小麥花粉致死基因Ki的遺傳與分子標(biāo)記_第1頁(yè)
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小麥花粉致死基因Ki的遺傳與分子標(biāo)記小麥雄性不育材料對(duì)小麥雜種優(yōu)勢(shì)的利用具有重要意義和價(jià)值,國(guó)外研究表明,某些特定普通小麥品種間雜交F1代表現(xiàn)的花粉部分不育現(xiàn)象,受控于核基因組花粉致死基因Ki。為了高效選擇具有花粉致死基因Ki的材料,利用現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)對(duì)Ki進(jìn)行定位,篩選與此連鎖的標(biāo)記,克隆出花粉致死基因連鎖標(biāo)記片段,建立穩(wěn)定的篩選體系,對(duì)于小麥Ki種質(zhì)材料的轉(zhuǎn)育和利用將具有重要的作用和意義。本研究取得的主要結(jié)果如下:1.通過對(duì)可育和不育材料的形態(tài)學(xué)特征觀察,發(fā)現(xiàn)二者除了花粉活力外,沒有表現(xiàn)出明顯的差異。采用花粉活性鑒定發(fā)現(xiàn),敗育花粉基本占到總花粉數(shù)的1/2,敗育花粉染色較淺,由此可知,與花粉完全可育植株相比,花粉敗育植株的花粉近半數(shù)發(fā)育不良,且失去活力。2.根據(jù)普通小麥“中國(guó)春”與澳大利亞春小麥品種“Timstein”的F1植株的花粉育性檢測(cè)結(jié)果,統(tǒng)計(jì)顯示,F1植株中花粉不育植株比率占到1/2,在BC1F1群體中,不育和可育植株的比例為1/2,說明小麥花粉致死基因?yàn)閱位蜻z傳模式。3.以“中國(guó)春”和澳大利亞春小麥品種“Timstein”與83份不同小麥品種雜交獲得相應(yīng)F1,用碘液為染料,對(duì)其雜交BC1F1進(jìn)行花粉染色顯微鏡觀察并對(duì)花粉致死基因攜帶種質(zhì)進(jìn)行鑒定篩選,根據(jù)結(jié)果從中篩選出攜帶相應(yīng)等位顯性Ki基因的品種有6個(gè),攜帶相應(yīng)等位隱性ki基因的品種有18個(gè)。4.以“中國(guó)春”和“Timstein”的BC1F1代作為定位群體,提取基因組DNA構(gòu)建“可育池”和“不育池”:用位于小麥6B染色體上85對(duì)SSR引物,利用分離群體分組分析法(BSA)進(jìn)行多態(tài)性篩選,其中在育性池間存在差異的有4對(duì)引物(Xgwm644、Xgwm311、Xgpw4138和Xgwm626)。將具有多態(tài)性的引物再通過BC1F1定位群體進(jìn)行驗(yàn)證,從中篩選出與目的基因連鎖且多態(tài)性穩(wěn)定的2個(gè)SSR標(biāo)記Xgwm626和Xgpw4138。5.運(yùn)用Mapmaker3.0軟件進(jìn)行連鎖分析,結(jié)果表明,Xgwm626和Xgpw4138標(biāo)記位于目的基因兩側(cè),與Ki基因的遺傳距離分別為9

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