考點(diǎn)35微生物的培養(yǎng)技術(shù)及其應(yīng)用（解析版）

考點(diǎn)35微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用（精講+精練）目錄知識(shí)點(diǎn)精準(zhǔn)記憶典型例題剖析微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)易混易錯(cuò)辨析2022高考真題感悟五、高頻考點(diǎn)精練第一部分：知識(shí)點(diǎn)精準(zhǔn)記憶第一部分：知識(shí)點(diǎn)精準(zhǔn)記憶微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用1．培養(yǎng)基的配制(1)概念：人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。(2)用途：用以培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物或積累其代謝物。(3)類(lèi)型：按物理狀態(tài)分類(lèi)液體培養(yǎng)基：①特點(diǎn)：不含凝固劑，呈液體狀態(tài)②用途：工業(yè)生產(chǎn)固體培養(yǎng)基：①特點(diǎn)：含凝固劑(如瓊脂)，呈固體狀態(tài)②用途：微生物的分離、鑒定，活菌計(jì)數(shù)，菌種保藏(4)成分碳源：①特點(diǎn)：提供碳元素的物質(zhì)②作用：構(gòu)成生物體的細(xì)胞的物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物，有些也是異養(yǎng)生物的能源物質(zhì)③來(lái)源：無(wú)機(jī)碳源：CO2、NaHCO3等；有機(jī)碳源：糖類(lèi)、牛肉膏等氮源：①特點(diǎn)：提供氮元素的物質(zhì)②作用：合成蛋白質(zhì)、核酸等物質(zhì)③來(lái)源：無(wú)機(jī)氮源：N2、NH3、銨鹽、硝酸鹽等；有機(jī)氮源：蛋白胨等無(wú)機(jī)鹽：①特點(diǎn)：為微生物提供除碳、氮之外的各種重要元素，包括大量元素和微量元素②作用：為微生物提供無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH等③來(lái)源：無(wú)機(jī)化合物：KH2PO4、K2HPO4、NaCl等水：①特點(diǎn)：生物體含量最高的無(wú)機(jī)化合物②作用：良好的溶劑，參與化學(xué)反應(yīng)等③來(lái)源：培養(yǎng)基、代謝產(chǎn)物（5）提醒：除了上述主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的需求。例如，在培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)，需要在培養(yǎng)基中添加維生素；在培養(yǎng)霉菌時(shí)，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至酸性；在培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至中性或弱堿性；在培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)，需要提供無(wú)氧的條件。2．無(wú)菌技術(shù)(1)目的：獲得純凈的培養(yǎng)物。(2)關(guān)鍵：防止雜菌污染。(3)區(qū)別：消毒與滅菌的比較比較項(xiàng)目條件結(jié)果常用方法應(yīng)用范圍消毒較為溫和的物理、化學(xué)或生物等方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物煮沸消毒法日常用品巴氏消毒法不耐高溫的液體化學(xué)藥物消毒法操作空間、操作者的衣物和手等紫外線消毒法接種室、接種箱或超凈工作臺(tái)滅菌強(qiáng)烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子濕熱滅菌法培養(yǎng)基、容器等干熱滅菌法玻璃器皿、金屬用具等灼燒滅菌法接種工具等（4）提醒：選擇無(wú)菌技術(shù)的原則：一要考慮無(wú)菌技術(shù)的效果，滅菌的效果比消毒要好；二要考慮操作對(duì)象的承受能力，活體生物材料、操作者的手等只能采用消毒，而不能用滅菌(5)其他操作①做好消毒和滅菌工作后，要注意避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周?chē)奈锲方佑|。②為了避免周?chē)h(huán)境中微生物的污染，接下來(lái)的許多操作都應(yīng)在超凈工作臺(tái)上并在酒精燈火焰附近進(jìn)行。3．微生物的純培養(yǎng)(1)概念辨析培養(yǎng)物：接種于培養(yǎng)基內(nèi)，在適合條件下形成特定種類(lèi)的微生物的群體純培養(yǎng)物：由單一個(gè)體繁殖所獲得的微生物群體菌落：分散的微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部繁殖形成的肉眼可見(jiàn)的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體純培養(yǎng)：獲得純培養(yǎng)物的過(guò)程酵母菌純培養(yǎng)的操作步驟(3)平板劃線法操作步驟（1）實(shí)驗(yàn)成功關(guān)鍵點(diǎn)①第一次劃線及每次劃線之前都需灼燒接種環(huán)滅菌，劃線操作結(jié)束仍需灼燒接種環(huán)。②灼燒接種環(huán)之后，要等其冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種。③在做第二次以及其后的劃線操作時(shí)，總是從上一次劃線的末端開(kāi)始劃線，這樣才能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。④劃線時(shí)最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連。⑤劃線用力大小要適當(dāng)，防止用力過(guò)大將培養(yǎng)基劃破。（2）平板劃線操作中幾次灼燒接種環(huán)的目的項(xiàng)目第一次操作每次劃線之前劃線結(jié)束目的殺死接種環(huán)上原有的微生物殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線的菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端，使每次劃線菌種數(shù)目減少殺死接種環(huán)上殘存的菌種，避免微生物污染環(huán)境和感染操作者二、微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)1．區(qū)分選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基1）.選擇培養(yǎng)基：①特點(diǎn)：允許特定種類(lèi)的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他種類(lèi)微生物生長(zhǎng)②用途：從眾多微生物中分離所需的微生物③舉例：加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌2）.鑒別培養(yǎng)基：①特點(diǎn)：根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品，進(jìn)而產(chǎn)生特定的顏色或其他變化②用途：鑒別不同種類(lèi)的微生物③舉例：用伊紅—亞甲藍(lán)培養(yǎng)基鑒別大腸桿菌3）.提醒常見(jiàn)選擇培養(yǎng)基舉例：①缺少氮源的培養(yǎng)基可以篩選能利用大氣中N2的微生物。②含青霉素的培養(yǎng)基可淘汰細(xì)菌，篩選出真菌。③無(wú)有機(jī)碳源的培養(yǎng)基可篩選出自養(yǎng)微生物。2．微生物的選擇培養(yǎng)和數(shù)量測(cè)定(1)稀釋涂布平板法步驟①系列稀釋操作：該操作常用在將細(xì)胞接種到培養(yǎng)基之前，通過(guò)液體稀釋的方法分散細(xì)胞，隨著稀釋程度的增大，單位體積中的微生物細(xì)胞數(shù)量減少，細(xì)胞得以分散。操作步驟：②涂布平板操作步驟(2)微生物的數(shù)量測(cè)定方法①顯微鏡直接計(jì)數(shù)法原理：利用特定細(xì)胞計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡計(jì)數(shù)一定容積的樣品中微生物的數(shù)量方法：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活菌而使計(jì)數(shù)結(jié)果偏大②間接計(jì)數(shù)法——活菌計(jì)數(shù)法(即稀釋涂布平板法)原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)單菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。3．土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)的實(shí)驗(yàn)操作(1)實(shí)驗(yàn)原理分離原理：①土壤中的細(xì)菌之所以能分解尿素，是因?yàn)樗麄兡芎铣呻迕涪谂渲埔阅蛩貫槲ㄒ坏吹呐囵B(yǎng)基，能夠在該培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的細(xì)菌就是能分解尿素的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)流程土壤取樣：從酸堿度接近中性的潮濕土壤中，鏟去表層土，取距地表3-5厘米的土壤層樣品的稀釋：通常選取一定稀釋范圍的樣品液進(jìn)行培養(yǎng)，以保證獲得的菌落數(shù)在30-300的平板適于計(jì)數(shù)微生物的培養(yǎng)與觀察：①接種：用稀釋涂布平板法接種②培養(yǎng)條件：30-37℃培養(yǎng)1-2天③觀察：根據(jù)菌落的特征區(qū)分微生物④計(jì)數(shù)：每隔24小時(shí)統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果(3)實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析與評(píng)價(jià)第二部分：典型例題剖析第二部分：典型例題剖析考向一、微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用1.應(yīng)用特定的測(cè)序技術(shù)發(fā)現(xiàn)某明代古沉船船體飽水木材樣品與沉積物中含有豐富的原核微生物類(lèi)群，與漆黑海底現(xiàn)場(chǎng)取的木材樣品與沉積物中的菌群種類(lèi)相似，但是菌群含量存在明顯的差異。下列敘述正確的是（

）A．海底沉積物中的原核微生物結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，以RNA為遺傳物質(zhì)B．在漆黑的海底現(xiàn)場(chǎng)獲取的木材樣品中含有大量能夠進(jìn)行化能合成作用的硝化細(xì)菌菌群C．海底沉積物為多種多樣的細(xì)菌菌群提供了生長(zhǎng)、繁殖所需的全部的碳源和氮源D．用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板統(tǒng)計(jì)海底某細(xì)菌的種群數(shù)量時(shí)發(fā)現(xiàn)平均每小格中有3個(gè)細(xì)菌，可估算一個(gè)計(jì)數(shù)室內(nèi)有1200個(gè)細(xì)菌【答案】D【詳解】A、原核生物具有細(xì)胞結(jié)構(gòu)，細(xì)胞生物的遺傳物質(zhì)都是DNA，A錯(cuò)誤；B、硝化細(xì)菌是一種好氧細(xì)菌，需要生活在氧氣充足的環(huán)境，而在漆黑的海底氧氣缺乏，因此在漆黑的海底現(xiàn)場(chǎng)獲取的木材樣品中不會(huì)含有大量能夠進(jìn)行化能合成作用的硝化細(xì)菌菌群，B錯(cuò)誤；C、細(xì)菌菌群生長(zhǎng)、繁殖所需的碳源和氮源不是全部來(lái)自于海底沉積物，N源還可來(lái)自水中溶解的無(wú)機(jī)鹽如硝酸鹽等，C錯(cuò)誤；D、血細(xì)胞計(jì)數(shù)板一共有400個(gè)小格，平均每小格中有3個(gè)細(xì)菌，可估算一個(gè)計(jì)數(shù)室內(nèi)有400×3=1200個(gè)細(xì)菌，D正確。故選D。考向二、微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)2.下列是關(guān)于“檢測(cè)土壤中細(xì)菌總數(shù)”實(shí)驗(yàn)操作的敘述，其中錯(cuò)誤的是（

）A．配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基；牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基也要滅菌B．取104、105、106倍的土壤稀釋液和無(wú)菌水各0．1ml，分別涂布于各組平板上C．將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組平板倒置，37℃恒溫培養(yǎng)24﹣48小時(shí)D．確定對(duì)照組無(wú)菌后，選擇菌落數(shù)多的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)【答案】D【詳解】A、配制好牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基后，培養(yǎng)基也要滅菌，A正確；B、取104、105、106倍的土壤稀釋液和無(wú)菌水各0．1ml，分別涂布于各組平板上，B正確；C、平板倒置后，將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組在37℃恒溫培養(yǎng)24﹣48小時(shí)，C正確；D、確定對(duì)照組無(wú)菌后，選擇菌落數(shù)在30﹣300以內(nèi)的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，D錯(cuò)誤。故選D。第三部分：易混易錯(cuò)辨析第三部分：易混易錯(cuò)辨析1.與微生物培養(yǎng)有關(guān)的6個(gè)易錯(cuò)點(diǎn)（1）固體培養(yǎng)基中的瓊脂僅作為凝固劑，不能為微生物生長(zhǎng)提供能量和碳源。（2）灼燒接種環(huán)，待其冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種。（3）劃線時(shí)最后一區(qū)不要與第一區(qū)相連。（4）劃線時(shí)用力大小要適當(dāng)，這是為了防止用力過(guò)大將培養(yǎng)基劃破。（5）用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低，這是因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。（6）尿素分解菌和纖維素分解菌的分離都運(yùn)用了選擇培養(yǎng)基，前者所用的培養(yǎng)基中尿素是唯一的氮源，后者所用的培養(yǎng)基中纖維素是唯一的碳源。2.教材結(jié)論性語(yǔ)句（1）（選擇性必修3P18）當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目少。（2）（選擇性必修3P18）同一稀釋度下，應(yīng)至少對(duì)3個(gè)平板進(jìn)行重復(fù)計(jì)數(shù)，然后求出平均值。第四部分：高考真題感悟第四部分：高考真題感悟1．（2022·海南·高考真題）為探究校內(nèi)植物園土壤中的細(xì)菌種類(lèi)，某興趣小組采集園內(nèi)土壤樣本并開(kāi)展相關(guān)實(shí)驗(yàn)。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（

）A．采樣時(shí)應(yīng)隨機(jī)采集植物園中多個(gè)不同地點(diǎn)的土壤樣本B．培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，可選用牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基C．土壤溶液稀釋倍數(shù)越低，越容易得到單菌落D．鑒定細(xì)菌種類(lèi)時(shí)，除形態(tài)學(xué)鑒定外，還可借助生物化學(xué)的方法【答案】C【詳解】A、采集植物園中土壤樣本的原則之一是要隨機(jī)采樣，A正確；B、牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基中含有細(xì)菌生長(zhǎng)所需的碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽等，可用于細(xì)菌的培養(yǎng)，B正確；C、土壤溶液稀釋倍數(shù)足夠高時(shí)，才能將聚集的細(xì)菌分散開(kāi)，有助于在培養(yǎng)基表面形成單菌落，C錯(cuò)誤；D、不同種類(lèi)細(xì)菌的理化特性一般不同，鑒定細(xì)菌種類(lèi)時(shí)，除根據(jù)菌落特征進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定外，還可以借助生物化學(xué)的方法進(jìn)行鑒定，D正確。故選C。2．（2022·湖北·高考真題）滅菌、消毒、無(wú)菌操作是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常見(jiàn)的操作。下列敘述正確的是（）A．動(dòng)、植物細(xì)胞DNA的提取必須在無(wú)菌條件下進(jìn)行B．微生物、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染C．為防止蛋白質(zhì)變性，不能用濕熱滅菌法對(duì)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌D．可用濕熱滅菌法對(duì)實(shí)驗(yàn)中所使用的微量離心管、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等進(jìn)行滅菌【答案】D【詳解】A、動(dòng)、植物細(xì)胞DNA的提取不需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行，A錯(cuò)誤；B、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染，保證無(wú)菌環(huán)境，而微生物的培養(yǎng)不能加入抗生素，B錯(cuò)誤；C、一般用濕熱滅菌法對(duì)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，以防止雜菌污染，C錯(cuò)誤；D、可用濕熱滅菌法對(duì)實(shí)驗(yàn)中所使用的微量離心管、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等進(jìn)行滅菌，以防止雜菌污染，D正確。故選D。3．（2022·湖北·高考真題）解脂菌能利用分泌的脂肪酶將脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪酸會(huì)使醇溶青瓊脂平板變?yōu)樯钏{(lán)色。將不能直接吸收脂肪的甲，乙兩種菌分別等量接種在醇溶青瓊脂平板上培養(yǎng)。甲菌菌落周?chē)尸F(xiàn)深藍(lán)色，乙菌菌落周?chē)蛔兩铝姓f(shuō)法錯(cuò)誤的是（

）A．甲菌屬于解脂菌B．實(shí)驗(yàn)中所用培養(yǎng)基以脂肪為唯一碳源C．可將兩種菌分別接種在同一平板的不同區(qū)域進(jìn)行對(duì)比D．該平板可用來(lái)比較解脂菌分泌脂肪酶的能力【答案】B【詳解】A、根據(jù)題干信息“甲菌菌落周?chē)尸F(xiàn)深藍(lán)色”，說(shuō)明甲可以分泌脂肪酶將脂肪分解成甘油和脂肪酸，脂肪酸會(huì)使醇溶青瓊脂平板變?yōu)樯钏{(lán)色，因此甲菌屬于解脂菌，A正確；B、乙菌落周?chē)鷽](méi)有出現(xiàn)深藍(lán)色，說(shuō)明乙菌落不能產(chǎn)生脂肪酶，不能利用脂肪為其供能，但乙菌落也可以在培養(yǎng)基上生存，說(shuō)明該培養(yǎng)基不是以脂肪為唯一碳源，B錯(cuò)誤；C、可將兩種菌分別接種在同一平板的不同區(qū)域進(jìn)行對(duì)比，更加直觀，C正確；D、可以利用該平板可用來(lái)比較解脂菌分泌脂肪酶的能力，觀察指標(biāo)可以以菌落周?chē)钏{(lán)色圈的大小，D正確。故選B。4．（2021·天津·高考真題）1．下列操作能達(dá)到滅菌目的的是（

）A．用免洗酒精凝膠擦手 B．制作泡菜前用開(kāi)水燙洗容器C．在火焰上灼燒接種環(huán) D．防疫期間用石炭酸噴灑教室【答案】C【詳解】A、用免洗酒精凝膠擦手屬于消毒，A錯(cuò)誤；B、制作泡菜前用開(kāi)水燙洗容器屬于消毒過(guò)程，B錯(cuò)誤；C、在火焰上灼燒接種環(huán)能達(dá)到滅菌目的，C正確；D、防疫期間用石炭酸噴灑教室，屬于消毒，D錯(cuò)誤。故選C。第五部分：高頻考點(diǎn)精練第五部分：高頻考點(diǎn)精練1．某樣液經(jīng)濾膜過(guò)濾后，轉(zhuǎn)移到完全培養(yǎng)基上并適宜條件下培養(yǎng)，每隔12h統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的數(shù)據(jù)作為結(jié)果，統(tǒng)計(jì)某種菌菌落數(shù)為205個(gè)，如圖所示。下列說(shuō)法正確的是（）A．若用濾膜測(cè)定硝化細(xì)菌數(shù)量，則培養(yǎng)基中可不添加氮源B．若計(jì)算出樣液中該種菌的密度為41個(gè)/L，該值比實(shí)際值偏大C．為了提高準(zhǔn)確度，需設(shè)平行重復(fù)實(shí)驗(yàn)，但不用空白對(duì)照D．菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)，大小不同的菌落形成的起始時(shí)間一般不同【答案】D【詳解】A、硝化細(xì)菌屬于化能合成型自養(yǎng)微生物，因此制備培養(yǎng)硝化細(xì)菌的培養(yǎng)基不需要添加碳源，但需要添加氮源，A錯(cuò)誤；B、自來(lái)水中大腸桿菌濃度是205/5=41個(gè)，由于兩個(gè)或多個(gè)大腸桿菌可能長(zhǎng)成一個(gè)菌落，因此比真實(shí)值偏小，B錯(cuò)誤；C、為了提高準(zhǔn)確度，需設(shè)平行重復(fù)實(shí)驗(yàn)，同時(shí)需要設(shè)置空白對(duì)照，C錯(cuò)誤；D、當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)，菌落的形成時(shí)間一般是不同的，D正確。故選D。2．藥物敏感試驗(yàn)簡(jiǎn)稱藥敏試驗(yàn)，旨在了解某病原微生物對(duì)各種抗生素的敏感程度，以指導(dǎo)臨床合理選用抗生素。紙片擴(kuò)散法是藥敏試驗(yàn)中一種常用的方法，在紙片周?chē)鷷?huì)形成透明的抑菌圈。下列敘述正確的是（

）A．圖1所示操作需待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)進(jìn)行，不需要在酒精燈旁操作B．圖3中Ⅳ的抑菌圈中出現(xiàn)了部分菌落可能是該病原微生物發(fā)生了基因突變C．進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，需將平板上布滿測(cè)試菌，需使用的接種工具是接種環(huán)D．接種后的平板在培養(yǎng)時(shí)的放置應(yīng)如圖2中②所示，可以防止污染【答案】B【詳解】A、圖1所示操作是倒平板，需要在酒精燈旁操作，以防止雜菌污染，A錯(cuò)誤；B、圖3中Ⅳ的抑菌圈中出現(xiàn)了部分菌落可能是該病原微生物發(fā)生了基因突變，產(chǎn)生了耐藥性，從而存活下來(lái)，B正確；C、進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，需將平板上布滿測(cè)試菌，利用的接種方法是稀釋涂布平板法，需使用的接種工具是涂布器，C錯(cuò)誤；D、接種后的平板在培養(yǎng)時(shí)需要倒置培養(yǎng)，即圖2中①所示，圖2中②是培養(yǎng)皿正置，倒置培養(yǎng)既能防止培養(yǎng)基中水分過(guò)快蒸發(fā)，又能防止冷凝形成的水珠倒流，D錯(cuò)誤。故選B。3．某興趣小組為研究“使用公筷對(duì)餐后菜品細(xì)菌數(shù)量的影響”，將每道菜分為3盤(pán)，一盤(pán)取樣冷藏，一盤(pán)使用公筷，一盤(pán)不用公筷，實(shí)驗(yàn)過(guò)程如下圖。下列敘述正確的是（

）A．在固體培養(yǎng)基X上用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種B．固體培養(yǎng)基X對(duì)菜品中的細(xì)菌有選擇作用C．根據(jù)菌落的特征可以準(zhǔn)確判斷細(xì)菌的種類(lèi)D．理論上，不食用組的培養(yǎng)基上不會(huì)有菌落出現(xiàn)【答案】A【詳解】A、由圖分析可知，圖中對(duì)菌落進(jìn)行了計(jì)數(shù)，采用的計(jì)數(shù)方法是稀釋涂布平板法，A正確；B、固體培養(yǎng)基沒(méi)有做任何處理，所以對(duì)菜品中的細(xì)菌沒(méi)有選擇性，B錯(cuò)誤；C、在一定培養(yǎng)條件下，不同的微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征，根據(jù)菌落的性狀、大小、顏色等特征，可以初步區(qū)分出不同種微生物，但不能準(zhǔn)確判斷，C錯(cuò)誤；D、不食用的菜品，正常情況下也有微生物存在，D錯(cuò)誤。故選A。4．為了觀察手掌上附著的微生物，某小組成員將自己的手掌在配制的牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基上輕輕按壓后，蓋上培養(yǎng)皿蓋，將平板倒置放在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h，結(jié)果如圖所示。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（

）A．配制的培養(yǎng)基經(jīng)高壓蒸汽滅菌后，還要調(diào)節(jié)pH才能用于接種B．待高溫滅菌后的培養(yǎng)基冷卻至50℃左右后，再進(jìn)行倒平板C．在超凈工作臺(tái)上和酒精燈火焰旁進(jìn)行操作，是為了防止雜菌污染D．手掌上的某些微生物在該培養(yǎng)基上并沒(méi)有生長(zhǎng)繁殖形成菌落【答案】A【詳解】A、配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基時(shí)，先調(diào)節(jié)pH，再進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，A錯(cuò)誤；B、待高溫滅菌后的培養(yǎng)基冷卻至50℃左右后，再進(jìn)行倒平板，此溫度下培養(yǎng)基不燙手，便于后續(xù)操作，且培養(yǎng)基尚未凝固，容易倒出，B正確；C、超凈工作臺(tái)在使用前經(jīng)紫外線消毒，而酒精燈火焰附近存在一個(gè)無(wú)菌區(qū)，為了防止雜菌污染，要在超凈工作臺(tái)上和酒精燈火焰附近進(jìn)行操作，C正確；D、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基雖然營(yíng)養(yǎng)齊全，但并非所有微生物均可在其上生存，如病毒則無(wú)法在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖，D正確。故選A。5．野生型大腸桿菌菌株能在未添加某種維生素的基本培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，氨基酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變株無(wú)法合成某種氨基酸，只能在添加了多種維生素的完全培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，下圖為純化某氨基酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變株的部分流程圖，①②③④代表培養(yǎng)基，A、B、C表示操作步驟，D、E為菌落。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．圖中①②④為基本培養(yǎng)基，③為完全培養(yǎng)基B．紫外線的目的是提高突變率，增加突變株的數(shù)量C．B的正確操作是用涂布器把菌液均勻地涂布在②表面D．經(jīng)C過(guò)程原位影印及培養(yǎng)后，可從④中挑取D進(jìn)行純化培養(yǎng)【答案】A【詳解】A、野生型大腸桿菌菌株能在基本培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，氨基酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變株無(wú)法合成某種氨基酸，只能在完全培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，根據(jù)題干信息和圖形分析，圖中①②④為完全培養(yǎng)基，③為基本培養(yǎng)基，A錯(cuò)誤；B、紫外線照射的目的誘導(dǎo)野生大腸桿菌發(fā)生基因突變，通過(guò)紫外線照射處理可提高突變頻率，從而增加突變株的數(shù)量，B正確；C、B操作是將菌液滴加到培養(yǎng)基表面，再用涂布器將菌液均勻的涂布在②表面，C正確；D、從圖中可看出，D在基本培養(yǎng)基中無(wú)法生長(zhǎng)，在完全培養(yǎng)基中可生長(zhǎng)，說(shuō)明D是氨基酸缺陷型菌落，故經(jīng)C過(guò)程影印及培養(yǎng)后，可從④培養(yǎng)基中挑取D菌落進(jìn)行純化培養(yǎng)，D正確。故選A。6．AM真菌能促進(jìn)根瘤菌（Rh）刺激根的局部膨大形成根瘤。為研究AM真菌促進(jìn)Rh形成根瘤的機(jī)制，研究人員分別取經(jīng)AM-+Rh-、AM++Rh-和AM++Rh+處理的大豆根系分泌物（+代表有，-代表無(wú)），滅菌后裝滿毛細(xì)管，將毛細(xì)管束放入含有根瘤菌菌液的試管中，實(shí)驗(yàn)裝置如圖1（此培養(yǎng)條件下根瘤菌能生存但并不增殖）。每隔兩天取出毛細(xì)管，用無(wú)菌水沖洗其外壁，打碎研磨沖洗定容后進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)，結(jié)果如圖2。下列有關(guān)上述實(shí)驗(yàn)操作及分析敘述正確的是（

）A．根瘤菌與AM真菌都具有生物膜系統(tǒng)，二者本質(zhì)區(qū)別是有無(wú)核膜包被的細(xì)胞核B．實(shí)驗(yàn)中可采用高壓蒸汽滅菌鍋對(duì)大豆根系分泌物和根瘤菌菌液進(jìn)行滅菌處理C．可取一定量的毛細(xì)管研磨液劃線接種在增殖平板培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)計(jì)數(shù)D．AM真菌與根瘤菌共同存在時(shí)，根系分泌物對(duì)根瘤菌的吸引作用更強(qiáng)【答案】D【詳解】A．根瘤菌沒(méi)有生物膜系統(tǒng)而AM真菌有，A錯(cuò)誤；B、可采用高壓蒸汽滅菌鍋對(duì)大豆根系分泌物進(jìn)行滅菌處理，根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求，根瘤菌菌液不能滅菌，B錯(cuò)誤；C、可取一定量的毛細(xì)管研磨液進(jìn)行稀釋涂布在增殖平板培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)計(jì)數(shù)，C錯(cuò)誤；D、從曲線圖上可以看出，AM真菌與根瘤菌共同存在時(shí)（AM++Rh+組），菌落數(shù)更多，說(shuō)明根系分泌物對(duì)根瘤菌的吸引作用更強(qiáng)，D正確。故選D。7．為了從反芻動(dòng)物的瘤胃中分離出能分解尿素的微生物，某興趣小組設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn)流程。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．為創(chuàng)造無(wú)氧環(huán)境，可采用穿刺接種法B．該實(shí)驗(yàn)使用的固體培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基C．細(xì)菌能分解尿素，是因?yàn)樗鼈兡芎铣呻迕窪．脲酶將尿素分解為氨和CO2，會(huì)使培養(yǎng)基pH降低【答案】D【詳解】A、穿刺接種法常用來(lái)接種厭氧菌，因此為創(chuàng)造無(wú)氧環(huán)境，可采用穿刺接種法，A正確；B、由圖可知，該實(shí)驗(yàn)使用的固體培養(yǎng)基，目的是分離出能夠分解尿素的細(xì)菌，是典型的選擇培養(yǎng)基，B正確；C、細(xì)菌想要分解尿素，必然含有能夠分解尿素的酶，即細(xì)菌能合成脲酶，C正確；D、脲酶將尿素分解為氨和CO2，氨會(huì)使培養(yǎng)基堿性增強(qiáng)，pH升高，D錯(cuò)誤。故選D。8．剛果紅是一種染料，可與纖維素反應(yīng)形成紅色復(fù)合物，但不會(huì)與纖維素水解產(chǎn)物發(fā)生反應(yīng)。研究人員利用該原理從土壤中分離纖維素分解菌并計(jì)數(shù)，培養(yǎng)結(jié)果如下圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．剛果紅培養(yǎng)基以纖維素為唯一碳源B．將菌液分散在培養(yǎng)基表面用平板劃線法C．圖中菌落丁分解纖維素的能力最強(qiáng)D．用顯微鏡直接計(jì)數(shù)統(tǒng)計(jì)的結(jié)果往往比活菌實(shí)際數(shù)目多【答案】B【詳解】A、該實(shí)驗(yàn)的目的是從土壤中分離纖維素分解菌并計(jì)數(shù)，因此該剛果紅培養(yǎng)基應(yīng)該以纖維素為唯一碳源，A正確；B、微生物常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，稀釋涂布平板法可用于計(jì)數(shù)，平板劃線法不能用來(lái)計(jì)數(shù)，故將菌液分散在培養(yǎng)基表面應(yīng)該用稀釋涂布平板法，B錯(cuò)誤；C、有透明圈說(shuō)明纖維素被纖維素酶催化降解，透明圈大小與纖維素酶的量與活性有關(guān)，透明圈越大，說(shuō)明降解纖維素能力越強(qiáng)，由圖可知，菌落丁周?chē)耐该魅ψ畲?，說(shuō)明其降解纖維素的能力最強(qiáng)，C正確；D、由于顯微鏡直接計(jì)數(shù)時(shí)統(tǒng)計(jì)的數(shù)據(jù)包括了已經(jīng)死亡的細(xì)菌，所以其統(tǒng)計(jì)的結(jié)果往往比活菌實(shí)際數(shù)目多，D正確。故選B。9．利用纖維素酶降解秸稈生產(chǎn)燃料乙醇，對(duì)緩解全球能源危機(jī)有重大意義?？蒲腥藛T開(kāi)展篩選、誘變及選育高產(chǎn)纖維素酶菌株的相關(guān)研究，過(guò)程如圖。下列敘述正確的是（

）A．采集的黑土壤需經(jīng)過(guò)高壓蒸汽滅菌進(jìn)行富集培養(yǎng)B．需用牛肉膏、纖維素、瓊脂等配制CMC平板C．誘變處理使每個(gè)細(xì)菌的產(chǎn)纖維素酶能力提高D．人工篩選可以使產(chǎn)纖維素菌株發(fā)生定向進(jìn)化【答案】D【詳解】A、結(jié)合分析可知，為避免菌種被殺死，采集的黑土壤不需要高壓蒸汽滅菌，A錯(cuò)誤；B、本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖沁x育高產(chǎn)纖維素酶菌株，故應(yīng)在以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，不能添加牛肉膏，B錯(cuò)誤；C、誘變處理的原理是基因突變，基因突變是不定向的，故誘變處理不能使每個(gè)細(xì)菌的產(chǎn)纖維素酶能力提高，C錯(cuò)誤；D、人工篩選是定向的，在該定向選擇的作用下，可以使產(chǎn)纖維素菌株向著高產(chǎn)的方向發(fā)生定向進(jìn)化，D正確。故選D。10．肉制品在發(fā)酵過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生一類(lèi)具有生物活性的含氮低分子化合物一生物胺。適量生物胺可促進(jìn)人體的正常生理活動(dòng)，但含量較高時(shí)有一定的毒性。科研人員擬采用水解圈（微生物水解生物胺產(chǎn)生的透明圈）的方法，從魚(yú)露發(fā)酵液中篩選高效生物胺降解菌，其操作思路如下：①?gòu)木喟l(fā)酵缸上表面8-12cm處吸取1mL發(fā)酵液→②→③取100uL均勻涂布在培養(yǎng)基x上→④挑取目標(biāo)菌落分離純化→⑤測(cè)定菌株的生物胺降解活性。下列相關(guān)分析中錯(cuò)誤的是（

）A．操作②是指用適量的蒸餾水稀釋魚(yú)露發(fā)酵液B．操作③采用的接種方法也可用于微生物計(jì)數(shù)C．配置培養(yǎng)基X時(shí)，應(yīng)以生物胺作為唯一氮源D．選擇目標(biāo)菌落時(shí)，應(yīng)挑取水解圈較大的菌落【答案】A【詳解】A、操作②是指用適量的無(wú)菌水稀釋魚(yú)露發(fā)酵液，A錯(cuò)誤；B、操作③采用的接種方法為稀釋涂布平板法，也可用于微生物計(jì)數(shù)，B正確；C、配置培養(yǎng)基X時(shí)，應(yīng)以生物胺作為唯一氮源以便篩選出生物胺降解菌，C正確；D、水解圈越大，說(shuō)明降解生物胺的能力越強(qiáng)，因此選擇目標(biāo)菌落時(shí)，應(yīng)該挑取水解圈較大的菌落，D正確。故選A。11．尿素容易保存，是目前使用量較大的一種化學(xué)氮肥，尿素分子并不能直接被農(nóng)作物吸收，只有被尿素分解菌分解成氨之后，才能被植物利用。如圖是從土壤中分離、計(jì)數(shù)尿素分解菌的過(guò)程，有關(guān)分析不正確的是（）A．若②過(guò)程稀釋了10倍，則乙錐形瓶里盛有18mL無(wú)菌水B．③的接種方法可用稀釋涂布平板法C．a(chǎn)、b、c培養(yǎng)基可以用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基D．若①②過(guò)程稀釋了10倍，a、b、c培養(yǎng)基上的菌落數(shù)依次為57、58、56個(gè)，則10g土樣中的尿素分解菌數(shù)量為5.7×108個(gè)【答案】C【詳解】A、②過(guò)程加入了2mL菌液，若稀釋了10倍，則乙錐形瓶里應(yīng)盛有18mL無(wú)菌水，A正確；B、平板劃線法不能計(jì)數(shù)，③的接種方法不能用平板劃線法，B正確；C、牛肉膏和蛋白胨均可提供氮源，a、b、c培養(yǎng)基應(yīng)以尿素為唯一氮源，C錯(cuò)誤；D、若a、b、e培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)為57個(gè)，10g土樣加入90mL無(wú)菌水相當(dāng)于稀釋了10倍，則由題圖可知，共稀釋了1×107倍，根據(jù)稀釋涂布平板法的計(jì)算公式，10g土樣可含有尿素分解菌5.7×108個(gè)，D正確。故選C。12．為了研究抗生素X對(duì)四種不同細(xì)菌（1、2、3、4）的作用效果，有人做了如圖的抗菌實(shí)驗(yàn)，四天后菌落形態(tài)如圖所示，則下列分析正確的是（

）A．抗生素X對(duì)細(xì)菌3的抑制效果最好 B．抗生素X對(duì)細(xì)菌4的抑制效果最差C．抗生素X對(duì)細(xì)菌2的抑制比對(duì)細(xì)菌3的抑制效果好 D．可以用抗生素X去治療由細(xì)菌1引起的疾病【答案】C【詳解】A、四天后細(xì)菌2的黑色區(qū)域最短，說(shuō)明抗生素X對(duì)細(xì)菌2的抑制效果最好，A錯(cuò)誤；B、四天后細(xì)菌3的黑色區(qū)域最短，說(shuō)明抗生素X對(duì)細(xì)菌3的抑制效果最差，B錯(cuò)誤；C、根據(jù)圖中結(jié)果可知，用抗生素X對(duì)細(xì)菌2的抑制比對(duì)細(xì)菌3的抑制效果好，C正確；D、由圖可知，抗生素X對(duì)細(xì)菌1不起作用，因此不能用抗生素X去治療由細(xì)菌1引起的疾病，D錯(cuò)誤。故選C。13．為宣傳正確佩戴口罩可降低呼吸道傳染疾病的風(fēng)險(xiǎn)，某同學(xué)進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)中將牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基置于距正確佩戴口罩的實(shí)驗(yàn)者口部前方50cm處，然后對(duì)著培養(yǎng)基講話1min或咳嗽2次，再進(jìn)行微生物培養(yǎng)和觀察。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．實(shí)驗(yàn)中培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基并需要進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌B．實(shí)驗(yàn)者對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行處理后，放入10℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1-2天C．實(shí)驗(yàn)中還應(yīng)設(shè)置不戴口罩直接講話或咳嗽進(jìn)行實(shí)驗(yàn)對(duì)照D．培養(yǎng)結(jié)束后可根據(jù)菌落的形狀、大小、顏色等特征確定微生物的種類(lèi)【答案】B【詳解】A、實(shí)驗(yàn)中要觀察微生物，因此配制的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基應(yīng)為固體培養(yǎng)基，并進(jìn)行嚴(yán)格滅菌處理，以防止雜菌污染，A正確；B、本實(shí)驗(yàn)是為了確定正確佩戴口罩可降低呼吸道傳染疾病的風(fēng)險(xiǎn)，而人體的溫度約為37°C，因此應(yīng)設(shè)置與人體相同的溫度，即在37°C恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1~2天，B錯(cuò)誤；C、本實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)組為佩戴口罩對(duì)著培養(yǎng)基講話1min或咳嗽2次，實(shí)驗(yàn)中還應(yīng)該設(shè)置“不戴口罩直接說(shuō)話或咳嗽’進(jìn)行對(duì)照實(shí)驗(yàn)，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，C正確；D、不同微生物的菌落具有特殊的特征，在實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)結(jié)束后，可根據(jù)菌落的形狀、大小、顏色、隆起程度等特征確定微生物種類(lèi)，D正確。故選B。14．做“微生物的分離與培養(yǎng)”實(shí)驗(yàn)時(shí)，下列敘述正確的是（

）A．高壓滅菌加熱結(jié)束時(shí)，打開(kāi)放氣閥使壓力表指針回到零后，開(kāi)啟鍋蓋B．倒平板時(shí)，應(yīng)將打開(kāi)的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上C．為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)立即去挑取菌落D．用記號(hào)筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時(shí)，應(yīng)標(biāo)記在皿底上【答案】D【詳解】A、高壓蒸汽滅菌加熱結(jié)束時(shí)，應(yīng)等壓力表的壓力降到零時(shí)，再打開(kāi)排氣閥，旋松螺栓，打開(kāi)鍋蓋，A錯(cuò)誤；B、倒平板時(shí)，將打開(kāi)的皿蓋放在一邊，容易污染培養(yǎng)皿，B錯(cuò)誤；C、經(jīng)火焰滅菌后的接種環(huán)溫度很高，若此時(shí)趁熱挑起待純化菌落會(huì)使其中的微生物死亡，C錯(cuò)誤；D、用記號(hào)筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時(shí)，由于培養(yǎng)菌落時(shí)需倒置培養(yǎng)，為了方便查看，應(yīng)標(biāo)記在皿底上，D正確。故選D。15．微生物需要從外界吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)來(lái)維持正常的生長(zhǎng)和繁殖。下列關(guān)于微生物營(yíng)養(yǎng)的敘述，正確的是（

）A．尿素分解菌和纖維素分解菌的培養(yǎng)基中可能含有相同的無(wú)機(jī)鹽B．篩選硝化細(xì)菌（自養(yǎng)型）的培養(yǎng)基中需加入適宜濃度的有機(jī)碳源C．只含有水和無(wú)機(jī)鹽兩類(lèi)成分的培養(yǎng)基中不可能形成生物群落D．乳酸菌需要的特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)是指其自身不能合成的某些無(wú)機(jī)物【答案】A【詳解】A、尿素分解菌的培養(yǎng)基中含有的無(wú)機(jī)鹽是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4，纖維素分解菌的培養(yǎng)基中含有的無(wú)機(jī)鹽是NaNO3、KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、KCl。A正確；B、硝化細(xì)菌是自養(yǎng)生物，可以用空氣中CO2作為碳源，用缺乏有機(jī)碳源的培養(yǎng)基可以篩選硝化細(xì)菌。B錯(cuò)誤；C、只含有水和無(wú)機(jī)鹽兩類(lèi)成分的培養(yǎng)基，可以培養(yǎng)既能固氮又能以CO2作為碳源的微生物（如固氮藍(lán)藻）。C錯(cuò)誤；D、乳酸菌需要的特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)是維生素，是有機(jī)物。D錯(cuò)誤。故選A。16．培養(yǎng)基是指供給微生物、植物或動(dòng)物細(xì)胞（或組織）生長(zhǎng)繁殖的，由不同物質(zhì)組合配制而成的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。針對(duì)下表中的三組培養(yǎng)基，下列敘述錯(cuò)誤的是（）組別培養(yǎng)基成分a蛋白胨、酵母提取物、甘露醇、水b葡萄糖、尿素、NaCl、K2HPO4、酚紅、瓊脂糖c礦質(zhì)元素、蔗糖、維生素、甘氨酸、水、瓊脂A．a(chǎn)組培養(yǎng)基可用于醋化醋桿菌的擴(kuò)大培養(yǎng)，該培養(yǎng)過(guò)程需用到磁力攪拌器和搖床B．b組培養(yǎng)基可用于分離含脲酶的微生物，該實(shí)驗(yàn)中需用全營(yíng)養(yǎng)LB固體培養(yǎng)基作對(duì)照C．c組培養(yǎng)基可用于誘導(dǎo)植物愈傷組織再分化，添加的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑需事先過(guò)濾滅菌D．上述培養(yǎng)基不僅要為相應(yīng)的細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)還要為其生存和繁殖提供適宜的環(huán)境【答案】C【詳解】A、a組培養(yǎng)基可用于醋化醋桿菌的擴(kuò)大培養(yǎng)，磁力攪拌器和搖床都是擴(kuò)大菌落與其所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的接觸面積，利于菌落的培養(yǎng)，A正確；B、b組培養(yǎng)基以尿素作為唯一氮源，含脲酶的微生物在該培養(yǎng)基上能生長(zhǎng)，其它微生物在該培養(yǎng)基上因缺乏氮源而不能生長(zhǎng)，可用于分離含脲酶的微生物，該實(shí)驗(yàn)中需用全營(yíng)養(yǎng)LB固體培養(yǎng)基作對(duì)照，通過(guò)對(duì)照可以判斷選擇培養(yǎng)基的選擇作用，B正確；C、c組培養(yǎng)基可以用來(lái)誘導(dǎo)植物愈傷組織再分化，添加的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑不能過(guò)濾滅菌，易被分解，C錯(cuò)誤；D、上述培養(yǎng)基不僅要為相應(yīng)的細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，還要為其生存和繁殖提供適宜的環(huán)境，D正確。故選C。17．結(jié)核桿菌是對(duì)抗生素極易產(chǎn)生耐藥性的細(xì)菌。為探究不同結(jié)核桿菌耐藥性的大小，研究人員提取患者體內(nèi)的病原菌進(jìn)行培養(yǎng)（如圖甲），過(guò)程Ⅰ接種純化的結(jié)果如圖乙。下列說(shuō)法正確的是（

）A．在病原菌的培養(yǎng)過(guò)程中只采用一種滅菌方法即可B．對(duì)單一菌落進(jìn)行液體培養(yǎng)的目的是獲得更多的結(jié)核桿菌C．培養(yǎng)中各培養(yǎng)基均需加入抗生素的目的是抑制雜菌生長(zhǎng)D．過(guò)程Ⅰ接種時(shí)劃線的順序是①→②→③，該方法無(wú)法完成對(duì)菌落的計(jì)數(shù)【答案】B【詳解】A、微生物的分離、培養(yǎng)過(guò)程需要嚴(yán)格的無(wú)菌環(huán)境，需要用到多種滅菌方法，如培養(yǎng)基、涂布器的滅菌方法分別是高壓蒸汽滅菌和灼燒滅菌，A錯(cuò)誤；B、對(duì)單一菌落進(jìn)行液體培養(yǎng)的目的是獲得更多的結(jié)核桿菌，即進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，B正確；C、培養(yǎng)中各培養(yǎng)基均需加入抗生素，目的是選擇出抗藥性強(qiáng)的目的菌，C錯(cuò)誤；D、根據(jù)圖乙中菌落分布的特點(diǎn)，劃線次數(shù)越多，細(xì)菌數(shù)量越少，可以推導(dǎo)出劃線的順序依次是①→③→②，D錯(cuò)誤。故選B。18．下列有關(guān)無(wú)菌技術(shù)的說(shuō)法，正確的是（

）①可以通過(guò)化學(xué)藥劑消毒法處理水源；②培養(yǎng)基需經(jīng)高壓蒸汽滅菌后方可調(diào)節(jié)pH；③配制培養(yǎng)基和接種時(shí)，均必需在酒精燈火焰旁操作；④接種室、接種箱或超凈工作臺(tái)在使用前，可用紫外線照射30min進(jìn)行消毒；⑤高壓蒸汽滅菌是在壓力為201kPa，溫度為121℃的條件下維持15-30min來(lái)滅菌的；A．①③ B．③⑤ C．③④ D．①④【答案】D【詳解】①可以使用化學(xué)藥劑即通過(guò)化學(xué)消毒法處理水源，還可用微生物分解水體的有機(jī)物，即通過(guò)生物消毒法凈化污水，①正確；②培養(yǎng)基配置時(shí)應(yīng)先調(diào)節(jié)pH再滅菌，②錯(cuò)誤；③配制培養(yǎng)基時(shí)，不需在酒精燈火焰旁操作，③錯(cuò)誤；④接種室、接種箱或超凈工作臺(tái)在使用前，可用紫外線照射30min進(jìn)行消毒，④正確；⑤高壓蒸汽滅菌是在壓力為100kPa，溫度為121°C的條件下維持15-30min來(lái)滅菌的，⑤錯(cuò)誤。故選D。19．經(jīng)誘變處理后，某細(xì)菌群體中基因突變頻率增大，但突變體數(shù)量仍占極少數(shù)。梯度平板法是篩選抗藥性突變型的一種簡(jiǎn)單有效的方法，其操作要點(diǎn)是：先在培養(yǎng)皿中倒入不含抗生素的培養(yǎng)基，立即傾斜培養(yǎng)皿到凝固為一個(gè)斜面，再將培養(yǎng)皿平放，繼續(xù)倒入含一定濃度抗生素的培養(yǎng)基，直至形成平面，培養(yǎng)基內(nèi)的抗生素濃度呈線性梯度，一端濃度高，另一端濃度低，將誘變處理的濃菌液涂在梯度平板上進(jìn)行培養(yǎng)及篩選。篩選出的抗藥性突變型再做抗藥性的測(cè)定。下列推斷不合理的是（

）A．抗藥性突變型個(gè)體的主要誘因是培養(yǎng)基中的抗生素B．制作含有抗生素的平板時(shí)，藥物須與培養(yǎng)基混合均勻C．培養(yǎng)后，在高濃度抗生素處出現(xiàn)的菌落為抗藥性突變型菌株且抗藥性強(qiáng)D．含抗生素的梯度平板上會(huì)出現(xiàn)未經(jīng)誘變處理的該細(xì)菌群體菌落【答案】A【詳解】A、培養(yǎng)基中的抗生素起選擇作用，不是抗藥性突變型個(gè)體產(chǎn)生的主要誘因，A錯(cuò)誤；B、抗生素與培養(yǎng)基混合均勻，從而便于通過(guò)觀察微生物在培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況判斷藥物的作用，B正確；C、不具有抗藥性的細(xì)胞會(huì)被抗生素殺死，故培養(yǎng)后在高濃度抗生素處出現(xiàn)的菌落為抗藥性突變型菌株且抗藥性強(qiáng)，C正確；D、未經(jīng)誘變處理的該細(xì)菌中也有具有抗藥性的個(gè)體，可以在含抗生素的梯度平板上生長(zhǎng)并形成菌落，D正確。故選A。20．高中生物實(shí)驗(yàn)中用到了不同體積分?jǐn)?shù)的酒精，下列說(shuō)法正確的是（

）A．微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，用50%酒精給實(shí)驗(yàn)者的雙手消毒B．觀察花生細(xì)胞中的脂肪顆粒，需要用70%的酒精洗去浮色C．DNA粗提取實(shí)驗(yàn)中，用95%冷酒精進(jìn)一步提純DNA，DNA溶解于95%冷酒精D．綠葉中色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)中，可用無(wú)水乙醇作為提取液【答案】D【詳解】A、微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，醫(yī)用和實(shí)驗(yàn)室的消毒常用體積分?jǐn)?shù)為75%的酒精，A錯(cuò)誤；B、在檢測(cè)脂肪的試驗(yàn)中需要用體積分?jǐn)?shù)50%的酒精洗去浮色，B錯(cuò)誤；C、DNA不溶于酒精，而蛋白質(zhì)等雜質(zhì)溶于酒精，進(jìn)而提純DNA，因此用95%冷酒精進(jìn)一步提純DNA，DNA不溶解于95%冷酒精，C錯(cuò)誤；D、在綠葉中色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)中，需要用無(wú)水乙醇來(lái)提取色素，D正確。故選D。21．采后的葡萄在運(yùn)輸、貯藏等過(guò)程中，易受黑曲霉感染而腐爛引起“黑粉病”，食用價(jià)值下降。為解決這一問(wèn)題，研究人員從葡萄園土壤中分離、純化和篩選出對(duì)黑曲霉有較強(qiáng)抑制作用的拮抗細(xì)菌，具體流程如圖。(1)黑曲霉與拮抗細(xì)菌都具有的結(jié)構(gòu)或物質(zhì)是_________。①質(zhì)膜

②核膜

③核酸

④核糖體

⑤線粒體(2)步驟Ⅰ采用的接種方法是_________，采用固體平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)進(jìn)行倒置培養(yǎng)的原因是_________。(3)在微生物培養(yǎng)操作過(guò)程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進(jìn)行_________（填“消毒”或“滅菌”）處理；操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和_________；靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使其內(nèi)蛋白質(zhì)變性，還能損傷它的_________結(jié)構(gòu)。(4)下列關(guān)于步驟Ⅳ的說(shuō)法正確的有_________。A．桔抗細(xì)菌與黑曲霉競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng)與生存空間B．桔抗細(xì)菌可能產(chǎn)生了某種物質(zhì)抑制黑曲霉的生長(zhǎng)繁殖C．黑曲霉可能產(chǎn)生了某種抗生素抑制描抗細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖D．桔抗細(xì)菌對(duì)黑曲霉抑制作用越大，則其周?chē)耐该魅υ酱?5)為進(jìn)一步研究抽抗細(xì)菌對(duì)葡萄中黑曲霉的抑制效果，研究人員進(jìn)行了圖實(shí)驗(yàn)，其中施加的處理①是_________、②是_________?！敬鸢浮?1)①③④(2)

稀釋涂布平板法

防止冷凝水倒流，污染培養(yǎng)基(3)

滅菌

消毒

DNA(4)ABD(5)

接種黑曲霉

接種黑曲霉和拮抗細(xì)菌【詳解】（1）黑曲霉是真核生物，拮抗細(xì)菌是原核生物，二者都具有①質(zhì)膜、③核酸（DNA和RNA）、④核糖體，而②核膜、⑤線粒體是真核生物特有的結(jié)構(gòu)。故選①③④。（2）結(jié)合平板上菌落的分布（分別較均勻），可知步驟1采用的接種方法是稀釋涂布平板法。采用固體平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)進(jìn)行倒置培養(yǎng)的原因是防止冷凝水倒流，污染培養(yǎng)基。（3）在微生物培養(yǎng)操作過(guò)程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進(jìn)行滅菌處理；操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和消毒；靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使其內(nèi)蛋白質(zhì)變性，還能損傷它的DNA結(jié)構(gòu)。（4）結(jié)合步驟Ⅲ和Ⅳ可知，在拮抗細(xì)菌的中間接種了黑曲霉，最后拮抗細(xì)菌周?chē)霈F(xiàn)透明圈，而黑曲霉的菌落消失。A、黑曲霉與拮抗細(xì)菌都接種在同一塊平板上，最終黑曲霉沒(méi)有生長(zhǎng)而拮抗細(xì)菌生長(zhǎng)較好，可能是由于拮抗細(xì)菌與黑曲霉競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng)與生存空間，且拮抗細(xì)菌的競(jìng)爭(zhēng)能力更強(qiáng)，A正確；B、拮抗細(xì)菌可能產(chǎn)生了某種物質(zhì)抑制黑曲霉的生長(zhǎng)繁殖，使得黑曲霉不能生長(zhǎng)，B正確；C、若黑曲霉可能產(chǎn)生了某種抗生素抑制拮抗細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖，則結(jié)果應(yīng)為有黑曲霉的菌落而無(wú)拮抗細(xì)菌的菌落，與圖示結(jié)果不符，C錯(cuò)誤；D、透明圈內(nèi)黑曲霉均無(wú)法生長(zhǎng)，拮抗細(xì)菌對(duì)黑曲霉抑制作用越大，則其周?chē)耐该魅υ酱?，D正確。故選ABD。（5）①發(fā)生腐爛，應(yīng)該加的是黑曲霉；②未發(fā)生腐爛，根據(jù)前面的結(jié)果可知，拮抗細(xì)菌有抑制黑曲霉的作用，因此②加入的是拮抗細(xì)菌和黑曲霉。22．從遠(yuǎn)古到現(xiàn)代，從傳統(tǒng)發(fā)酵到分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，生物技術(shù)一直與我們的生活息息相關(guān)?；卮鹣铝袉?wèn)題。(1)微生物培養(yǎng)技術(shù)是最基本、最核心的生物技術(shù)。在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物，一方面需要為培養(yǎng)的微生物提供合適的______________________(答出2點(diǎn)即可)，另一方面需要確保無(wú)處不在的其他微生物不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)造成干擾。(2)在生產(chǎn)上，人們使用果膠酶、纖維素酶等提高水果的出汁率和澄清度。①由霉菌發(fā)酵生產(chǎn)的果膠酶是食品加工業(yè)中使用量最大的酶制劑之一，被廣泛地應(yīng)用于果汁加工業(yè)。培養(yǎng)霉菌可以用查氏培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基一般含有___________________(答出2種即可)、氮源和碳源，碳源進(jìn)入細(xì)胞后，可參與_______________(答出2種即可)、蛋白質(zhì)和核酸等有機(jī)物的合成。②果膠酶是分解果膠的一類(lèi)酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶和果膠酯酶等。在果汁的工業(yè)生產(chǎn)中，分離果膠酶的方法有__________________(答出2種即可)。③果汁中可能含有大腸桿菌，果汁中大腸桿菌的數(shù)量可以通過(guò)濾膜法來(lái)測(cè)定，具體做法是______________________，根據(jù)培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目，計(jì)算出果汁中大腸桿菌的數(shù)量。(3)植物芳香油的提取方法有蒸餾、壓榨和萃取等，具體采用哪種方法要根據(jù)_____________________來(lái)決定。胡蘿卜素易溶于有機(jī)溶劑，提取胡蘿卜素可以采用有機(jī)溶劑萃取的方法，萃取胡蘿卜素的有機(jī)溶劑應(yīng)該具有________________(答出3點(diǎn)即可)的特點(diǎn)。此外，還需要考慮萃取效率、對(duì)人的毒性、是否易燃、有機(jī)溶劑是否能從產(chǎn)品中完全除去、會(huì)不會(huì)影響產(chǎn)品質(zhì)量等問(wèn)題?！敬鸢浮?1)營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境（條件）(2)

水、無(wú)機(jī)鹽

糖類(lèi)、脂質(zhì)

凝膠色譜法和電泳法

將已知體積的果汁過(guò)濾后，將濾膜放在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上培養(yǎng)，一段時(shí)間后，統(tǒng)計(jì)黑色菌落的數(shù)目(3)

(植物）原料的特點(diǎn)

較高的沸點(diǎn)、能夠充分溶解胡蘿卜素、不與水混溶【分析】培養(yǎng)基的概念及營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成（1）概念：人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出的供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。（2）營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽，此外還要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求，例如，培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加維生素，培養(yǎng)霉菌時(shí)需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將pH調(diào)至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)則需要提供無(wú)氧的條件。2.凝膠色譜法：凝膠色譜法也稱做分配色譜法，是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法。所用的凝膠實(shí)際上是一些微小的多孔球體，這些小球體大多數(shù)是由多糖類(lèi)化合物構(gòu)成的，如葡聚糖或瓊脂糖。在小球體內(nèi)部有許多貫穿的通道，當(dāng)相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)通過(guò)凝膠時(shí)，相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)人凝膠內(nèi)部的通道，路程較長(zhǎng)，移動(dòng)速度較慢;而相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無(wú)法進(jìn)人凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部移動(dòng)，路程較短，移動(dòng)速度較快。相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子因此得以分離。3.電泳是指帶電粒子在電場(chǎng)的作用下發(fā)生遷移的過(guò)程。許多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解離的基團(tuán)，在一定的pH下，這些基團(tuán)會(huì)帶上正電或負(fù)電。在電場(chǎng)的作用下，這些帶電分子會(huì)向著與其所帶電荷相反的電極移動(dòng)。電泳利用了待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小、形狀的不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離。（1）各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽，此外還要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物，需要做到兩點(diǎn)，一方面需要為培養(yǎng)的微生物提供合適的營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境，即微生物的生長(zhǎng)提供合適的培養(yǎng)基和適宜的環(huán)境條件，另一方面需要確保無(wú)處不在的其他微生物不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)造成干擾，因而培養(yǎng)微生物培養(yǎng)過(guò)程中無(wú)菌技術(shù)的設(shè)施非常關(guān)鍵。（2）①由霉菌發(fā)酵生產(chǎn)的果膠酶是食品加工業(yè)中使用量最大的酶制劑之一，被廣泛地應(yīng)用于果汁加工業(yè)。培養(yǎng)霉菌可以用查氏培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基一般含有水分、無(wú)機(jī)鹽、氮源和碳源，碳源不僅可以作為能源物質(zhì)，還可作為細(xì)胞的組成成分，因而碳源可參與糖類(lèi)、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和核酸等有機(jī)物的合成。②果膠酶是分解果膠的一類(lèi)酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶和果膠酯酶等。酶作為蛋白質(zhì)，通常利用分離蛋白質(zhì)的方法進(jìn)行分離，因此果膠酶的分離通常用凝膠色譜法和電泳法，前者的原理是根據(jù)不同分子量的蛋白質(zhì)分子在凝膠柱中移動(dòng)的速度不同進(jìn)行設(shè)計(jì)的，后者利用的原理是根據(jù)不同分子質(zhì)量的蛋白質(zhì)在電泳過(guò)程中遷移的速度不同實(shí)現(xiàn)的分離。③果汁中可能含有大腸桿菌，果汁中大腸桿菌的數(shù)量可以通過(guò)濾膜法來(lái)測(cè)定，具體做法是將已知體積的果汁過(guò)濾后，將濾膜放在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上培養(yǎng)，一段時(shí)間后，統(tǒng)計(jì)黑色菌落的數(shù)目，這里用到的原理是大腸桿菌在伊紅--美藍(lán)培養(yǎng)基上顯黑色的原理設(shè)計(jì)的，然后根據(jù)培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目，推算出果汁中大腸桿菌的數(shù)量。（3）植物芳香油的提取方法有蒸餾、壓榨和萃取等，具體采用哪種方法需要根據(jù)(植物）原料的特點(diǎn)來(lái)決定。根據(jù)胡蘿卜素易溶于有機(jī)溶劑，因而提取胡蘿卜素采用萃取法進(jìn)行，這里萃取胡蘿卜素的有機(jī)溶劑應(yīng)該具有較高的沸點(diǎn)、能夠充分溶解胡蘿卜素、不與水混溶的特點(diǎn)。另還需要考慮萃取效率、對(duì)人的毒性、是否易燃等問(wèn)題。23．原核生物繁殖快、多為單細(xì)胞，且遺傳物質(zhì)相對(duì)較少，因此早期的基因工程操作都用原核生物作為受體細(xì)胞，其中以大腸桿菌應(yīng)用最為廣泛。目前市場(chǎng)上供應(yīng)的降血糖藥物多為重組人胰島素，即應(yīng)用基因工程技術(shù)生產(chǎn)的、與內(nèi)源激素結(jié)構(gòu)和生物活性相同的胰島素。用于生產(chǎn)重組人胰島素的表達(dá)系統(tǒng)主要有大腸桿菌和酵母菌，這兩個(gè)系統(tǒng)各有利弊，大腸桿菌系統(tǒng)表達(dá)效率高，但后處理較難；酵母系統(tǒng)表達(dá)量雖然低，但對(duì)表達(dá)產(chǎn)物的處理較簡(jiǎn)便。下圖為某研究小組設(shè)計(jì)的酵母菌培養(yǎng)流程，回答下列有關(guān)問(wèn)題：(1)實(shí)驗(yàn)中對(duì)所用實(shí)驗(yàn)物品、培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌處理的目的是____________________，除上述滅菌處理外，為達(dá)到相同的目的，操作時(shí)還要注意________________________（至少回答1點(diǎn)）。(2)用大腸桿菌來(lái)生產(chǎn)重組人胰島素，為何后處理比較難？____________________________。(3)進(jìn)行酵母菌計(jì)數(shù)時(shí)，不采用平板劃線法接種的原因是______________________。對(duì)于頻繁使用的菌種，常采用臨時(shí)保藏的方法，但該方法保存時(shí)間不長(zhǎng)，原因是____________________。(4)虎紅培養(yǎng)基是培養(yǎng)、分離和計(jì)數(shù)酵母菌的常用培養(yǎng)基。在該培養(yǎng)基平板上，酵母菌多數(shù)為圓形凸起、邊緣整齊、表面光滑濕潤(rùn)、不透明乳白色或粉紅色的菌落，少數(shù)菌落表面粗糙或皺褶、周邊呈細(xì)分枝狀，因此該培養(yǎng)基屬于____________________（填“選擇培養(yǎng)基”或“鑒別培養(yǎng)基”）。觀察發(fā)現(xiàn)，在培養(yǎng)基內(nèi)部也分布有酵母菌菌落，分析內(nèi)部出現(xiàn)菌落的原因?yàn)開(kāi)___________________________。【答案】(1)

防止外來(lái)雜菌污染，獲得純凈培養(yǎng)物