特殊毒性實驗

特殊毒性實驗1(三)特殊毒性試驗123致突變試驗致癌試驗發(fā)育毒性和致畸作用試驗(三)特殊毒性試驗化學(xué)毒物體細(xì)胞生殖細(xì)胞致突變作用后果親代子代致癌畸胎衰老動脈硬化未知疾病致畸致死存活負(fù)荷第一節(jié)：致突變試驗(三)特殊毒性試驗第一節(jié)：致突變試驗鼠傷寒沙門菌營養(yǎng)缺陷型回復(fù)突變實驗哺乳動物細(xì)胞基因突變試驗致突變試驗12345染色體畸形分析小鼠骨髓細(xì)胞微核試驗單細(xì)胞凝膠電泳技術(shù)(三)特殊毒性試驗鼠傷寒沙門菌營養(yǎng)缺陷型回復(fù)突變實驗〔Ames試驗〕原理組氨酸缺陷型菌(his-)野生型菌株(his+)正向突變回復(fù)突變誘導(dǎo)作用某化學(xué)物(三)特殊毒性試驗鼠傷寒沙門菌營養(yǎng)缺陷型回復(fù)突變實驗〔Ames試驗〕原理(三)特殊毒性試驗Ames試驗結(jié)果評定陽性：誘發(fā)回變菌落數(shù)/自發(fā)回變菌落數(shù)≥2有劑量-反響關(guān)系或至少某一測試點有重復(fù)并有統(tǒng)計學(xué)意義結(jié)果應(yīng)是至少兩次獨立試驗的重復(fù)結(jié)果只要在一種試驗菌株得到陽性結(jié)果，即認(rèn)為受試物是致突變物；僅當(dāng)四種試驗菌株均得到陰性結(jié)果，才認(rèn)為受試物是非致突變物(三)特殊毒性試驗小鼠骨髓細(xì)胞微核試驗微核：染色體無著絲點斷片或因紡錘體受損傷而喪失的整個染色體在細(xì)胞分裂的后期仍留在子細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi)，成為一個或幾個規(guī)那么的次核常用嚙齒類動物骨髓多染紅細(xì)胞(PCE)微核試驗。PCE是紅細(xì)胞成熟的一個階段，此時有的紅細(xì)胞的主核已排出，微核容易辯認(rèn)觀察的遺傳學(xué)終點：染色體完整性改變和染色體別離改變(三)特殊毒性試驗小鼠骨髓細(xì)胞微核試驗Break

or

loss(三)特殊毒性試驗小鼠骨髓細(xì)胞微核試驗(三)特殊毒性試驗單細(xì)胞凝膠電泳試驗〔彗星試驗〕(三)特殊毒性試驗單細(xì)胞凝膠電泳試驗〔彗星試驗〕(三)特殊毒性試驗第二節(jié)：致癌試驗哺乳動物細(xì)胞體外惡性轉(zhuǎn)化試驗哺乳動物長期致癌試驗體外細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗是檢測受試物對體外培養(yǎng)的哺乳動物細(xì)胞轉(zhuǎn)化的遺傳毒理試驗。是將動物細(xì)胞在體外培養(yǎng)的環(huán)境下，將細(xì)胞暴露于致癌物，高度模擬致癌物在體內(nèi)致癌的作用進(jìn)行致癌物檢測的一種技術(shù)，可以有效的體外篩查致癌物質(zhì)的致癌活性。長期致癌試驗常規(guī)選用大鼠和小鼠，剛離乳的實驗動物。設(shè)三個試驗組。以最大耐受劑量〔MTD〕為高劑量。原那么上試驗期限要求長期或終生，一般小鼠1.5年，大鼠2年。觀察有無腫瘤出現(xiàn)、腫瘤出現(xiàn)時間及死亡時間。(三)特殊毒性試驗第二節(jié)：致癌試驗動物選擇大鼠小鼠（剛離乳）劑量分組3個組每組雌雄各50只途徑期限小鼠1.5年大鼠2年結(jié)果分析腫瘤出現(xiàn)時間動物死亡時間病理學(xué)特征腫瘤發(fā)生率(三)特殊毒性試驗第三節(jié)：發(fā)育毒性和致畸作用試驗沙利度胺〔反響停〕事件(三)特殊毒性試驗1957年10月Thalidomide正式投放歐洲市場，不久進(jìn)入市場，在此后的不到一年內(nèi)，反響停風(fēng)行歐洲、非洲、澳大利亞和拉丁美洲，作為一種“沒有任何副作用的抗妊娠反響藥物〞，成為“孕婦的理想選擇〞。反響停事件是藥物史上的悲劇，因服用反響停而導(dǎo)致的畸形嬰兒據(jù)保守估計大約有8000人，還導(dǎo)致大約5000到7000個嬰兒在出生前就已經(jīng)因畸形死亡。(三)特殊毒性試驗反響?！睺halidomide〕(三)特殊毒性試驗第三節(jié)：發(fā)育毒性和致畸作用試驗(三)特殊毒性試驗致畸作用發(fā)育生物體死亡著床前死亡，早期死亡晚期死亡生長改變即生長遲緩生長發(fā)育指標(biāo)比正常對照低結(jié)構(gòu)異常指胎兒形態(tài)結(jié)構(gòu)異常即畸形功能缺陷包括器官系統(tǒng)、生化免疫等功能的變化(三)特殊毒性試驗12345著床前期器官形成期胎兒期圍產(chǎn)期新生兒發(fā)育(三)特殊毒性試驗反響停的敏感期：末次月經(jīng)后第34到50天第35-37天：耳朵畸形和聽力缺失第39-41天：胎兒上肢缺失第43-44天：雙手成海豹樣3指畸形第46-48天：胎兒拇指畸形(三)特殊毒性試驗第三節(jié)：發(fā)育毒性和致畸作用試驗傳統(tǒng)實驗體外篩選試驗三段生殖毒性試驗(三)特殊毒性試驗動物選擇大鼠家兔劑量分組3劑量組每組受孕雌性動物15-20只動物交配1:1或1:2大鼠第6天給受試物持續(xù)到第15天胎仔檢查外觀內(nèi)臟軟組織骨骼畸胎出現(xiàn)率結(jié)果評定傳統(tǒng)實驗(三)特殊毒性試驗體外篩選試驗大鼠全胚培養(yǎng)器官培養(yǎng)胚胎細(xì)胞微團(tuán)培養(yǎng)水螅培養(yǎng)(三)