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微專題一微生物的培養(yǎng)與利用一
選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基的比較要點(diǎn)解讀比較項(xiàng)目選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基特殊成分加入(或缺少)某種化學(xué)物質(zhì)加入某種指示劑或化學(xué)藥品目的抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng),促進(jìn)目的微生物生長(zhǎng)與微生物的代謝物或培養(yǎng)基中的成分發(fā)生特定反應(yīng)比較項(xiàng)目選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基用途培養(yǎng)、分離出特定微生物鑒別不同的微生物舉例培養(yǎng)酵母菌和霉菌,可在培養(yǎng)基中加入青霉素,抑制細(xì)菌生長(zhǎng);用以尿素作為唯一氮源的培養(yǎng)基來培養(yǎng)尿素分解菌可用伊紅—亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳制品中是否含有大腸桿菌(若有,則菌落呈深紫色)典例剖析【例1】北京冬奧會(huì)食堂讓各國運(yùn)動(dòng)健兒愛上中國味道,其餐余垃圾在垃圾集中點(diǎn)采用“生化+霧化+膜過濾”技術(shù)處理后,可以達(dá)到無二次污染的標(biāo)準(zhǔn)。為篩選對(duì)抗生素有抗性、高效降解淀粉的微生物,提高“生化”處理的效率,研究人員將餐余垃圾機(jī)械化處理后加入裝有無菌水的錐形瓶中制備餐余垃圾浸出液,然后進(jìn)行如下圖所示操作。下列說法錯(cuò)誤的是(
)A.餐余垃圾浸出液在接種前通常需要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌處理B.可用稀釋涂布平板法將餐余垃圾浸出液接種在X培養(yǎng)基上C.X培養(yǎng)基含有淀粉和抗生素,Y培養(yǎng)基是不含瓊脂的液體培養(yǎng)基D.圖中降解淀粉最高效的微生物是⑤,可根據(jù)菌落特征初步判斷微生物類型A解析:餐余垃圾浸出液在接種前進(jìn)行高壓蒸汽滅菌會(huì)殺死菌種,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗,A項(xiàng)錯(cuò)誤。餐余垃圾浸出液中微生物濃度較高,可用稀釋涂布平板法將餐余垃圾浸出液接種在X培養(yǎng)基上,B項(xiàng)正確。本實(shí)驗(yàn)的目的是篩選對(duì)抗生素有抗性、高效降解淀粉的微生物,故X培養(yǎng)基應(yīng)以淀粉為唯一碳源,且添加抗生素起選擇作用;Y培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基,其中不含凝固劑瓊脂,C項(xiàng)正確。淀粉遇碘變藍(lán)色,滴加碘液后,能夠分解淀粉的菌落周圍出現(xiàn)透明圈,所以題圖中降解淀粉最高效的微生物是⑤;不同微生物表現(xiàn)出的菌落特征不同,可根據(jù)菌落特征初步判斷微生物類型,D項(xiàng)正確。二
平板劃線法與稀釋涂布平板法的比較要點(diǎn)解讀典例剖析【例2】圖甲表示稀釋涂布平板法中的部分操作,圖乙表示平板劃線法操作的結(jié)果。下列敘述錯(cuò)誤的是(
)A.涂布前要將涂布器灼燒,冷卻后才能進(jìn)行涂布B.對(duì)于濃度較高的菌液,如果圖甲中的稀釋倍數(shù)僅為1×102,則所得的菌落大多不是由單一的細(xì)胞繁殖而成的C.圖乙培養(yǎng)皿中所得的菌落都符合要求D.圖乙中連續(xù)劃線的起點(diǎn)是上一次劃線的末端答案:C解析:如果灼燒后的涂布器沒有冷卻就接觸菌種,會(huì)將菌體殺死,A項(xiàng)正確。稀釋倍數(shù)過低,會(huì)導(dǎo)致多個(gè)菌體聚集在一起繁殖成菌落,B項(xiàng)正確。平板劃線中,一般在最后一次劃線的末端處形成的菌落才是由單一的細(xì)胞繁殖而成的,這樣的菌落才符合要求,C項(xiàng)錯(cuò)誤。連續(xù)劃線時(shí),除了第一次劃線外,每一次劃線的起點(diǎn)都是上一次劃線的末端,目的是使菌體密度越來越小,保證最后劃線末端處的菌落是由單一的細(xì)胞繁殖而成的,D項(xiàng)正確。1.下列有關(guān)微生物分離、純化及計(jì)數(shù)的敘述,錯(cuò)誤的是(
)A.用富含纖維素的培養(yǎng)基富集培養(yǎng)纖維素分解菌B.平板劃線法通過連續(xù)劃線將聚集的菌種分離并進(jìn)行計(jì)數(shù)C.稀釋涂布平板法通過系列梯度稀釋可將微生物分離D.用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)活菌時(shí),實(shí)驗(yàn)結(jié)果往往偏大答案:B解析:纖維素是纖維素分解菌的碳源,因此常用富含纖維素的培養(yǎng)基富集培養(yǎng)纖維素分解菌,A項(xiàng)正確。平板劃線法通過連續(xù)劃線將聚集的菌種分離然后培養(yǎng),但不能用于微生物的計(jì)數(shù),B項(xiàng)錯(cuò)誤。稀釋涂布平板法通過系列梯度稀釋可將微生物分離,C項(xiàng)正確。用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)活菌時(shí),會(huì)將死菌也統(tǒng)計(jì)在內(nèi),導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果往往偏大,D項(xiàng)正確。2.下圖表示分離某種以尿素為氮源的細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)過程,下列敘述錯(cuò)誤的是(
)A.土樣從有哺乳動(dòng)物尿液的地方選取,獲得目的菌種的概率較高B.為驗(yàn)證尿素固體培養(yǎng)基具有選擇作用,可用牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基作對(duì)照C.需將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組平板倒置,放入37℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24~48hD.在尿素固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的都是以尿素為氮源的細(xì)菌D解析:在含哺乳動(dòng)物尿液的土壤中有較多能合成脲酶的細(xì)菌,因此土樣從有哺乳動(dòng)物尿液的地方選取,獲得目的菌種的概率較高,A項(xiàng)正確。取不同稀釋倍數(shù)的土壤稀釋液各0.1
mL,分別涂布于牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基和尿素固體培養(yǎng)基上,其中牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基作為對(duì)照,用以說明尿素固體培養(yǎng)基是否具有選擇作用,B項(xiàng)正確。在尿素固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的大多數(shù)是以尿素為氮源的細(xì)菌,還有一些是利用空氣中N2的微生物等,D項(xiàng)錯(cuò)誤。3.我國科學(xué)家從北極分離、鑒別出了一種耐低溫細(xì)菌,過程如下:①接種在人造海水中,15℃條件下振蕩培養(yǎng)3h;②梯度稀釋后將樣品涂布在TYS培養(yǎng)基中(0.5%胰蛋白胨、0.1%酵母提取物、1.5%瓊脂),15℃條件下培養(yǎng)7d;③挑取生長(zhǎng)的菌落,進(jìn)行平板劃線,15℃條件下培養(yǎng)后選擇不同形態(tài)的菌落進(jìn)一步培養(yǎng)、鑒別和保藏。下列說法錯(cuò)誤的是(
)A.TYS培養(yǎng)基是含有機(jī)碳源、氮源的固體培養(yǎng)基B.人造海水、培養(yǎng)皿等在使用前需要進(jìn)行滅菌處理C.涂布后再次劃線培養(yǎng)的目的是進(jìn)一步純化所得菌種D.分析所有菌落能還原采樣點(diǎn)所有微生物的種類與含量D解析:由于培養(yǎng)條件限制,有一些菌種可能無法培養(yǎng)出來,因此不能還原采樣點(diǎn)所有微生物的種類與含量。4.氰化物是指帶有氰基(—CN)的化合物,許多氰化物有劇毒,極少量就會(huì)使生物在短時(shí)間內(nèi)中毒死亡。采用生物法降解氰化物是減輕水中氰化物污染的有效途徑之一。自然界中對(duì)氰化物有降解能力的微生物約有50種,它們能產(chǎn)生腈水合酶和腈水解酶等,最終將氰化物中的C和N轉(zhuǎn)變?yōu)镃O2和NH3。請(qǐng)回答下列問題。(1)欲從水體中分離出能夠降解氰化物的微生物,首先應(yīng)制備2種培養(yǎng)基,一種是牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,另一種是以
作為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基;然后將2種培養(yǎng)基倒平板,設(shè)置如下表所示的對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組。
對(duì)照組實(shí)驗(yàn)組①②③已接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基平板④對(duì)照組①②分別為
。若對(duì)照組的平板上沒有菌落生長(zhǎng),說明培養(yǎng)基在使用前未被雜菌污染;若實(shí)驗(yàn)組③平板上的菌落數(shù)顯著多于同一稀釋倍數(shù)的④平板上的菌落數(shù),說明
。
(2)用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)時(shí),同一稀釋度下應(yīng)至少對(duì)
個(gè)平板進(jìn)行重復(fù)計(jì)數(shù)。若某同學(xué)在4個(gè)平板培養(yǎng)基上分別接種稀釋倍數(shù)為1×106的菌液0.1mL,培養(yǎng)后菌落數(shù)分別為155、160、176、149,則每毫升原菌液中上述目的菌的數(shù)量約為
個(gè)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,使用過的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行
處理才能倒掉,以防造成環(huán)境污染。
(3)脫除污水中氰化物的方法有多種,目前采用較多的是化學(xué)氧化法,但該處理過程中易產(chǎn)生毒性比HCN更大的揮發(fā)性氣體CNCl。與化學(xué)氧化法相比,生物降解法具有更好的應(yīng)用前景,原因是
。
答案:(1)氰化物未接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基平板和未接種的選擇培養(yǎng)基平板選擇培養(yǎng)基具有選擇作用(2)3
1.6×109滅菌(3)生物降解法能將氰化物徹底分解成CO2和NH3等產(chǎn)物,比化學(xué)氧化法更安全解析:(2)用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)時(shí),同一稀釋度下應(yīng)至少對(duì)3個(gè)平板進(jìn)行重復(fù)計(jì)數(shù),然后求平均值,這樣可以減小實(shí)驗(yàn)誤差。若某同學(xué)在4個(gè)平板培養(yǎng)
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