苛養(yǎng)菌的分離培養(yǎng)

關于苛養(yǎng)菌的分離培養(yǎng)何為苛養(yǎng)菌？1.苛養(yǎng)菌主要是指對生長環(huán)境、營養(yǎng)要求較苛刻的細菌，在普通環(huán)境中不能或難以生長。

體外培養(yǎng)需添加特殊因子或其他營養(yǎng)成分。

2.苛養(yǎng)菌在臨床上涉及到的主要有：嗜血桿菌屬、肺炎鏈球菌、化膿性鏈球菌、奈瑟氏菌、布拉漢氏菌、軍團菌等

3.有一些特殊的實驗可幫助苛養(yǎng)菌的鑒定，一些選擇性培養(yǎng)基可幫助細菌的鑒定。第2頁,共66頁，2024年2月25日，星期天血平板培養(yǎng)基

血平板培養(yǎng)基又叫血平板，主要用于鏈球菌及其他苛養(yǎng)菌的分離、培養(yǎng)及溶血活性的檢測。主要成分：其中的蛋白胨和牛肉粉主要提供細菌生長所需要的碳源、氮源、氨基酸及維生素。氯化鈉維持培養(yǎng)基中的滲透壓，瓊脂用做凝固劑。脫纖維羊血一方面提供一些特殊的生長因子，另一方面用于觀察溶血反應。第3頁,共66頁，2024年2月25日，星期天A嗜血桿菌屬與人類密切相關的嗜血桿菌有8種，比較常見的是流感嗜血桿菌和副流感嗜血桿菌。流感嗜血桿菌簡稱流感桿菌，屬嗜血桿菌屬。本屬細菌因人工培養(yǎng)時必須加新鮮血液或血液成分方能生長，故名嗜血桿菌。流感嗜血桿菌是嗜血桿菌屬中最常見的對人有治病性的細菌，可引起原發(fā)性化膿性感染和呼吸道繼發(fā)感染。近年來也是社區(qū)獲得性肺炎的主要病原菌。第4頁,共66頁，2024年2月25日，星期天流感桿菌(Hemophilusinfluenzae)是人類上呼吸道的正常菌群，以往一直被誤認為是流行性感冒的病原菌，但實際致病范圍極廣，除引起呼吸道病變外，尚可引起腦膜炎、敗血癥、結膜炎、女性生殖道感染、蜂窩織炎等。不僅是嬰幼兒感染的常見致病菌，亦是成人感染的病原菌之一。第5頁,共66頁，2024年2月25日，星期天1.形態(tài)與染色

流感嗜血桿菌是一群無動力、無芽孢、呈球桿狀或多形態(tài)的革蘭陰性小桿菌。菌落為圓形、無色、透明。2.培養(yǎng)特性需氧或兼性厭氧，培養(yǎng)時需要X因子和V因子。血液中因x子經加熱可釋放，故常用巧克力色培養(yǎng)基分離培養(yǎng)。另外金黃色葡萄球菌生長時能產生本菌需要的V因子，第6頁,共66頁，2024年2月25日，星期天因此與金黃色葡萄球菌共同培養(yǎng)時，離金黃色葡萄球菌菌落近的生長好，形成衛(wèi)星現象。副流感只需V因子，杜克氏只需X因子。

該菌的藥敏實驗為HTM平板第7頁,共66頁，2024年2月25日，星期天3.致病物質和所致疾病

致病物質主要為莢膜、菌毛與內毒素。根據莢膜多糖，b型致病力最強。所致疾病分原發(fā)感染和繼發(fā)感染兩類，前者為急性化膿性感染，后者常在流感、麻疹等感染后發(fā)生，臨床有慢性支氣管炎、中耳炎、鼻竇炎等，多見于成人。第8頁,共66頁，2024年2月25日，星期天于1930年，流感嗜血桿菌分類為兩類，即莢膜菌株及沒有莢膜的菌株。雖然已知莢膜類的乙型流感嗜血桿菌是毒性的主因之一，但感染流感嗜血桿菌的病因仍未完全清楚。它們的莢膜能幫助它們抵抗在沒有免疫的寄主體內的吞噬作用及不觸發(fā)補體介導的裂解。沒有莢膜的菌株則較少侵略，但它們能誘發(fā)炎癥而產生其他病癥，如會咽炎。第9頁,共66頁，2024年2月25日，星期天病源菌根據不同的生化反應可分為6個生物型：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ。致病者多為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ型。根據莢膜多糖抗原性不同，可將有莢膜菌分為a、b、c、d、e和f6個血清型。b型致病力最強，其次為e和f。根據細菌外膜蛋白（OMP）又可分為不同的亞型。有莢膜者致病力大于無莢膜者。第10頁,共66頁，2024年2月25日，星期天流感桿菌主要通過呼吸道在人與人之間傳播，也可通過孕婦產道感染。新生兒由于有來自母體的被動免疫，故2個月內發(fā)病率低，3個月至3歲兒童的血清抗體水平最低，此期易產生感染第11頁,共66頁，2024年2月25日，星期天杜克雷嗜血桿菌杜克雷氏嗜血桿菌的形態(tài)特點是短而細小，呈短棒狀，兩端較為鈍圓。長約1.5微米，寬約0.5微米。往往成雙平行排列呈雙鏈狀。大多數細菌分布在細胞外呈鏈狀排列，僅少數細菌可在細胞內呈團塊分布。人是它的儲存宿主。對溫度的敏感性很高，不耐熱，超過38℃時就很快死亡。干燥及65℃時均可迅速死亡。但它的耐寒性能較強。第12頁,共66頁，2024年2月25日，星期天從病灶中或培養(yǎng)菌落中取材檢查可見2個或2個以上細菌連成鎖狀有如魚群在游泳。故稱魚群狀。在淋巴腺組織切片中可見典型的連鎖桿菌。第13頁,共66頁，2024年2月25日，星期天杜克雷嗜血桿菌對溫度較敏感，43-44℃以上溫度則失去抵抗能力，20分鐘即可死亡。對42℃抵抗性稍強，但4小時死亡。在37℃中可活6-8天，10-20℃之間7-10天后可死亡，在此溫度中較大腸菌、葡萄球菌抵抗力弱，較淋球菌強，對寒冷抵抗力較強，5℃中可生存1周，凍干時可能生存1年。對干燥的抵抗性弱。在人工培養(yǎng)中溫度是發(fā)育的重要因素。第14頁,共66頁，2024年2月25日，星期天在19世紀以前人們把梅毒與軟性下疳混為一談。直到1889年，意大利皮膚病學家杜克雷從3例患有生殖器潰瘍的病人患部取膿性分泌物，接種到自己身上，并形成了潰瘍。他在自身患部排出的膿性分泌物中發(fā)現一種微生物，這種微生物特別喜歡在含有新鮮的人血或兔血的培養(yǎng)基上生長，所以被稱之為杜克雷氏嗜血桿菌。就是以后證實的軟性下疳致病菌。第15頁,共66頁，2024年2月25日，星期天杜克雷嗜血桿菌對X因子需要性高，不需要V因子，將純培養(yǎng)物注射入家兔可引起面部潰瘍性病灶，人感染后，不能產生持久免疫力。第16頁,共66頁，2024年2月25日，星期天B肺炎鏈球菌1.形態(tài)與染色該菌為革蘭染色陽性，菌體呈矛頭狀、成雙或短鏈狀排列的雙球菌，有毒株菌體外有化學成分為多糖的莢膜。普通染色時莢膜不著色，表現為菌體周圍透明環(huán)。無鞭毛，不形成芽孢，菌體衰老時可呈現革蘭染色陰性。第17頁,共66頁，2024年2月25日，星期天

2.培養(yǎng)特性和生化反應營養(yǎng)要求及在血平板上菌落特征基本同甲型鏈球菌，培養(yǎng)時間稍久菌落中央下陷呈臍窩狀，在血清肉湯中培養(yǎng)稍久亦因細菌自溶而使渾濁的培養(yǎng)液變澄清，自溶酶可被膽汁或膽鹽等物質活化，加速細菌溶解，故可用膽汁溶菌試驗與甲型鏈球菌相區(qū)別。

該菌通過optochin敏感實驗得到鑒定。第18頁,共66頁，2024年2月25日，星期天

該菌的藥敏實驗平板為血MH平板，放CO2環(huán)境**1ug苯唑西林紙片可用來篩選P耐藥，但須認識到，當OX>20mm時表明肺炎鏈球菌對P敏感，此菌往往也對其他B-內酰胺（包括阿莫西林和多數頭孢素）抗生素敏感；如果OX<19，則需要重新檢測青霉素、頭孢霉素MIC，以確認該菌株是否是耐藥。

許多藥物還沒有藥敏試驗的解釋標準，不能夠提供準確的、令人滿意的一些重要抗生素（如超廣譜頭孢、碳青霉烯）的藥敏試驗結果。第19頁,共66頁，2024年2月25日，星期天3.致病性在化膿性球菌中，肺炎鏈球菌的致病力僅次于金黃色葡萄球菌。不同的是，到目前為止，肺炎鏈球菌極少對青霉素類抗生素產生耐藥性。肺炎鏈球菌主要的致病物質是肺炎鏈球菌溶血素及莢膜。莢膜具有抗原性，是肺炎鏈球菌分型的依據。此菌可引起大葉性肺炎、腦膜炎、支氣管炎等疾病。第20頁,共66頁，2024年2月25日，星期天C鏈球菌1.形態(tài)與染色鏈球菌為革蘭染色陽性細菌。菌體球或卵圓形，直徑不超過2um,呈鏈狀排列。致病性鏈球菌鏈較長。無芽孢，大多數無鞭毛，幼齡菌常有莢膜。多數兼性厭氧，少數厭氧，過氧化氫酶陰性，適溫37度。營養(yǎng)要求較高，培養(yǎng)基中需加入血清、血液或腹水。在液體培養(yǎng)基中呈沉淀生長，但也有呈均勻渾濁生長（肺鏈），在固體培養(yǎng)基上形成細小、表面光滑、圓形、灰白色、半透明或不同的菌落。第21頁,共66頁，2024年2月25日，星期天2.鏈球菌的生化反應鏈球菌在普通培養(yǎng)基上生長不良a.桿菌肽敏感試驗：A群溶血性鏈球菌對桿菌肽非常敏感，而其他群鏈球菌通常耐受，故此試驗可對鏈球菌進行鑒別。b.CAMP試驗：下血平板上B群溶血性鏈球菌能產生CAMP因子，可促進金黃色葡萄球b溶血素活性。第22頁,共66頁，2024年2月25日，星期天3.致病性鏈球菌廣泛存在于自然界和人及動物糞便和健康人鼻咽部，可引起人類多種疾患，A族占90%以上，猩紅熱，丹毒，新生兒敗血癥，腦膜炎，產引起各種化膿性炎癥，褥熱以及鏈球菌變態(tài)反應性疾病等。第23頁,共66頁，2024年2月25日，星期天D奈瑟氏菌寄生的腦膜炎奈瑟氏球菌和淋病奈瑟氏球菌是重要的致病菌，腦膜炎奈瑟氏菌是人類流行性腦脊髓膜炎的病原菌，多數菌株在初分離時有莢膜，一般通過呼吸道傳播所引起，常在冬末春初季節(jié)發(fā)病最為流行。淋病奈瑟氏菌可引起急或慢性淋菌性尿道炎、陰道炎，主要通過性接觸傳播。第24頁,共66頁，2024年2月25日，星期天1.形態(tài)與染色本屬細菌為革蘭染色陰性，球形或球桿形。球菌多呈雙球菌狀排列，相鄰一側扁平或略凹呈腎狀；桿菌則較短粗，長寬相比為2:1，無鞭毛。腦膜炎奈瑟氏菌在患者腦脊液中，多位于中性粒細胞內，形態(tài)典型。在孵育24h后的培養(yǎng)物中，常呈現衰退形態(tài)，菌體大小較不一致，著色亦深淺不勻。新分離菌株大多有莢膜和菌毛。第25頁,共66頁，2024年2月25日，星期天2培養(yǎng)特性營養(yǎng)要求較高，需在含有血清、血液等培養(yǎng)基中方能生長，最常用的是巧克力培養(yǎng)基，專性需氧，5%CO2條件下生長更佳，最適生長溫度為37度，低于30度不生長，孵育24小時后，形成直徑1.0—1.5mm的無色、圓形、光滑、透明，似露滴狀的菌落。在血平板上不溶血，產生自溶酶，人工培養(yǎng)如不及時轉種，超過48h常死亡。第26頁,共66頁，2024年2月25日，星期天3.檢驗方法鑒定直接涂片檢查a.淤血斑：刺破淤血斑做血膜片，干燥固定后革蘭染色陰性雙球菌呈對排列，可初診。b.腦脊液：取腦脊液離心后沉淀物涂片同上分離培養(yǎng)將標本直接接種于血瓊脂平板、巧克力平板，置于5-10%co2,35度培養(yǎng)24小時后可見圓形、濕潤小菌落，經涂片證實G-雙球菌第27頁,共66頁，2024年2月25日，星期天該菌鑒定主要通過氧化酶、糖類發(fā)酵和血清學試驗以及培養(yǎng)生長特點進行a.細菌染色形態(tài)b.氧化酶試驗陽性C.觸酶試驗陽性d.分解葡萄糖、麥芽糖產酸不產氣e.莢膜多糖抗原直接凝集試驗。第28頁,共66頁，2024年2月25日，星期天注意：該菌能產生自溶酶，易自溶，故采集時標本不易放冰箱，應保溫立即送檢。必要時可作雙份血清測定抗體效價的變化。第29頁,共66頁，2024年2月25日，星期天淋球菌1879年，奈瑟從35例急性尿道炎、陰道炎及新生兒急性結膜炎病人的分泌物中，分離出淋病雙球菌。1885年，Bumm在人、?；蜓虻哪萄迮囵B(yǎng)基上培養(yǎng)淋球菌獲得成功第30頁,共66頁，2024年2月25日，星期天保溫保濕及時送檢，及時接種(30min內)，培養(yǎng)基應孵熱后再接種。標本取后應立即接種于培養(yǎng)基中。國外常用的培養(yǎng)基有Thayer-Martin培養(yǎng)基及改良的Stuart運送培養(yǎng)基。國內也已研制成國產培養(yǎng)基，如加多粘菌素E(25μg/mL)的血液瓊脂或巧克力瓊脂。初代分離時應用5%二氧化碳環(huán)境(燭缸)，培養(yǎng)溫度36℃為宜，相對濕度80%以上。培養(yǎng)24～48h觀看結果。第31頁,共66頁，2024年2月25日，星期天淋球菌在多粘菌素B血液瓊脂(一種常用的培養(yǎng)基)上經24～48小時培養(yǎng)之后，可形成圓形、凸起、濕潤、光滑、半透明或灰白色的菌落。如繼續(xù)培養(yǎng)，菌落體積增大，表面粗糙，邊緣皺縮。如表現為以上情況，初步判定為淋球菌陽性。第32頁,共66頁，2024年2月25日，星期天形態(tài)與染色淋球菌呈卵圓形或豆形，菌體長0.6～0.88um，寬約0.58um。常成對排列，鄰近面扁平或稍凹陷，像兩粒豆子對在一起。無鞭毛，不形成芽孢。在急性感染的機體內，其形態(tài)較典型，多位于細胞漿內。慢性期則在細胞外。淋球菌革蘭染色陰性。第33頁,共66頁，2024年2月25日，星期天首先該菌生長較慢，營養(yǎng)要求高，需要在5%CO2環(huán)境下才能生長良好----這是區(qū)別于其他奈瑟菌的前提。接下來是作氧化酶+、觸酶+，其他生化反應采用酶法進行，可用非發(fā)酵菌用的糖類生化管：葡萄糖（+）、麥芽糖、乳糖、蔗糖、果糖，其他須作硝還、DNA試驗均陰性。第34頁,共66頁，2024年2月25日，星期天涂片時不要用力涂擦，以防止細胞破裂和變形。涂片厚薄要合適。涂片過薄，涂片中幾乎沒有細胞，會造成假陰性;涂片過厚，脫色不易干凈，會使各種成分難以分辨。女性生殖道中有些菌如不動桿菌等很象淋球菌，常可造成涂片的假陽性結果。咽和直腸標本的直接涂片結果也常由于正常菌叢或各種雜菌的掩蓋而不可靠。

第35頁,共66頁，2024年2月25日，星期天只有培養(yǎng)法才是金標準方法，也只有培養(yǎng)法才能獲得藥敏結果，尤其對PPNG這樣多重耐藥的淋球菌意義更大，在糖類生化管表面加液體石蠟的目的是因為淋病奈瑟菌是以發(fā)酵形式利用糖類，而在氧氣存在時發(fā)酵代謝受到抑制，加入石蠟則可隔離氧氣，使得細菌的發(fā)酵產酸現象更為明顯，便于觀察。第36頁,共66頁，2024年2月25日，星期天再則，之所以要用非發(fā)酵菌的生化管，是因為其配方中糖類與蛋白胨的比例為1:0.2，細菌分解蛋白胨產堿較少，不足以影響代謝糖類時的產酸；還因為培養(yǎng)基中加入了少量瓊脂可使代謝時所產生的酸性物質能在局部聚積，使得顏色變化現象更為明顯，如此便提高生化管的靈敏度。第37頁,共66頁，2024年2月25日，星期天F卡他莫拉菌革蘭氏染色顯示為陰性，故為革蘭氏陰性非發(fā)酵菌。過去一直認為卡他莫拉菌是對人體無致病性的上呼吸道正常寄居菌。但是，近20多年的研究發(fā)現，該菌不僅可以引起兒童和老年人的上呼吸道感染，而且還是引起成人下呼吸道感染的主要病原菌，是兒童中耳炎、肺炎以及成人的慢性下呼吸道感染的第3位最常見致病菌，僅次于流感嗜血桿菌和肺炎鏈球菌，而且其發(fā)病率逐年增加。第38頁,共66頁，2024年2月25日，星期天形態(tài)學卡他莫拉菌又稱為卡他奈瑟菌和卡他布蘭漢菌。卡他莫拉菌在血平板、巧克力平板等各種培養(yǎng)基上生長良好，菌落呈“冰球”狀。培養(yǎng)24h后形成灰白色、光滑、直徑1-3mm不透明、不溶血的菌落，易從培養(yǎng)上刮下培養(yǎng)48h后，形成表面干燥、不平、邊緣不整齊的菌落，如用接種環(huán)推移，整個菌落可移動（有特殊手感）。第39頁,共66頁，2024年2月25日，星期天卡他莫拉無芽孢、無鞭毛，形態(tài)上易于其他奈瑟菌屬相混淆。本菌不分解任何糖類，可產生氧化酶、觸酶和DNA酶。硝酸鹽還原試驗陽性。與腦膜炎奈瑟球菌的鑒別卡他莫拉是DNA、硝酸鹽還原均為陽性。與莫拉菌屬的鑒別卡他為球菌，成雙或腎性排列，DNA陽性；而莫拉為球桿菌,DNA為陰性第40頁,共66頁，2024年2月25日，星期天軍團菌軍團菌是隱藏在空調制冷裝置中的致病菌，隨冷風吹出浮游在空氣中，吸入人體后會出現上呼吸道感染及發(fā)熱的癥狀，嚴重者可導致呼吸衰竭和腎衰竭。軍團菌最早是由于部隊室內密閉作業(yè)，導致群體發(fā)生上呼吸道感染而得名。軍團病是一種非常嚴重的、有時可以致命的肺炎。第41頁,共66頁，2024年2月25日，星期天軍團病是由軍團桿菌引起，這種細菌產生在自然環(huán)境中，在溫水里及潮熱的地方蔓延。人工供水系統(tǒng)有時也能為軍團桿菌的大量繁殖提供生存環(huán)境。這些系統(tǒng)包括淋浴器、礦泉池、噴泉以及空調設備的冷卻水塔。人們通常是由于呼吸了被軍團桿菌污染的水源散發(fā)的水霧而傳染上軍團病的。第42頁,共66頁，2024年2月25日，星期天鑒定方法

細菌培養(yǎng)法軍團菌為革蘭氏陰性桿菌，專性需氧，胞內寄生菌。軍團菌最初是從以軍團菌病人肺組織感染的豚鼠中分離出來的。這種方法雖然有較高的可靠性，但非常昂貴，而且費時費力，不久就被平板培養(yǎng)法所取代。第43頁,共66頁，2024年2月25日，星期天目前標準培養(yǎng)基為活性碳酵母浸膏瓊脂平板，也稱軍團菌生長平板(BCYE)。接種在BCYE平板上的樣品在溫度為35-37oC，培養(yǎng)10天，在濃度為2.5%CO2的環(huán)境下培養(yǎng)更有利于軍團菌的生長。軍團菌的菌落通常呈白色、灰色、有熒光。軍團菌在BCYE平板上生長而在平板和半光氨酸缺失BCYE-Cys平板上不生長第44頁,共66頁，2024年2月25日，星期天血清學玻片凝集法軍團菌感染l周左右可檢測出血清中軍團菌特異性IgM抗體，2周左右可檢測到特異性IgG抗體?，F已發(fā)現嗜肺軍團菌有15個血清型。其中，嗜肺軍團菌血清1型(Lp1)與人類疾病關系最密切，其次為血清4型(Lp4)和6型(Lp6)。第45頁,共66頁，2024年2月25日，星期天布魯氏菌生物學形狀：革蘭氏陰性短小桿菌，初次分離時多呈球狀，球桿狀和卵圓形，單個分散存在，少數情況成對或短鏈狀或聚集成小團狀排列，無芽孢，無莢膜、無鞭毛、不運動。革蘭染色經常著色不佳，吉姆染色呈紫色。第46頁,共66頁，2024年2月25日，星期天本菌專性需氧，初次分離培養(yǎng)時需5-10%CO2。生長緩慢，營養(yǎng)要求高，最適生長溫度為35-37度，在血瓊脂平板或肝浸液瓊脂平板上，37度養(yǎng)48h長出肉眼可見的透明、無色、光滑性小菌落。血瓊脂平板上無溶血現象。致病性

內毒素是主要的致病物質。莢膜與侵襲酶有利于細菌通過完整皮膚、粘膜進入宿主體內，并在機體臟器內大量繁殖和快速擴散入血。此外，布魯菌引起的4型超敏反應也能參與致病。第47頁,共66頁，2024年2月25日，星期天布魯菌是動物源性疾病，感染家畜引起流產，畜病還可表現為睪丸，附睪，乳腺，子宮炎等。人感染后，主要表現為發(fā)熱、發(fā)冷、體弱不適、全身痛和多汗、頭痛等，還包括肝臟損害、血液系統(tǒng)、骨關節(jié)受損、男女泌尿生殖系統(tǒng)病變等。第48頁,共66頁，2024年2月25日，星期天微生物學檢查：1.標本直接革蘭染色檢查布魯菌的意義不大2.臨床上抽取血液和骨髓標本，進行分離培養(yǎng)。另外：病后1周后，可用試管凝集試驗測定血清IGM抗體?？贵w效價>=1：160-320為陽性。對慢性患者可進行補體結合試驗測IGG，一般以1:10為陽性診斷標準，可診斷慢性或曾患過布魯菌病。第49頁,共66頁，2024年2月25日，星期天培養(yǎng)與鑒定在血瓊脂平板培養(yǎng)5-7天可形成灰色不溶血菌落。在固體培養(yǎng)基上菌落為無色、半透明、圓形、表面光滑、邊緣整齊、中央稍凸起，直徑為2-3mm;有時可出現粘液或干燥的硬皮樣菌落。液體培養(yǎng)基呈輕度渾濁有沉淀，不形成菌膜。培養(yǎng)>=30天才能報告陰性。第50頁,共66頁，2024年2月25日，星期天藥物敏感試驗臨床治療首選強力霉素，其次復方新諾明，由于病程長，用藥時間需4-6周。藥敏試驗可不作為臨床常規(guī)，但如需要必須采用稀釋法做MIC.第51頁,共66頁，2024年2月25日，星期天β-內酰胺酶以其主要水解對象可分為青霉素酶、頭孢菌素酶、廣譜酶、超廣譜酶。

第52頁,共66頁，2024年2月25日，星期天根據生化特征或氨基酸序列的同源性第一類為頭孢菌素水解酶（Amp-C酶），產生菌主要系革蘭陰性菌，如假單胞菌、腸桿菌、不動桿菌和克雷伯桿菌等，由染色體介導。第53頁,共66頁，2024年2月25日，星期天第二類為青霉素酶和超廣譜酶，包括革蘭陽性菌的青霉素酶，質粒介導的TEM和SHV酶及其衍生物組成組成的超廣譜β-內酰胺酶（ESBLs）、羧芐青霉素酶、鄰氯青霉素酶（OXA酶）和由沙雷菌屬與腸桿菌屬產生的非金屬碳青霉烯酶。第54頁,共66頁，2024年2月25日，星期天第三類為金屬酶，由假單胞菌屬、脆弱擬桿菌屬、產黃菌屬、沙雷菌屬及嗜麥芽黃單胞桿菌屬產生的可水解碳青霉烯抗生素的金屬酶。第四類為其他不能被克拉維酸完全抑制的青霉素酶.第55頁,共66頁，2024年2月25日，星期天β酶的特殊性、動力學參數及其基因的核苷酸序列A活性部位為絲氨酸殘基，包括多種質粒編碼的青霉素酶，如TEM1、SHV1、ROB1或PC1酶，相對分子質量29000。第56頁,共66頁，2024年2月25日，星期天B為金屬酶(metalloenzymes)，活性部位為半胱氨酸殘基，產金屬酶的細菌有嗜麥芽黃桿菌(stenotrophomonasmaltophila)，氣單胞菌和脆性擬桿菌。該類為碳青霉烯酶，耐藥的抗生素包括碳青霉烯、青霉素、第一、二、三代頭孢菌素、氨曲南。第57頁,共66頁，2024年2月25日，星期天C活性部位為絲氨酸殘基，相對分子質量為39000，它的產生與β-酶誘導劑有關，歸因于調控基因突變，主要是染色體編碼的頭孢菌素酶(AmpC酶)是由染色體上一組Amp基因介導的。D為青霉素酶，包括OXA。

第58頁,共66頁，2024年2月25日，星期天超廣譜β—內酰胺酶（ESBLs）

1．什么是ESBLs？

ESBLs是英文Extended—Spectyumβ—Lactamase縮寫，中文意思是超廣譜β—內酰胺酶，屬質粒介導，它是當前抗生素出現的新的耐藥趨勢之一。第