2018版浙江高考生物《選考總復(fù)習(xí)》課件第9單元第33講微生物的利用

第33講微生物的利用第九單元生物技術(shù)實(shí)踐1.大腸桿菌的培養(yǎng)和別離(加試)。2.別離以尿素為氮源的微生物(加試)。考綱要求內(nèi)容索引考點(diǎn)一微生物的培養(yǎng)和別離考點(diǎn)二別離以尿素為氮源的微生物做模擬練預(yù)測課時(shí)訓(xùn)練考點(diǎn)一微生物的培養(yǎng)和別離知識梳理答案1.大腸桿菌(1)特性：大腸桿菌是革蘭氏性、(代謝類型)的腸道桿菌，在腸道中一般對人無害，但假設(shè)進(jìn)入人的系統(tǒng)，就會(huì)對人體產(chǎn)生危害。(2)用途：是 技術(shù)中被廣泛采用的工具。陰兼性厭氧泌尿基因工程2.細(xì)菌的培養(yǎng)和別離(1)細(xì)菌的繁殖：以的方式繁殖，分裂速度很快，約20min分裂一次。(2)培養(yǎng)的方法：需要將已有細(xì)菌的培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)基中，一般用(工具)轉(zhuǎn)移帶菌的培養(yǎng)物。(3)細(xì)菌別離的方法與特點(diǎn)答案分裂接種環(huán)劃線別離涂布別離3.消毒和滅菌的區(qū)別化學(xué)物體外表煮沸高壓蒸汽答案4.大腸桿菌的培養(yǎng)和別離實(shí)驗(yàn)(1)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：將大腸桿菌擴(kuò)大培養(yǎng)和劃線別離，即用培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng)大腸桿菌，培養(yǎng)后再在 培養(yǎng)基上劃線進(jìn)行別離，隨后培養(yǎng)基上就會(huì)形成一個(gè)個(gè)單獨(dú)的菌落。答案LB液體LB固體平面(2)實(shí)驗(yàn)步驟答案倒平板接種高壓蒸汽三角瓶連續(xù)劃線單個(gè)菌落(3)大腸桿菌別離的用途：單菌落的別離是 的通用方法，也是用于篩選高表達(dá)量菌株的最簡便方法之一。答案消除污染雜菌答案5.微生物接種的兩種常用方法比較接種環(huán)一系列[思考診斷]答案1.連線無菌技術(shù)的方法、類型及對象2.觀察甲、乙、丙、丁四幅圖，熟悉倒平板的操作流程，請?zhí)羁眨捍鸢?1)請用文字和箭頭寫出正確的倒平板操作流程：

。(2)甲、乙、丙中的滅菌方法是

。(3)丁中的操作需要等待

才能進(jìn)行。丙→乙→甲→丁灼燒滅菌平板冷卻凝固3.以下圖中甲為劃線別離法中最重要的環(huán)節(jié)，乙為操作的結(jié)果：答案(1)每一次劃線后都要將接種環(huán)灼燒(

)(2)除第一次劃線外，每一次劃線的起點(diǎn)都是第一次劃線的末端(

)提示

平板劃線時(shí)除第一次劃線外，每一次劃線的起點(diǎn)都是上一次劃線的末端，而不是第一次?！獭?.如圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖，請思考：答案(1)獲得圖A效果和B效果的接種方法分別是什么？提示獲得效果A的接種方法為涂布別離法，獲得效果B的接種方法為劃線別離法。答案(2)某同學(xué)在純化土壤中的細(xì)菌時(shí)，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成了一片，最可能的原因是什么？應(yīng)當(dāng)怎樣操作才可防止此種現(xiàn)象？提示

最可能的原因是菌液濃度過高或劃線時(shí)在劃下一區(qū)域前未將接種環(huán)灼燒滅菌；采取的措施是增大稀釋倍數(shù)或每次劃新區(qū)域前先將接種環(huán)灼燒滅菌。1.以下圖為“大腸桿菌的培養(yǎng)和別離”實(shí)驗(yàn)的根本流程，請答復(fù)以下問題：解析LB液體培養(yǎng)基是通用的細(xì)菌培養(yǎng)基，LB固體平面培養(yǎng)基那么用于劃線別離形成單菌落。氯化鈉的作用是維持培養(yǎng)基的滲透壓。調(diào)節(jié)好酸堿度后才能進(jìn)行滅菌，假設(shè)滅菌后再進(jìn)行酸堿度調(diào)節(jié)，又會(huì)產(chǎn)生新的污染。解題探究(1)A過程配制的是通用細(xì)菌培養(yǎng)基，稱為_______培養(yǎng)基。配制時(shí)除了參加特定的營養(yǎng)物質(zhì)以外，還要參加一定量的氯化鈉，以維持______。對培養(yǎng)基酸堿度的調(diào)節(jié)，應(yīng)該在B過程的____(填“前面”或“后面”)。LB液體滲透壓前面解析答案123(3)D過程后，一個(gè)菌體便會(huì)形成一個(gè)_______，這種別離方法是___________的通用方法，也是篩選特定菌株的最簡便方法之一。

消除污染雜菌(或純化菌種)(2)D過程與C過程相比，培養(yǎng)基中增加的物質(zhì)是____，E過程所需的溫度是____。瓊脂4℃(單)菌落解析在液體培養(yǎng)基的根底上參加一定量的瓊脂可形成固體培養(yǎng)基。菌種應(yīng)置于4°C冰箱中保存。解析通過劃線別離后，一個(gè)菌體就會(huì)繁殖出一個(gè)菌落。解析答案123(4)植物組織培養(yǎng)時(shí)，先配制MS培養(yǎng)基，再參加一定比例的植物激素，當(dāng)生長素相對較多時(shí)，可促進(jìn)_____。生根解析答案解析植物組織培養(yǎng)中生長素相對較多時(shí)，有利于生根，而細(xì)胞分裂素相對較多時(shí)，那么有利于生芽。123(5)植物組織培養(yǎng)和微生物培養(yǎng)都需要無菌操作，以下不適宜用高壓蒸汽滅菌的是()A.接種環(huán)和鑷子B.三角瓶和廣口瓶C.發(fā)芽培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基D.用于培養(yǎng)的幼莖和幼芽解析√解析高壓蒸汽滅菌常用于培養(yǎng)基、培養(yǎng)器材等的滅菌，而用于培養(yǎng)的幼莖和幼芽那么不能進(jìn)行任何滅菌操作，否那么會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡。1232.檢驗(yàn)飲用水的細(xì)菌含量是有效監(jiān)控疾病發(fā)生的必要措施。請答復(fù)以下與檢驗(yàn)飲用水有關(guān)的問題：(1)要測定飲用水中大腸桿菌的數(shù)量，常采用________法，通常將水樣進(jìn)行一系列的梯度_____，然后將上述的水樣用玻璃刮刀分別涂布到______________的外表進(jìn)行培養(yǎng)，記錄菌落數(shù)量。用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)___(填“是”或“否”)需要對照組。原因是__________________________________________________________。涂布別離稀釋LB固體培養(yǎng)基是

需要判斷培養(yǎng)基使用之前是否被雜菌污染(培養(yǎng)基滅菌是否合格)答案123(2)下面所示的四種菌落分布圖中，不可能由上述方法得到的是_____。(3)大腸桿菌的培養(yǎng)條件是無菌，培養(yǎng)基配制時(shí)需參加氯化鈉，以維持______。配制培養(yǎng)基時(shí)先__后__。A.調(diào)節(jié)pH B.滅菌C.消毒 D.調(diào)節(jié)溫度√滲透壓AB答案1233.請答復(fù)微生物培養(yǎng)和別離的有關(guān)問題：(1)欲從土壤中別離出能利用尿素的細(xì)菌：以_____為唯一氮源且參加了_____指示劑的培養(yǎng)基，用_______________法別離細(xì)菌。假設(shè)培養(yǎng)基平板上有菌落存活且顏色變___，那么說明別離成功。解析別離能利用尿素的細(xì)菌，只需以尿素為唯一氮源，加酚紅指示劑，采用涂布別離法別離細(xì)菌，只要培養(yǎng)基中的指示劑變紅，標(biāo)志著存在脲酶水解尿素的反響，證明菌株可以以尿素為氮源。尿素酚紅涂布別離(或涂布)紅解析答案123(2)別離以尿素為氮源的細(xì)菌和別離大腸桿菌都使用了LB培養(yǎng)基，其成分_____。A.前者含瓊脂，后者不含瓊脂和瓊脂糖B.兩者都含有瓊脂C.前者含有瓊脂糖，后者不含瓊脂糖但含瓊脂D.兩者都不含瓊脂和瓊脂糖解析別離以尿素為氮源的細(xì)菌所用培養(yǎng)基應(yīng)含有瓊脂糖，而別離大腸桿菌所用培養(yǎng)基那么不含瓊脂糖而含瓊脂。解析√返回123考點(diǎn)二別離以尿素為氮源的微生物知識梳理答案1.菌種特點(diǎn)含有

酶，可以通過降解尿素作為其生長的氮源。2.培養(yǎng)基用以

為唯一氮源的培養(yǎng)基培養(yǎng)，以

培養(yǎng)基為對照。3.實(shí)驗(yàn)原理(1)篩選以尿素為氮源的微生物，可使用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)選擇。(2)細(xì)菌合成的脲酶能將尿素分解成

，致使pH升高，使酚紅指示劑

。脲尿素LB全營養(yǎng)NH3變紅4.實(shí)驗(yàn)步驟制備培養(yǎng)基：將已滅菌的LB固體培養(yǎng)基和尿素固體培養(yǎng)基分別倒入兩個(gè)培養(yǎng)皿中，搖勻，平放至凝固↓制備細(xì)菌懸液：用1g土樣配制不同濃度的細(xì)菌懸液↓用別離細(xì)菌：將不同濃度的土壤稀釋液分別加到有LB培養(yǎng)基和尿素培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，并用玻璃刮刀涂布到整個(gè)平面上答案涂布別離法↓培養(yǎng)：將培養(yǎng)皿倒置，在37℃恒溫箱中培養(yǎng)24～48h↓觀察：培養(yǎng)基中菌落數(shù)量答案5.反響的鑒定在配制培養(yǎng)基時(shí)，參加指示劑酚紅，培養(yǎng)時(shí)細(xì)菌將尿素分解并產(chǎn)生堿性的氨，使培養(yǎng)基上菌落周圍出現(xiàn) 。紅色的環(huán)帶

只有能分解尿素的微生物才能生長[思考診斷]答案1.分析下表所示培養(yǎng)基的配方，答復(fù)以下問題。(1)在該培養(yǎng)基的配方中，為微生物提供碳源的物質(zhì)是

，提供氮源的物質(zhì)是

。(2)該培養(yǎng)基

(填“是”或“否”)具有選擇作用，因?yàn)?/p>

。葡萄糖尿素是2.如圖為別離以尿素為氮源的微生物的實(shí)驗(yàn)，思考答復(fù)以下問題。答案(1)實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖鞘褂煤械呐囵B(yǎng)基別離能產(chǎn)生酶的細(xì)菌；使用作為指示劑，由顏色變化檢測知酶所催化的反響，相關(guān)的反響式為。(2)制備尿素固體培養(yǎng)基過程中采用的滅菌方法有 、G6玻璃漏斗過濾法。(3)從上圖所示實(shí)驗(yàn)過程中可判斷出細(xì)菌懸液C的稀釋度為，用涂布別離法別離細(xì)菌。尿素脲酚紅(NH2)2C＝O＋H2O2NH3＋CO2高壓蒸汽滅菌法10－43.判斷以下表達(dá)的正誤(1)土樣應(yīng)從有哺乳動(dòng)物排泄物的地方取()

(2)取10－4、10－5的土壤稀釋液各0.1mL，分別涂布于全營養(yǎng)LB固體培養(yǎng)基、尿素固體培養(yǎng)基上()(3)將實(shí)驗(yàn)組和對照組平板倒置，37°C恒溫培養(yǎng)24～48h()(4)在尿素固體培養(yǎng)基上生長的細(xì)菌都是以尿素為氮源的細(xì)菌()答案√√√×提示

有哺乳動(dòng)物排泄物的地方含脲酶的細(xì)菌較多。4.2013年11月22日凌晨3點(diǎn)，青島黃島區(qū)發(fā)生石油泄漏事件，一些微生物可以有效地分解石油，如何配制選擇培養(yǎng)基將這類微生物選擇出來？答案提示配制的選擇培養(yǎng)基中，石油作為唯一的碳源，然后用這種培養(yǎng)基培養(yǎng)多種微生物，但凡能在該種培養(yǎng)基上生存的就是能分解石油的微生物。1.現(xiàn)從土壤中別離以尿素為氮源的細(xì)菌，實(shí)驗(yàn)過程如以下圖所示：解題探究請答復(fù)：(1)欲從土壤中別離出能分解尿素的細(xì)菌，將土壤用_______進(jìn)行一系列的梯度稀釋，同一濃度的土壤稀釋液應(yīng)至少涂布___個(gè)平板，通常以每個(gè)培養(yǎng)皿中有___個(gè)以內(nèi)的單菌落的那一組稀釋倍數(shù)為最適宜。無菌水320答案12(2)接種后的培養(yǎng)皿____于37℃的恒溫箱中培養(yǎng)。假設(shè)培養(yǎng)基中存在含脲酶的細(xì)菌，其菌落周圍會(huì)出現(xiàn)________，這是由于尿素被分解產(chǎn)生氨氣，遇培養(yǎng)基中的__________產(chǎn)生的顏色變化，從而證明這一菌株能以尿素為氮源。(3)別離能利用尿素的細(xì)菌時(shí)所用的培養(yǎng)基成分上最主要的特點(diǎn)是________________________________。倒置紅色環(huán)帶酚紅指示劑以尿素作為唯一氮源的(固體)培養(yǎng)基答案12(4)以下操作需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行的是____(多項(xiàng)選擇)。A.稱取葡萄糖、瓊脂糖等培養(yǎng)基成分B.倒平板C.涂布平板D.微生物的培養(yǎng)(5)與LB全營養(yǎng)培養(yǎng)基上的菌落數(shù)相比，尿素培養(yǎng)基上只有少數(shù)菌落的原因是____________________________________________?！獭掏寥乐心芾媚蛩氐募?xì)菌在土壤菌群中只占極少數(shù)答案122.如圖是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細(xì)菌的過程。解析脲酶能夠催化尿素分解為氨，故圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以尿素作為唯一氮源。由于尿素被分解成了氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，pH升高，使酚紅指示劑變紅色。(1)圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以_____為唯一氮源；鑒別培養(yǎng)基還需添加____作為指示劑，產(chǎn)脲酶細(xì)菌在該培養(yǎng)基上生長一段時(shí)間后，其菌落周圍的指示劑將變成___色。尿素酚紅紅解析答案12(2)在5個(gè)細(xì)菌培養(yǎng)基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為105的土壤樣品溶液0.1mL，培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板上長出的細(xì)菌菌落數(shù)分別為13、156、462、178和191。該過程采取的接種方法是__________，每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量為_____×108個(gè)；與血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法相比，此計(jì)數(shù)方法測得的細(xì)菌數(shù)較___。解析涂布別離法1.75少答案12解析用于計(jì)數(shù)細(xì)菌菌落數(shù)的接種方法是涂布別離法，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)應(yīng)介于30～300之間，應(yīng)選擇細(xì)菌菌落數(shù)為156、178和191的平板計(jì)數(shù)，每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量為(156＋178＋191)/3÷0.1×105＝1.75×108個(gè)。由于兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連接在一起時(shí)，往往統(tǒng)計(jì)的是一個(gè)菌落，故用此方法測得的細(xì)菌數(shù)偏少。121.培養(yǎng)基中觀測指標(biāo)的分析(1)培養(yǎng)基中的酚紅指示劑產(chǎn)生顏色變化(變紅)，標(biāo)志著存在脲酶水解尿素的作用，從而證明這一菌株能以尿素為氮源。紅色環(huán)狀區(qū)域的大小代表脲酶活性的強(qiáng)弱和含量的多少。紅色區(qū)域越大，說明菌株利用尿素的能力越強(qiáng)。(2)與全營養(yǎng)培養(yǎng)基上的菌落數(shù)比較，尿素培養(yǎng)基上只有少數(shù)菌落，這一現(xiàn)象說明能利用尿素的細(xì)菌在土壤菌群中只占極少局部。歸納整合122.微生物篩選過程中必要的兩種對照培養(yǎng)基及其作用12返回做模擬練預(yù)測1.(2016·溫州中學(xué)期末測試)以下圖是微生物平板劃線示意圖。劃線的順序?yàn)?、2、3、4、5。以下操作方法正確的選項(xiàng)是()解析A.操作前要將接種環(huán)放在火焰旁滅菌B.劃線操作須在火焰上進(jìn)行C.在5區(qū)域中才有可能得到所需菌落D.在1、2、3、4、5區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)進(jìn)行滅菌√1234解析操作前要將接種環(huán)放在火焰上灼燒滅菌，A項(xiàng)錯(cuò)誤；劃線操作須在火焰旁進(jìn)行，B項(xiàng)錯(cuò)誤；在5區(qū)域中最有可能得到所需菌落，C項(xiàng)錯(cuò)誤；在1、2、3、4、5區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)進(jìn)行滅菌，D項(xiàng)正確。12342.在細(xì)菌培養(yǎng)過程中，以下有關(guān)操作正確的選項(xiàng)是()A.涂布器用火焰灼燒進(jìn)行滅菌B.培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進(jìn)行滅菌C.倒平板和取菌液都必須要在酒精燈火焰旁進(jìn)行D.別離得到的菌落應(yīng)先接種在平板上，培養(yǎng)24h后，置于4℃冰箱中保存解析涂布器應(yīng)該用高壓蒸汽滅菌，A項(xiàng)錯(cuò)誤；培養(yǎng)基應(yīng)該先滅菌后分裝，B項(xiàng)錯(cuò)誤；倒平板和取菌液都必須要在酒精燈火焰旁進(jìn)行，以防止雜菌污染，C項(xiàng)正確；別離得到的菌落應(yīng)先接種在斜面上，置于37℃的恒溫箱培養(yǎng)24h后，再置于4℃冰箱中保存，D項(xiàng)錯(cuò)誤。解析√12343.以下圖是“別離以尿素為氮源的微生物”實(shí)驗(yàn)的根本流程，請答復(fù)以下問題：解析別離以尿素為氮源的微生物，應(yīng)該以尿素為唯一氮源，所以不應(yīng)有瓊脂。解析(1)該實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基不能含有_____。A.尿素 B.氯化鈉C.葡萄糖 D.瓊脂√1234(2)尿素溶液可用_______________使之無菌。假設(shè)要檢查B過程滅菌是否徹底，可以采用的方法是________________________________________________________。(3)圖中步驟C為_______。相對于劃線別離法，過程D涂布別離法的優(yōu)點(diǎn)是______________。G6玻璃漏斗過濾

將空白培養(yǎng)基放在適宜溫度下培養(yǎng)一段時(shí)間，

觀察有無菌落出現(xiàn)倒平板單菌落更易分開1234解析尿素用G6玻璃漏斗過濾除去其中細(xì)菌等微生物。解析答案(4)如果菌落周圍出現(xiàn)___色環(huán)帶，說明該菌落能分泌脲酶。紅1234解析假設(shè)菌落能分泌脲酶，那么菌落周圍會(huì)出現(xiàn)紅色環(huán)帶。解析答案4.(2014·浙江自選，17節(jié)選)(1)現(xiàn)有一份污水樣品，某興趣小組欲檢測其中的細(xì)菌數(shù)，進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn)。將一定量的污水樣品進(jìn)行濃度梯度稀釋。取適量不同稀釋度的稀釋液，用________法分別接種于固體平面培養(yǎng)基上，經(jīng)培養(yǎng)后進(jìn)行計(jì)數(shù)。該實(shí)驗(yàn)應(yīng)注意，接種前，從盛有_________的容器中將玻璃刮刀取出，放在酒精燈火焰上灼燒，冷卻后待用；分組時(shí)，需用______________作為對照。涂布別離70%酒精未接種的培養(yǎng)基解析答案1234解析細(xì)菌的別離與計(jì)數(shù)常用涂布別離法，即用玻璃刮刀將一定體積的稀釋液涂布到固體平面培養(yǎng)基上。玻璃刮刀在使用前需進(jìn)行滅菌處理，即將其浸入體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精中，隨后取出放在酒精燈火焰上灼燒，冷卻后待用。為排除其他因素的影響，提高實(shí)驗(yàn)的可信度，實(shí)驗(yàn)中要設(shè)置空白對照。1234(2)在上述細(xì)菌培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，應(yīng)計(jì)數(shù)的是接種了(

)A.各個(gè)稀釋度樣品的培養(yǎng)基上的細(xì)菌數(shù)B.合理稀釋度樣品的培養(yǎng)基上的細(xì)菌數(shù)C.各個(gè)稀釋度樣品的培養(yǎng)基上的菌落數(shù)D.合理稀釋度樣品的培養(yǎng)基上的菌落數(shù)解析將菌液涂布到固體平面培養(yǎng)基上后，倒置放在恒溫箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)一段時(shí)間后，統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)。當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基外表生長的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌，這樣通過統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)就可估算出待測樣品的細(xì)菌數(shù)目，所以要選擇合理稀釋度樣品的培養(yǎng)基上的菌落數(shù)。解析√返回1234課時(shí)訓(xùn)練一、選擇題1.以下圖為實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)和純化大腸桿菌過程中的局部操作步驟，以下說法錯(cuò)誤的選項(xiàng)是()解析A.①②③步驟操作時(shí)需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行B.步驟①中，待倒入的培養(yǎng)基冷卻后蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋C.步驟③中，每次劃線前后都需對接種環(huán)進(jìn)行灼燒處理D.劃線接種結(jié)束后，將圖④平板倒置后放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)√12345678910解析由圖可知，步驟①是倒平板，步驟②是用接種環(huán)蘸取菌液，步驟③是進(jìn)行平板劃線，步驟④是培養(yǎng)。①②③步驟操作時(shí)需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行，防止被雜菌污染，A項(xiàng)正確；倒完平板后應(yīng)立即蓋上培養(yǎng)皿蓋，冷卻后將平板倒過來放置，B項(xiàng)錯(cuò)誤；每次劃線前后灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到單菌落，C項(xiàng)正確；劃線接種結(jié)束后，將平板倒置放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，有利于培養(yǎng)基外表的水分更好地?fù)]發(fā)和防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染，D項(xiàng)正確。123456789102.(2016·舟山中學(xué)期末測試)以下有關(guān)微生物培養(yǎng)的表達(dá)中，不正確的選項(xiàng)是()解析A.獲得純潔培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染B.單菌落的別離是消除污染的雜菌的通用方法C.培養(yǎng)基都必須使用高壓蒸汽滅菌法滅菌D.倒置平板防止培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水滴落√12345678910解析微生物培養(yǎng)中獲得純潔培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染，A項(xiàng)正確；通?？梢圆捎猛坎紕e離法或劃線別離法進(jìn)行單菌落的別離，以消除污染的雜菌，B項(xiàng)正確；培養(yǎng)基通常可以進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，但對于培養(yǎng)基中有高溫易分解的成分，就不能用此方法，如培養(yǎng)基中的尿素等物質(zhì)，C項(xiàng)錯(cuò)誤；劃線接種結(jié)束后需要將培養(yǎng)皿倒置，以防止培養(yǎng)基蒸發(fā)冷凝成的水滴入培養(yǎng)基而造成污染，D項(xiàng)正確。123456789103.(2015·普陀中學(xué)期末測試)在分解尿素的細(xì)菌的別離和鑒定中，對先后用到的兩種培養(yǎng)基的表達(dá)正確的選項(xiàng)是()A.參加酚紅指示劑作為鑒別培養(yǎng)基，再參加唯一碳源作為選擇培養(yǎng)基B.參加唯一氮源作為鑒別培養(yǎng)基，再參加酚紅指示劑作為選擇培養(yǎng)基C.參加唯一氮源作為選擇培養(yǎng)基，再參加酚紅指示劑作為鑒別培養(yǎng)基D.參加酚紅指示劑作為選擇培養(yǎng)基，再參加唯一碳源作為鑒別培養(yǎng)基解析能合成脲酶的細(xì)菌才能分解尿素。配制以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基，能夠生長的細(xì)菌就是能分解尿素的細(xì)菌；細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中參加酚紅指示劑培養(yǎng)細(xì)菌，假設(shè)指示劑變紅，可確定該種細(xì)菌能夠分解尿素。解析√123456789104.在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中參加酚紅指示劑的目的是()A.篩選出能分解尿素的細(xì)菌B.對別離的菌種作進(jìn)一步鑒定C.作細(xì)菌的營養(yǎng)成分D.假設(shè)指示劑變藍(lán)就能準(zhǔn)確地認(rèn)定該菌能分解尿素解析篩選出能分解尿素的細(xì)菌用選擇培養(yǎng)基即可，不需要加指示劑。參加指示劑的培養(yǎng)基，目的都是對要?jiǎng)e離的菌種作進(jìn)一步的鑒定。解析√12345678910二、非選擇題5.幽門螺桿菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性潰瘍的主要致病因素。在患者體內(nèi)采集樣本并制成菌液后，進(jìn)行別離培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)根本步驟如下：解析幽門螺桿菌(Hp)含有脲酶，能以尿素為氮源，在參加尿素和酚紅指示劑的培養(yǎng)基中培養(yǎng)Hp，由于尿素經(jīng)脲酶的降解可產(chǎn)生堿性的NH3，NH3能使培養(yǎng)基中的酚紅由紅黃色變成紅色，故菌落周圍會(huì)出現(xiàn)紅色環(huán)帶。請答復(fù)：(1)在配制培養(yǎng)基時(shí)，要參加尿素和酚紅指示劑，這是因?yàn)镠p含有_____，它能以尿素作為氮源；假設(shè)有Hp，那么菌落周圍會(huì)出現(xiàn)___色環(huán)帶。脲酶紅解析答案12345678910(2)以下對尿素溶液進(jìn)行滅菌的最適方法是_____滅菌。A.高壓蒸汽 B.紫外燈照射C.70%酒精浸泡 D.過濾解析由于尿素加熱會(huì)分解，對尿素溶液進(jìn)行滅菌最好用G6玻璃砂漏斗過濾。解析√12345678910(3)步驟X表示_____。在無菌條件下操作時(shí)，先將菌液稀釋，然后將菌液_____到培養(yǎng)基平面上。菌液稀釋的目的是為了獲得___菌落。解析微生物培養(yǎng)時(shí)需將培養(yǎng)皿倒置并放在恒溫培養(yǎng)箱中，假設(shè)不倒置培養(yǎng)，那么無法形成單菌落。(4)在培養(yǎng)時(shí)，需將培養(yǎng)皿倒置并放在__________中，假設(shè)不倒置培養(yǎng)，將導(dǎo)致______________。接種涂布單恒溫培養(yǎng)箱無法形成單菌落解析微生物的別離和培養(yǎng)步驟：配制培養(yǎng)基→滅菌、倒平板→接種→培養(yǎng)。為獲得單菌落，接種操作前應(yīng)先將菌液稀釋，然后將菌液涂布到培養(yǎng)基平面上即可。解析答案12345678910(5)臨床上用14C呼氣試驗(yàn)檢測人體是否感染Hp，其根本原理是Hp能將14C標(biāo)記的____分解為NH3和14CO2。解析幽門螺桿菌能將14C標(biāo)記的尿素分解為NH3和14CO2，故臨床上常用14C呼氣試驗(yàn)檢測人體內(nèi)幽門螺桿菌的存在。尿素解析答案123456789106.從土壤中別離以尿素為氮源的細(xì)菌，實(shí)驗(yàn)過程如下圖：請答復(fù)：(1)圖中物質(zhì)A為_______，假設(shè)要統(tǒng)計(jì)每克土壤樣品中以尿素為氮源的細(xì)菌的活菌數(shù)目，宜采用________法接種到尿素培養(yǎng)基上，對照組配制的培養(yǎng)基為________培養(yǎng)基，假設(shè)用同濃度的土壤稀釋液接種，實(shí)驗(yàn)組培養(yǎng)皿中菌落數(shù)(大于、等于或小于)對照組。在能利用尿素的細(xì)菌菌落周圍，有紅色環(huán)帶出現(xiàn)的原因是______________________________________________________________________________。無菌水涂布別離LB全營養(yǎng)小于因?yàn)槟芾媚蛩氐募?xì)菌產(chǎn)生的脲酶，將培養(yǎng)基中的尿素分解，產(chǎn)生的氨使指示劑呈紅色答案12345678910(2)以下培養(yǎng)基中，能別離出分解尿素的細(xì)菌的是()A.葡萄糖、NaCl、K2HPO4、酚紅、瓊脂糖、水B.葡萄糖、NaCl、K2HPO4、酚紅、瓊脂糖、水、尿素C.NaCl、瓊脂糖、水、蛋白胨、酵母提取物、尿素D.葡萄糖、NaCl、K2HPO4、酚紅、瓊脂糖、水、蛋白胨、酵母提取物(3)欲將別離得到的以尿素為氮源的細(xì)菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，應(yīng)使用_______培養(yǎng)基?！蘈B液體答案123456789107.(原創(chuàng))有些細(xì)菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學(xué)欲從受原油污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株。請答復(fù)以下問題：(1)在篩選過程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以_____為唯一碳源的培養(yǎng)基上。從功能上講，該培養(yǎng)基屬于__(A.固體B.液體C.純化D.選擇)培養(yǎng)基。原油D解析可以將所需要的微生物從混雜的微生物群中別離出來的培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基。欲篩選出能降解原油的菌株，培養(yǎng)基中應(yīng)只含有原油而無其他碳源，這樣不能降解原油的細(xì)菌在此培養(yǎng)基上不能生存，可篩選出能分解原油的菌種。解析答案12345678910(2)純化菌種時(shí)，為了得到單菌落，常采用的接種方法有兩種，即______________________。劃線別離法和涂布別離法解析別離純化菌種時(shí)，接種的方法有劃線別離法和涂布別離法，其目的都是使聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基外表形成單菌落，以便于純化菌種。(3)為了篩選出高效菌株，可比較單菌落周圍透明圈的大小，透明圈大說明該菌株的降解能力___。強(qiáng)解析降解原油能力越強(qiáng)的菌株，在菌落周圍形成的透明圈越大。解析答案12345678910(4)通常情況下，在微生物培養(yǎng)過程中，實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、________和高壓蒸汽滅菌。無菌技術(shù)要求實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈_____附近進(jìn)行，以防止周圍環(huán)境中微生物的污染。干熱滅菌火焰解析實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌(如接種環(huán))、干熱滅菌(如培養(yǎng)皿)和高壓蒸汽滅菌(如培養(yǎng)基)等。無菌技術(shù)要求整個(gè)實(shí)驗(yàn)操作都要在酒精燈火焰附近進(jìn)行，以防止周圍微生物的污染。解析答案123456789108.(2016·金麗衢十校聯(lián)考)下表是3組生物實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基。請答復(fù)以下問題：(1)別離以尿素為氮源的細(xì)菌應(yīng)選用培養(yǎng)基__。在含有脲酶的細(xì)菌菌落周圍會(huì)出現(xiàn)________，這是由于尿素被分解產(chǎn)生的___使pH升高，酚紅指示劑產(chǎn)生顏色變化，從而證明這一菌株可以尿素為氮源。變色區(qū)域越大，說明該菌株利用尿素的能力____。b紅色環(huán)帶氨越強(qiáng)12345678910答案解析別離以尿素為氮源的細(xì)菌應(yīng)選用以尿素為唯一氮源并添加酚紅指示劑的培養(yǎng)基。分解尿素的微生物可產(chǎn)生脲酶，脲酶可催化尿素分解產(chǎn)生氨，氨使酚紅指示劑變紅，從而在菌落周圍形成紅色環(huán)帶，形成的紅色環(huán)帶越大，說明該菌株利用尿素的能力越強(qiáng)。12345678910(2)用培養(yǎng)基a進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，那么培養(yǎng)基中還需參加________________________。一般先用____(填“發(fā)芽”或“生根”)培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，使之長出較多的叢狀苗，然后將叢狀苗分株培養(yǎng)。

植物激素(植物生長調(diào)節(jié)劑)發(fā)芽解析植物組織培養(yǎng)所需的MS培養(yǎng)基需參加植物激素。培養(yǎng)過程中一般先用發(fā)芽培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，使之長出較多的叢狀苗，然后將叢狀苗分株培養(yǎng)，誘導(dǎo)生根。解析答案12345678910(3)生產(chǎn)上利用黑曲霉或蘋果青霉來提取果膠酶，在用果膠酶水解果膠的實(shí)驗(yàn)中，以下說法正確的選項(xiàng)是____。A.實(shí)驗(yàn)后滴加酒精的目的是增加果膠酶的活性B.沸水浴加熱后果膠酶的活性隨著溫度的下降逐漸恢復(fù)C.間歇攪拌20～30min的目的是讓果膠酶與果膠充分接觸D.選用黑曲霉提取液是因?yàn)楣z酶只能在生物細(xì)胞內(nèi)起催化作用解析√解析在用果膠酶水解果膠的實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)操作后滴加酒精的目的是檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)過程中果膠是否被水解；沸水浴加熱后果膠酶會(huì)失去活性；只要條件適宜，果膠酶在細(xì)胞內(nèi)外均可發(fā)揮催化作用。123456789109.(2015·寧波鄞州中學(xué)練習(xí))有機(jī)農(nóng)藥苯磺隆是一種除草劑，長期使用會(huì)污染環(huán)境，研究發(fā)現(xiàn)，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。別離能降解苯磺隆菌株的實(shí)驗(yàn)過程如以下圖所示。請答復(fù)以下問題：解析(1)微生物生長繁殖所需的主要營養(yǎng)物質(zhì)有碳源、水、_____、_______四類，該實(shí)驗(yàn)所用的選擇培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為唯一碳源，其原因是________________________________________。氮源無機(jī)鹽只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長和繁殖12345678910答案解析微生物生長所需要的主要營養(yǎng)物質(zhì)包括碳源、氮源、水和無機(jī)鹽。使用選擇培養(yǎng)基是因?yàn)檫x擇培養(yǎng)基上只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長和繁殖，同時(shí)又能抑制或阻止其他微生物的生長。12345678910(2)純化菌株時(shí)，通常使用的劃線工具是_______。在第二次及以后劃線時(shí)，總是從上一次的末端開始劃線。這樣做的目的是______________________

。

接種環(huán)