亮的黃綠色熒光。FITC570nm，595～600nm，呈現(xiàn)橘紅色熒光。(tetramethylrhodamineisothiocynate,TRITC)：TRITC620nm，F(xiàn)ITC3（Eu3）、鋱（藻紅蛋白（P-phycoerythrin，PE）：PE564nm，488nm576nm，對(duì)于多甲藻葉綠素蛋白35kD，490nm488nm677nm。FL3PerCP。碘化丙啶（propidiumiodide，PI）：可選擇性地嵌入核酸DNA、RNA）DNARNaseRNADNA488nmFITC：黃色結(jié)晶粉末，吸取光：490~495nm，520~530nm，TRITC：550nm，620nm，o鑭系：Eu、PE：490～560nm，595nm，紅色熒光HRPHPA二聚體便形成含有強(qiáng)熒光的物質(zhì)。例如，4-甲基傘酮-β-Dβ-半乳4450nm。其它如堿性磷酸酶的底物4根過(guò)氧化物酶的底物對(duì)羥基苯乙酸等。鑭系螯合物某些3含有與蛋白質(zhì)形成共價(jià)鍵的化學(xué)基團(tuán)熒光效率高，標(biāo)記后下降不明顯熒光色澤與背景色澤對(duì)比鮮明標(biāo)記辦法簡(jiǎn)樸、快速CDC抗原的細(xì)胞，未損傷，不染色，為陰性反映。二.實(shí)驗(yàn)環(huán)節(jié)1.PBS5%PBS3-0-10%可疑陽(yáng)性反映(±)11-20%21-50%陽(yáng)性反映(++)死細(xì)胞占51-80%81-100%性反映。闡明CDC驗(yàn)必須要有抗原、抗體、補(bǔ)體共同參加。②.第②構(gòu)成陰性的因素：實(shí)驗(yàn)中加入抗體、LC。由于無(wú)抗原和補(bǔ)，呈陰性反映。闡明CDC實(shí)驗(yàn)必須要有補(bǔ)體的參加LC，既無(wú)抗原抗體免疫復(fù)合CDC類反映稱為凝集反映(agglutination)ug/mlγIg術(shù)3H、51Cr、32P、125I、HRP、1行。缺點(diǎn):每檢查一種抗原必須制備對(duì)應(yīng)的熒光抗體。2性熒光容易增多。3(二)流式細(xì)胞術(shù)DNA、RNA、蛋白質(zhì)和細(xì)胞體積等)進(jìn)行多(三