BJH202205- 化妝品中脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯的測定

BJHBJH化妝品補充檢驗方法BJH202205化妝品中脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯的測定2022-12-20發(fā)布國家藥品監(jiān)督管理局發(fā)布

化妝品中脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯的測定（BJH202205）1范圍本方法規(guī)定了化妝品中脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯的測定方法。本方法適用于膏霜乳類、液體類、凝膠類、貼膜類化妝品中脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯的定性和定量測定。2原理樣品經(jīng)甲醇超聲提取，采用高效液相色譜儀分離，質(zhì)譜檢測器檢測，根據(jù)保留時間和特征離子對的相對豐度比定性，定量離子對峰面積定量，以標準曲線法計算含量。3試劑和材料除另有規(guī)定外，本方法中所用試劑均為分析純及以上規(guī)格，水為符合GB/T6682規(guī)定的一級水。3.1甲醇，色譜純。3.2冰乙酸，色譜純。3.30.1%乙酸溶液：量取1mL冰乙酸（3.2），用水稀釋至1000mL，混勻。3.4標準品：脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯標準品，純度≥97%。標準品的中文名稱、英文名稱、CAS號、分子式、相對分子質(zhì)量、結(jié)構(gòu)式詳見附錄A中的表A.1。3.5脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯標準儲備溶液：稱取脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯標準品20mg（精確到0.00001g），置于50mL容量瓶中，用甲醇（3.1）溶解并定容至刻度，搖勻。該標準儲備溶液的質(zhì)量濃度為400mg/L。3.6脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯標準溶液：精密量取脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯標準儲備溶液（3.5）0.20mL，置于50mL容量瓶中，用甲醇（3.1）定容至刻度，搖勻。該標準溶液的質(zhì)量濃度為1.6mg/L。4儀器和設(shè)備4.1高效液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀。4.2分析天平：感量0.0001g和0.00001g。4.3超聲波清洗器。4.4渦旋混合儀。4.5高速離心機，轉(zhuǎn)速不小于10000r/min。5試樣制備與保存樣品應(yīng)按照標簽標示的貯存條件進行保存。取樣前，應(yīng)檢查封口的完整性，觀察樣品的性狀和特征，并使樣品混勻。打開包裝后，應(yīng)盡可能快地取出所要測定部分進行分析，取樣后，應(yīng)將樣品進行密封保存。6分析步驟6.1篩查用標準溶液量取脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯標準溶液（3.6）適量，用甲醇（3.1）進行稀釋，配制成濃度為2μg/L的標準溶液。6.2基質(zhì)標準中間液精密量取脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯標準溶液（3.6）10mL，置于100mL容量瓶中，用甲醇（3.1）稀釋至刻度，搖勻，制成脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯濃度為160μg/L的基質(zhì)標準中間液。6.3基質(zhì)標準系列溶液稱取空白試樣0.2g（精確到0.0001g），置于25mL具塞比色管中，精密加入基質(zhì)標準中間液（6.2）適量，加入甲醇（3.1）至約20mL，自“渦旋振蕩30s”起與樣品同法處理（6.4），配制得濃度為1、2、5、12.5、25μg/L系列濃度基質(zhì)標準系列溶液。注：基質(zhì)標準系列溶液采用的空白試樣的劑型應(yīng)與待測樣品基本一致。6.4樣品處理稱取樣品0.2g（精確到0.0001g），置于25mL具塞比色管中，加入甲醇（3.1）約20mL，渦旋振蕩30s，使試樣與提取溶劑充分混勻，超聲提取20min，靜置至室溫，用甲醇（3.1）定容至刻度，搖勻，經(jīng)0.22μm聚四氟乙烯濾膜過濾（必要時可先10000r/min轉(zhuǎn)速離心10min），濾液作為供試品溶液備用。當供試品溶液中檢出脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯且濃度較高時，需適當稀釋后測定；空白試樣（6.3）也應(yīng)同法稀釋。6.5儀器參考條件6.5.1色譜條件色譜柱：C18柱（100mm×2.1mm，1.8μm），或等效色譜柱；流動相：A為0.1%乙酸溶液（3.3），B為甲醇（3.1）。梯度洗脫程序見表1；流速：0.2mL/min；柱溫：35℃；進樣量：2μL。表1梯度洗脫程序時間（min）流動相A（%）流動相B（%）0.00851510.00109012.00109013.00851516.0085156.5.2質(zhì)譜條件離子源：電噴霧離子源（ESI源）；監(jiān)測模式：負離子多反應(yīng)監(jiān)測模式（MRM），監(jiān)測離子對及相關(guān)參數(shù)設(shè)定見表2。表2脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯監(jiān)測離子對及相關(guān)參數(shù)設(shè)定組分名稱母離子（m/z）子離子（m/z）CE（eV）脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯531.298.9*431.1-50-19*為推薦的定量離子。注：當采用不同質(zhì)譜儀器時，儀器參數(shù)可能存在差異，測定前應(yīng)將質(zhì)譜參數(shù)優(yōu)化到最佳。6.6定性判定取供試品溶液（6.4）與篩查用標準溶液（6.1）在相同分析條件下測定，樣品中如呈現(xiàn)定量離子對和定性離子對的色譜峰，被測成分的特征離子峰保留時間與篩查用標準溶液（6.1）對應(yīng)的保留時間一致，且樣品所選擇的監(jiān)測離子對的相對豐度比與篩查用標準溶液（6.1）的監(jiān)測離子對的相對豐度比的偏差不超過表3的規(guī)定，則可以判定樣品中存在脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯。表3定性確證時相對離子豐度比的最大允許偏差相對離子豐度（k）k>50%50%≥k>20%20%≥k>10%k≤10%允許最大偏差±20%±25%±30%±50%6.7定量測定取基質(zhì)標準系列溶液（6.3）依次測定，以系列濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，進行線性回歸，繪制基質(zhì)標準曲線，其線性相關(guān)系數(shù)應(yīng)大于0.99。取供試品溶液（6.4）測定，將定量離子對色譜峰面積代入基質(zhì)標準曲線。按“7”項下公式，計算樣品中脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯的含量。6.8平行試驗按上述步驟，對同一樣品進行平行實驗測定。6.9空白試驗除不加試樣外，均按上述測定條件和步驟進行。7結(jié)果計算結(jié)果按式（1）計算：………………(SEQ標準自動公式\*ARABIC1)式中：ω—樣品中脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯的質(zhì)量分數(shù)，μg/g；ρ—供試品溶液中脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯的質(zhì)量濃度，μg/L；V—樣品定容體積，mL；m—樣品取樣量，g；D—稀釋倍數(shù)（如未稀釋則為1）。相同條件下獲得的兩次獨立測試結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的10%。8精密度和準確度多家實驗室驗證定量下限濃度回收率為80%～110%，相對標準偏差小于10%（n=6），中、高濃度回收率為85%～110%，相對標準偏差小于10%（n=6）。9檢出限和定量限本方法中脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯的檢出限、定量下限及取樣量為0.2g時檢出濃度和最低定量濃度見表4。表4脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯的檢出限、定量下限、檢出濃度和最低定量濃度組分名稱檢出限（ng）定量下限（ng）檢出濃度（μg/g）最低定量濃度（μg/g）脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯0.00070.0020.040.210圖譜圖1脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯標準溶液的多反應(yīng)監(jiān)測色譜圖附錄A脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯的相關(guān)信息表A.1脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯的的中文名稱、英文名稱、CAS號、分子式、相對分子質(zhì)量及結(jié)構(gòu)式中文名稱英文名稱CAS號分子式相對分子質(zhì)量結(jié)構(gòu)