我國大劣按蚊及其傳瘧作用的研究進展

我國大劣按蚊及其傳瘧作用的研究進展

中國已知的蚊媒疾病包括瘧疾、淋巴腺疾病、登甲熱、出血熱和乙型腦炎。它們的媒介研究已有綜述介紹。本文著重補充近10年這方面研究的進展。1蚊、大劣按蚊、私家車種我國瘧疾的重要媒介是嗜人按蚊(AnophelesanthropophagusXuetFeng,1975)、中華按蚊(An.sinensisWiedemann,1828)、大劣按蚊(An.dirusPeytonetHarrison,1979)和微小按蚊(An.minimusTheobald,1901)。此外,昆明按蚊(An.kunmingensisDongetWang1985)被認為是滇西南高原的媒介。最近對于以上媒介的分類地位和型別有了不少研究。1.1中華按蚊屬genussp.這兩種按蚊和下述昆明按蚊以及最近記述的筠連按蚊(An.junlianensisLei,1996)等,都是我國赫坎按蚊復合體(An.hyrcanuscomplex)成員。嗜人按蚊一直被視作中華按蚊,直到上一世紀50年代末起,才通過形態(tài)比較、雜交、DNA限制性酶切片段長度差異、DNA探針等研究,予以明確區(qū)分。最近,馬雅軍等通過rDNA轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)2區(qū)(rDNA-ITS2)序列研究,更進一步證明它是一個獨立種。有意義的是,應(yīng)用此方法對陜西、山東、遼寧等12個不同地點采集的中華按蚊檢測結(jié)果,遼寧(法庫、沈陽)和山東(濟寧)標本中有的是嗜人按蚊,而這種按蚊認為的分布北限為北緯34°。1.2大劣按蚊的分類和傳播大劣按蚊是一個包括A、B、C、D、E型以及林棲按蚊(An.nemophilousPeytonetRamalingam,1988)和高砂按蚊(An.takasagoensisMorishita,1946)的復合體,我國對大劣按蚊的分類地位和傳瘧作用已有綜合介紹。通過核型、卵的電鏡掃描以及rDNA-ITS2片段PCR擴增,已知我國大劣按蚊存在有A和D兩型。海南島的大劣按蚊屬A型,是該島叢林和山麓瘧疾的主要媒介,有很高的媒介效能;云南省的是D型,也有瘧原蟲自然腺感染雌蚊發(fā)現(xiàn),表明在當?shù)匾财鸬蒋懠矀鞑プ饔?。這兩型可用聚合酶鏈反應(yīng)方法來區(qū)分,比較簡便和可靠。A型和D型rDNA-ITS2種特異片段PCR擴增的結(jié)果,分別出現(xiàn)374bp和663bp單一清晰條帶。大劣按蚊在我國廣西南部也有分布,但對種型尚缺乏研究。1.3形態(tài)和酶譜的研究早在上一世紀50年代,我國已發(fā)現(xiàn)海南島和大陸的微小按蚊存在嗜血性和棲性上的差異,即海南島的主吸人血并內(nèi)棲,而大陸的則不同程度地吸取家畜血液和外棲,這種差別也反映在它們的媒介效能。1959~1960年,海南全島進行了防制這種按蚊的六六六和DDT室內(nèi)滯留噴灑,獲得很好的效果,此后一段期間內(nèi)它接近絕跡。但是從70年代起,在該島有些地區(qū)數(shù)量逐漸增加,種群結(jié)構(gòu)也有所變化。這顯然是受殺蟲劑選擇的結(jié)果。俞淵、李明馨根據(jù)形態(tài)和生活習性以及同功酶帶型的區(qū)別,提出我國的微小按蚊可分為A和B兩型。最近王學忠等比較了云南省5個地理株微小按蚊酯酶同功酶譜的結(jié)果,各地理株之間酶譜存在一定差異;其中4個地理株進行隨機擴增多態(tài)DNA分析,也表明不同地理株存在遺傳分化。王學忠等還進行了微小按蚊、烏頭按蚊(An.aconitusDoentz1912)和溪流按蚊(An.fluviatilisJames,1902)同樣酶譜比較,認為這3種按蚊各有穩(wěn)定的酶帶,可以根據(jù)Rm值予以區(qū)分。最近,王學忠等(未發(fā)表資料)更對云南5個地理株和泰國(清邁)的微小按蚊進行了rDNA-ITS2序列比較,結(jié)果發(fā)現(xiàn)云南微小按蚊存在A和C型。1.4基于結(jié)構(gòu)和形態(tài)特征的同源性分析康萬民等已經(jīng)報道,昆明按蚊與涼山按蚊(An.liangshanensisKang,TanetCao1981)雜交能育,F1涎腺染色體也聯(lián)合。最近馬雅軍等比較了這兩種按蚊rDNA-ITS2序列的差異和主要形態(tài)特征的變化幅度,發(fā)現(xiàn)它們8個樣本rDNA-ITS2序列同源性為97.1%~99.8%。昆明按蚊的形態(tài)特征,特別如幼蟲頭毛2-C的分叉,也與涼山按蚊交叉重疊,表明兩者之間無明確與穩(wěn)定的鑒別特征。因此,他們認為昆明按蚊實系涼山按蚊的同物異名。此外,馬雅軍等更進行了遼寧、山東和韓國的八代按蚊(An.yatsushiroensisMiyazaki,1951)與四川筠連按蚊(An.junlianensisLei,1996)rDNA-ITS2序列差異分析,發(fā)現(xiàn)兩者序列的同源性高達96.2%~99.8%。因而認為筠連按蚊可能是八代按蚊的同物異名。2種類型和種數(shù)對種蚊的種子分析我國馬來絲蟲病的主要媒介是嗜人按蚊和中華按蚊。這兩種按蚊研究的進展已如上述。班氏絲蟲病的主要媒介是淡色庫蚊(CulexpipienspallensCoquillett,1898)和致倦庫蚊(Cx.pipiensquinquefasciatusSay,1823)。它們以及尖音庫蚊指名亞種(Cx.pipienspipiensLinnaeus,1758)和最近發(fā)現(xiàn)的騷擾庫蚊(Cx.pipiensmolestusForskal,1775),都屬尖音庫蚊復合體(Cx.pipienscomplex)。趙彤言、陸寶麟以及趙彤言、周方等建立了這4成員的實驗室種群,對它們進行了雜交、單糖、表皮碳氫化合物以及脂肪酸的氣相色譜分析、雄蚊陽莖DV/D和幼蟲形態(tài)數(shù)值分析等一系列的研究,闡明了我國尖音庫蚊是包括4個亞種的復合體,致倦庫蚊并非如國外學者看作的獨立物種,淡色庫蚊也不是有些學者認為的尖音庫蚊和致倦庫蚊的“中間型”。最近,宋社吾等(未發(fā)表資料)對這4個亞種試用rDNA-ITS2序列比較,發(fā)現(xiàn)它們之間序列的差異未能反映亞種的關(guān)系。3致倦庫蚊對登革病毒的不致感我國登革熱的媒介是埃及伊蚊(AedesaegyptiLinnaeus,1762)和白紋伊蚊[Ae.albopictus(Skuse,1894)]。這方面研究的最新進展是澄清了致倦庫蚊對登革病毒的易感性問題。早期國外研究表明,它對登革病毒不易感,并非登革熱的媒介。我國臺灣的致倦庫蚊對4個型登革病毒的實驗傳播的結(jié)果也是陰性。但是在我國近年本病的流行中,海南和廣州曾從這種庫蚊分離到登革病毒(DEN-2,DEN-3)。李雪東、趙桂芳(1985)報告,小鼠被人工感染登革病毒的這種庫蚊刺叮后,可以產(chǎn)生登革熱抗體,因而認為不能排除它傳播登革病毒的可能。由于目前登革熱的發(fā)生和流行,端賴其媒介的防制,而致倦庫蚊又是廣布亞熱帶和熱帶以及我國北緯32°~34°以南的常見蚊種,因而其對登革病毒的易感性問題,重又引起國內(nèi)外有關(guān)學者的注意。他們研究的結(jié)果都表明致倦庫蚊對登革病毒并不易感。最近董言德等用白紋伊蚊為對照,對這種庫蚊進行了人工感染登革病毒(DEN-2)的研究,包括病毒分離以及與上述李雪東等相似的實驗,結(jié)果不僅未能從它分離到病毒,而且也未能重復李雪東等的結(jié)果,進一步證明致倦庫蚊不能起傳播登革病毒的作用。此外,謝超(未發(fā)表資料)在研究蚊蟲感染登革病毒機理中,也從病毒在蚊體內(nèi)的定位以及中腸分離病毒等,同樣證明致倦庫蚊對DEN-2不易感,而且證實是受中腸屏障的阻礙。根據(jù)上述最近國內(nèi)外研究的結(jié)果,可以認為致倦庫蚊不能成為登革熱的媒介,從而在登革熱的防制中仍應(yīng)著重于對兩種伊蚊媒介的控制。4關(guān)于中國蚊的研究的幾點建議我國近10年在瘧疾、淋巴絲蟲病和登革熱/登革出血熱媒介的研究雖然有了不少進展,但也為今后這方面的研究提出了一些值得注意和需要進一步研究的問題。(1)赫坎按蚊復合體是我國最復雜的種團。我國從1975年以來共記述了9個新種,其中8個屬于這個復合體。這些新種的記述主要根據(jù)形態(tài)、甚至微小的區(qū)別,因而有的已確證為一種的同物異名。以上特征雖然是一般蚊類鑒別的基礎(chǔ),但對于復合體內(nèi)的親緣種,從上述昆明按蚊和筠連按蚊的例子來看,顯然單靠一些形態(tài)的區(qū)別是不夠的。對于蚊蟲復合體,特別是這一復雜的復合體尚需進行形態(tài)、生態(tài)、雜交以及應(yīng)用現(xiàn)代技術(shù)進行比較系統(tǒng)的研究,以期對它獲得全面的認識。(2)微小按蚊在我國的分布很廣,已知海南和大陸不同地區(qū)的在形態(tài)和習性等方面有較大差異。國外學者認為泰國的屬A和C型,我國云南的為B型。上述王學忠等根據(jù)rDNA-ITS2序列差異,發(fā)現(xiàn)我國云南的存在A和C型,這比俞淵提出的A和B型更有意義。但是我國這種按蚊作為一個復合體的研究還不多。它也需要與赫坎按蚊復合體一樣,作進一步的系統(tǒng)研究。(3)微小按蚊和溪流按蚊由于早昔提出的前緣脈有無分脈前白斑、雌蚊觸須亞端黑環(huán)的寬度等區(qū)分特征的個體變異較大,例如同一微小按蚊雌蚊的后代可同時出現(xiàn)有和無分脈前白斑的個體,因而它們的區(qū)分一直存在實際的困難。最近許錦江等(1998年)進行了這兩種按蚊的形態(tài)比較,認為有無分脈前白斑以及分脈前白斑與分脈暗斑長度的比例是兩者區(qū)分的重要特征,看來同樣不能解決上述問題。王學忠等(2000)對它們酯酶同功酶研究結(jié)果,認為兩者可以根據(jù)酶譜帶型和Rm值作區(qū)分。但值得一提的是,酯酶同功酶酶譜比較也并不穩(wěn)定。例如陳本等和王學忠等報告的同一單位提供的同一思茅株的酯酶同功酶酶譜就有較大不同。同時,這兩種按蚊雜交可以產(chǎn)生健壯的子代,子代形態(tài)也無固定母體特征。因此,我國有無溪流按蚊,或溪流按蚊的分類地位,尚待澄清。(4)我國乙腦的主要媒介三帶喙庫蚊(Cx.tritaeniorhynohusGiles,1901)也是一個復合體。作為一個重要媒介蚊種,也需要作比較系統(tǒng)的研究。(5)從上一世紀末葉起,國外已開始應(yīng)