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文檔簡介

ICS11.220

CCSB41

團體標準

T/CVMA65—2021

犬貓臨床尿液檢查技術規(guī)范

TechnicaIspecificationforclinicaIurinalysisofcanineandfeIine

2021-12-22發(fā)布2021-12-22實施

中國獸醫(yī)協(xié)會發(fā)布

T/CVMA65—2021

目次

前言.....................................................................................II

1范圍....................................................................................1

2規(guī)范性引用文件..........................................................................1

3術語和定義..............................................................................1

4尿液樣本采集與保存.....................................................................1

4.1尿液樣本采集.......................................................................1

4.2尿液樣本保存........................................................................2

5物理性質檢查............................................................................2

5.1顏色和透明度.......................................................................2

5.2尿比重.............................................................................2

6化學性質檢查............................................................................3

7尿沉渣檢查..............................................................................3

附錄A(規(guī)范性)犬貓膀胱穿刺操作規(guī)程...............................................4

附錄B(規(guī)范性)折射儀測量尿比重的操作規(guī)程.........................................5

附錄C(規(guī)范性)尿試紙條法化學性質檢測操作規(guī)程.....................................6

附錄D(規(guī)范性)尿沉渣制備規(guī)程......................................................7

附錄E(規(guī)范性)迪夫快速染色........................................................9

T/CVMA65—2021

**—1—

刖s

本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分:標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定起

草。

本文件由北京中農大動物醫(yī)院有限公司提出。

本文件由中國獸醫(yī)協(xié)會歸口。

本文件起草單位:北京中農大動物醫(yī)院有限公司、中國農業(yè)大學、北京小動物診療行業(yè)協(xié)會、啟晟

(天津)寵物醫(yī)院管理有限公司。

本文件主要起草人:許楚楚、劉洋、夏兆飛、呂艷麗、陳艷云、黃薇。

II

T/CVMA65—2021

犬貓臨床尿液檢查技術規(guī)范

1范圍

本文件規(guī)定了犬貓尿液檢查時的樣本采集與保存,以及物理性質、化學性質及尿沉渣檢查。

本文件適用于動物診療機構及其醫(yī)務人員對犬貓尿液樣本進行檢查。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中,注日期的引用文件,

僅該日期對應的版本適用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本

文件。

T/CVMA60犬貓導尿操作技術

3術語和定義

下列術語和定義適用于本文件。

3.1

膀胱穿刺cystocentesis

用注射器經(jīng)由腹壁進入膀胱獲取尿液。

3.2

尿比重urinespecificgravity,USG

相同體積的尿液和水的質量比。

4尿液樣本采集與保存

4.1尿液樣本采集

4.1.1自然排尿

在動物排尿過程中,用潔凈、干燥的容器接取中段尿5mL~10mL。

注:中段尿指自然排尿時,讓開始的前段尿液將尿道沖洗干凈后,接取中段污染較小的尿液樣本。

4.1.2導尿

導尿具體操作按T/CVMA60執(zhí)行。

4.1.3膀胱穿刺

建議在超聲引導下進行。膀胱穿刺具體操作流程按附錄A執(zhí)行。

T/CVMA65—2021

4.2尿液樣本保存

尿液樣本保存應滿足以下條件:

——尿液樣本應于無菌、干燥、密閉的容器內保存。

一尿液樣本在室溫(15℃~25℃)下可保存lh冷藏(0℃~4℃)保存不超過6h,冷藏保存

的尿液應恢復室溫后再進行分析。

5物理性質檢查

5.1顏色和透明度

在光線充足的情況下,將混勻的尿液置于無色透明的容器內觀察顏色和透明度,并記錄。健康犬貓

尿液顏色和透明度參見表1。

表1健康犬貓尿液物理性質檢查結果參考值

檢查項目犬貓

顏色黃色到黃褐色黃色到黃褐色

透明度清亮清亮

比重1.015^1.0501.035^1.060

5.2尿比重

應使用比重計測USG,寵物診療機構也可用犬貓專用的折射儀進行測量。折射儀測量USG的方法按

附錄B執(zhí)行。環(huán)境溫度變化大的實驗室宜使用帶溫度校正功能的折射儀測量尿比重。健康犬貓尿比重參

見表1。

6化學性質檢查

犬貓尿液化學性質檢查包括pH、葡萄糖、酮體、膽紅素、潛血和蛋白??梢杂媚蛞夯瘜W性質檢查

試紙條檢測,操作方法按附錄C進行。健康犬貓尿液化學性質結果參見表2。

表2健康犬貓尿液化學性質檢查結果參考值

檢查項目犬貓

pH5.5~7.55.5~7.5

蛋白陰性,濃縮尿:+陰性

葡萄糖陰性陰性

酮體陰性陰性

尿膽紅素O-+陰性

潛血陰性陰性

7尿沉渣檢查

尿液沉渣檢查包括對細胞、結晶、管型和微生物等的顯微鏡觀察,尿沉渣涂片制備方法按附錄D操

作。健康犬貓尿沉渣檢查結果參見表3。

2

T/CVMA65—2021

表3健康犬貓尿沉渣檢查結果參考值

檢查項目犬貓

紅細胞(40倍物鏡)<5個<5個

白細胞(40倍物鏡)<5個<5個

其他細胞少量移行上皮少量移行上皮

細菌無無

管型(10倍物鏡)<2透明管型<2透明管型

結晶不定,可能有磷酸鐵鎂和草酸鈣結不定,可能有磷酸鐵鎂和草酸鈣結

晶(大麥町犬可能有尿酸鹽結晶)晶

脂滴不常見常見

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附錄A

(規(guī)范性)

犬貓膀胱穿刺操作規(guī)程

A.1所需材料

22G針頭、注射器、電推剪、酒精棉、碘伏棉、手套。

A.2操作步驟

犬貓膀胱穿刺的操作步驟如下:

a)動物仰臥保定。

b)觸診膀胱確定其大小和位置,電推剪剃毛后,以穿刺位點為中心順時針向外,分別使用酒精棉、

碘伏棉、酒精棉依次消毒皮膚表面,待消毒劑干燥后進行操作。

c)定位并固定膀胱。在膀胱穿刺前、穿刺中以及穿刺后,不可過分擠壓膀胱。

d)連接針頭和注射器。

e)將針頭穿透腹壁,朝向尾背側,成一定角度小心地刺入膀胱。這樣當膀胱收縮時,可以使針頭

保持于膀胱腔內,將尿液抽出。

f)采集5mL、10mL樣本,將針頭從腹壁拔出,拔出前應停止抽吸注射器的操作。

g)更換針頭,將尿樣注入無菌、密閉容器中。

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附錄B

(規(guī)范性)

折射儀測量尿比重的操作規(guī)程

B.1目的

尿液中的溶質濃度(通過測量尿相對密度獲得)可以反映腎臟的濃縮或稀釋功能。相對密度和折射

率有關,可以使用折射儀測量。

B.2材料和設備

離心后或未離心的尿液樣本、犬貓專用折射儀、去離子水、紙巾、一次性吸管。

B.3操作步驟

折射儀測定尿比重的操作步驟如下:

a)打開蓋板,露出折射儀的檢測棱鏡。

b)滴一滴尿樣于檢測棱鏡表面。

c)立即蓋上檢測棱鏡上的蓋板。

d)手持折射儀,用手指輕壓蓋板,使尿樣攤開,在檢測棱鏡上形成一個薄層,保持折射儀水平,

將折射儀對準光源。

e)根據(jù)動物種屬選取相應的標尺,讀出視場中明暗分界線在標尺上的刻度,保留小數(shù)點后第三位。

f)在尿液分析報告中記錄結果。

g)用水沖洗折射儀,用紙巾擦拭檢測棱鏡和蓋板的表面。

B.4校準

每次檢測前進行校準,將去離子水當作尿液樣本進行操作,操作步驟同B.3。去離子水讀取的結

果應為1.000。若結果并非1.000,則應旋轉校準旋鈕直至達到1.000。

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附錄C

(規(guī)范性)

尿試紙條法化學性質檢測操作規(guī)程

C.1尿試紙條的保存

密封、勿丟棄干燥劑、遠離高溫高濕環(huán)境。

C.2注意事項

應用試紙條法檢測尿液化學性質時應注意:

a)根據(jù)需要按步驟查閱說明書和比色板上的色塊、顏色變化幅度及干擾因素。

b)勿用過期試紙。

c)使用前先拿出試紙條,確保測試區(qū)未變色。

d)勿用手觸摸測試區(qū)。

e)堿性蒸汽或酸性揮發(fā)性氣體環(huán)境中勿使用試紙條。

f)尿液本身的顏色異常會影響色塊的顏色判讀,此時尿液化學性質結果僅供參考。

C.3操作步驟

尿試紙條法化學性質檢測的操作如下:

a)取新鮮、混勻的尿液或尿液上清檢測化學性質。冷藏尿樣應恢復室溫后再進行檢測。

b)將試紙條的測試區(qū)全部浸入尿樣中(不宜超過1s),或將尿液樣本快速滴加于各測試色塊上,

避免尿液從一個測試色塊流向其他色塊。

c)用吸水紙吸去試紙條上多余的尿液。

d)勿使測試區(qū)上的試劑相互污染。

e)光線良好的情況下,在標定時間內,將反應后測試區(qū)的顏色和生產(chǎn)商提供的比色板上的色塊進

行對比,并記錄結果。如有必要,進行驗證試驗。

f)如有可以進行試紙條判讀的機器,按機器說明操作,并記錄結果。

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附錄D

(規(guī)范性)

尿沉渣制備規(guī)程

D.1所需物品

吸管、塑料管、離心機、教玻片、蓋玻片(22mmX22mm)、顯微鏡。

D.2樣本處理步驟

D.2.1離心

準備尿液2mL~5mL,恢復到室溫,將尿液混合均勻后轉移到離心管中。常用450g~460g離心5min。

D.2.2分離上清

用吸管吸取上清轉移到另一塑料管中。留下0.2mL~0.5mL的尿液和沉渣。使原液和剩余樣本為10:

1?制備濃縮比例一致的沉渣樣本。

D.2.3制備濕片

輕晃離心管使尿沉渣重新懸浮。用塑料吸管吸取一滴懸浮液至干凈的載玻片上,蓋上蓋玻片,待顯

微鏡觀察。

D.2.4制備涂片

取一滴尿沉渣懸浮液于載玻片上,另取一張潔凈的載玻片,十字交叉置于尿沉渣樣本上,在樣本完

全散開前,平穩(wěn)地推拉第二張載玻片,制成尿沉渣涂片。將涂片自然風干或冷風機吹干后,用迪夫快速

染色法染色涂片,染色方法見附錄E。

如果沉渣量較少,可采取線性富集的方法制備涂片,取一滴重懸的尿沉渣樣本滴于1號載玻片的一

端,取另一光滑邊緣載玻片2號,以30°~45°角放置在液滴前,待樣本在2號載玻片邊緣擴散后,緩慢

進行推片,推片至約1號載玻片另一端約3/4位置時,直接提起拿走2號載玻片,讓尿沉渣樣本在1號載玻

片上形成濃集線。將涂片自然風干或冷風機吹干后,用迪夫染色法染色涂片,染色方法見附錄E。

D.2.5顯微鏡觀察

D.2.5.1濕片觀察

尿沉渣濕片的顯微鏡觀察步驟如下:

a)調低顯微鏡聚光器,根據(jù)物鏡調節(jié)光圈大小。

b)用10倍物鏡檢查沉渣中較大的成分,如管型、結晶和寄生蟲等。

c)用40倍物鏡檢查尿沉渣,進行紅細胞、白細胞和上皮細胞計數(shù),并對細菌、真菌、寄生蟲和

小結晶進行辨認、計數(shù)和描述。

d)記錄顯微鏡檢查結果。

D.2.5.2染色涂片觀察

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T/CVMA65—2021

尿沉渣染色涂片的顯微鏡觀察步驟如下:

a)抬高顯微鏡聚光器,根據(jù)物鏡調節(jié)光圈大小。

b)從低倍鏡到高倍鏡觀察尿沉渣涂片中的紅細胞、白細胞和上皮細胞等結構。

c)在油鏡下觀察尿沉渣涂片中的細菌、真菌等微生物。

d)記錄顯微鏡檢查結果。

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附錄E

(規(guī)范性)

迪夫快速染色

E.1滴染法

E.1.1準備材料

涂片樣本、迪夫A液、迪夫B液、磷酸鹽緩沖液、洗耳球、染色架、計時器、吸水紙、去離子水或

蒸儲水。

E.1.2操作步驟

迪夫染色滴染法操作步驟如下:

a)將風干涂片水平置于染色架上,有樣本的一面朝上。

b)滴加迪夫A液,使其完全覆蓋涂片,染色20s~30s.

c)用磷酸鹽緩沖液將涂片上的A液沖凈,并將涂片上多余的液體傾倒掉。

d)滴加迪夫B液,使其完全覆蓋涂片,染色20s~30s?

e)用去離子水或蒸儲水沖洗涂片,直至沖凈染液。

f)將涂片傾斜放置于吸水紙上,自然晾干;或用吹風機冷風吹干。

E.1.3注意事項

染色時應注意:

a)涂片樣本應完全風干。

b)根據(jù)涂片厚薄、有核細胞數(shù)量多少及環(huán)境溫度調整染色時間,涂片厚、有核細胞數(shù)量多及環(huán)境

溫度低時,可適當延長染色時間。

c)滴加的染液量應充足,避免染液蒸發(fā)導致染料沉淀物附著于涂片上。

d)染液應新鮮或定期過濾,避免形成染料沉淀物妨礙涂片觀察。

e)不可用吸水紙覆蓋在涂片上吸取水分。

f)不同廠家生產(chǎn)的

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