一 營養(yǎng)與食品衛(wèi)生學(xué)的研究內(nèi)容與方法

./111一營養(yǎng)與食品衛(wèi)生學(xué)的研究容與方法〔一營養(yǎng)學(xué)的研究容1.食物營養(yǎng)2.人體營養(yǎng)3.公共營養(yǎng)〔二食品衛(wèi)生學(xué)的研究容1.食品的污染問題2.食品及其加工技術(shù)的衛(wèi)生問題3.食源性疾病及食品安全評價體系的建立4.食品衛(wèi)生監(jiān)督管理〔三營養(yǎng)與食品衛(wèi)生學(xué)研究方法1.實驗研究：〔1離體實驗〔invitro〔2整體實驗〔invivo2.人群研究：〔1人群志愿者的實驗研究〔2人群流行病學(xué)調(diào)查〔3意外事故或突發(fā)事件的人群研究二動物實驗方法一般來說,動物實驗的研究工作應(yīng)該明確描述：〔1研究的目的和/或者需要驗證的假說?！?選擇特定動物模型的原因?！?動物種、品系、來源和類型?！?每個獨立實驗,包括研究設(shè)計和使用動物數(shù)量?！?數(shù)據(jù)分析所用的統(tǒng)計學(xué)方法。步驟的詳細描述〔一動物實驗的分類1、確證性的實驗：用一種最大可能,正確解答問題的系統(tǒng)方法,收集有關(guān)處理實施后動物反應(yīng)的科學(xué)數(shù)據(jù)。2、探索性的實驗：為產(chǎn)生新的假說提供素材。這兩類實驗都涉及在實驗人員的控制下,對動物施加一定的處理或操作,來發(fā)現(xiàn)是否處理在實驗對象上引起一定的反應(yīng),或者對這種反應(yīng)進行定量。3、檢驗性實驗：是觀察性的實驗,用于發(fā)現(xiàn)科研人員不能控制的變量之間的聯(lián)系。這種聯(lián)系可能是暫時的也可能是長期的。實驗設(shè)計的主要目的一是保證所測變量的任何差異是由處理造成的,而不是其他非對照變量引起；另一個目的是通過控制確定的變量在盡可能小的圍,減少所測反應(yīng)的變異性,這樣對處理效應(yīng)的評介更準(zhǔn)確?！捕游飳嶒灥?R原則1．減量化原則

減量化原則<<reduce>,要求用較少的原料和能源投入來達到既定的生產(chǎn)目的或消費目的,進而到從經(jīng)濟活動的源頭就注意節(jié)約資源和減少污染。減量化有幾種不同的表現(xiàn)。在生產(chǎn)中,減量化原則常常表現(xiàn)為要求產(chǎn)品小型化和輕型化。此外,減量化原則要求產(chǎn)品的包裝應(yīng)該追求簡單樸實而不是豪華浪費,從而達到減少廢物排放的目的。

2．再使用原則

再使用原則<<reuse>,要求制造產(chǎn)品和包裝容器能夠以初始的形式被反復(fù)使用。再使用原則要求抵制當(dāng)今世界一次性用品的泛濫,生產(chǎn)者應(yīng)該將制品及其包裝當(dāng)作一種日常生活器具來設(shè)計,使其像餐具和背包一樣可以被再三使用。再使用原則還要求制造商應(yīng)該盡量延長產(chǎn)品的使用期,而不是非常快地更新?lián)Q代。

3．再循環(huán)原則

再循環(huán)原則<recycle>,要求生產(chǎn)出來的物品在完成其使用功能后能重新變成可以利用的資源,而不是不可恢復(fù)的垃圾。按照循環(huán)經(jīng)濟的思想,再循環(huán)有兩種情況,一種是原級再循環(huán),即廢品被循環(huán)用來產(chǎn)生同種類型的新產(chǎn)品,例如報紙再生報紙、易拉罐再生易拉罐等等；另一種是次級再循環(huán),即將廢物資源轉(zhuǎn)化成其它產(chǎn)品的原料。原級再循環(huán)在減少原材料消耗上面達到的效率要比次級再循環(huán)高得多,是循環(huán)經(jīng)濟追求的理想境界。〔三實驗動物的選擇一、

藥理學(xué)研究中的選擇1、

臨床藥物代動物學(xué)研究：首選動物及性別,應(yīng)盡量與藥效量或毒理學(xué)研究所用動物一致。

藥物動力學(xué)參數(shù)測定：最好使用犬、猴子等大動物,可在同一動物上多次采樣。

藥物分布實驗：大、小鼠較方便。

藥物排泄試驗：一般首選大鼠,膽汁采集可在乙醚麻醉,膽管插管引流。2、

一般藥理研究：主要藥效作用以外廣泛藥理作用的研究。

動物：小鼠、大鼠、貓、犬等性別不限。3、

作用于神經(jīng)系統(tǒng)的藥物研究：

促智藥：成年大小鼠一般應(yīng)用幼年、老年鼠。

鎮(zhèn)靜催眠藥：成年小鼠便于分組。

抗痛藥：成年大小鼠,以雄性為宜。

鎮(zhèn)痛藥：需在整體動物上進行,常用成年小鼠、兔,也可用豚鼠、犬等,雌雄兼用。

中樞性肌松藥：小鼠、貓。

解熱藥：首選兔。兔：品種、年齡、室溫、動物活動情況等不同,對發(fā)熱反應(yīng)速度和程度有明顯影響,應(yīng)按藥典規(guī)定進行。

神經(jīng)節(jié)傳導(dǎo)阻滯影響藥物：首選貓,最常用的是頸神經(jīng)節(jié),因其前后部易于區(qū)分。4、

心血管系統(tǒng)的藥物研究：

抗心肌缺血藥：狗、貓、兔、大小鼠。

抗心率失常藥：豚鼠。小鼠不便操作。

降壓藥：狗、貓、大鼠。不宜用兔：外周循環(huán)對外界環(huán)境刺激極敏感,血壓變化大。

治療心功能不全藥：狗、貓、豚鼠、兔。一般不用大鼠。

降血脂藥：大鼠、兔。模型動物：遺傳性高脂血癥WHHL兔。

抗動脈粥樣硬化藥：一般用兔、鵪鶉。

抗血小板聚集藥、抗凝血藥：大鼠、兔,個別也可用小鼠。5、

呼吸系統(tǒng)藥物：

鎮(zhèn)咳藥篩選：首選豚鼠,對化學(xué)刺激或機械刺激都很敏感。貓：生理條件下很少咳嗽,可用于刺激喉上神經(jīng)誘發(fā)咳嗽,在初篩基礎(chǔ)上進一步肯定藥物的鎮(zhèn)咳作用。

支氣管擴藥：常用豚鼠：氣道平滑肌對致痙劑藥物反應(yīng)敏感。大鼠：某些免疫和藥理學(xué)特點與人類較近。

祛痰藥：一般用雄性小鼠,兔、貓。

犬：適用于觀察藥物的鎮(zhèn)咳作用持續(xù)時間。

兔：對化學(xué)、電刺激不敏感。大小鼠：實驗可靠性差。6、

消化系統(tǒng)藥物：

胃腸解痙藥：大鼠、豚鼠、家兔、犬等,雌雄均可。

催吐、止吐：犬、貓、鴿等。兔、豚鼠、大鼠,無嘔吐反射,故不選用。7、泌尿系統(tǒng)藥物：

利尿、抗利尿藥：雄性大鼠或犬為好。8、分泌系統(tǒng)藥物：

腎上腺皮質(zhì)激素類藥物：大小鼠,雌雄均可。9、計生藥：

終止中期妊娠藥,子宮收縮藥：雌性大鼠、豚鼠、兔、貓。

女用避孕藥：雌性大鼠、倉鼠、兔、獼猴。

男用避孕藥：雄性近交系大鼠,獼猴。10、精神藥物：

抗焦慮藥：成年大小鼠、兔。

抗抑郁藥：大小鼠,其次為犬、豬。二、藥物安全性評價試驗1

、急性毒性

大多為半數(shù)致死量〔LD50實驗。也有不少國家對一部分藥不再要求做LD50?？晒?jié)約大量的動物和藥品。如藥物毒性很小,則進行耐受劑量實驗。常用大鼠、小鼠,最常用為封閉群動物2、長期毒性試驗

觀察連續(xù)給予受試藥物。需兩種以上的動物才能較正確地預(yù)示受試藥物在臨床上的毒性反應(yīng),常用：一種為嚙齒類大鼠,另一種為犬、猴、小型豬。大鼠:封閉群,大動物：Beagle犬。3、生殖毒性實驗：〔1一般生殖毒性試驗3個獨立試驗〔2致畸敏感期毒性試驗〔3圍產(chǎn)期毒性試驗

不同種屬動物對藥物敏感性不同至少應(yīng)用二種以上動物。

嚙齒類：小鼠、大鼠、倉鼠

非嚙齒類：兔、犬、靈長類。4、致突變及致癌試驗

長期致癌：〔1對動物要求高。常用：F344大鼠,A系小鼠,基因剔除小鼠。〔2對環(huán)境要求高；〔3排除一切其它致癌因素。5、藥物依賴性試驗

觀察期一般較長,項目較多。都采用大、小鼠及猴。6、其他毒性試驗：藥物毒性試驗及原則之一,給藥途徑必須與將采用的臨床給藥途徑相一致。

外用藥毒性:皮膚給藥?！矡o論急性、長期一般用兔、豚鼠、大鼠。

外用藥的刺激過敏試驗,豚鼠<過敏>,<大鼠皮膚不適宜>；兔,<刺激>

栓劑：年輕兔、大鼠

滴鼻劑、吸入劑：考照臨床給藥途徑,用大鼠、豚鼠、兔。眼科以兔為宜。

生物制品,生物工程產(chǎn)品：有較為嚴(yán)格種屬特異性。三動物實驗的應(yīng)用題目：Protectiveroleofpuerarinonlead-inducedalterationsofthehepaticglutathioneantioxidantsystemandhyperlipidemiainrats<一>目的：探討根素對鉛誘導(dǎo)的肝臟谷胱甘肽氧化系統(tǒng)以及老鼠高脂血癥的作用機理?！捕牧吓c方法：1材料：根素、醋酸鉛溶、LDL感受器、CYP7A1抗體、HMGR抗體、β-激動蛋白受體、雄性Wistar大鼠2方法：2.1動物分組體重170g8周齡大鼠實驗室條件下適應(yīng)后,隨即分為4組,每組10只：〔1對照組<Ctrl>：飲食無鉛水,試驗期間每天灌喂0.9%的生理鹽水〔2鉛處理組<Pb>：每天飲食500mgPb/L的水〔3鉛+根素組<Pb+Pu>：每天飲食500mgPb/L的水,灌胃200mg/<kg.day>根素。〔4根根素組<Pu>：飲食同對照組,每天灌喂200mg/<kg.day>根素。室溫23℃2.2測定指標(biāo)：每日前攝入量、血液和肝臟中的Pb含量、ALT、AST、肝臟組織學(xué)變化、肝臟ROS,TBARS、GSH、肝臟中HMGR、CYP7A1基因表達等〔三結(jié)果與分析Fig5根對鉛誘導(dǎo)的老鼠肝臟GCL、GR、Gpx及GST活性的影響GCL、GR、Gpx及GST對于保持細胞的氧化還原平衡發(fā)揮著重要作用,由圖5可以看出,鉛誘導(dǎo)后,肝臟中的GCL、GR、Gpx及GST四種酶的活性均顯著降低,而服用根素后,能使這四種酶的活性恢復(fù)到正常水平。Fig6根素對鉛誘導(dǎo)的老鼠血漿脂質(zhì)含量的影響由圖6可以看出,鉛有道能顯著增加老鼠血漿中脂質(zhì)含量,與對照組相比,膽固醇、甘油三酯及低密度值蛋白含量分別增加了1.34倍、1.32倍和1.78倍,差異顯著。而血漿中高密度脂蛋白含量降低了34%。服用根素后,血漿中的膽固醇、甘油三酯及低密度值蛋白分別降低20%、22%和45%,HDL含量增加了0.34倍,差異均達到顯著水平。結(jié)果表明,根素能抑制鉛誘導(dǎo)的老鼠高脂血癥。圖7根素對鉛誘導(dǎo)的老鼠肝臟HMGR、CYP7A1及LDL-R表達的影響A圖：根素對鉛誘導(dǎo)的老鼠肝臟脂質(zhì)代相關(guān)蛋白表達的影響B(tài)圖：LDL-R蛋白條帶的相關(guān)度分析C圖：HMGR蛋白條帶的相關(guān)度分析D圖：CYP7A1蛋白條帶的相關(guān)度分析由圖7可以看出