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文檔簡介
實驗四微生物大小的測定和酵母菌死活細胞鑒定一、實驗目的:1、學習并掌握用測微尺測定微生物大小的方法。2、學習區(qū)分酵母的死活細胞的方法。實驗對象主要儀器二、實驗原理:1測微尺的使用
包括目鏡測微尺和鏡臺測微尺。鏡臺測微尺是中央部分刻有精確等分線的載片。一般每格10μm。臺尺不直接測大小,只用于校正目尺每格的相對長度。(用于標定目尺,使臺尺與目尺重合)
目鏡測微尺(目尺)是一塊可放入接目鏡內的圓形小玻片,其中央有精確的等分刻度。不同透鏡組合放大倍數不同,目尺每小格代表的實際長度也不一樣。計算:n目尺×每小格目尺所代表的長度=n臺尺×10μm2.酵母菌死活細胞的鑒定酵母菌的形態(tài)多為圓形,少數為橢圓型及不規(guī)則型,本實驗面包酵母近圓形。美藍作為無毒性染料,其氧化型呈藍色,還原型呈無色?;畹慕湍讣毎哂行玛惔x活性,能使美藍由氧化型(藍)變?yōu)檫€原型(無色),染約3min,死的酵母或衰老的細胞代謝能力弱,菌體呈藍色或淺藍色。據此區(qū)分死活酵母。三、實驗材料高活性干酵母(安琪牌)儀器:目鏡測微尺(目尺),鏡臺測微尺(臺尺)四、實驗步驟安裝目尺,校正目尺。放臺尺→調焦→低倍鏡下,使目尺與臺尺零點對齊,并在某一刻度上完全重合(準焦)→低倍、高倍、油鏡下分別計算目尺每格所代表的長度。2.制作酵母的美藍水浸片
在載片上加一滴美藍染液,挑取酵母與之混勻。用鑷子取蓋片,注意避免產生氣泡3.菌體大小測定
校正完畢,移走臺尺,換上制好的面包酵母的水浸片,先低倍后高倍。面包酵母幾乎圓形,測其直徑占目尺多少格,將格數乘上目尺每格代表的長度,即為面包酵母的實際大小4.計算菌體大小
將目尺取出放入盒內保存五
實驗結果1
目尺校正結果
2
面包酵母的大?。骸?/p>
=
?μm接物鏡放大倍數目尺格數臺尺格數目尺每格代表的長度(μm)低倍鏡高倍鏡六注意事項:
1.使用鏡臺測微尺進行校正時,若一時無法直接找到測微尺,可先對刻尺外的圓圈線進行準焦后再通過移動標本推進器進行尋找。2.細菌的個體微小,在進行細胞大小測定時一般應選用油鏡,以減小誤差。3.進行顯微鏡計數時應先在低倍鏡下尋找大方格的位置,找到計數室后將其移至視野中央,再換高倍鏡觀察和計數。4.酵母菌計數加樣品前,一定將菌液搖勻。七、思考題:1.更換不同放大倍數的目鏡和物鏡時,為什么必
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