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文檔簡介
ICS11.220
CCSB41
團體標準
T/CVMA65—2021
犬貓臨床尿液檢查技術規(guī)范
TechnicaIspecificationforclinicaIurinalysisofcanineandfeIine
2021-12-22發(fā)布2021-12-22實施
中國獸醫(yī)協(xié)會發(fā)布
T/CVMA65—2021
目次
前言.....................................................................................II
1范圍....................................................................................1
2規(guī)范性引用文件..........................................................................1
3術語和定義..............................................................................1
4尿液樣本采集與保存.....................................................................1
4.1尿液樣本采集.......................................................................1
4.2尿液樣本保存........................................................................2
5物理性質檢查............................................................................2
5.1顏色和透明度.......................................................................2
5.2尿比重.............................................................................2
6化學性質檢查............................................................................3
7尿沉渣檢查..............................................................................3
附錄A(規(guī)范性)犬貓膀胱穿刺操作規(guī)程...............................................4
附錄B(規(guī)范性)折射儀測量尿比重的操作規(guī)程.........................................5
附錄C(規(guī)范性)尿試紙條法化學性質檢測操作規(guī)程.....................................6
附錄D(規(guī)范性)尿沉渣制備規(guī)程......................................................7
附錄E(規(guī)范性)迪夫快速染色........................................................9
T/CVMA65—2021
**—1—
刖s
本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分:標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定起
草。
本文件由北京中農大動物醫(yī)院有限公司提出。
本文件由中國獸醫(yī)協(xié)會歸口。
本文件起草單位:北京中農大動物醫(yī)院有限公司、中國農業(yè)大學、北京小動物診療行業(yè)協(xié)會、啟晟
(天津)寵物醫(yī)院管理有限公司。
本文件主要起草人:許楚楚、劉洋、夏兆飛、呂艷麗、陳艷云、黃薇。
II
T/CVMA65—2021
犬貓臨床尿液檢查技術規(guī)范
1范圍
本文件規(guī)定了犬貓尿液檢查時的樣本采集與保存,以及物理性質、化學性質及尿沉渣檢查。
本文件適用于動物診療機構及其醫(yī)務人員對犬貓尿液樣本進行檢查。
2規(guī)范性引用文件
下列文件中的內容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中,注日期的引用文件,
僅該日期對應的版本適用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本
文件。
T/CVMA60犬貓導尿操作技術
3術語和定義
下列術語和定義適用于本文件。
3.1
膀胱穿刺cystocentesis
用注射器經(jīng)由腹壁進入膀胱獲取尿液。
3.2
尿比重urinespecificgravity,USG
相同體積的尿液和水的質量比。
4尿液樣本采集與保存
4.1尿液樣本采集
4.1.1自然排尿
在動物排尿過程中,用潔凈、干燥的容器接取中段尿5mL~10mL。
注:中段尿指自然排尿時,讓開始的前段尿液將尿道沖洗干凈后,接取中段污染較小的尿液樣本。
4.1.2導尿
導尿具體操作按T/CVMA60執(zhí)行。
4.1.3膀胱穿刺
建議在超聲引導下進行。膀胱穿刺具體操作流程按附錄A執(zhí)行。
T/CVMA65—2021
4.2尿液樣本保存
尿液樣本保存應滿足以下條件:
——尿液樣本應于無菌、干燥、密閉的容器內保存。
一尿液樣本在室溫(15℃~25℃)下可保存lh冷藏(0℃~4℃)保存不超過6h,冷藏保存
的尿液應恢復室溫后再進行分析。
5物理性質檢查
5.1顏色和透明度
在光線充足的情況下,將混勻的尿液置于無色透明的容器內觀察顏色和透明度,并記錄。健康犬貓
尿液顏色和透明度參見表1。
表1健康犬貓尿液物理性質檢查結果參考值
檢查項目犬貓
顏色黃色到黃褐色黃色到黃褐色
透明度清亮清亮
比重1.015^1.0501.035^1.060
5.2尿比重
應使用比重計測USG,寵物診療機構也可用犬貓專用的折射儀進行測量。折射儀測量USG的方法按
附錄B執(zhí)行。環(huán)境溫度變化大的實驗室宜使用帶溫度校正功能的折射儀測量尿比重。健康犬貓尿比重參
見表1。
6化學性質檢查
犬貓尿液化學性質檢查包括pH、葡萄糖、酮體、膽紅素、潛血和蛋白??梢杂媚蛞夯瘜W性質檢查
試紙條檢測,操作方法按附錄C進行。健康犬貓尿液化學性質結果參見表2。
表2健康犬貓尿液化學性質檢查結果參考值
檢查項目犬貓
pH5.5~7.55.5~7.5
蛋白陰性,濃縮尿:+陰性
葡萄糖陰性陰性
酮體陰性陰性
尿膽紅素O-+陰性
潛血陰性陰性
7尿沉渣檢查
尿液沉渣檢查包括對細胞、結晶、管型和微生物等的顯微鏡觀察,尿沉渣涂片制備方法按附錄D操
作。健康犬貓尿沉渣檢查結果參見表3。
2
T/CVMA65—2021
表3健康犬貓尿沉渣檢查結果參考值
檢查項目犬貓
紅細胞(40倍物鏡)<5個<5個
白細胞(40倍物鏡)<5個<5個
其他細胞少量移行上皮少量移行上皮
細菌無無
管型(10倍物鏡)<2透明管型<2透明管型
結晶不定,可能有磷酸鐵鎂和草酸鈣結不定,可能有磷酸鐵鎂和草酸鈣結
晶(大麥町犬可能有尿酸鹽結晶)晶
脂滴不常見常見
3
T/CVMA65—2021
附錄A
(規(guī)范性)
犬貓膀胱穿刺操作規(guī)程
A.1所需材料
22G針頭、注射器、電推剪、酒精棉、碘伏棉、手套。
A.2操作步驟
犬貓膀胱穿刺的操作步驟如下:
a)動物仰臥保定。
b)觸診膀胱確定其大小和位置,電推剪剃毛后,以穿刺位點為中心順時針向外,分別使用酒精棉、
碘伏棉、酒精棉依次消毒皮膚表面,待消毒劑干燥后進行操作。
c)定位并固定膀胱。在膀胱穿刺前、穿刺中以及穿刺后,不可過分擠壓膀胱。
d)連接針頭和注射器。
e)將針頭穿透腹壁,朝向尾背側,成一定角度小心地刺入膀胱。這樣當膀胱收縮時,可以使針頭
保持于膀胱腔內,將尿液抽出。
f)采集5mL、10mL樣本,將針頭從腹壁拔出,拔出前應停止抽吸注射器的操作。
g)更換針頭,將尿樣注入無菌、密閉容器中。
4
T/CVMA65—2021
附錄B
(規(guī)范性)
折射儀測量尿比重的操作規(guī)程
B.1目的
尿液中的溶質濃度(通過測量尿相對密度獲得)可以反映腎臟的濃縮或稀釋功能。相對密度和折射
率有關,可以使用折射儀測量。
B.2材料和設備
離心后或未離心的尿液樣本、犬貓專用折射儀、去離子水、紙巾、一次性吸管。
B.3操作步驟
折射儀測定尿比重的操作步驟如下:
a)打開蓋板,露出折射儀的檢測棱鏡。
b)滴一滴尿樣于檢測棱鏡表面。
c)立即蓋上檢測棱鏡上的蓋板。
d)手持折射儀,用手指輕壓蓋板,使尿樣攤開,在檢測棱鏡上形成一個薄層,保持折射儀水平,
將折射儀對準光源。
e)根據(jù)動物種屬選取相應的標尺,讀出視場中明暗分界線在標尺上的刻度,保留小數(shù)點后第三位。
f)在尿液分析報告中記錄結果。
g)用水沖洗折射儀,用紙巾擦拭檢測棱鏡和蓋板的表面。
B.4校準
每次檢測前進行校準,將去離子水當作尿液樣本進行操作,操作步驟同B.3。去離子水讀取的結
果應為1.000。若結果并非1.000,則應旋轉校準旋鈕直至達到1.000。
5
T/CVMA65—2021
附錄C
(規(guī)范性)
尿試紙條法化學性質檢測操作規(guī)程
C.1尿試紙條的保存
密封、勿丟棄干燥劑、遠離高溫高濕環(huán)境。
C.2注意事項
應用試紙條法檢測尿液化學性質時應注意:
a)根據(jù)需要按步驟查閱說明書和比色板上的色塊、顏色變化幅度及干擾因素。
b)勿用過期試紙。
c)使用前先拿出試紙條,確保測試區(qū)未變色。
d)勿用手觸摸測試區(qū)。
e)堿性蒸汽或酸性揮發(fā)性氣體環(huán)境中勿使用試紙條。
f)尿液本身的顏色異常會影響色塊的顏色判讀,此時尿液化學性質結果僅供參考。
C.3操作步驟
尿試紙條法化學性質檢測的操作如下:
a)取新鮮、混勻的尿液或尿液上清檢測化學性質。冷藏尿樣應恢復室溫后再進行檢測。
b)將試紙條的測試區(qū)全部浸入尿樣中(不宜超過1s),或將尿液樣本快速滴加于各測試色塊上,
避免尿液從一個測試色塊流向其他色塊。
c)用吸水紙吸去試紙條上多余的尿液。
d)勿使測試區(qū)上的試劑相互污染。
e)光線良好的情況下,在標定時間內,將反應后測試區(qū)的顏色和生產(chǎn)商提供的比色板上的色塊進
行對比,并記錄結果。如有必要,進行驗證試驗。
f)如有可以進行試紙條判讀的機器,按機器說明操作,并記錄結果。
6
T/CVMA65—2021
附錄D
(規(guī)范性)
尿沉渣制備規(guī)程
D.1所需物品
吸管、塑料管、離心機、教玻片、蓋玻片(22mmX22mm)、顯微鏡。
D.2樣本處理步驟
D.2.1離心
準備尿液2mL~5mL,恢復到室溫,將尿液混合均勻后轉移到離心管中。常用450g~460g離心5min。
D.2.2分離上清
用吸管吸取上清轉移到另一塑料管中。留下0.2mL~0.5mL的尿液和沉渣。使原液和剩余樣本為10:
1?制備濃縮比例一致的沉渣樣本。
D.2.3制備濕片
輕晃離心管使尿沉渣重新懸浮。用塑料吸管吸取一滴懸浮液至干凈的載玻片上,蓋上蓋玻片,待顯
微鏡觀察。
D.2.4制備涂片
取一滴尿沉渣懸浮液于載玻片上,另取一張潔凈的載玻片,十字交叉置于尿沉渣樣本上,在樣本完
全散開前,平穩(wěn)地推拉第二張載玻片,制成尿沉渣涂片。將涂片自然風干或冷風機吹干后,用迪夫快速
染色法染色涂片,染色方法見附錄E。
如果沉渣量較少,可采取線性富集的方法制備涂片,取一滴重懸的尿沉渣樣本滴于1號載玻片的一
端,取另一光滑邊緣載玻片2號,以30°~45°角放置在液滴前,待樣本在2號載玻片邊緣擴散后,緩慢
進行推片,推片至約1號載玻片另一端約3/4位置時,直接提起拿走2號載玻片,讓尿沉渣樣本在1號載玻
片上形成濃集線。將涂片自然風干或冷風機吹干后,用迪夫染色法染色涂片,染色方法見附錄E。
D.2.5顯微鏡觀察
D.2.5.1濕片觀察
尿沉渣濕片的顯微鏡觀察步驟如下:
a)調低顯微鏡聚光器,根據(jù)物鏡調節(jié)光圈大小。
b)用10倍物鏡檢查沉渣中較大的成分,如管型、結晶和寄生蟲等。
c)用40倍物鏡檢查尿沉渣,進行紅細胞、白細胞和上皮細胞計數(shù),并對細菌、真菌、寄生蟲和
小結晶進行辨認、計數(shù)和描述。
d)記錄顯微鏡檢查結果。
D.2.5.2染色涂片觀察
7
T/CVMA65—2021
尿沉渣染色涂片的顯微鏡觀察步驟如下:
a)抬高顯微鏡聚光器,根據(jù)物鏡調節(jié)光圈大小。
b)從低倍鏡到高倍鏡觀察尿沉渣涂片中的紅細胞、白細胞和上皮細胞等結構。
c)在油鏡下觀察尿沉渣涂片中的細菌、真菌等微生物。
d)記錄顯微鏡檢查結果。
8
T/CVMA65—2021
附錄E
(規(guī)范性)
迪夫快速染色
E.1滴染法
E.1.1準備材料
涂片樣本、迪夫A液、迪夫B液、磷酸鹽緩沖液、洗耳球、染色架、計時器、吸水紙、去離子水或
蒸儲水。
E.1.2操作步驟
迪夫染色滴染法操作步驟如下:
a)將風干涂片水平置于染色架上,有樣本的一面朝上。
b)滴加迪夫A液,使其完全覆蓋涂片,染色20s~30s.
c)用磷酸鹽緩沖液將涂片上的A液沖凈,并將涂片上多余的液體傾倒掉。
d)滴加迪夫B液,使其完全覆蓋涂片,染色20s~30s?
e)用去離子水或蒸儲水沖洗涂片,直至沖凈染液。
f)將涂片傾斜放置于吸水紙上,自然晾干;或用吹風機冷風吹干。
E.1.3注意事項
染色時應注意:
a)涂片樣本應完全風干。
b)根據(jù)涂片厚薄、有核細胞數(shù)量多少及環(huán)境溫度調整染色時間,涂片厚、有核細胞數(shù)量多及環(huán)境
溫度低時,可適當延長染色時間。
c)滴加的染液量應充足,避免染液蒸發(fā)導致染料沉淀物附著于涂片上。
d)染液應新鮮或定期過濾,避免形成染料沉淀物妨礙涂片觀察。
e)不可用吸水紙覆蓋在涂片上吸取水分。
f)不同廠家生產(chǎn)的
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