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4564.1596孔板。5.475%乙醇。76.檢測(cè)程序新冠病毒檢測(cè)程序見(jiàn)圖1。鑒定圖1水中新冠病毒檢測(cè)程序7.1實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)要求管理辦法》(衛(wèi)辦醫(yī)政發(fā)【2010】194號(hào))有關(guān)規(guī)定，具備經(jīng)過(guò)衛(wèi)生健康行政部門(mén)審核備案8為感染性廢液，需采用化學(xué)消毒(0.55%含氯消毒劑處理)或物理消毒(紫外照射30分鐘以98.3.1取其中一份水樣，充分混勻，遵照《醫(yī)療機(jī)構(gòu)新型冠狀病毒核酸檢測(cè)工作手冊(cè)(試行第二版)》的要求，將采樣袋置入56℃水浴鍋溫浴30分鐘，使水樣滅活。溫浴過(guò)程中可每隔10分鐘將標(biāo)本輕柔搖勻1次，以保證標(biāo)本均勻滅活。溫浴后標(biāo)本須靜置至室溫10-15分鐘使氣溶膠沉降，隨后再開(kāi)蓋進(jìn)行后續(xù)病毒富集工作。實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)。若結(jié)果判定為水樣核酸陽(yáng)性，核酸檢測(cè)Ct值≤25且有S形擴(kuò)增曲線，可進(jìn)行病毒感推薦使用Gibco最低必需培養(yǎng)液(Gibco’sminimumessentialmedium,MEM)培養(yǎng)，2mmol/LL-谷氨酰胺，1×鏈霉素/青霉素液，100mL/L(生長(zhǎng))或20mL/L(維持)胎牛血清。全過(guò)程質(zhì)控病毒(HCoV-OC43病毒)實(shí)時(shí)熒光RT-PCR的引物、探針見(jiàn)表A.1。采序列(5’-3’)N基因正向引物(F)AGCAACCAGGCTGATGTCAATN基因反向引物(R)AGCAGACCTTCCTGAGCCTTCN基因熒光探針(P)5’-FAM-TGACATTGTCGATCGGGAC附錄B(資質(zhì)性)數(shù)的對(duì)數(shù)+距離比×稀釋系數(shù)的對(duì)數(shù)式中：距離比=(50%的臨界感染率-50%)/(50%的臨界感染率-50%的低臨界感染率)。(規(guī)范性)C.2無(wú)核酸酶溶液的配制：配制溶液用的液體和固體應(yīng)采用未開(kāi)封的新品。配制溶液所用的并經(jīng)常更換，以避免皮膚上的細(xì)菌和真菌及人體自身分泌璃容器應(yīng)在240℃烘烤4h以去除核酸酶。離心管、移液器吸頭、藥匙等用具可購(gòu)買(mǎi)無(wú)核酸酶級(jí)別的，或用0.1%的焦炭酸二乙酯(DEPC)水溶液室溫浸泡過(guò)夜，然后高壓滅菌并烘干。焦炭酸二乙酯(DEPC)1.

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