動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 學(xué)案導(dǎo)學(xué)

選擇性必修三.2動(dòng)物細(xì)胞工程一動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)【學(xué)習(xí)目標(biāo)】1.簡述動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件和過程,構(gòu)建動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程圖。2.舉例說明動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用。3.簡述干細(xì)胞的種類及其應(yīng)用價(jià)值?！局攸c(diǎn)難點(diǎn)】說明動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)胞生長的特點(diǎn)。預(yù)學(xué)案教材研讀（自主學(xué)習(xí)）動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)包括、和等，其中是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)（1）概念：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物體中取出相關(guān)的，將它分散成，然后在適宜的下，讓這些細(xì)胞的技術(shù)。（2）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件①營養(yǎng)：將細(xì)胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)按和嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基，稱為合成培養(yǎng)基，使用時(shí)通常需加入等天然成分。培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞一般使用液體培養(yǎng)基，也稱為_______。②、的環(huán)境：培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具應(yīng)進(jìn)行處理以及在無菌環(huán)境下進(jìn)行操作。需要定期更換，以便清除代謝物。③溫度、pH和滲透壓：哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的溫度多是℃；多數(shù)細(xì)胞適宜pH為；也是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中需要考慮的重要環(huán)境參數(shù)。④氣體環(huán)境：95%＋5%。O2是所必需的，CO2的主要作用是________________。2.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程：取動(dòng)物組織→用的方法或用等處理的方法，將組織分散成_________→制成__________________→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行_______代培養(yǎng)→分瓶后進(jìn)行_______代培養(yǎng)。（1）．懸浮生長：細(xì)胞懸浮在培養(yǎng)液中生長增殖，會因__________________、積累和培養(yǎng)液中等因素而分裂受阻。（2）．細(xì)胞貼壁：多數(shù)細(xì)胞貼附在_____上生長。（3）．接觸抑制：當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面時(shí)，細(xì)胞通常會停止的現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。（4）．原代培養(yǎng)：指動(dòng)物組織經(jīng)處理后的。（5）．傳代培養(yǎng)：分瓶后的細(xì)胞培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)時(shí)，懸浮生長的細(xì)胞直接用法收集；貼壁生長的細(xì)胞要先用等處理，再用法收集。3.干細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用（1）．干細(xì)胞功能：在一定條件下，可以分化成。（2）．干細(xì)胞的存在：、和等多種組織和器官中。（3）．干細(xì)胞的種類判斷對錯(cuò)：1．多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中其培養(yǎng)液所需的適宜pH為6.8～7.0。 ()2．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)要定期更換培養(yǎng)液，其目的是便于清除代謝物，防止代謝物積累對細(xì)胞自身造成傷害。 ()3．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的原理是動(dòng)物細(xì)胞的全能性。 ()4．制備肝細(xì)胞懸液時(shí)用胃蛋白酶處理。 ()5．培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞的第一代(即第一次細(xì)胞增殖)被稱為原代培養(yǎng)。 ()6．培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細(xì)胞。 ()

導(dǎo)學(xué)案課堂探究（疑難點(diǎn)撥）探究一：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)1.概念：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后在適宜的培養(yǎng)條件下，讓這些細(xì)胞生長和增殖的技術(shù)。2.目的：獲得細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物；不能獲得完整動(dòng)物個(gè)體。3.原理：探究二：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件1．營養(yǎng)eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(營養(yǎng)物質(zhì)：糖類、、、維生素等,：補(bǔ)充培養(yǎng)液中尚未研究清楚的成分))2．無菌、無毒的環(huán)境eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(培養(yǎng)液和滅菌處理，,環(huán)境下進(jìn)行操作,更換，清除代謝物))3．溫度和pHeq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(溫度：哺乳動(dòng)物多以為宜,pH：))4．氣體環(huán)境eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(：細(xì)胞代謝所必需的,CO2：維持培養(yǎng)液的))添加血清、血漿的作用：血清和血漿中含有多種維持細(xì)胞正常代謝和生長的物質(zhì)，如蛋白質(zhì)、氨基酸、未知的促生長因子等。細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，一般需添加10%～20%的血清或血漿。探究三：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程1.應(yīng)選擇什么樣的組織或器官進(jìn)行培養(yǎng)？為什么？2.分散成單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)的原因？3.用酶兩次處理的目的分別是什么？能否用胃蛋白酶處理？【典例1】實(shí)驗(yàn)小鼠皮膚細(xì)胞培養(yǎng)的基本過程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是()A．甲過程需要在無菌條件下進(jìn)行B．乙過程可用胰蛋白酶處理皮膚組織C．丙過程是原代培養(yǎng)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象D．丁過程是傳代培養(yǎng)細(xì)胞，不出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象

探究四：植物組織培養(yǎng)與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)理論基礎(chǔ)植物細(xì)胞全能性細(xì)胞增殖培養(yǎng)基類型固體或半固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基成分礦質(zhì)元素、蔗糖、維生素、氨基酸、植物激素等無機(jī)鹽、葡萄糖、維生素、氨基酸、促生長因子、動(dòng)物血清等取材植物幼嫩部位或花藥等動(dòng)物胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的器官或組織過程脫分化、再分化原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)相同點(diǎn)①都需要人工條件下的無菌操作，無菌培養(yǎng)；②都需要配制合成培養(yǎng)基；③都需要適宜的溫度、pH等條件1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的目的有什么不同？2．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)過程中細(xì)胞分裂的方式相同嗎？【典例2】下列屬于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)區(qū)別的是()A．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基與植物細(xì)胞培養(yǎng)基的成分有所不同B．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不需要在無菌條件下進(jìn)行C．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可發(fā)生遺傳物質(zhì)改變，而植物組織培養(yǎng)不能D．植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)都體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性探究五：干細(xì)胞的種類及功能來源功能及應(yīng)用胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)早期胚胎能夠分化成為動(dòng)物體內(nèi)的任何細(xì)胞，并進(jìn)一步形成組織、器官甚至生物個(gè)體成體干細(xì)胞成體組織或器官只能分化成特定的細(xì)胞或組織，不具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞)體外誘導(dǎo)體細(xì)胞產(chǎn)生能分化成為具有特定功能的細(xì)胞，用于治療疾病1.誘導(dǎo)多能干細(xì)胞用于治療人類的某些頑癥的原理是什么？2.誘導(dǎo)多能干細(xì)胞為什么可以解決供體器官不足和器官移植后免疫排斥的問題？固學(xué)案課后訓(xùn)練（能力提升）2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)1.一般來說,動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿足以下哪些條件()①無毒的環(huán)境②無菌的環(huán)境③合成培養(yǎng)基需加入血清④溫度與動(dòng)物體溫相近⑤需要O2,不需要CO2⑥適宜的滲透壓A.①②③④⑤⑥B.①②③④C.①③④⑤⑥D(zhuǎn).①②③④⑥2.(2023河南焦作月考)為解決大面積燒傷病人的植皮難題,科學(xué)家研制出人造皮膚,研制過程中需要將人的皮膚細(xì)胞置于培養(yǎng)液中進(jìn)行培養(yǎng)。配制培養(yǎng)液時(shí),除必需的已知成分外,還必須加入天然成分,細(xì)胞才能正常生長和增殖。下列相關(guān)敘述不正確的是()A.細(xì)胞培養(yǎng)過程中,應(yīng)將細(xì)胞置于含有95%空氣和5%CO2的混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中B.為了避免動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中的污染,可向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素C.培養(yǎng)液中加入的天然成分可能是血清,用于補(bǔ)充細(xì)胞生長和增殖所需的物質(zhì)D.經(jīng)培養(yǎng)可得到由多層細(xì)胞構(gòu)成的人造皮膚,能直接用于移植3.如圖為動(dòng)物成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)過程示意圖。下列敘述正確的是()A.步驟①的操作不需要在無菌環(huán)境中進(jìn)行B.步驟②中用鹽酸溶解細(xì)胞間物質(zhì)使細(xì)胞分離C.步驟③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶處理D.步驟④培養(yǎng)過程中不會發(fā)生細(xì)胞癌變4.(2023貴州銅仁一中月考)如圖表示某學(xué)習(xí)小組利用正常的小鼠細(xì)胞進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程,①~④表示相關(guān)過程。下列相關(guān)敘述正確的是()A.過程①可以使用機(jī)械法或酶解法改變細(xì)胞的通透性B.過程②為原代培養(yǎng),培養(yǎng)細(xì)胞1一般會發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象C.培養(yǎng)細(xì)胞2需要貼附于基質(zhì)表面生長,直接用離心法進(jìn)行收集D.進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程中,不會發(fā)生基因的選擇性表達(dá)5.(2023廣東深圳外國語學(xué)校月考)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程中,貼壁的細(xì)胞不一定都能增殖并形成克隆(單個(gè)細(xì)胞繁殖形成的細(xì)胞群體),而形成克隆的細(xì)胞必為有增殖活力的細(xì)胞,這一特點(diǎn)可用于測定動(dòng)物細(xì)胞的增殖能力。大致流程如下圖,相關(guān)敘述不正確的是()A.出現(xiàn)接觸抑制后,細(xì)胞克隆停止增殖B.克隆細(xì)胞與接種的細(xì)胞的遺傳信息可能不同C.胰蛋白酶可使細(xì)胞分散成單個(gè),利于計(jì)數(shù)D.采用固體培養(yǎng)基培養(yǎng)才能形成細(xì)胞克隆6.(2022湖北監(jiān)利中學(xué)月考)如圖是某同學(xué)設(shè)計(jì)的有關(guān)紫杉醇抗腫瘤實(shí)驗(yàn)的研究流程,下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.酶X可以是胃蛋白酶B.物質(zhì)Y是生理鹽水,實(shí)驗(yàn)結(jié)果可與加入紫杉醇的甲組形成對照C.培養(yǎng)時(shí)需要定期更換培養(yǎng)液,目的是清除代謝物D.若甲組腫瘤細(xì)胞的數(shù)目少于乙組,可以說明紫杉醇具有抗腫瘤作用7.(2023河南安陽一中階段練習(xí))下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的敘述,不正確的是()A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基不同B.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)不同C.煙草葉片細(xì)胞離體培養(yǎng)能產(chǎn)生新個(gè)體,小鼠的ES細(xì)胞離體培養(yǎng)可分化成心肌細(xì)胞、神經(jīng)元等細(xì)胞D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要添加激素,植物組織培養(yǎng)需要添加血清8.下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的敘述,錯(cuò)誤的是()A.培養(yǎng)過程中都會發(fā)生有絲分裂B.培養(yǎng)過程都需要在無菌條件下進(jìn)行C.培養(yǎng)過程中都存在貼壁生長和接觸抑制現(xiàn)象D.培養(yǎng)過程中都易受培養(yǎng)條件和外界壓力的影響而發(fā)生變異9.(2023福建永安三中月考)我國科學(xué)家通過體細(xì)胞誘導(dǎo)培養(yǎng)出了類似受精卵發(fā)育3天狀態(tài)的人類全能干細(xì)胞,它能夠形成各類組織、器官。這是目前全球在體外培養(yǎng)的“最年輕”的人類細(xì)胞。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.體細(xì)胞誘導(dǎo)成全能干細(xì)胞的過程導(dǎo)致遺傳物質(zhì)發(fā)生改變B.全能干細(xì)胞可分化為胎盤組織,并有可能發(fā)育為更成熟的其他組織C.全能干細(xì)胞誘導(dǎo)分化成各種組織細(xì)胞的基礎(chǔ)是基因的選擇性表達(dá)D.此項(xiàng)研究成果在解決器官短缺和器官移植免疫排斥等問題上有重要意義10.(2023湖北宜昌月考)小鼠的成纖維細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)可成為iPS細(xì)胞,為新型再生療法帶來希望。下列敘述正確的是()A.經(jīng)誘導(dǎo)形成的iPS細(xì)胞增殖能力強(qiáng),分化能力弱B.分化后的細(xì)胞蛋白質(zhì)種類和數(shù)量相同C.iPS細(xì)胞屬于成體干細(xì)胞D.與ES細(xì)胞相比,iPS細(xì)胞用于再生醫(yī)學(xué)可回避倫理爭議11.一名嬰兒在出生后,醫(yī)院為他保留了臍帶血,在他以后生長發(fā)育過程中如果出現(xiàn)了某種難以治療的疾病,就可以利用血液中的干細(xì)胞進(jìn)行治療,下列關(guān)于這個(gè)實(shí)例的說法不正確的是()A.用干細(xì)胞培育出人體需要的組織或器官用來移植治病,不需要激發(fā)細(xì)胞的全能性B.用臍帶血中的干細(xì)胞并不能治療這個(gè)孩子所有的疾病C.如果要移植用他的干細(xì)胞培育出的器官,需要用到細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)D.如果要移植用他的干細(xì)胞培育出的器官,應(yīng)該長期給他使用免疫抑制藥物12.(2023北京豐臺一模)懸浮培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞會因細(xì)胞密度過大、有害代謝產(chǎn)物積累等因素而分裂受阻。生產(chǎn)上常用灌流式培養(yǎng)避免這些現(xiàn)象出現(xiàn)。灌流式培養(yǎng)是在細(xì)胞培養(yǎng)管內(nèi),一邊不斷注入新鮮培養(yǎng)基,一邊將培養(yǎng)液的上清液不斷移出。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.灌流式培養(yǎng)的細(xì)胞會貼壁生長,但不會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象B.灌流是在細(xì)胞密度達(dá)到一定濃度或者營養(yǎng)物質(zhì)低于一定濃度時(shí)進(jìn)行C.過高的灌流速率會導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)不能得到充分利用,造成培養(yǎng)基浪費(fèi)D.配制灌流式培養(yǎng)所需培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)考慮細(xì)胞生存的液體環(huán)境的滲透壓13.為研究血清在細(xì)胞培養(yǎng)中的作用,某小組進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)并得到了如圖所示的結(jié)果。下列有關(guān)敘述正確的是()A.正常細(xì)胞在培養(yǎng)過程中可存在接觸抑制的現(xiàn)象,癌細(xì)胞則不存在該現(xiàn)象B.血清應(yīng)在加入培養(yǎng)液后與培養(yǎng)液一起進(jìn)行高壓蒸汽滅菌C.由圖示結(jié)果可知,血清的有無對癌細(xì)胞的影響小于對正常細(xì)胞的影響D.利用含細(xì)胞懸液的培養(yǎng)瓶培養(yǎng)細(xì)胞的過程中應(yīng)定期更換培養(yǎng)液14.(2023河南鄭州二中聯(lián)考)某團(tuán)隊(duì)利用化學(xué)小分子成功地將已高度分化的小鼠體細(xì)胞誘導(dǎo)成了可以重新分化發(fā)育為各種組織器官類型的“多潛能性”細(xì)胞,并將其命名為“化學(xué)誘導(dǎo)的多潛能干細(xì)胞(CiPS細(xì)胞)”,開辟了一條全新的體細(xì)胞“重編程”途徑。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.小鼠體細(xì)胞誘導(dǎo)成CiPS細(xì)胞是形態(tài)、結(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程B.與小鼠體細(xì)胞相比,誘導(dǎo)形成的CiPS細(xì)胞全能性較高C.體細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化為CiPS細(xì)胞的過程類似于植物細(xì)胞的脫分化過程D.體細(xì)胞轉(zhuǎn)化成CiPS細(xì)胞后,細(xì)胞內(nèi)部分不表達(dá)的基因可能會重新表達(dá)15．2012年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)獲得者發(fā)現(xiàn)，利用逆轉(zhuǎn)錄病毒將Oct4等4個(gè)關(guān)鍵基因?qū)胍逊只捏w細(xì)胞中并表達(dá)，可使這個(gè)細(xì)胞成為類似干細(xì)胞的誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞）。下圖為該技術(shù)在人體細(xì)胞中的實(shí)驗(yàn)示意圖。下列相關(guān)敘述中，錯(cuò)誤的是（）A．由iPS細(xì)胞產(chǎn)生其他種類細(xì)胞的過程稱為細(xì)胞分化B．利用患者的iPS細(xì)胞對其自身受損器官進(jìn)行修復(fù)，與傳統(tǒng)器官移植相比，成功率更高C．iPS細(xì)胞的增殖難以控制，具有衰老細(xì)胞的特征D．與ES細(xì)胞相比，iPS細(xì)胞用于再生醫(yī)學(xué)可回避倫理爭議16．下圖表示人體干細(xì)胞發(fā)生的變化過程。下列有關(guān)此圖的敘述，正確的是()A．a(chǎn)、b、c均代表細(xì)胞分化過程B．圖中各細(xì)胞中蛋白質(zhì)種類相同C．b、c過程產(chǎn)生的細(xì)胞一般都具有細(xì)胞周期D．a(chǎn)、b、c過程產(chǎn)生的各細(xì)胞遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生變化17.（不定項(xiàng)）下列關(guān)于小鼠成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)過程及原理的敘述不正確的是（）A．用胰蛋白酶將組織細(xì)胞的膜蛋白消化可獲得單個(gè)的細(xì)胞 B．在培養(yǎng)基中添加胰島素可促進(jìn)細(xì)胞對葡萄糖的攝取 C．培養(yǎng)到一定時(shí)期的細(xì)胞停止增殖的主要原因是營養(yǎng)枯竭 D．培養(yǎng)過程中二倍體細(xì)胞可能會經(jīng)脫分化形成癌細(xì)胞18.（不定項(xiàng)）如圖為動(dòng)物成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)過程示意圖。下列敘述不正確的是（）A．步驟①的操作不需要在無菌環(huán)境中進(jìn)行 B．步驟②中用鹽酸溶解細(xì)胞間物質(zhì)使細(xì)胞分離 C．步驟③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶處理 D．步驟④培養(yǎng)過程中，一定要用到胰蛋白酶處理19．（不定項(xiàng)）下列有關(guān)干細(xì)胞的敘述中，正確的是（）A．胚胎干細(xì)胞可以分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞 B．造血干細(xì)胞分化形成紅細(xì)胞和白細(xì)胞的過程是不可逆的 C．肝臟干細(xì)胞分化形成肝臟細(xì)胞的過程表現(xiàn)了細(xì)胞的全能性 D．各種干細(xì)胞分化形成不同組織細(xì)胞是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果

20.(2023山東煙臺招遠(yuǎn)一中期中)科學(xué)家將小鼠多能干細(xì)胞的4種基因Oct3/4、Sox2、c-Myc和Klf4,同時(shí)導(dǎo)入已分化的小鼠成纖維細(xì)胞中,結(jié)果后者被誘導(dǎo)成為多能干細(xì)胞,稱為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞),此類細(xì)胞能分裂并產(chǎn)生皮膚細(xì)胞﹑神經(jīng)細(xì)胞以及可以搏動(dòng)的心肌細(xì)胞等。請分析回答下列問題:(1)④過程表示細(xì)胞發(fā)生了分化,原因是D、E和F細(xì)胞中的 (填2種化合物名稱)種類不完全相同。

(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中需通入CO2,其作用是 。

(3)利用自變量控制的減法原理,要了解Oct3/4、Sox2,c-Myc和Klf4基因在誘導(dǎo)iPS細(xì)胞時(shí),每個(gè)基因作用的相對大小,請你給出實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的思路。_________________________________________________________________________。_________________________________________________________________________。_________________________________________________________________________。21.請回答下面有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的問題。（1）在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，將細(xì)胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)按其種類和所需數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基稱為培養(yǎng)基。通常在培養(yǎng)培養(yǎng)過程中保證環(huán)境是。（2）細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含O2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，O2的作用是。（3）培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞一般取自幼體或胚胎組織，原因是______________________________________________________________________________________________________。（4）細(xì)胞原代培養(yǎng)的過程中，貼壁細(xì)胞分裂受阻的原因是。（5）原代培養(yǎng)的細(xì)胞停止分裂增殖后，需對細(xì)胞進(jìn)行___________________，才能讓細(xì)胞繼續(xù)增殖。進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)，對細(xì)胞進(jìn)行____________法收集，之后制成細(xì)胞懸液，分瓶培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)至50以后，少數(shù)細(xì)胞會克服細(xì)胞自然壽命的極限，獲得不死性，與正常細(xì)胞相比，其遺傳物質(zhì)已發(fā)生。2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)預(yù)學(xué)案答案動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞核移植動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)1.（1）組織單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)條件生長和增殖（2）①種類所需量血清培養(yǎng)液②無菌無毒滅菌培養(yǎng)液③36.50.57.2-7.4滲透壓④空氣CO2細(xì)胞代謝維持培養(yǎng)液的pH2.機(jī)械胰蛋白酶、膠原蛋白酶單個(gè)細(xì)胞細(xì)胞懸液原傳（1）細(xì)胞密度過大有害代謝物營養(yǎng)物質(zhì)缺乏（2）培養(yǎng)瓶的瓶壁（3）相互接觸分裂增殖（4）初次培養(yǎng)（5）離心胰蛋白酶離心3.（1）其他類型的細(xì)胞（2）早期胚胎骨髓臍帶血（3）①早期胚胎所有組織器官個(gè)體②造血干細(xì)胞神經(jīng)干細(xì)胞精原干細(xì)胞特定的細(xì)胞或組織完整個(gè)體③免疫排斥反應(yīng)判斷對錯(cuò)：×√×××