2016年臨床基因擴(kuò)增檢驗實驗室質(zhì)量手冊

目錄

實驗室公正性說明

修訂頁

第一章質(zhì)量方針

分子生物實驗室組織結(jié)構(gòu)圖

分子生物實驗室設(shè)置平面圖

第二章管理程序文件

程序管理文件編碼目錄JS-LJ-SMP0000-000

實驗室內(nèi)務(wù)管理程序JS-LJ-SMP0001-000

實驗室人員配置及培訓(xùn)程序JS-LJ-SMP0002-000

實驗室質(zhì)量控制管理程序JS-LJ-SMP0003-000

儀器設(shè)備管理程序JS-LJ-SMP0004-000

臨床標(biāo)本的管理程序JS-LJ-SMP0005-000

實驗室生物防護(hù)與安全管理程序JS-LJ-SMP0006-000

實驗室文件、記錄的管理程序JS-LJ-SMP0007-000

實驗耗材購買、驗收、儲放程序JS-LJ-SMP0008-000

抱怨處理程序JS-LJ-SMP0009-000

儀器設(shè)備校準(zhǔn)程序JS-LJ-SMPOO10-000

實驗室檢測結(jié)果報告程序JS-LJ-SMP0011-000

檢驗過程中發(fā)生故障時的應(yīng)急處理程序JS-LJ-SMP0012-000

實驗室清潔消毒程序JS-LJ-SMP0013-000

文件修改程序JS-LJ-SMP0014-000

腫瘤分子檢測實驗室標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件編碼目錄JS-LJ-S0P0000-000

石蠟包埋組織DNA提取標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程JS-LJ-S0P0001-000

石蠟包埋組織樣本RNA提取標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程JS-LJ-SGP0002-000

血液DNA提取標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程JS-LJ-S0P0003-000

口腔拭子/唾液DNA提取標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程JS-LJ-S0P0004-000

組織DNA提取標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程JS-LJ-S0P0005-000

組織RNA提取標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程JS-LJ-S0P0006-000

反轉(zhuǎn)錄標(biāo)準(zhǔn)操作流程JS-LJ-SGP0007-000

基因mRNA表達(dá)檢測標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程JS-LJ-S0P0008-000

EGFR基因突變Q-PCR標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程JS-LJ-S0P0009-000

KRAS基因突變Q-PCR標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程JS-LJ-SOPOO10-000

BRAF基因突變Q-PCR標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程JS-LJ-SOPOO11-000

PDGFRA基因突變Q-PCR標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程JS-LJ-SOPOO12-000

葉酸基因多態(tài)性Q-PCR標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程JS-LJ-SOPOO13-000

基因SNPQ-PCR標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程JS-LJ-SOPOO14-000

lpl9qLOH標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程JS-LJ-SOPOO15-000

MGMT甲基化標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程JS-LJ-SOPOO16-000

樣本脫包、分類、編號、登錄、發(fā)放標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程JS-LJ-SOPOO17-000

臨床標(biāo)本采集、驗收、拒收標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程JS-LJ-SOPOO18-000

臨床標(biāo)本保存標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程JS-LJ-S0P0019-000

試劑質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程JS-LJ-S0P0020-000

實驗結(jié)果有效性判斷標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程JS-LJ-S0P0021-000

室內(nèi)質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程JS-LJ-SOP0022-000

室間質(zhì)量評價標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程JS-LJ-S0P0023-000

主要儀器使用、維護(hù)、校準(zhǔn)操作規(guī)程JS-LJ-SOP0024-000

實驗室廢棄物處理程序JS-LJ-S0P0025-000

申請單必須信息JS-LJ-S0P0026-000

腫瘤個體化檢測樣本采集注意事項JS-LJ-SGP0027-000

葉酸基因檢測樣本采集注意事項JS-LJ-S0P0028-000

檢測報告標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程JS-LJ-SQP0029-000

修訂頁

修訂修訂的

簡要修訂內(nèi)容批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期

序號章節(jié)條款

第一章

質(zhì)

里

方

針

質(zhì)量方針

題目：質(zhì)量方針起草：日期：

審核：日期：

編號：JS-LJ-ZLC0001-000批準(zhǔn)：日期：

頒發(fā)部門：技術(shù)部生效日期：

分發(fā)部門：技術(shù)部

臨床基因擴(kuò)增檢驗實驗室是嚴(yán)格按照衛(wèi)生部、山東省臨床基因擴(kuò)增實驗室

規(guī)范化、標(biāo)準(zhǔn)化要求進(jìn)行管理與操作，我中心的質(zhì)量方針為：公正、科學(xué)、

準(zhǔn)確、高效

我們的檢驗工作必須做到：

行為公正一任何情況下，不被各種利益所驅(qū)動，客觀公正、獨立誠實

地開展檢驗工作。

方法科學(xué)一遵守國家有關(guān)法律、法規(guī)，依據(jù)有關(guān)檢驗標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范。

數(shù)據(jù)準(zhǔn)確一認(rèn)真執(zhí)行本中心工作程序，對檢驗工作進(jìn)行全過程質(zhì)量控

制，確保檢驗數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可靠性。

辦事高效一在規(guī)定的工作日內(nèi)接受客戶委托，出具檢驗報告。

分子實驗室組織結(jié)構(gòu)圖

題目：分子生物實驗室組織結(jié)構(gòu)圖起草：日期：

審核：日期：

編號：JS-LJ-ZLC0002-000批準(zhǔn)：日期：

頒發(fā)部門：技術(shù)部生效日期：

分發(fā)部門：技術(shù)部

第二章

管

理

程

序

文

件

JS-LJ-SMPOOO1-000

實驗室內(nèi)務(wù)管理程序

題目：實驗室內(nèi)務(wù)管理程序起草：日期：

審核：日期：

編號:JS-LJ-SMPOOO1-000批準(zhǔn)：日期：

頒發(fā)部門：技術(shù)部生效日期：

分發(fā)部門：技術(shù)部

1.目的：防止實驗室交叉污染，保證實驗室的正常運行，確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和

實驗人員的安全性。

2.適用范圍：本制度適用于PCR實驗室及相關(guān)人員，明確實驗室各分區(qū)的內(nèi)務(wù)工

作。

3.程序

3.1.實驗室的設(shè)置和人流、物流管理

3.1.1.本中心在二樓大實驗室內(nèi)設(shè)置臨床基因擴(kuò)增檢驗實驗室，即PCR實驗室。

3.1.2.PCR實驗室的設(shè)置分四個獨立工作區(qū)：PCR試劑準(zhǔn)備區(qū)（一區(qū)）、PCR樣本處

理區(qū)（二區(qū)）、PCR擴(kuò)增區(qū)（三區(qū)）、PCR產(chǎn)物分析區(qū)（四區(qū)），各區(qū)設(shè)有專門的責(zé)任

人。各區(qū)門前有醒目標(biāo)志，每個區(qū)都設(shè)置緩沖區(qū)，用于更換工作服、工作鞋及維持空

氣流向。進(jìn)入各個工作區(qū)域工作時，必須嚴(yán)格遵守單一方向順序：即從第一區(qū)的試劑

準(zhǔn)備區(qū)一-?第二區(qū)的樣本處理區(qū)一-?第三區(qū)的擴(kuò)增區(qū)一-＞第四區(qū)的產(chǎn)物分析區(qū)。嚴(yán)禁

誤入和逆向進(jìn)入各工作區(qū)。一、二區(qū)通過排風(fēng)裝置保持正壓，三、四區(qū)通過抽風(fēng)裝置

保持負(fù)壓。

3.1.3,各區(qū)配備專用的儀器、設(shè)備、輔助設(shè)施、耗材、清潔用品、辦公和消毒用

品，并有明顯的區(qū)域標(biāo)示，須貼上不同顏色標(biāo)簽予以區(qū)別：第一區(qū)為藍(lán)色標(biāo)簽，第二

區(qū)為綠色標(biāo)簽，第三區(qū)為白色標(biāo)簽，第四區(qū)為粉色標(biāo)簽不得混用。

3.1.4,各區(qū)配有不同顏色工作服，第一區(qū)為藍(lán)色，第二區(qū)為綠色，第三區(qū)為白色，

第四區(qū)為粉色，進(jìn)入各區(qū)實驗室，必須更換本室有顏色標(biāo)識的工作服，換上專用鞋，

帶上手套。

3.1.5.實驗室的物流同樣嚴(yán)格遵守上述唯一流向制度，并通過傳遞窗進(jìn)行傳遞。

3.2實驗室清潔消毒管理

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3.2.1.實驗室工作服應(yīng)每周由專人定期清洗和消毒。標(biāo)本制備區(qū)工作服必須先進(jìn)行消

毒。

3.2.2.實驗結(jié)束后實驗人員必須立即對工作區(qū)進(jìn)行清潔消毒，操作完成后打開排氣

扇。桌面在工作結(jié)束后，必須立即用消毒液（2g/L有效氯含量或75%酒精等）擦拭，并

將可移動紫外燈調(diào)至實驗臺60-90cm內(nèi)照射消毒30-60min,室內(nèi)空氣紫外燈消毒

30-60min。

3.2.3.各區(qū)配備專用清潔工具，并有明顯的區(qū)域標(biāo)示，不得混用。

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實驗室人員配置及培訓(xùn)程序

題目：實驗室人員配置及培訓(xùn)起草：日期：

程序?qū)徍耍喝掌冢?/p>

編號：JS-LJ-SMP0002-000批準(zhǔn)：日期：

頒發(fā)部門：技術(shù)部生效日期：

分發(fā)部門：技術(shù)部

1.目的：保證實驗室有足夠數(shù)量合格的工作人員，確保能夠保質(zhì)保量完成相應(yīng)的工

作任務(wù)。

2.適用范圍：本程序適用于實驗室人員配置、管理、培訓(xùn)及考核，所有工作人員均

應(yīng)熟知并遵守該程序。

3.程序

3.1.人員要求

3.1.1.實驗室工作人員應(yīng)為醫(yī)學(xué)檢驗專業(yè)或相關(guān)專業(yè)畢業(yè)，具有中級技術(shù)職稱或大

中專以上學(xué)歷。

3.1.2.實驗室工作人員應(yīng)參加衛(wèi)生部或市臨檢中心舉辦的PCR技術(shù)培訓(xùn)，并取得合

格證。

3.1.3.對于新進(jìn)入本室的人員，應(yīng)在實驗室有培訓(xùn)合格證的上級技術(shù)人員的指導(dǎo)

下進(jìn)行實驗工作，實驗報告由有資格的本室工作人員出具，并應(yīng)在最短的時間內(nèi)取得

上崗培訓(xùn)合格證。

3.2.人員配置

3.2.1.實驗室應(yīng)根據(jù)工作需要配備足夠的工作人員，目前實驗室操作人員4人，其

中2人已獲得培訓(xùn)合格證，視工作量的增加和業(yè)務(wù)發(fā)展需要，適當(dāng)增加工作人員。

3.2.2.各級技術(shù)人員履行相應(yīng)的工作職責(zé)。

3.3.人員培訓(xùn)及考核

3.3.1.實驗室負(fù)責(zé)人（或技術(shù)負(fù)責(zé)人）定期參加衛(wèi)生部PCR室間質(zhì)評總結(jié)會。

3.3.2.實驗室工作人員定期參加相關(guān)學(xué)術(shù)交流會議。

3.3.3.安排未取得上崗培訓(xùn)合格證的工作人員在合適的時間內(nèi)參加技術(shù)培訓(xùn)。

3.4.人員管理

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3.4.1實驗室建立所有工作人員的技術(shù)檔案，包括：學(xué)歷、任職資格、發(fā)表論文、

研究成果、培訓(xùn)等相關(guān)材料復(fù)印件。

3.4.2技術(shù)檔案包括文本檔案和電子檔案，文本檔案每年更新1次。

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實驗室質(zhì)量控制管理程序

題目：實驗室質(zhì)量控制管理程起草：日期：

序?qū)徍耍喝掌冢?/p>

編號：JS-LJ-SMP0003-000批準(zhǔn)：日期：

頒發(fā)部門：技術(shù)部生效日期：

分發(fā)部門：技術(shù)部

1.目的：監(jiān)控本實驗室常規(guī)工作的可靠性和有效性，確定檢測結(jié)果能否報告。

2.適用范圍：本程序適用于實驗室臨床檢測實驗全過程，實驗室工作人員均須熟知

并遵守本程序，并逐步完善室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評工作。

3.程序

3.1.室內(nèi)質(zhì)控

3.1.1.由于核酸擴(kuò)增的高敏感性，為避免假陽性和假陰性，必須對DNA和RNA分析

的各步進(jìn)行質(zhì)量控制，以保證測定結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。室內(nèi)質(zhì)控包括標(biāo)本制備、

逆轉(zhuǎn)錄、擴(kuò)增和產(chǎn)物分析中的每一步。

3.1.2.逆轉(zhuǎn)錄和擴(kuò)增：包括陽性質(zhì)控和陰性質(zhì)控。對逆轉(zhuǎn)錄和核酸擴(kuò)增的質(zhì)控可使

用內(nèi)標(biāo)質(zhì)控方法也可采用外標(biāo)質(zhì)控方法。

3.1.3.在測定血清/血漿病原體如HBV-DNA、HCV-RNA等時，應(yīng)使用市臨檢中心統(tǒng)一

發(fā)放的質(zhì)控品作為質(zhì)控樣本，與待測臨床標(biāo)本等同處理提取核酸及擴(kuò)增，以判斷逆轉(zhuǎn)

錄及擴(kuò)增檢測的效果。

3.1.4.質(zhì)控樣本在擴(kuò)增時必須使用與患者的標(biāo)本相同的主反應(yīng)混合液。

3.1.5.每一個PCR反應(yīng)都必須設(shè)外加陰性質(zhì)控（污染監(jiān)測質(zhì)控）。

3.1.6.測定結(jié)果的評價：

3.1.6.1.采用實時熒光定量PCR檢測方法，在判斷結(jié)果時，應(yīng)先對擴(kuò)增的熒光信

號作出定性判斷，然后再進(jìn)行定量分析，避免一些非特異性熒光信號對結(jié)果分析的干

擾。

3.1.6.2.當(dāng)質(zhì)控標(biāo)本實驗數(shù)據(jù)在控時，方可發(fā)出臨床標(biāo)本的檢測報告。

3.1.6.3.每次實驗的質(zhì)控數(shù)據(jù)均要作記錄，如有失控現(xiàn)象應(yīng)及時分析失控原因并

采取措施，并做記錄。

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3.2.室間質(zhì)評

3.2.1.參加山東省或衛(wèi)生部臨檢中心相關(guān)檢測的室間質(zhì)量評價。

3.2.2.室間質(zhì)控樣本的接收和驗收參見室間質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。

3.2.3.質(zhì)控標(biāo)本的檢測按常規(guī)臨床標(biāo)本對待，檢測結(jié)果須在截止日期前上報。

3.2.4.對室間質(zhì)評的反饋結(jié)果進(jìn)行分析，確定工作中須修正的環(huán)節(jié)。查閱同行對有

關(guān)試劑盒的使用效果。

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儀器設(shè)備管理程序

題目：儀器設(shè)備管理程序起草：日期：

審核：日期：

編號：JS-LJ-SMP0004-000批準(zhǔn)：日期：

頒發(fā)部門：技術(shù)部生效日期：

分發(fā)部門：技術(shù)部

1.目的：確保實驗室儀器設(shè)備得到妥善的管理。確保檢測質(zhì)量，保障儀器設(shè)備的使

用壽命。

2.適用范圍：本程序適用于基因擴(kuò)增檢驗診斷室所有的儀器設(shè)備的購置、驗收、使

用、校正和維護(hù)管理。

3.程序

3.1.儀器購買原則：根據(jù)中心的有關(guān)規(guī)定本著“質(zhì)優(yōu)價廉”進(jìn)行，所購儀器必須三

證齊全（生產(chǎn)許可證、產(chǎn)品注冊證、經(jīng)營執(zhí)照），并能與基因診斷實驗室的工作條件相

符外包裝：廠名廠址、檢測、批準(zhǔn)文號、批號和有效期等。

3.2.儀器購買程序

3.2.1.儀器廠家的確定：先由實驗操作人員提出初步意見，提供2家或2家以上（特

殊情況1家亦可）試劑廠家的有關(guān)儀器信息，提交中心儀器審核組討論。

3.2.2.儀器的購買：由物流部負(fù)責(zé)與供貨商聯(lián)系供貨，交儀器審核組討論決定。

3.3.儀器的驗收：供貨商送來儀器后由物流部人員和實驗操作人員共同驗收，在廠

家的供貨清單上簽字。

3.4.儀器的放置：根據(jù)儀器本身的要求及基因診斷實驗室各區(qū)的要求安放儀器。

3.5.基因診斷實驗室的主要儀器設(shè)備均需建立檔案，檔案內(nèi)容包括：設(shè)備的名稱及

型號、制造商名稱、設(shè)備編號、啟用日期、目前放置地點、設(shè)備責(zé)任人，并應(yīng)有儀器

的標(biāo)準(zhǔn)操作SOP或其它技術(shù)資料復(fù)印件。

3.6.常規(guī)儀器設(shè)備的操作使用程序

3.6.1.儀器設(shè)備的使用授權(quán)

3.1.6.1.僅有本實驗室工作人員有權(quán)使用實驗室的儀器設(shè)備。

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3.1.6.2.儀器設(shè)備的使用者在使用前首先必須熟悉儀器設(shè)備的操作使用程序并經(jīng)

中心主任考核認(rèn)可。

3.1.6.3.PCR實驗室現(xiàn)有工作人員均經(jīng)工程師操作培訓(xùn)，共同完成實驗室檢測系

統(tǒng)的建立，管理文件的撰寫工作。

3.6.2.儀器的使用

3.6.2.1.儀器設(shè)備的使用嚴(yán)格遵守分區(qū)使用管理。

3.6.2.2.儀器設(shè)備的使用必須嚴(yán)格遵循儀器設(shè)備的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。

3.7.常規(guī)儀器設(shè)備的維護(hù)保養(yǎng)程序

3.7.1,儀器設(shè)備應(yīng)定期校準(zhǔn)，具體參照“儀器設(shè)備校準(zhǔn)程序”。

3.7.2.儀器出現(xiàn)故障應(yīng)作記錄和處理意見，如不能正常使用，應(yīng)填寫維修申請單，

交儀器部設(shè)備維修人員或相關(guān)專門維修單位進(jìn)行處理。

3.8.儀器應(yīng)有工作狀態(tài)標(biāo)識，正常運行的各區(qū)儀器應(yīng)貼有相應(yīng)的標(biāo)簽（綠色）以表明

其狀態(tài)。待維護(hù)的儀器用黃色標(biāo)簽。有故障待修暫停儀器用紅色標(biāo)簽。需定期作校準(zhǔn)

或檢定的儀器應(yīng)有校準(zhǔn)或檢定日期及下次校準(zhǔn)或檢定日期的記錄。

3.9.儀器設(shè)備的報廢經(jīng)提出申請后，由中心有關(guān)人員統(tǒng)一處理。

3.10.本實驗室所有儀器、設(shè)備均為專用不外借。

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臨床標(biāo)本的管理程序

題目：臨床標(biāo)本的管理程序起草：日期：

審核：日期：

編號：JS-LJ-SMP0005-000批準(zhǔn)：日期：

頒發(fā)部門：技術(shù)部生效日期：

分發(fā)部門：技術(shù)部

1.目的：加強(qiáng)標(biāo)本采集、運送、貯存、廢棄的管理，保證檢驗結(jié)果準(zhǔn)確性與有效

性。

2.適用范圍：本程序適用于各類臨床標(biāo)本的管理。

3.程序

3.1.標(biāo)本的唯一?性標(biāo)識：標(biāo)識構(gòu)成——中心代碼、病人姓名、標(biāo)本采集日期、檢

測、該檢測批次的標(biāo)本序號，無間隔符號。標(biāo)本的唯一性標(biāo)識須字跡清晰明了，不得

隨意作任何涂改；必須時，在舊標(biāo)識上劃雙線更改，更改后應(yīng)保持舊標(biāo)識可辨識。具

體見“標(biāo)本唯標(biāo)識編號操作規(guī)程”。外包裝：廠名廠址、檢測、批準(zhǔn)文號、批號和

有效期等。

3.2.標(biāo)本的采集、驗收、拒收：本實驗室檢測標(biāo)本為血清，要求用真空采血管采集

血液標(biāo)本；接收標(biāo)本時應(yīng)核對標(biāo)本與檢驗申請單的一致性。標(biāo)本接受人須檢查標(biāo)本狀

態(tài)：標(biāo)本合乎要求，須在標(biāo)本記錄上注明合格，作進(jìn)一步處理；標(biāo)本不合格，工作人

員有權(quán)拒受標(biāo)本，其它后續(xù)處理過程中發(fā)現(xiàn)的不合格，應(yīng)記錄其狀態(tài)并通知相關(guān)醫(yī)院

重新送檢。具體見“臨床標(biāo)本采集、驗收、拒收操作規(guī)程”。

3.3.臨床標(biāo)本的保存：當(dāng)天不檢測的標(biāo)本可經(jīng)離心后吸取血清及時放置于-20℃保

存。具體見“臨床標(biāo)本保存操作規(guī)程”。

3.4.標(biāo)本的安全處理：實驗室所有的廢棄標(biāo)本、使用過的耗材等均應(yīng)放入含相應(yīng)濃

度的有效氯消毒液中，然后再作相應(yīng)的處理。所有標(biāo)本均可能具有傳染性，須嚴(yán)格遵

守檢驗中心有關(guān)院內(nèi)感染及醫(yī)用垃圾的管理和處理規(guī)定，工作人員須注意保持并隨時

檢查容器的完整和無標(biāo)本外泄發(fā)生。具體見“實驗室廢棄物處理程序”和“實驗室生

物防護(hù)和安全管理程序”。

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實驗室生物防護(hù)與安全管理程序

題目：實驗室生物防護(hù)與安全起草：日期：

管理程序?qū)徍耍喝掌冢?/p>

編號:JS-LJ-SMP0006-000批準(zhǔn)：日期：

頒發(fā)部門：技術(shù)部生效日期：

分發(fā)部門：技術(shù)部

1.目的：保證實驗室、實驗人員和外部環(huán)境的安全。

2.適用范圍：本程序適用于整個臨床基因診斷實驗室。

3.程序：根據(jù)《中華人民共和國傳染病防治法》，參照《微生物和生物醫(yī)學(xué)實驗室生

物安全通用準(zhǔn)則》以及山東省臨床檢驗中心下發(fā)的《山東省臨床檢驗專業(yè)質(zhì)控督查基本

內(nèi)容和要求》，對本實驗室中各種危險因素采取有效的控制措施，預(yù)防實驗室中存在的

污染源對實驗室、實驗人員和環(huán)境的污染，具體內(nèi)容詳見中心文件“生物安全手

冊nn，，o

3.1.嚴(yán)格執(zhí)行生物防護(hù)和安全制度，監(jiān)控各種危險因素，采取有效控制措施，注意個

人生物安全防護(hù)，實驗中嚴(yán)格按照各種標(biāo)準(zhǔn)操作程序操作外包裝：廠名廠址、檢測、

批準(zhǔn)文號、批號和有效期等。

3.2.每天更換廢液缸的2g/L有效氯含量消毒液，并保證2g/L有效氯含量消毒液用量為

廢液缸內(nèi)總液量的1/5左右。正確配置使用消毒液。如不當(dāng)使用消毒液也能散布污染通

過空白對照、陰性對照、陽性對照和弱陽性（低拷貝數(shù)）對照進(jìn)行質(zhì)控。

3.3.實驗臺面日常清潔時使用75%的酒精擦拭。每區(qū)每天實驗前后紫外燈照射30—60

min,如有需要可延長照射時間，對工作臺面實驗前后也要用紫外燈照射30—60min,

并作好記錄。

3.4.標(biāo)本采集、運送過程中，應(yīng)保持容器完好，無泄漏。工作桌面或地面一旦有標(biāo)本

污染時，應(yīng)及時用含氯消毒液清潔，再用75%的酒精清潔桌面。

3.5.實驗廢棄物、患者樣本均可能具有傳染性，應(yīng)按照生物傳染性質(zhì)對待，應(yīng)嚴(yán)格按

照實驗室廢棄物處理制度處理。

3.6.有下列情況之一者，還需另外消毒：手接觸有傳染性的微生物；水龍頭、水池肥

皂、工作服可能同時被大量細(xì)菌污染者。消毒劑可用2g/L有效氯含量消毒液。

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3.7.其它安全措施：

3.7.1.在基因擴(kuò)增檢驗實驗室門上需貼上生物危害標(biāo)志，非工作需要，其他人員不

得入內(nèi)。與實驗無關(guān)的任何私人物品嚴(yán)禁入內(nèi)。

3.7.2.實驗室工作人員應(yīng)接受生物安全相關(guān)培訓(xùn)，了解病原體感染的途徑和預(yù)防方

法。

3.7.3.接觸感染性物質(zhì)的實驗室人員必須作好個人防護(hù)，戴好手套、口罩和帽子，

禁止裸手接觸任何物質(zhì)，不要戴著手套觸摸皮膚。

3.7.4.實驗使用后的廢物按照不同的處理要求進(jìn)行處理。

3.7.5.實驗人員進(jìn)入PCR實驗工作區(qū)，應(yīng)換上各區(qū)的專用工作服，離開時脫下該區(qū)

的工作服，并掛在指定的地方。工作結(jié)束后，立即洗手才可離開。

3.7.6.實驗結(jié)束后必須立即對工作區(qū)進(jìn)行清潔消毒。桌面在工作結(jié)束后，必須立即

用消毒液（2g/L有效氯含量消毒液或75給酉精等）擦拭，并將可移動紫外燈調(diào)至距實驗

臺60-90cm內(nèi)照射消毒30-60min（＞

3.7.7.保證實驗室所用的實驗消耗品均經(jīng)過高壓滅菌處理。

3.7.8.制定防火、防盜措施：①及時檢查電線是否老化，發(fā)現(xiàn)隱患應(yīng)及時排除；②

防盜措施：設(shè)內(nèi)保安全機(jī)制，由PCR室工作人員為安全員，負(fù)責(zé)工作完畢后檢查門窗。

3.7.9.要嚴(yán)格執(zhí)行以上各項措施，并定期由室負(fù)責(zé)人對以上措施的落實情況予以調(diào)

查。如調(diào)查不合格，對相應(yīng)責(zé)任人進(jìn)行處罰，并限期整改。

4.應(yīng)急措施:

4.1.工作人員在實驗過程中懷疑被感染、發(fā)生重大生物污染時，應(yīng)立即停止試驗并報

告上級，并暫時關(guān)閉實驗室，進(jìn)行嚴(yán)格的消毒，并根據(jù)實際情況，采取相應(yīng)有效措施

避免感染的發(fā)生或蔓延。如遇實驗中手指被劃破，應(yīng)立即用水沖洗、消毒包扎傷口，

如此標(biāo)本為陽性，應(yīng)立即接種疫苗，同時上報山東省臨檢中心，提請再次審核實驗室

消毒隔離情況。

4.2.在此期間，為了確保報告的及時，將病人標(biāo)本送往其他經(jīng)衛(wèi)生部審批的實驗室檢

測。

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實驗室文件、記錄的管理程序

題目：實驗室文件、記錄的管起草：日期：

理程序?qū)徍耍喝掌冢?/p>

編號：JS-LJ-SMP0007-000批準(zhǔn)：日期：

頒發(fā)部門：技術(shù)部生效日期：

分發(fā)部門：技術(shù)部

1.目的：確保資料的記錄、保存狀態(tài)在控。

2.適用范圍：本程序適用于實驗過程中產(chǎn)生的數(shù)據(jù)、文本資料的記錄和保存的整個

過程，主要有：病人和標(biāo)本信息、實驗操作記錄、實驗檢測結(jié)果、原始檢測申請

單和出具的檢測報告單、儀器使用記錄等。

3.程序

3.1.病人和標(biāo)本信息：接收標(biāo)本后，在標(biāo)本登記表中登記病人和標(biāo)本信息，包

括：病人姓名、性別、年齡、檢測、標(biāo)本類型、標(biāo)本狀態(tài)、送檢日期、標(biāo)本接收人

等，對不符合檢測要求的標(biāo)本在“拒收標(biāo)本登記表”上記錄，并及時通知送檢單位。

當(dāng)天工作結(jié)束后將以上表格分類保存于標(biāo)本接受間外包裝：廠名廠址、檢測、批準(zhǔn)文

號、批號和有效期等。

3.2.檢測過程中的實驗記錄：在專用實驗記錄簿上記載，不同實驗區(qū)的記錄簿

不得混用。試劑準(zhǔn)備和貯存區(qū)應(yīng)記錄檢測所用的試劑盒情況（名稱、批號、數(shù)量）；

標(biāo)本制備區(qū)記錄檢測標(biāo)本數(shù)及在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行的操作過程；在擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)記錄質(zhì)

控結(jié)果和分析。

3.3.PCR儀運行結(jié)束，運行和結(jié)果文件應(yīng)保存在專門的數(shù)據(jù)文件夾中。文件名

應(yīng)保持唯一性，前面英文字母為實驗，后面六位數(shù)字為實驗日期，如HBV020710c

3.4.將病例資料、樣品資料、檢測結(jié)果錄入報告系統(tǒng)，產(chǎn)生結(jié)果報告單，經(jīng)實

驗室主任審核簽名；檢驗申請單、檢驗結(jié)果記錄（包括病例資料）裝訂保存于擴(kuò)增區(qū)

工作臺抽屜里，統(tǒng)一建檔封存，至少保存2年以上。

3.5.實驗記錄要真實，不得隨意涂改，如確需更改，應(yīng)在所需更改內(nèi)容上劃雙

紅線，填上新內(nèi)容，說明更改原因并簽名。

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3.6.實驗記錄須妥善保存，涉及醫(yī)療糾紛及特殊情況外，本室無義務(wù)提供給他

人借閱或復(fù)印通過空白對照、陰性對照、陽性對照和弱陽性（低拷貝數(shù)）對照進(jìn)行質(zhì)

控。

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實驗耗材購買、驗收、儲放程序

題目：實驗耗材購買、驗收、儲起草：日期：

放程序?qū)徍耍喝掌冢?/p>

編號:JS-LJ-SMP0008-000批準(zhǔn)：日期：

頒發(fā)部門：技術(shù)部生效日期：

分發(fā)部門：技術(shù)部

1.目的：規(guī)定試劑購買原則、驗收的程序和試劑的1E確貯存。

2.適用范圍：本程序適用于實驗室所購的診斷試劑盒、實驗耗材。

3.程序

3.1.試劑的購買和管理

3.1.1.試劑購買原則：PCR檢測試劑選用原則“質(zhì)優(yōu)價廉”并與ABI7500儀器配

套，所購試劑必須三證齊全。（三證包括：）

3.1.2.試劑購買程序

3.L2.1試劑廠家的確定：先由具體檢測人員提供2家或2家以上（特殊情況1家亦

可）試劑生產(chǎn)廠家的相關(guān)試劑信息，提交試劑審核組討論并確定第一試劑商和第二試劑

供貨商，將申請單交物流部與供貨商確定試劑價格。

3.1.2.2試劑的購買：操作人員提前1周以上填寫請購單，交由物流部與供貨商聯(lián)系

供貨。

3.1.2.3試劑生產(chǎn)廠商的變更：為保證試劑使用的穩(wěn)定性，原則上一年內(nèi)不變更試劑

生產(chǎn)廠商，如在使用過程中發(fā)現(xiàn)質(zhì)量問題，操作人員及時向?qū)嶒炇邑?fù)責(zé)人匯報，必要

時提出更換試劑生產(chǎn)廠家的要求，交試劑審核組討論決定。

3.1.3.試劑驗收：

3.1.3.1物流部專門人員負(fù)責(zé)核對試劑品名、數(shù)量和價格，并在供貨清單上簽字。

3.1.3.2操作人員負(fù)責(zé)試劑質(zhì)量驗收（內(nèi)外包裝驗收）：

3.1.3.2.1.外包裝要求：包裝完整無損、標(biāo)識清楚齊全（品名、廠家、批準(zhǔn)文號、生

產(chǎn)日期、效期）、所購試劑需保證至少仍有三個月以上效期；

3.1.3.2.2.內(nèi)包裝要求：內(nèi)包裝完好無損、無泄漏，試劑各部分、說明書齊全。供

貨清單由試劑管理人員保管，試劑驗收后登記存儲。

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3.1.4.試劑儲存：試劑盒保存按照說明書規(guī)定進(jìn)行。PCR檢測試劑分區(qū)保存：擴(kuò)增

反應(yīng)體系試劑保存于試劑儲存區(qū)；對照品、定量校準(zhǔn)品、核酸提取試劑儲存于樣品處

理區(qū)。

3.1.5.試劑質(zhì)檢：按照試劑質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)操作程序操作。

3.1.6.試劑出現(xiàn)質(zhì)量問題，立即書面通知實驗室負(fù)責(zé)人員，在其知情同意下，書面

通知物流部辦理退換貨手續(xù)。

3.2.實驗耗材的購買和管理

3.2.1.購買：由實驗室工作人員填寫申請，按需提出所購耗材的品名、規(guī)格、數(shù)

量，由實驗室負(fù)責(zé)人簽字同意后交物流部購買。

3.2.2.驗收：消耗品購進(jìn)后由物流部相關(guān)人員核對數(shù)量、規(guī)格，查驗外包裝是否破

損，如發(fā)生破損或其它質(zhì)量問題，給予退回。由實驗室工作人員負(fù)責(zé)進(jìn)行質(zhì)量驗收。

3.3.實驗操作人員對庫存試劑定期每月檢查，并填寫試劑使用記錄表，不使用過期

試劑，并杜絕浪費現(xiàn)象。

3.4.試劑外借必須征得實驗室負(fù)責(zé)人員同意，并履行中心有關(guān)借出手續(xù)。

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抱怨處理程序

題目：抱怨處理程序起草：日期：

審核：日期：

編號：JS-LJ-SMP0009-000批準(zhǔn)：日期：

頒發(fā)部門：技術(shù)部生效日期：

分發(fā)部門：技術(shù)部

1.目的：“抱怨”往往提示實驗室存在著尚未得到認(rèn)識的漏洞或問題。為正確處理好

“抱怨”，鞏固和完善實驗室質(zhì)量體系，特制訂本程序。

2.適用范圍：本程序適用于來自于患者，臨床醫(yī)護(hù)人員或?qū)嶒炇夜ぷ魅藛T針對檢測結(jié)

果質(zhì)量、服務(wù)質(zhì)量或?qū)嶒炇夜芾淼葐栴}的投訴。每個實驗室工作人員均有責(zé)任接待

申訴者，實驗室負(fù)責(zé)人對抱怨進(jìn)行處理，如超出室負(fù)責(zé)人職權(quán)范圍，應(yīng)經(jīng)中心負(fù)責(zé)

人處理。

3.程序

3.1.接到抱怨

3.2.記錄抱怨

3.3.提出針對具體抱怨的處理方法

3.4.將不在《常見抱怨處理方式》范圍內(nèi)的處理方法交室負(fù)責(zé)人審核

3.5.征求抱怨方對處理方法的意見

3.6.執(zhí)行解決方案

3.7.記錄最后的處理結(jié)果

4.處理措施：

4.1.針對客戶對服務(wù)態(tài)度抱怨的處理措施

4.1.1.接到抱怨后，由室負(fù)責(zé)人責(zé)成相關(guān)人員向客戶致歉。

4.1.2.對患者提出的合理要求及時進(jìn)行處理。

4.1.3.調(diào)查事情原委，根據(jù)調(diào)查結(jié)果對相關(guān)責(zé)任人進(jìn)行處罰。

4.1.4.記錄抱怨及其處理結(jié)果。

4.2.針對客戶對結(jié)果準(zhǔn)確性抱怨的處理措施

4.2.1.為客戶展示原始實驗數(shù)據(jù)。

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4.2.2.向客戶解釋相關(guān)實驗程序和可能臨床情況，幫助客戶解除疑慮。

4.2.3.如確有實驗結(jié)果不符合有效性要求或出現(xiàn)錯誤，則應(yīng)及時糾正錯誤，重新實

驗以得到準(zhǔn)確結(jié)果。同時由室負(fù)責(zé)人向客戶致歉以爭取得到其諒解，按有關(guān)條例對責(zé)任

人進(jìn)行相應(yīng)處罰，并記錄。

4.3.針對客戶對檢測結(jié)果和臨床診斷的符合率抱怨的處理措施

4.3.1.針對客戶抱怨的檢查進(jìn)行從實驗前到實驗后的全程調(diào)查，查找是否存在影響

結(jié)果的因素，并形成書面報告。

4.3.2.就調(diào)查發(fā)現(xiàn)的問題進(jìn)行針對性解決。

4.3.3.與客戶建立定期交流機(jī)制，定期了解臨床使用情況和對臨床作出

解釋。

4.4.針對客戶對結(jié)果發(fā)放時效性抱怨的處理措施

4.4.1.嚴(yán)格按承諾時間發(fā)放臨床報告。

4.4.2.在與客戶交流會上就報告發(fā)放過程及時間作出解釋，獲取臨床對結(jié)果報告時

效性的理解。

5.抱怨解決的原則

5.1.所有實驗室工作人員要認(rèn)真對待客戶及其它部門人員就實驗室工作所提出的抱

怨，對提出抱怨的人員要做到語言文明，熱情接待。

5.2.由實驗室負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)對抱怨申訴進(jìn)行處理，實驗室負(fù)責(zé)人不在時由其委托人處

理，實驗室所有工作人員均有責(zé)任接待申訴者。

5.3.對抱怨和投訴均應(yīng)進(jìn)行相應(yīng)記錄，包括日期、申訴人、申訴內(nèi)容、處理措施、處

理者、聯(lián)系方式等。

5.4.對于當(dāng)時能解決的申訴應(yīng)及時處理，當(dāng)時不能解決的，要限時處理，并明確告知

申訴者。

5.5.如抱怨涉及到實驗室操作程序是否符合《臨床基因擴(kuò)增實驗室管理暫行辦法》、

《臨床基因擴(kuò)增實驗室工作規(guī)范》等，實驗室負(fù)責(zé)人應(yīng)召集實驗室工作人員討論，如實

驗室的操作程序確實不符合有關(guān)規(guī)定，應(yīng)重新修訂操作規(guī)程后執(zhí)行。

5.6.當(dāng)實驗室負(fù)責(zé)人無法滿意解決報怨時，應(yīng)將有關(guān)材料遞交中心，由中心處理。

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儀器設(shè)備校準(zhǔn)程序

題目：儀器設(shè)備校準(zhǔn)程序起草：日期：

審核：日期：

編號:JS-LJ-SMPOO10-000批準(zhǔn)：日期：

頒發(fā)部門：技術(shù)部生效日期：

分發(fā)部門：技術(shù)部

1.目的：確保實驗室儀器設(shè)備得到妥善的管理，確保檢測質(zhì)量。

2.適用范圍：本程序適用于適用于實驗室所有的儀器設(shè)備。

3.程序

3.1.校準(zhǔn)方法：

3.1.1.定量擴(kuò)增儀、生物安全柜、冷凍高速離心機(jī)功能性儀器由各生產(chǎn)廠家每年進(jìn)

行一次維修檢測，并將此作為校準(zhǔn)依據(jù)。各儀器的校準(zhǔn)單位（即生產(chǎn)廠家）見主要儀器

一覽表。

3.1.2.移液器校準(zhǔn)外送專業(yè)機(jī)構(gòu)專業(yè)人員進(jìn)行校準(zhǔn)。

3.1.3.干式恒溫器使用經(jīng)質(zhì)量檢定的溫度計進(jìn)行自行校準(zhǔn)。

3.1.4.溫濕度計校準(zhǔn)以經(jīng)過質(zhì)量計量監(jiān)督局校準(zhǔn)過的其他溫度計和濕度計進(jìn)行校

準(zhǔn)。

3.1.5.移動紫外線消毒車由檢驗中心儀器部專門人員每六個月對紫外燈管的紫外線

進(jìn)行測試。新燈管要求紫外線強(qiáng)度大于或等于90UW/cm；舊燈管紫外線強(qiáng)度大于或等于

2

70UW/cm0每年聯(lián)系生產(chǎn)廠家進(jìn)行一次維護(hù)和檢測，并將此作為校準(zhǔn)依據(jù)。

3.2.校準(zhǔn)計劃

3.2.1,啟用校準(zhǔn)：設(shè)備在投入使用時實施啟用校準(zhǔn)。

3.2.2.周期校準(zhǔn)：設(shè)備在投入使用后，每年實施一次校準(zhǔn)。

3.2.3.維修后校準(zhǔn)：設(shè)備在維修后須經(jīng)校準(zhǔn)方可重新投入使用。

3.2.4,校準(zhǔn)計劃外的校準(zhǔn)：如在檢測及EQA,IQC活動中發(fā)現(xiàn)存在結(jié)果漂移或偏差及

其它可疑情況時，通過分析對可疑設(shè)備及時實施校準(zhǔn)。

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3.2.5.移液器的校準(zhǔn)順序：按照單一流向規(guī)定，對移液器的校準(zhǔn)首先校準(zhǔn)試劑準(zhǔn)備

區(qū)，然后依次為樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)。每校準(zhǔn)完一個區(qū)的移液器，將其放回原處

后，再取下一個區(qū)的移液器進(jìn)行校準(zhǔn)。

3.2.6.校準(zhǔn)安排在不進(jìn)行樣本檢測的日期完成。

3.2.7.校準(zhǔn)的有效標(biāo)識：經(jīng)校準(zhǔn)的設(shè)備加貼綠色標(biāo)簽，標(biāo)簽上應(yīng)標(biāo)明本次校準(zhǔn)的日

期和結(jié)果及下次校準(zhǔn)的計劃預(yù)定日期。

3.2.8.實驗室負(fù)責(zé)人員每年應(yīng)制定書面的各儀器設(shè)備的校準(zhǔn)計劃，經(jīng)實驗室負(fù)責(zé)人

批準(zhǔn)后由各儀器設(shè)備責(zé)任人按計劃實施。

3.3.校準(zhǔn)結(jié)果的審批及記錄保存：每次校準(zhǔn)的結(jié)果須及時送交中心質(zhì)量負(fù)責(zé)人審閱簽

字。校準(zhǔn)記錄須妥善保存于PCR實驗室三區(qū)直至設(shè)備報廢。

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實驗室檢測結(jié)果報告程序

題目：實驗室檢測結(jié)果報告程序起草：日期：

審核：日期：

編號:JS-LJ-SMPOO11-000批準(zhǔn)：日期：

頒發(fā)部門：技術(shù)部生效日期：

分發(fā)部門：技術(shù)部

1.目的：檢測報告是過程的最終輸出，為使報告的生成、發(fā)放、管理受控，特制訂本程

序。

2.適用范圍：本程序適用于本基因擴(kuò)增檢驗實驗室所有臨床檢測的結(jié)果報告，只有經(jīng)PCR

培訓(xùn)并獲得上崗證的工作人員才有權(quán)審核和簽發(fā)報告單。

3.程序

3.1.檢測結(jié)果的報告應(yīng)準(zhǔn)確、清晰、明確、客觀和及時，杜絕虛假報告。

3.2.實時熒光PCR測定時，其檢測數(shù)據(jù)要經(jīng)過分析，避免因非特異性熒光而造成假陽性結(jié)

果。根據(jù)質(zhì)控品判斷PCR擴(kuò)增的有效性，只有當(dāng)質(zhì)控品的實驗數(shù)據(jù)在控時，才可發(fā)出報告，否

則應(yīng)重新測定。

3.3.定量結(jié)果報告以每毫升拷貝數(shù)（拷貝數(shù)/ml）報告，如結(jié)果高于測定方法線性范圍上限，

則對樣本稀釋后再測，結(jié)果乘上稀釋倍數(shù)；如結(jié)果低于方法的線性范圍下限，則報告小于檢測

下限。

3.4.病人檔案及測定結(jié)果及病人檔案一并登記到實驗結(jié)果記錄表中，由室負(fù)責(zé)人管理所有

病人資料。每份報告均應(yīng)由我實驗室出具；報告內(nèi)容至少應(yīng)包括：病人姓名、性別、年齡、樣

本號、標(biāo)本特性、標(biāo)本狀態(tài)、標(biāo)本接收日期及測定、測定方法、結(jié)果、參考范圍以及操作者和

審核者的簽名和檢測日期等內(nèi)容。否則視為無效或虛假報告單。以上記錄實行完整保存，至少

保存2年以上。

3.5.報告單應(yīng)及時發(fā)出。由送化驗單人員負(fù)責(zé)送往各送檢醫(yī)院。

3.6.打印當(dāng)日檢測報告匯總表，存檔，妥善保存2年以上

3.7.當(dāng)臨床科室醫(yī)生要求電話報告結(jié)果時，應(yīng)先確認(rèn)對方身份，核對其所查詢的病人姓

名、病區(qū)床號等情況，方可報告，并明確告知對方，實驗的最終結(jié)果以檢測報告單為準(zhǔn)。

JS-LJ-SMPOO11-000

3.8.當(dāng)患者要求電話報告結(jié)果時，應(yīng)讓患者提供病人基本信息后由送檢醫(yī)院科室負(fù)責(zé)人出

面告知對方其檢測結(jié)果，并需明確告知對方，實驗的最終結(jié)果以檢測報告單為準(zhǔn)。

JS-LJ-SMPOO12-000

檢驗過程中發(fā)生故障時的應(yīng)急處理程序

題目：檢驗過程中發(fā)生故障時的起草：日期：

應(yīng)急處理程序?qū)徍耍喝掌冢?/p>

編號:JS-LJ-SMPOO12-000批準(zhǔn)：日期：

頒發(fā)部門：技術(shù)部生效日期：

分發(fā)部門：技術(shù)部

1.目的：為避免因儀器設(shè)備發(fā)生故障和試劑盒發(fā)生質(zhì)量問題而影響到臨床檢測報告的

及時性和準(zhǔn)確性，特制定本程序。

2.適用范圍：本程序適用于可能影響到檢測報告發(fā)出的儀器設(shè)備和試劑等，對于潛在

著一定的可能影響檢測質(zhì)量的不確定因素，一旦發(fā)生，作為對應(yīng)措施，實驗室應(yīng)有一套相

應(yīng)的應(yīng)急處理程序，室負(fù)責(zé)人有責(zé)任組織并直接監(jiān)督本程序的實施。

3.程序

3.1.實驗室負(fù)責(zé)人接到儀器設(shè)備故障的報警后，立即現(xiàn)場確認(rèn)異常情況的性質(zhì)和故障

程度。

3.2.儀器設(shè)備故障本室不能解決的，應(yīng)及時通知有關(guān)設(shè)備維修人員或供應(yīng)商，具體程

序見儀器設(shè)備管理程序。對于發(fā)生故障的儀器設(shè)備，及時維修的同時，采取以下處理辦

法。

3.2.1.有滿足使用要求的替用設(shè)備的，啟用替用設(shè)備。

3.2.2.可借用其他部門儀器設(shè)備時，核實該設(shè)備的使用狀態(tài)良好后可借用。

3.2.3.替用、借用或備用設(shè)備的使用在滿足質(zhì)量要求的同時，必須同時滿足實驗室管理

措施（特別是防污染）的要求。

3.3.試劑盒質(zhì)量發(fā)生問題，經(jīng)核實后，及時通知供貨商更換另一批次試劑，使用前需

先作質(zhì)量檢測，合格后方可使用。

3.4.當(dāng)有樣本或反應(yīng)管破裂，并泄露于離心機(jī)內(nèi)或擴(kuò)增儀時，應(yīng)停止工作，立即用浸

有75%的乙醇消毒液的棉簽榛拭離心機(jī)或擴(kuò)增儀，然后紫外燈照射30min；將該破管的原

始標(biāo)本按要求保存好與下一批標(biāo)本一起檢測。

3.5.當(dāng)有樣本破裂,并泄露于工作臺面時,應(yīng)用棉簽吸干血清,并用浸有2g/L有效氯消

毒液的毛巾覆蓋30min后，清水擦干再用紫外線燈照射30min。

JS-LJ-SMPOO12-000

3.6.若質(zhì)控品出現(xiàn)問題，應(yīng)更換其他批次的質(zhì)控品。

3.7.如果試劑配制與標(biāo)本處理過程中遇到停電狀況，把試劑、標(biāo)本先保存在冰箱里，

等待電源來時再繼續(xù)操作。如果在擴(kuò)增過程中遇到停電，實驗室內(nèi)部UPS將利用電池組供

電，使PCR實驗操作完成。

3.8.儀器設(shè)備故障或試劑質(zhì)量問題不能得到解決，預(yù)期將會影響到檢測報告的及時發(fā)

出，可將標(biāo)本送至其它實驗室檢查（該實驗室同樣應(yīng)為獲同類認(rèn)準(zhǔn)的PCR檢測實驗室）；

如已影響到報告的及時發(fā)出，應(yīng)向相關(guān)醫(yī)院公告，取得病人和醫(yī)生的諒解。

3.9.影響到檢測報告發(fā)出的情況，應(yīng)在“應(yīng)急處理登記表”作記錄。

JS-LJ-SMP0013-000

實驗室清潔消毒程序

題目：實驗室清潔消毒程序起草：日期：

審核：日期：

編號:JS-LJ-SMPOO13-000批準(zhǔn)：日期：

頒發(fā)部門：技術(shù)部生效日期：

分發(fā)部門：技術(shù)部

1.目的：保證實驗室環(huán)境的整潔，防止污染。

2.適用范圍：適于實驗室工作環(huán)境、實驗臺面、工作服、移液器等的清潔消毒工

作。所有實驗室工作人員應(yīng)熟知并遵守本程序，清潔工作可由實驗室指定人員進(jìn)行。

3.操作程序

3.1.消毒液配制

3.1.1.配制2g/L有效氯消毒液：參照消毒劑說明書配制終濃度為2g/L有效氯消毒

液。

3.1.2.各實驗區(qū)的清潔消毒工具均專用，不可混用。所配制的消毒液只限在當(dāng)天內(nèi)

使用，隔夜如使用時應(yīng)根據(jù)本S0P重新配制。

3.2.紫外消毒

3.2.1.紫外消毒須根據(jù)需要設(shè)定時間，通常為30min,根據(jù)需要適當(dāng)延長時間。

3.2.2.消毒結(jié)束后，關(guān)閉電源開關(guān)。

3.3.實驗室消毒清潔程序

3.3.1,每次實驗前一天和實驗結(jié)束后對各區(qū)進(jìn)行全面消毒。包括實驗臺面、傳遞

窗、地板。

3.3.2.實驗過程中如發(fā)生標(biāo)本或試劑外濺，應(yīng)立即用含2g/L有效氯消毒液濕布覆蓋

污染處30min,再進(jìn)行擦拭，隨后用清水擦洗，并作記錄。

3.3.3.實驗結(jié)束后用含2g/L有效氯消毒液對臺面進(jìn)行清潔，紫外燈照射30min。

3.3.4.實驗結(jié)束后，用移動紫外消毒車對工作臺面進(jìn)行紫外照射30min,并將傳遞

窗紫外燈打開照射30min。

3.3.5.實驗結(jié)束后，開啟室內(nèi)紫外燈對實驗室進(jìn)行紫外照射消毒至少30min。

3.3.6.實驗結(jié)束后，用含2g/L有效氯消毒液對各區(qū)所有儀器設(shè)備進(jìn)行擦拭清潔。

JS-LJ-SMP0013-000

3.3.7.每次對使用過的移液器、鏡子用75%酒精棉球進(jìn)行擦拭。

3.3.8.每周將待清潔工作服高壓滅菌后洗滌消毒，不同實驗區(qū)的工作服隔天洗滌。

JS-LJ-SMPOO14-000

文件修改程序

題目：文件修改程序起草：日期：

審核：日期：

編號：JS-LJ-SMPOO14-000批準(zhǔn)：日期：

頒發(fā)部門：技術(shù)部生效日期：

分發(fā)部門：技術(shù)部

1.目的：保證文件完整性和有效性。

2.適用范圍：本實驗室管理體系的所有文件。

3.程序：

3.1.使用文件的操作人員在實驗過程中發(fā)現(xiàn)某個文件不適合實際工作，應(yīng)書面向室負(fù)責(zé)

人提出申請。

3.2.申請在中心會議上通過，文件即可修改。

3.3.文件修改由原撰寫人執(zhí)行。

3.4.文件首次發(fā)行為第一版，當(dāng)文件有修改后，修改狀態(tài)用阿拉伯?dāng)?shù)字表示，按1、2、

3、4順序遞增，標(biāo)示在版號后。

3.5.修改的文件經(jīng)中心負(fù)責(zé)人審核批準(zhǔn)、所有要求的授權(quán)簽字均已履行后，文件即為正

式發(fā)布，并同時生效執(zhí)行，原文件同時作廢。

3.6.文件修改內(nèi)容的相關(guān)記錄由實驗室負(fù)責(zé)人保存。

JS-LJ-SOPOOO1-000

石蠟包埋組織DNA提取標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

題目：石蠟包埋組織DNA提取標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程起草：日期：

審核：日期：

編號：JS-LJ-SOPOOO1-001批準(zhǔn)：日期：

頒發(fā)部門：技術(shù)部生效日期：

分發(fā)部門：技術(shù)部

1.目的：采用細(xì)胞裂解和血紅素/蛋白沉淀技術(shù)，結(jié)合DNA制備膜選擇性地吸附

DNA,以從石蠟包埋組織中提取高質(zhì)量的基因組DNA。

2.適用范圍：本程序適用于所有石蠟包埋組織樣品的DNA提取。

3.方法原理：利用細(xì)胞裂解液裂解細(xì)胞核釋放基因組DNA,由硅膠膜柱可逆吸附基因

組DNA,經(jīng)蛋白酶消化、漂洗液清洗除去蛋白質(zhì)、脂質(zhì)以及多糖等雜質(zhì)后，用純化液洗

脫獲得基因組DNAo

4.實驗準(zhǔn)備：

4.1.儀器和試劑：水浴鍋，小型常溫高速離心機(jī)，細(xì)胞/組織基因組DNA（離心柱）提

取試劑盒（百泰克），1.5ml離心管，20-200內(nèi)移液器及槍頭，100-100014移液器及

槍頭。

4.2.預(yù)備：實驗前10min打開水浴鍋，調(diào)至56C；另一水浴鍋調(diào)制90C；本實驗操

作過程在抽提專用實驗臺進(jìn)行，穿實驗服，戴乳膠手套及口罩。漂洗液照使用前確認(rèn)

加入無水乙醇，用記號筆在瓶上標(biāo)記。其余溶液TL或CB如果有結(jié)晶或者沉淀，請于

37c水浴重新溶解，并混勻。

4.3.樣本確認(rèn)：根據(jù)樣本登記表的信息對樣本進(jìn)行確認(rèn)，并確認(rèn)樣本抽提類型、樣本

質(zhì)量及是否足量等。

5.實驗步驟：

5.1.組織脫蠟：開啟通風(fēng)櫥；在通風(fēng)處內(nèi)開啟1.5ml離心管管蓋，用移液槍加入1ml

二甲苯，用刀片將5-8片10Pm厚的石蠟生物組織切片（蠟塊組織處理：在石蠟包埋

組織樣品表面輕輕刮去不含組織的石蠟表層，再刮取5T0um厚的薄片，并保證剩余樣

本表面平整，嚴(yán)禁使用摳取，粉碎，切除等操作破壞組織樣本；若是蠟卷，則直接用

干凈的槍頭挑取適量樣本）輕輕刮入L5ml離心管，密蓋，振蕩器振蕩30s；于離心

機(jī)內(nèi)12000rpm離心2min,棄上清至專用廢液缸。注意不要棄掉沉淀。再加入1ml

JS-LJ-S0P0001-000

無水乙醇，密蓋，再用振蕩器充分振蕩混勻；于離心機(jī)內(nèi)120002111離心2111門，棄上

清專用廢液缸。打開管蓋，于室溫或37℃干燥10T5min,至酒精完全揮發(fā)，備用。過

程使用槍頭為一次性耗用物，不得反復(fù)使用。

5.2.消化：加入200間裂解液TL,重懸沉淀，加入3014蛋白酶K,混勻。置于64c

水浴鍋水浴lh（或直至樣品完全溶解），90℃水浴鍋水浴30min,短暫離心，試管壁上

的溶液收集到管底。

5.3.加入200m結(jié)合液CB,渦旋混勻，再加入100月異丙醇，漩渦震蕩充分混勻。

短暫離心，試管壁上的溶液收集到管底。

5.4.轉(zhuǎn)移溶液：將所有的溶液（不要沉淀）都轉(zhuǎn)移到一個吸附柱中，12000rpm離心

30s,倒去收集管中廢液。重新將吸附柱放回收集管中。

5.5.洗滌：向吸附柱內(nèi)加入500以抑制物去除劑IR,棄槍頭，12000rpm離心30s,

倒掉收集管中廢液。

5.6.向吸附柱內(nèi)加入700m漂洗液WB,12000rpm,離心30s,倒掉收集管中廢液，

加500川漂洗液WB,12000rpm,離心30s,倒掉收集管中廢液。

5.7.晾干吸附柱：空轉(zhuǎn)12000rpm2min,將吸附柱放入新的1.5ml離心管中，打開

吸附柱蓋子，室溫放置2min或以上以徹底晾干吸附材料中殘余的酒精。

5.8.洗脫：向吸附膜中間加入65射的洗脫緩沖液EB（65℃預(yù)熱），室溫放置2-3min,

12000rpm離心Imin,離心管中的液體即為抽提的基因組DNA。

5.8.濃度測量：用分光光度計測量DNA濃度。

6.質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn):DNA濃度高于20ng/l4,0D260/0D280約為1.度2.0則認(rèn)為DNA可用,可

直接用于PCR等后續(xù)實驗，否則需重新抽提。若抽提好的DNA暫時不用，可置于-20℃保

存?zhèn)溆谩?/p>

7.關(guān)機(jī)及實驗臺整理：實驗完成后，關(guān)閉水浴鍋，所有用過的移液器調(diào)至最大量程，

擺放整齊，所有用過的東西歸回原位。最后用75%酒精噴灑實驗臺面，2min后擦拭干

凈。

8.注意事項：試劑盒在第一次使用前請按試劑瓶標(biāo)簽說明在漂洗液WB中加入無水乙

醇，并做好標(biāo)記；溶液使用后，應(yīng)避免長期暴露于空氣中，用后應(yīng)及時蓋緊蓋子。剩

余石蠟標(biāo)本在下次接收樣本時返還客服部，并由客服簽字確認(rèn)。

9.參考文獻(xiàn)：細(xì)胞、組織基因組DNA提取試劑盒說明書。（百泰克）

JS-LJ-SQP0002-000

石蠟包埋組織樣本RNA提取標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

題目：石蠟包埋組織樣本RNA提取標(biāo)準(zhǔn)操作起草：日期：

規(guī)程審核：日期：

編號：JS-LJ-SOP0002-000批準(zhǔn)：日期：

頒發(fā)部門：技術(shù)部生效日期：

分發(fā)部門：技術(shù)部

1.目的：柱提法從石蠟包埋組織樣本中提取高質(zhì)量的RNA。

2.適用范圍：本程序適用于所有石蠟包埋組織樣品的RNA提取。

3.方法原理：改進(jìn)的異硫氟酸胭/酚一步法裂解細(xì)胞和滅活RNA,然后總RNA在高離序

鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜，再通過一系列快速的漂洗離心的步驟，漂

洗液將細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除，最后低鹽的RNasefreewater將純凈RNA從硅

基膜上洗脫。

4.實驗準(zhǔn)備：

4.1.儀器和試劑：通風(fēng)櫥，小型高速冷凍離心機(jī)；固定組織基因組RNA（離心柱）提

取試劑盒（百泰克）溶液PTL,蛋白酶K,裂解液MRL,去蛋白液RE,漂洗液R肌

RNase-freeH。70%乙醇，RNase-free吸附柱，氯仿，收集管，移液器及槍頭。

注意：所有接觸樣