微生物實(shí)驗(yàn)思考題及微生物實(shí)驗(yàn)思考題參考答案及知識(shí)要點(diǎn)

微生物實(shí)驗(yàn)思考題用油鏡觀察時(shí)應(yīng)該注意哪些問題？在載破片和鏡頭之間加滴什么油？起什么作用？答：應(yīng)該先用擦鏡紙將鏡頭擦干凈,以防上次實(shí)驗(yàn)的污染.操作時(shí),先低倍再高倍.用完要擦掉油.加滴香柏油。作用：增加折光率,也就是增加了顯微鏡的分辨率.根據(jù)實(shí)驗(yàn)體會(huì)，談?wù)剳?yīng)如何根據(jù)所觀察微生物的大小，選擇不同的物鏡進(jìn)行有效的觀察。答：細(xì)菌用油鏡,真菌用高倍鏡.都是先用低倍鏡找到目標(biāo)后,再用高倍鏡調(diào)到合適的視野和合適的清晰度.放線菌、酵母菌、多細(xì)胞真菌相對(duì)較大，用放大40倍的物鏡就可以看了，細(xì)菌小，要用放大1000倍的物鏡看，感覺還很小。病毒那就要用電子顯微鏡看了。哪些環(huán)節(jié)會(huì)影響革蘭氏染色結(jié)果的正確性？其中最關(guān)鍵的環(huán)節(jié)是什么？答：涂片環(huán)節(jié)、加熱固定環(huán)節(jié)、脫色環(huán)節(jié)；其中最關(guān)鍵的環(huán)節(jié)是脫色環(huán)節(jié)。進(jìn)行革蘭氏染色時(shí)，為什么特別強(qiáng)調(diào)菌齡不能太老，用老齡細(xì)菌染色會(huì)出現(xiàn)什么問題？答：著色不均，染色效果不好。陰性陽性不明顯分不太清楚,問題是：不便于顯微鏡下觀察是陽性菌還是陰性菌。5、革蘭氏染色時(shí)，初染前能加碘液?jiǎn)?乙醇脫色后復(fù)染之前，革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌應(yīng)分別是什么顏色?答：不可以。因?yàn)榈馀c染料會(huì)結(jié)合成大分子，使得染料分子不能穿過細(xì)胞的細(xì)胞壁，對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響。脫色后復(fù)染前，革蘭氏陽性菌呈紫色，陰性菌無色。6、不經(jīng)過復(fù)染這一步，能否區(qū)別革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌？答：不行。在復(fù)染之前，革蘭氏陰性菌是無色透明的，在顯微鏡下很難觀察到；或者脫色過度，也會(huì)造成陽性菌脫色，不經(jīng)過復(fù)染，無法進(jìn)一步區(qū)別。7、你認(rèn)為制備細(xì)菌染色標(biāo)本時(shí),應(yīng)該注意哪些環(huán)節(jié)?答:1制備適宜的培養(yǎng)基

2在超凈工作臺(tái)上進(jìn)行,保持無菌環(huán)境

3對(duì)培養(yǎng)基,接種環(huán)等物品的高溫高壓滅菌.

4倒置培養(yǎng)基,防止冷凝水內(nèi)流8.為什么要求制片完全干燥后才能用油鏡觀察?答:1、若未完全干燥,載玻片上的液體會(huì)污染油鏡鏡頭。鏡頭非常精密,被污染后不利于下次觀察；2、若未完全干燥，水滴會(huì)影響油與玻璃之間折光率，造成視野不夠清晰。9.如果涂片未以熱固定,將會(huì)出現(xiàn)什么問題?加熱溫度過高、時(shí)間太長，又會(huì)怎么樣呢？答:如果沒有加熱固定的話，水分蒸發(fā)太慢或者在染色時(shí)菌體會(huì)被沖洗掉；如果加熱時(shí)間過久，菌體變形或形態(tài)破壞，無法染色。10.制備培養(yǎng)基的一般程序是什么？答：稱量——溶解—調(diào)PH值—融化瓊脂—過濾分裝—包扎標(biāo)記——滅菌——倒平板11.做過本次實(shí)驗(yàn)后，你認(rèn)為在制備培養(yǎng)基時(shí)要注意些什么問題？答：溶解配料的水要適量；PH要調(diào)到7.3左右；要小心手提式高壓鍋的使用；倒平板時(shí)要防止培養(yǎng)基被污染12.滅菌在微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)操作中有何重要意義？答：防止培養(yǎng)基被污染；防止雜菌影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果13.試述高壓蒸汽滅菌的操作方法和原理。答：高壓滅菌的原理是：在密閉的蒸鍋內(nèi)，其中的蒸汽不能外溢，壓力不斷上升，使水的沸點(diǎn)不斷提高，從而鍋內(nèi)溫度也隨之增加。在0.1MPa的壓力下，鍋內(nèi)溫度達(dá)121℃。在此蒸汽溫度下，可以很快殺死各種細(xì)菌及其高度耐熱的芽孢。操作方法：加水——裝料、加蓋——排氣——升壓、保壓、和降壓——取料14.高壓蒸汽滅菌時(shí)應(yīng)注意哪些事項(xiàng)？答：第一，無菌包不宜過大，不宜過緊，各包裹間要有間隙，使蒸汽能對(duì)流易滲透到包裹中央。第二，布類物品應(yīng)放在金屬類物品上，否則蒸汽遇冷凝聚成水珠，使包布受潮。阻礙蒸汽進(jìn)入包裹中央，嚴(yán)重影響滅菌效果。第三，定期檢查滅菌效果。15.試述如何在接種中，貫徹?zé)o菌操作的原則?答：保持操作臺(tái)的無菌狀態(tài)與在無菌室操作；操作前，要進(jìn)行手的消毒；接種環(huán)要加熱滅菌；接種物品要標(biāo)記。16.以斜面上的菌種接種到新的斜面培養(yǎng)基為例說明操作方法和注意事項(xiàng)。答：在接種箱或者超凈工作臺(tái)上.將母種經(jīng)過消毒處理以后,在酒精燈火焰區(qū)上方打開棉塞.用接種針挑取一小塊菌絲體,接入新的試管培養(yǎng)基上即可.17.試設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)，從土壤中分離酵母菌并進(jìn)行計(jì)數(shù)。答：無標(biāo)準(zhǔn)答案。18.在酵母菌死活細(xì)胞的觀察中，使用美藍(lán)液有什么作用？答：區(qū)別死活細(xì)胞。19.為何要用乳酸-石碳酸溶液作霉菌水浸片？答：用乳酸-石炭酸的優(yōu)點(diǎn)是可使細(xì)胞不變形，具有殺菌、防腐作用；不易干燥，能保持較長時(shí)間；能防止孢子四處飛散。20.細(xì)菌與霉菌的菌落有何區(qū)別？答：細(xì)菌菌落光滑，易于基質(zhì)脫離；霉菌菌落較大、菌絲細(xì)長,菌落疏松,呈絨毛狀、蜘蛛網(wǎng)狀、棉絮狀,無固定大小,多有光澤,不易挑。21.如何區(qū)分霉菌與放線菌的菌落？什么是擴(kuò)展性菌落？答：霉菌的菌落形態(tài)較大,質(zhì)地一般比放線菌疏松,細(xì)胞分化明顯菌絲粗壯有核菌落邊緣有粗絲狀細(xì)胞生長快有霉味。而霉菌往往形成復(fù)雜的孢子囊孢子梗等結(jié)構(gòu)。

放線菌菌落小菌絲細(xì)而均勻菌落邊緣可見細(xì)絲狀細(xì)胞有泥腥味，放線菌的分生孢子形態(tài)結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單。擴(kuò)展性菌落：就是原本培養(yǎng)的細(xì)菌由于發(fā)生擴(kuò)散,形成的一些非預(yù)期的菌落,通常這些菌落會(huì)影響正常實(shí)驗(yàn)觀察,可以用藥物抑制.22.能否用血球計(jì)數(shù)板在油鏡下進(jìn)行計(jì)數(shù)？為什么？答：不能。計(jì)數(shù)時(shí)滴在血球計(jì)數(shù)板上的是菌懸液，相當(dāng)于在鏡頭和計(jì)數(shù)板直接加了一層水。水層會(huì)降低視野的亮度和顯微鏡的分辨率，造成菌體和網(wǎng)格線不清晰。23.根據(jù)自己體會(huì)，說明血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)的誤差主要來自那些方面？如何減少誤差？答：誤差主要來自試劑誤差、方法誤差、儀器誤差；減少誤差有保持樣品的純凈、細(xì)胞溶液必須震蕩均勻、樣品濃度要適中、血球計(jì)數(shù)板要整潔清晰。24.菌種保藏中，石蠟油的作用是什么？答：作用是密封。防止空氣進(jìn)入，降低菌種的生理活性。25.經(jīng)常使用的細(xì)菌菌株，使用哪種保藏方法比較好？答：用甘油冷凍保藏方法保存，在液體培養(yǎng)基中加入百分子十五的甘油，然后低溫冷凍（-7度）左右。26.食品檢驗(yàn)為什么要測(cè)定細(xì)菌菌落總數(shù)？答：測(cè)定細(xì)菌菌落總數(shù)是檢驗(yàn)食品純度程度的指標(biāo)。也是判斷其保存能力的指標(biāo)。27.實(shí)驗(yàn)操作如何使數(shù)據(jù)可靠?答：1、向平皿傾注液體時(shí),平皿僅微微開啟即可；2、檢樣從開始稀釋到傾注最后一個(gè)平皿所用時(shí)間不宜超過20min.

3、培養(yǎng)液和檢液在培養(yǎng)皿內(nèi)要搖勻；

4、培養(yǎng)液傾注培養(yǎng)皿時(shí)溫度要在45攝氏度,以免燙死菌落.28.食品中檢出的菌落總數(shù)是否代表該食品上的所有細(xì)菌數(shù)？為什么？答：不能代表該食品上所有細(xì)菌數(shù)。因?yàn)樵趯?shí)驗(yàn)過程中會(huì)造成細(xì)菌的損失或死亡、食品上的細(xì)菌包括了各種各樣的微生物。29.為什么營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基在使用前要保持在（46±1）℃的溫度？答：營養(yǎng)瓊脂是用來做菌落總數(shù)項(xiàng)目的,如果太熱就會(huì)將細(xì)菌燙死,而太冷則瓊脂還沒倒就凝固了（凝固點(diǎn)大約在40度）。30.大腸菌群檢驗(yàn)中為什么首先要用乳糖膽鹽發(fā)酵管？答：因?yàn)槿樘悄扄}發(fā)酵管中的成分有溴甲酚紫，中性時(shí)呈藍(lán)紫色，酸性時(shí)呈黃色，如果顏色不變（呈藍(lán)紫色），說明無產(chǎn)酸的大腸菌群；如果顏色變黃色，說明可能出現(xiàn)能分解乳糖產(chǎn)酸的大腸菌群；膽鹽可以抑制其它細(xì)菌生長繁殖；看杜氏小管中是否有氣體，判斷是否為分解乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的大腸菌群。31.做空白對(duì)照實(shí)驗(yàn)的目的?答：目的是檢驗(yàn)培養(yǎng)基是否受到污染，驗(yàn)證無菌操作。32.為什么大腸菌群的檢驗(yàn)要經(jīng)過復(fù)發(fā)酵才能證實(shí)答：初發(fā)酵是樣品的發(fā)酵結(jié)果，不是大腸菌群純菌的發(fā)酵試驗(yàn)，有可能受其它雜菌影響判斷結(jié)果。進(jìn)行證實(shí)試驗(yàn)避免假陽性結(jié)果。33.復(fù)發(fā)酵為什么使用乳糖發(fā)酵管但不需加膽鹽?答：膽鹽能抑制革蘭氏陽性菌等雜菌生長.在初發(fā)酵，培養(yǎng)基已經(jīng)加入膽鹽抑制革蘭氏陽性菌生長，并在EMB培養(yǎng)基上進(jìn)行分離培養(yǎng)，因此復(fù)發(fā)酵培養(yǎng)時(shí)無需乳糖發(fā)酵管，以免大腸菌腸受到抑制。二.細(xì)菌的簡(jiǎn)單染色和革蘭氏染色1.革蘭氏染色中那一步是關(guān)鍵?為什么？你是如何操作的？革蘭氏染色的關(guān)鍵步驟是：乙醇脫色（是脫色時(shí)間）。如果脫色過度，革蘭氏陽性菌也可被脫色而被誤認(rèn)為是革蘭氏陰性菌；如脫色時(shí)間過短，革蘭氏陰性菌也可被脫色而被誤認(rèn)為是革蘭氏陽性菌。脫色時(shí)間的長短還受涂片的厚薄，脫色是玻片晃動(dòng)的快慢及乙醇用量的多少等因素的影響，難以嚴(yán)格規(guī)定（脫色是應(yīng)當(dāng)控制速度，脫色時(shí)間一般為20—30s）。2.固定的目的之一是殺死菌體，這與自然死亡的菌體有何不同？自然死亡的菌體本身已經(jīng)部分自溶，結(jié)構(gòu)已經(jīng)改變。固定殺死細(xì)菌時(shí)細(xì)菌結(jié)構(gòu)是保持死亡時(shí)的狀態(tài)的。3.不經(jīng)復(fù)染這一步能否區(qū)分革蘭氏陽性菌和陰性菌？能。在酒精脫色后，不被酒精脫色而保留紫色者為革蘭氏陽性菌（G＋），被酒精脫色為革蘭氏陰性菌。最后一步用番紅染液復(fù)染，是為了讓結(jié)果更清楚。4.涂片為什么要固定，固定適應(yīng)注意什么問題？a殺死細(xì)菌并使菌體黏附與玻片上；b增加其對(duì)染料的親和力。固定時(shí)應(yīng)注意：手持玻片，菌膜朝上，在微火過3次（手指觸摸玻片反面，不燙手為宜），固定時(shí)應(yīng)盡可能維持細(xì)胞原有形態(tài)，防止細(xì)胞膨脹或收縮。三.霉菌、放線菌的形態(tài)觀察1.鏡檢時(shí)，如何區(qū)分基內(nèi)菌絲與氣生菌絲？一般氣生菌絲顏色較深，直生或分枝絲狀，比基內(nèi)菌絲粗；而基內(nèi)菌絲色淺、發(fā)亮，可看到橫隔膜，繼而斷裂成球狀或桿狀小體。2.顯微鏡下細(xì)菌放線菌酵母菌和霉菌的主要區(qū)別是什么？放線菌與細(xì)菌需要在油鏡下才能觀察清楚，而霉菌和酵母菌在低倍鏡下即可看到。細(xì)菌：為細(xì)而短的單細(xì)胞微生物（個(gè)體微?。?，主要形態(tài)有：球、桿、螺旋狀等。（部分桿菌還可形成芽孢）放線菌：存在分枝絲狀體和菌絲體，革蘭氏陽性菌，有孢子絲和孢子（球形、橢圓形、桿狀、柱狀）。酵母菌：?jiǎn)渭?xì)胞，菌體呈圓球、卵形或橢圓形，少數(shù)呈檸檬形、尖形等。菌體比細(xì)菌大幾倍到幾十倍，部分處于出芽繁殖過程中菌體還可觀察到芽體，大多數(shù)菌體上還有芽痕。霉菌：菌絲和孢子的寬度通常比細(xì)菌和放線菌粗得多，常是細(xì)菌菌體寬度的幾倍到幾十倍，在低倍鏡下即可看到，并還可看到孢子囊梗、囊軸、孢子囊、包囊孢子等。四.玻璃器皿的洗滌、包扎與滅菌1.高壓蒸汽滅菌開始時(shí)為什么要將鍋內(nèi)排盡？滅菌后為什么要待壓力降低到“0”因?yàn)榭諝獾呐蛎泬捍笥谒羝呐蛎泬?，所以，?dāng)水蒸汽中含有空氣時(shí)，在同一壓力下，含空氣蒸汽的溫度低于飽和蒸汽的溫度。如果壓力未降到0時(shí)，打開排氣閥，就會(huì)因鍋內(nèi)壓力突然下降，使容器內(nèi)的培養(yǎng)基由于內(nèi)外壓力不平衡（壓力突然下降而發(fā)生復(fù)沸騰）而沖出燒瓶口或試管口，造成培養(yǎng)基等液體沾濕棉塞或溢出等事故。2.設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案，比較干熱滅菌和濕熱滅菌的效果。以下試驗(yàn)方案有關(guān)操作均遵循無菌操作條件和等量原則。實(shí)驗(yàn)材料試管鑷子酒精燈嗜熱脂肪芽孢桿菌ATCC7053菌片紙片（與菌片同大小同材料）溴甲酚紫蛋白凍水培養(yǎng)基（已滅菌）等實(shí)驗(yàn)材料（材料有余）。對(duì)照組取9支潔凈試管，分為A1B1C1三組（每3支一組），將A1組中放入菌片，B1組中放入紙片，C1組中什么也不加；不經(jīng)滅菌，直接加入溴甲酚紫蛋白凍水培養(yǎng)基（等量）。恒為培養(yǎng)將上述所有試管按分組在56℃3.為什么干熱滅菌比濕熱滅菌所需溫度高時(shí)間長？在濕熱條件下，有水蒸汽的作用：a高溫水蒸汽導(dǎo)熱比干空氣要快；b高溫水蒸汽冷凝變水時(shí)有放熱過程；c高溫水蒸汽能穿透細(xì)菌的細(xì)胞膜，直接進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)破壞細(xì)胞；c高溫水蒸汽能水解一部分細(xì)胞結(jié)構(gòu)，加速導(dǎo)熱。（濕熱中細(xì)菌菌體吸收水分，蛋白質(zhì)較易凝固，因蛋白質(zhì)含水量增加，所需凝固溫度降低；濕熱的穿透力比干熱大；濕熱的蒸汽有潛熱存在，每1克水在100℃時(shí)，由氣態(tài)變?yōu)橐簯B(tài)時(shí)可放出2．26kJ（千焦）的熱量。這種潛熱，能迅速提高被滅菌物體的溫度，從而增加滅菌效力。五.培養(yǎng)基的配置1.配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，有哪些操作步驟？那幾步易出錯(cuò)，如何防止？稱取藥品—加熱溶化—分裝—加棉塞—包扎—滅菌—擱置斜面易出錯(cuò)的步驟有：a稱取藥品稱取時(shí)鑰匙專用，瓶蓋不要錯(cuò)蓋，易吸水的藥品要快速稱取；b加熱溶化加入藥品后要用玻璃棒不停攪拌，以免糊底（在瓊脂熔化過程中，應(yīng)控制火力，以免培養(yǎng)基因沸騰而溢出容器，同時(shí)，需不斷攪拌，以防瓊脂糊底燒焦。）；c分裝分裝時(shí)培養(yǎng)基不能粘在三角瓶（或試管）口，以免接種時(shí)染菌；d擱置斜面斜面長度約試管長度一半為宜。2.配制培養(yǎng)基的一般原則是什么？a目的明確b營養(yǎng)協(xié)調(diào)c理化適宜d經(jīng)濟(jì)節(jié)約六.平板菌落計(jì)數(shù)法1.平板菌落計(jì)數(shù)法的原理是什么?它適用于那些微生物的計(jì)數(shù)？平板菌落計(jì)數(shù)法是將等測(cè)樣品經(jīng)適當(dāng)稀釋后，其中的微生物充分分散為單個(gè)細(xì)胞，取一定量的稀釋液接種到平板上，經(jīng)過培養(yǎng)，由每個(gè)單細(xì)胞生長繁殖而形成的肉眼可見的菌落，即一個(gè)單菌落應(yīng)代表原樣品中的一個(gè)單細(xì)胞。統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)，根據(jù)其稀釋倍數(shù)和取樣接種量即可換算出樣品中的含菌數(shù)。（但是，由于待測(cè)樣品往往不易完全分散成單個(gè)細(xì)胞，所以，長成的一個(gè)單菌落也可能來自樣品中的2~3或更多個(gè)細(xì)胞。因此平板菌落計(jì)數(shù)的結(jié)果往往偏低?，F(xiàn)在常使用菌落形成單位）。平板計(jì)數(shù)法是根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基上所形成的一個(gè)菌落是由一個(gè)微生物繁殖而形成的現(xiàn)象進(jìn)行的，也就是一個(gè)菌落可代表一種微生物（并不絕對(duì))。通常用來測(cè)定樣品中所含細(xì)菌、孢子、酵母菌等單細(xì)胞微生物的數(shù)量。2.菌落樣液移入培養(yǎng)皿后，若不盡快地倒入培養(yǎng)基并充分搖勻，將會(huì)出現(xiàn)什么結(jié)果？為什么？出現(xiàn)的結(jié)果是：形成菌落過于集中，不能形成均勻分布的單菌落，導(dǎo)致無法計(jì)數(shù)。因?yàn)椋喝舨涣⒓磽u勻，菌體常會(huì)吸附在皿底上，不易形成均勻分布的單菌落，從而影響計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。3.要獲得本次試驗(yàn)的成功，那幾步最為關(guān)鍵？為什么？a稀釋菌液若在稀釋時(shí)移液管混用可使稀釋梯度不準(zhǔn)確，從而導(dǎo)致計(jì)數(shù)誤差（放菌液時(shí)吸管尖不要碰到液面，即每一支吸管只能接觸一個(gè)稀釋度的菌懸液，否則稀釋不精確，結(jié)果誤差大。）；b稀釋倒平板1若再加入菌液不立即倒入培養(yǎng)基，可使菌體黏附于皿底；2若不注意培養(yǎng)基溫度，溫度過高會(huì)將菌體燒死，溫度過低會(huì)使培養(yǎng)基一倒入立即凝固，從而菌體不能均勻分布；3倒入培養(yǎng)基需立即搖勻，否則菌體常會(huì)吸附在皿底上，不易形成均勻分布的單菌落，從而影響計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性；4選擇倒平板的稀釋梯度也是很重要的，一般以三個(gè)連續(xù)稀釋度中的第二個(gè)稀釋度倒平板后所出現(xiàn)的平均菌落數(shù)在50個(gè)左右為宜，否則要適當(dāng)增加（或減少）稀釋度加以調(diào)整。4.平板菌落計(jì)數(shù)法與顯微鏡直接計(jì)數(shù)法相比有何優(yōu)缺點(diǎn)？微生物顯微鏡直接計(jì)數(shù)法隨機(jī)性大,所以對(duì)菌體數(shù)量不能做出較為宏觀,全面的反應(yīng).顯微鏡直接計(jì)數(shù)法一般與血球計(jì)數(shù)板配套使用.但顯微鏡直接計(jì)數(shù)法的優(yōu)點(diǎn)是快速,觀察到馬上可以計(jì)數(shù)，而計(jì)的是相應(yīng)微生物總數(shù)。平板菌落計(jì)數(shù)法最大的缺點(diǎn)是速度慢,需要平板上長出菌落一段時(shí)間后才能計(jì)數(shù).但是由于平板菌落計(jì)數(shù)法通常做梯度稀釋,所以計(jì)數(shù)的線性范圍大.由于是菌懸液涂布,所以比較均勻,能較好的反應(yīng)菌落的疏密程度.重復(fù)性,平行性很好,而計(jì)的是活菌數(shù)。是經(jīng)典的計(jì)數(shù)方法.七.顯微鏡直接計(jì)數(shù)法1.為何用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板可計(jì)得樣品總菌值？敘述其適用范圍。a計(jì)數(shù)室體積一定；b在顯微鏡下，不經(jīng)染色不能分辨菌體的死活，使計(jì)數(shù)所得的數(shù)目為一定體積內(nèi)的總菌數(shù)，從而計(jì)得樣品中總菌值。適用范圍：可單細(xì)胞存在的細(xì)菌酵母菌或顯絲狀生長的真菌，放線菌所生的孢子等。2.為什么計(jì)數(shù)室內(nèi)不能有氣泡？試分析產(chǎn)生氣泡的可能原因。a氣泡會(huì)占據(jù)計(jì)數(shù)室的空間，導(dǎo)致計(jì)數(shù)室中的菌體個(gè)數(shù)計(jì)數(shù)偏小，最后導(dǎo)致計(jì)數(shù)結(jié)果偏小。b計(jì)數(shù)室內(nèi)的氣泡，可影響菌液的隨機(jī)分布，使計(jì)數(shù)產(chǎn)生誤差。產(chǎn)生氣泡原因：a操作不當(dāng)，先放菌液再蓋蓋玻片；b計(jì)數(shù)室洗滌不干凈；c蓋玻片移動(dòng)，造成空氣進(jìn)入而產(chǎn)生氣泡。3.試分析影響本實(shí)驗(yàn)結(jié)果的誤差來源及提出改進(jìn)措施？1、儀器誤差：所用器材均應(yīng)清潔干凈，并且計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)區(qū)不應(yīng)該有擦痕。2、計(jì)數(shù)室內(nèi)可能有氣泡。因?yàn)榻湍讣?xì)胞并沒有染色，看起來是透明的，有氣泡很容易被計(jì)入，使數(shù)值偏高；并且，氣泡會(huì)影響菌懸液的隨機(jī)分布。

改進(jìn)：若產(chǎn)生氣泡，則用吸水紙吸出。3、菌體在計(jì)數(shù)板上分布不均，當(dāng)用選取5格計(jì)數(shù)時(shí)，會(huì)造成很大誤差。改進(jìn)：應(yīng)使菌液自然流入并混勻，進(jìn)行觀察時(shí)盡可能多數(shù)幾個(gè)格子。4、配制稀釋液時(shí)吸取的濃度過高或過低，導(dǎo)致稀釋液濃度和原液不成正確比例，計(jì)算時(shí)產(chǎn)生誤差。應(yīng)將原液搖晃均勻后取中部的液體進(jìn)行稀釋。5、由于數(shù)菌體數(shù)目時(shí)視覺疲勞而導(dǎo)