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第3節(jié)DNA的復制第3章基因的本質DNA聚合酶DNA聚合酶子鏈解旋酶問題探討

沃森和克里克在發(fā)表DNA雙螺旋結構的那篇著名短文的結尾處寫道:“值得注意的是,我們提出的這種堿基特異性配對方式,暗示著遺傳物質進行復制的一種可能的機制”。

1.堿基互補配對原則暗示DNA的復制機制可能是怎樣的?

暗示DNA的復制可能需要先解開DNA雙螺旋的兩條鏈,然后通過堿基互補配對合成互補鏈。問題探討

沃森和克里克在發(fā)表DNA雙螺旋結構的那篇著名短文的結尾處寫道:“值得注意的是,我們提出的這種堿基特異性配對方式,暗示著遺傳物質進行復制的一種可能的機制”。

2.這句話中為什么要用“可能”二字?這反應科學研究具有什么特點?

科學研究需要大膽的想象,但是得出結論必須建立在確鑿的證據之上。2.推測可能的復制方式。3.根據復制模式,預測實驗結果。1.DNA的復制方式是什么?演繹推理實驗驗證得出結論提出問題提出假說4.實驗、得出結論、驗證假說??茖W方法假說——演繹法

提出問題:DNA的復制方式是什么?一、對DNA復制的推測(提出假說)半保留復制全保留復制(1)從親代DNA(母鏈)去向來看,半保留復制和全保留復制有什么不同?(2)實驗的關鍵是什么?一、對DNA復制的推測半保留復制

全保留復制追蹤母鏈在子代DNA中的分布同位素標記法二、DNA半保留復制的實驗證據(1)應該怎么樣檢測子代DNA的標記情況?(2)全保留復制的子代DNA有沒有放射性?(3)半保留復制的子代DNA有沒有放射性?檢測子代DNA的放射性一半有放射性,一半沒有都具有放射性半保留復制

全保留復制能否檢測出DNA一條鏈的放射性?二、DNA半保留復制的實驗證據(4)大腸桿菌在培養(yǎng)液中分裂,DNA復制產生的子代DNA在子代大腸桿菌體內,都在同一培養(yǎng)液中,而檢測的是溶液體系總體的放射性,那這兩種培養(yǎng)液哪種可以檢測到放射性嗎?檢測放射性可以區(qū)分兩種復制方式嗎?都能檢測到放射性;不能區(qū)分。半保留復制

全保留復制能否檢測出DNA一條鏈的放射性?

要驗證上述預測,就要分別觀察親代和子代的情況,但復制后的DNA分子混合在一起,不易分離。怎么解決?二、DNA半保留復制的實驗證據半保留復制

全保留復制能否檢測出DNA一條鏈的放射性?密度梯度離心密度梯度離心科學方法DNA就會懸停在與其等密度的部位連續(xù)的CsCl濃度梯度(密度上小下大)利用DNA能吸收紫外線的特點,顯示DNA的分布二、DNA半保留復制的實驗證據(演繹推理)15N/14NDNA親代子一代子二代15N/14NDNA15N/15NDNA

14N/14NDNA14N/14NDNA15N/14NDNA

15N/14NDNA

1條重帶1條中帶1條輕帶1條中帶若DNA采用半保留復制:二、DNA半保留復制的實驗證據若DNA采用全保留復制:14N/14NDNA親代子一代子二代14N/14NDNA15N/15NDNA

15N/15NDNA14N/14NDNA15N/15NDNA

14N/14NDNA

1條重帶1條輕帶1條重帶1條輕帶1條重帶(演繹推理)科學方法在密度梯度離心中,DNA密度能自然發(fā)生改變嗎?

不能。密度變化,DNA的位置也會發(fā)生改變。

放射性同位素會自發(fā)衰變,宜選用穩(wěn)定同位素,如14N、15N。二、DNA半保留復制的實驗證據(實驗驗證)大腸桿菌在含15NH4Cl的培養(yǎng)液中培養(yǎng)若干代提取DNA,離心轉移到14NH4Cl的培養(yǎng)液中細胞分裂一次細胞分裂兩次第一代第二代提取DNA,離心提取DNA,離心1條重帶1條中帶1條輕帶1條中帶二、DNA半保留復制的實驗證據(得出結論)

DNA是以半保留的方式進行的。課前回顧

在美國生物學家梅塞爾森和斯塔爾關于DNA復制的研究中:1.研究方法:2.實驗材料:3.實驗技術:4.實驗原理:5.實驗結論:假說—演繹法大腸桿菌同位素標記技術和密度梯度離心技術只含15N的雙鏈DNA密度大,只含14N的雙鏈DNA密度小,一條鏈含14N、另一條鏈含15N的雙鏈DNA密度居中。DNA是以半保留的方式進行的。已知一條全部N原子被15N標記的DNA分子(親代),轉移到含14N的培養(yǎng)基上培養(yǎng)n代,其結果如下,回答下列問題:親代子一代子二代DNA數:________

只含15N的DNA數:________

含15N、14N的DNA數:________

只含14N的DNA數:________

含14N的DNA數:________2n022n-22n已知一條全部N原子被15N標記的DNA分子(親代),轉移到含14N的培養(yǎng)基上培養(yǎng)n代,其結果如下,回答下列問題:親代子一代子二代脫氧核苷酸鏈總數:________含15N的單鏈為:________含14N的單鏈為:________2n+122n+1-2無論DNA復制多少次,含有原來母鏈的DNA分子永遠只有兩條。1.若某一親代DNA分子含有胞嘧啶m個,①經過n次復制需要消耗的胞嘧啶數目?②第n次復制,消耗的胞嘧啶數目?2.一個具有a個堿基對的DNA,含有b個A,該DNA完成n次復制,需要游離的胞嘧啶脫氧核苷酸多少個?m(2n-1)個m·2n-1個(2n-1)(a-b)個以親代DNA為模板合成子代DNA的過程。1.DNA復制的概念:2.DNA復制的時期:3.DNA復制的場所:細胞分裂前的間期真核生物:

。原核生物:

。細胞質(擬核、質粒)細胞核(主要)、線粒體、葉綠體三、DNA復制的過程三、DNA復制的過程4.DNA復制的特點:①半保留復制②邊解旋邊復制三、DNA復制的過程4.DNA復制的特點:③多起點復制復制泡加快DNA復制的速率,為細胞分裂做好物質準備。意義/原因三、DNA復制的過程DNA聚合酶DNA聚合酶子鏈解旋酶解旋——在

驅動下,

將DNA雙螺旋解開。能量解旋酶三、DNA復制的過程DNA聚合酶DNA聚合酶子鏈解旋酶合成子鏈——

等以解開的

為模板,以游離的________________為原料,按照______________原則,各自合成與母鏈互補的一條子鏈。DNA聚合酶每一條母鏈4種脫氧核苷酸

堿基互補配對三、DNA復制的過程DNA聚合酶DNA聚合酶子鏈解旋酶復旋——每條新子鏈與其對應的模板鏈盤繞成

結構雙螺旋三、DNA復制的過程5.DNA復制的條件:①模板:②原料:③能量:④酶:親代DNA的兩條鏈4種游離的脫氧核苷酸解旋酶,DNA聚合酶等ATP三、DNA復制的過程5.DNA復制的結果:1個DNA→2個DNA復制15N14N15N

15N15N復制置于14N中1.DNA為什么要準確地自我復制?2.如何保證DNA復制的準確性?四、DNA復制的意義

DNA通過復制,將遺傳信息從親代細胞傳遞給子代細胞,從而保持了遺傳信息的連續(xù)性。DNA獨特的雙螺旋結構,為復制提供了精確的模板,通過堿基互補配對,保證了復制能夠準確地進行。對于DNA復制的研究還在繼續(xù)……美國科學家首次拍攝DNA動態(tài)復制過程對于DNA復制的研究還在繼續(xù)……傳統觀念:

在遵循堿基互補配對原則、半保留復制與半不連續(xù)復制等規(guī)則的條件下,解旋酶、DNA聚合酶與連接酶等物質分別作用于鏈狀結構,使得新產生的遺傳物質與母體完全匹配。最新進展:

每條單鏈高度獨立復制,充滿隨機性,最后卻能夠完美與母鏈相匹配!一、概念檢測1.DNA復制是在為細胞分裂進行必要的物質準備。據此判斷下列相關表述是否正確。(1)DNA復制與染色體復制是分別獨立進行的。()(2)在細胞有絲分裂的中期,每條染色體是由兩條染色單體組成的,所以DNA的復制也是在這個時期完成的。

()××一、概念檢測2.DNA復制保證了親子代間遺傳信息的連續(xù)性。下列關于DNA復制的敘述,正確的是()A.復制均在細胞核內進行B.堿基互補配對原則保證了復制的準確性C.1個DNA分子復制1次產生4個DNA分子D.游離的脫氧核苷酸在解旋酶的作用下合成子鏈B一、概念檢測3.將DNA雙鏈都被15N標記的大腸桿菌放在含有14N的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使其分裂3次,下列敘述正確的是()A.所有的大腸桿菌都含有15NB.含有15N的大腸桿菌占全部大腸桿菌的比例為1/2C.含有15

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