DB2306T 183-2023 美國紅楓“秋火焰”組培快繁技術(shù)規(guī)程

ICS65.020.40CCSICS65.020.40CCSB64黑 龍 江 省 大 慶 市 地 方 標 準DB2306/T183—2023美國紅楓"秋火焰"組培快繁技術(shù)規(guī)程2023-12-31發(fā)布 2024-01-31實施大慶市場監(jiān)理局 發(fā)布DB2306/T183—2023DB2306/T183—2023PAGE\*ROMANPAGE\*ROMANII目 次前言 II1范引文件 1語定義 1織養(yǎng)境 1養(yǎng)基 1培基制（分子使度mg/L） 1培基滅菌 2菌系建立 2取時間 2外體毒理 2外體養(yǎng) 2芽殖養(yǎng) 2苗養(yǎng) 3根養(yǎng) 3培馴和栽 3馴化 3移栽 3產(chǎn)案 3前 言本文按GB/T1.1—2020《準工導則 第部分標化件結(jié)和起規(guī)》起草。本文件由黑龍江省大慶市林草局提出。志敏、徐亮、馮滿、翟晶、楊揚DB2306/T183—2023DB2306/T183—2023PAGEPAGE1美國紅楓"秋火焰"組培快繁技術(shù)規(guī)程范圍本文件規(guī)定了美國紅楓（Acerrubrum'RedMaple'）組培快繁的組織培養(yǎng)環(huán)境、培養(yǎng)基、無菌體系的建立、莖芽增殖培養(yǎng)、壯苗培養(yǎng)、生根培養(yǎng)、組培苗馴化與移栽以及生產(chǎn)檔案。本文件適用于大慶地區(qū)美國紅楓組培快繁育苗。（LY/T1882 本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。組織培養(yǎng)環(huán)境參照LY/T1882相關(guān)規(guī)定準備。培養(yǎng)基mg/L）MSΙ（10）每升培養(yǎng)基用量：NH4NO313000mg；KNO319000mg；CaCl2·2H2O400mg；MgSO4·7H2O7400mg；KH2PO41700mg。MSΠ（100）MnSO4·4H2O2230mg；ZnSO4·7H2O860mg；CoCl2·6H2O2.5mg；CuSO4·5H2O25mg；H3BO3620mg；Na2MO4·2H2O25mg；KI83mg；FeSO4·7H2O2780mg；Na2-EDTA3730mg。MSШ（50）煙酸25mg；鹽酸吡哆醇25mg；鹽酸硫胺素5mg。MSⅣ（100）10000mg。MSⅤ（100）50mg。0.1mg/mL～2mg/mL。Ι100Π10mLШ20mL10mL液Ⅴ10mL1000mL30g5g1000mLPH5.8～6.0。培養(yǎng)基配制后，趁熱分裝，240mL的組培瓶裝入30mL-40mL培養(yǎng)基，封口并標明種類。置于高壓滅菌鍋中121℃下滅菌30min。配制好的培養(yǎng)基放到2℃～25℃避光無菌室中避光存放，時間不超過1周。生長季均可取材，5-6月且取一年生半木質(zhì)化帶芽枝條為最佳。將枝條剪成小段，用肥皂水清洗枝條并用流水沖洗1h后，轉(zhuǎn)入超凈工作臺中，用75%酒精浸泡30s后再用2%次氯酸鈉浸泡5min。無菌水沖洗3次～5次后，將消毒后的枝條放入燒杯中，切去3cm～5cm1個～2（。初代培養(yǎng)基組成：改良MS培養(yǎng)基+0.5mg/L6-BA+0.1mg/LTDZ+0.1mg/LGA3（pH6.0。初代培養(yǎng)條件：組培室溫度（24℃±2℃，光照時長14h/d，光照強度1200Lux。初代培養(yǎng)方法：將外植體避光培養(yǎng)3d～5d再進行光暗周期培養(yǎng)。培養(yǎng)30d轉(zhuǎn)移到新鮮培養(yǎng)基上。植株長度≥10cm時，取植株的頂端莖段進行增殖培養(yǎng)。植株截成帶2個～4個芽點、長度為2cm～3cm的莖段接種到增殖培養(yǎng)基中。+0.005mg/LTDZ+0.1mg/L6-BA+0.1mg/LGA3+0.1mg/LIBA（pH6.0。增殖培養(yǎng)條件：同初代培養(yǎng)條件。繼代周期：每隔40d～50d轉(zhuǎn)移到新配制的培養(yǎng)基上。植株長度≥2cm時，去除下部1/3葉片，去除基部愈傷，將處理后的植株頂芽向上垂直接種到壯苗培養(yǎng)基上。+1.0mgLG3+10mgL-BA+.2mg/LIBpH6.0繼代周期：培養(yǎng)30d后轉(zhuǎn)移到生根培養(yǎng)基上。植株度≥4 cm下部1/3片去基傷處后植頂向上直種生根培養(yǎng)上。生根培養(yǎng)基組成：1/2MS培養(yǎng)基+2.0mg/LIBA+1.0mg/LGA3+30g/L蔗糖+1.0g/L活性炭（pH6.0）。1/2MS培養(yǎng)基組成：MS培養(yǎng)基中大量元素減半，其他成分同MS培養(yǎng)基。生根培養(yǎng)條件：同初代培養(yǎng)條件。培養(yǎng)周期：20d。馴化取根長1cm～3cm的組培苗進行煉苗馴化，將培養(yǎng)瓶放置到日光充足但不直射，溫度17℃～25℃50%～70%的溫室中5d～7d1d～20.3%的KMnO42min20℃～30移栽用蛭石、草炭土按照體積比1:2的混合基質(zhì)，裝入育苗盤中。將苗盤浸入多菌靈溶液中消毒。將馴化后的組培苗栽種到基質(zhì)中后澆透水，室溫下遮陰培養(yǎng)5d～7d。待緩苗后再逐漸接受正