芳胺類藥物的質(zhì)量分析

關(guān)于芳胺類藥物的質(zhì)量分析學(xué)習(xí)目標(biāo)1.掌握鹽酸普魯卡因和對乙酰氨基酚的鑒別、檢查和含量測定方法。2.了解鹽酸普魯卡因和對乙酰氨基酚的結(jié)構(gòu)特征和特殊雜質(zhì)的檢查原理。第2頁,共47頁，星期六，2024年，5月芳香胺類藥物

芳胺類

芳酰胺類（1）（2）芳胺類藥物主要指具有芳胺或芳酰胺結(jié)構(gòu)的藥物，這類藥物中典型藥物有對乙酰氨基酚、鹽酸普魯卡因。第3頁,共47頁，星期六，2024年，5月第一節(jié)鹽酸普魯卡因的質(zhì)量分析

鹽酸普魯卡因是一種局部麻醉藥，它的化學(xué)結(jié)構(gòu)為4-氨基苯甲酸-2-(二乙氨基)乙醇鹽酸鹽，可由對硝基甲苯為原料，經(jīng)氧化、酯化得到硝基卡因，再經(jīng)過還原、成鹽后制得?！吨袊幍洹?010年版除了收載鹽酸普魯卡因原料，還收載了鹽酸普魯卡因注射液、注射用鹽酸普魯卡因等劑型。第4頁,共47頁，星期六，2024年，5月一、鹽酸普魯卡因的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

鹽酸普魯卡因原料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)查閱（《中國藥典》2010年版第二部793頁。通過課前預(yù)習(xí)，思考完成下列問題？

1.你能在中國藥典上找到注射用鹽酸普魯卡因的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)嗎？2.你能根據(jù)所學(xué)說出鹽酸普魯卡因結(jié)構(gòu)上的兩個(gè)Ｎ原子哪個(gè)是叔Ｎ原子？第5頁,共47頁，星期六，2024年，5月二、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)解讀（一）性狀與鑒別（二）檢查（三）含量測定第6頁,共47頁，星期六，2024年，5月1、性狀普魯卡因結(jié)構(gòu)中的脂烴胺側(cè)鏈有叔胺氮原子，顯弱堿性，與鹽酸成鹽，因而易溶于水。（一）性狀與鑒別第7頁,共47頁，星期六，2024年，5月2、水解反應(yīng)二乙氨基乙醇↑能使?jié)櫇竦募t色石蕊試紙變?yōu)樗{(lán)色HCl鹽酸普魯卡因＋10％NaOH→白色↓（普魯卡因）

變?yōu)橛蜖钗?/p>

水解產(chǎn)生對氨基苯甲酸（白）對氨基苯甲酸鈉第8頁,共47頁，星期六，2024年，5月3、紅外光譜法該法是專屬性很強(qiáng)的鑒別方法，其紅外光吸收圖譜應(yīng)依次與對照的圖譜一致。第9頁,共47頁，星期六，2024年，5月4、氯化物的鑒別反應(yīng)本品的水溶液顯氯化物的鑒別反應(yīng)。（1）取供試品溶液，加稀硝酸使成酸性后，加硝酸銀試液，生成白色凝乳狀沉淀；分離，沉淀加氨試液即溶解，再加稀硝酸，沉淀復(fù)析出。

第10頁,共47頁，星期六，2024年，5月（2）取供試品少量，置試管中，加等量的二氧化錳，混勻，加硫酸濕潤后，緩慢加熱，Cl-可被二氧化錳氧化成Cl2；Cl2遇碘化鉀（KI）淀粉試紙可氧化其中I-成I2，I2在I-存在下可使淀粉試紙變?yōu)樗{(lán)色。第11頁,共47頁，星期六，2024年，5月4、重氮化-偶合反應(yīng)（芳香第一胺反應(yīng)）鹽酸普魯卡因結(jié)構(gòu)中具有芳伯氨基，可發(fā)生重氮化-偶合反應(yīng)。第12頁,共47頁，星期六，2024年，5月思考與交流1.從結(jié)構(gòu)上分析重氮化-偶合反應(yīng)鑒別鹽酸普魯卡因的原理。2.根據(jù)普魯卡因的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，還可以設(shè)計(jì)什么方法鑒別鹽酸普魯卡因？第13頁,共47頁，星期六，2024年，5月1、酸度來源:1)生產(chǎn)過程中:需在酸性條件下進(jìn)行氧化、酯化、成鹽等反應(yīng)，因此可能會(huì)引入酸性雜質(zhì);2)貯藏過程中:可能會(huì)水解生成游離酸（對氨基苯甲酸）?！吨袊幍洹?010年版規(guī)定要進(jìn)行酸度檢查。（二）檢查第14頁,共47頁，星期六，2024年，5月2、對氨基苯甲酸本品在干燥條件下較穩(wěn)定，但其水溶液穩(wěn)定性較差，易發(fā)生水解反應(yīng)生成對氨基苯甲酸。其注射液在制備過程中，由于受滅菌溫度、滅菌時(shí)間、溶液pH、貯藏時(shí)間、光線及金屬離子等因素的影響，可發(fā)生水解反應(yīng)，生成對氨基苯甲酸和2-二乙氨基乙醇。對氨基苯甲酸隨貯藏時(shí)間的延長或高溫加熱，可進(jìn)一步脫羧轉(zhuǎn)化為苯胺，苯胺又可被氧化為有色物，使注射液變黃，療效下降，毒性增加。

第15頁,共47頁，星期六，2024年，5月思考與交流請根據(jù)《中國藥典》2010年版對氨基苯甲酸檢查項(xiàng)，計(jì)算其限量？2.《中國藥典》2005年版規(guī)定檢查普魯卡因注射液中對氨基苯甲酸采用薄層色譜法，而2010年版藥典卻采用高效液相色譜法，請問：新版藥典為何將對氨基苯甲酸的檢查改用高效液相色譜法？第16頁,共47頁，星期六，2024年，5月3、其他檢查溶液的澄清度、鐵鹽、干燥失重、熾灼殘?jiān)?、重金屬檢查。注射用鹽酸普魯卡因還應(yīng)進(jìn)行細(xì)菌內(nèi)毒素和無菌檢查。第17頁,共47頁，星期六，2024年，5月亞硝酸鈉滴定法鹽酸普魯卡因分子結(jié)構(gòu)中有芳伯氨基，在酸性溶液中可與亞硝酸鈉反應(yīng)，故可用亞硝酸鈉滴定法測定含量。（三）含量測定第18頁,共47頁，星期六，2024年，5月NaNO2滴定法的原理：在鹽酸的酸性溶液中，NaNO2與具有芳伯氨基（芳香第一胺）的鹽酸普魯卡因發(fā)生重氮化反應(yīng)，定量生成重氮鹽，以消耗NaNO2滴定液（0.1mol/L）的量來計(jì)算藥物含量，用永停滴定法指示滴定終點(diǎn)。第19頁,共47頁，星期六，2024年，5月計(jì)算公式：式中：V：供試品消耗亞硝酸鈉滴定液體積（ml）T：滴定度（mg/ml）F：亞硝酸鈉鈉滴定液濃度校正因子W供：供試品的稱樣量（g）第20頁,共47頁，星期六，2024年，5月永停滴定法指示滴定終點(diǎn)的原理：滴定前，溶液中無亞硝酸，電極上無氧化還原反應(yīng)，因而電路無電流通過，電流計(jì)指針指在零位；滴定到終點(diǎn)時(shí)，溶液中有微過量的亞硝酸，電極上可發(fā)生氧化還原反應(yīng)，電路中有電流通過，使電流計(jì)指針突然偏轉(zhuǎn)，不再回復(fù)而指示終點(diǎn)。第21頁,共47頁，星期六，2024年，5月測定的主要條件：加入適量的溴化鉀加快反應(yīng)速度。加入過量鹽酸加速反應(yīng)。反應(yīng)溫度：在室溫（10-30℃）下進(jìn)行。滴定速度：滴定管尖端插入液面下滴定；滴定速度先快后慢。思考與交流1.亞硝酸鈉法測定鹽酸普魯卡因的含量的原理是什么？２.影響重氮化反應(yīng)速度的因素有哪些？第22頁,共47頁，星期六，2024年，5月第二節(jié)對乙酰氨基酚的質(zhì)量分析

對乙酰氨基酚是一種解熱鎮(zhèn)痛藥，它的化學(xué)結(jié)構(gòu)為N-(4-羥基苯基)乙酰胺，可由對硝基苯酚經(jīng)還原得對氨基酚，再經(jīng)醋酸酰化后制得。《中國藥典》2010年版除了收載對乙酰氨基酚原料、對乙酰氨基酚片、對乙酰氨基酚注射液等多種劑型。

第23頁,共47頁，星期六，2024年，5月一、對乙酰氨基酚的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)對乙酰氨基酚原料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的查閱（《中國藥典》2010年版第二部234頁）。通過課前預(yù)習(xí)，思考完成下列問題？

1.你能在中國藥典上找到對乙酰氨基酚的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)嗎？2.分析對乙酰氨基酚結(jié)構(gòu)中的官能團(tuán)。

第24頁,共47頁，星期六，2024年，5月二、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)解讀（一）鑒別（二）檢查（三）含量測定第25頁,共47頁，星期六，2024年，5月（一）鑒別1、顯色反應(yīng)對乙酰氨基酚分子結(jié)構(gòu)中具有酚羥基，可直接與三氯化鐵發(fā)生反應(yīng)顯藍(lán)紫色。第26頁,共47頁，星期六，2024年，5月2、水解后重氮化-偶合反應(yīng)具有潛在芳香第一胺的藥物，經(jīng)適當(dāng)方法處理后，若能游離出芳香第一胺，也可以發(fā)生重氮化-偶合反應(yīng)。對乙酰氨基酚加熱水解后生成芳香胺基，因此可以發(fā)生重氮化-偶合反應(yīng)。第27頁,共47頁，星期六，2024年，5月

對乙酰氨基酚Ch.P（2010）[鑒別]

取本品約0.1g，加稀鹽酸5ml，置水浴中加熱40分鐘，放冷；取0.5ml，滴加亞硝酸鈉試液5滴，搖勻，用水3ml稀釋后，加堿性β-萘酚試液2ml，振搖，即顯紅色。

第28頁,共47頁，星期六，2024年，5月3、紅外光譜法該法是專屬性很強(qiáng)的鑒別方法，其紅外光吸收圖譜應(yīng)依次與對照的圖譜一致。第29頁,共47頁，星期六，2024年，5月思考與交流1.能與三氯化鐵顯色的藥物一般應(yīng)含有什么官能團(tuán)？2.為什么水解后的重氮化-偶合反應(yīng)能鑒別對乙酰氨基酚？第30頁,共47頁，星期六，2024年，5月對乙酰氨基酚在生產(chǎn)合成過程中引入:一般雜質(zhì)外特殊雜質(zhì):反應(yīng)中間體、副產(chǎn)物以及分解產(chǎn)物等?！吨袊幍洹?010版規(guī)定對乙酰氨基酚除檢查酸度、氯化物、硫酸鹽、水分（干燥失重）、熾灼殘?jiān)椭亟饘俚纫话汶s質(zhì)外，還需檢查乙醇溶液的澄清度與顏色、有關(guān)物質(zhì)、對氨基酚、對氯苯乙酰胺等特殊雜質(zhì)。（二）檢查第31頁,共47頁，星期六，2024年，5月1、酸度對乙酰氨基酚在酸性條件下易水解，故應(yīng)進(jìn)行酸度檢查。2、乙醇溶液的澄清度與顏色

對乙酰氨基酚原料藥的生產(chǎn)合成工藝中使用鐵粉作為還原劑，有可能帶入成品中，致使其乙醇溶液產(chǎn)生渾濁。中間體對氨基酚的有色氧化產(chǎn)物，在乙醇中顯橙紅色或棕色。第32頁,共47頁，星期六，2024年，5月3、有關(guān)物質(zhì)對氨基酚、對氯苯乙酰胺、鄰乙?；鶎σ阴０被印⑴嫉?、氧化偶氮苯、苯醌和醌亞胺等。方法：薄層色譜法。

第33頁,共47頁，星期六，2024年，5月思考與交流對乙酰氨基酚檢查項(xiàng)下的“有關(guān)物質(zhì)“是什么？2.《中國藥典》2010年版采用什么方法檢查此“有關(guān)物質(zhì)”？第34頁,共47頁，星期六，2024年，5月4、對氨基酚來源：1）生產(chǎn)合成過程：乙?；磻?yīng)不完全

2）貯存過程：發(fā)生水解。其毒性較大，并使本品產(chǎn)生色澤，應(yīng)嚴(yán)格控制其限量。方法：高效液相色譜法。注：對氨基酚對照溶液不穩(wěn)定，應(yīng)臨用前新鮮配制。第35頁,共47頁，星期六，2024年，5月5、對氯苯乙酰胺對乙酰氨基酚在生產(chǎn)合成過程中，會(huì)引入對氯苯乙酰胺雜質(zhì)。方法：高效液相色譜法。思考與交流1.請根據(jù)《中國藥典》2010年版下對氨基酚檢查項(xiàng)，計(jì)算其限量？2.《中國藥典》2010年版采用什么方法檢查對氯苯乙酰胺？第36頁,共47頁，星期六，2024年，5月紫外分光光度法對乙酰氨基酚紫外吸收光譜特征明顯，在257nm波長處有最大吸收，基于這一特征可用于其原料藥及其制劑的含量測定。優(yōu)點(diǎn)：該法較亞硝酸鈉滴定法靈敏度高，操作簡便。《中國藥典》2010年版采用吸收系數(shù)法，測定對乙酰氨基酚原料、片劑、注射劑、栓劑及膠囊劑的含量。（三）含量測定第37頁,共47頁，星期六，2024年，5月計(jì)算公式：式中：A:為供試品吸光度V:供試品溶液稀釋前的初始體積（ml）D:稀釋倍數(shù)W供:供試品的稱樣量（g）第38頁,共47頁，星期六，2024年，5月【實(shí)例解析】

對乙酰氨基酚的含量測定

精密稱取對乙酰氨基酚0.0420g，置250ml量瓶中，加0.4％氫氧化鈉溶液50ml溶解后，加水至刻度，搖勻，精密量取5m1，置100ml量瓶中，加0.4％氫氧化鈉溶液10m1，加水至刻度，搖勻，在257nm的波長處測定吸光度為0.594，按C8H9NO2的吸收系數(shù)為715計(jì)算本品百分含量。解析：A=0.594，=715，V=250，D=100/5=20W供=0.0420g與中國藥典中對乙酰氨基酚的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較，98.9%在98.0%~102.0范圍內(nèi)，故該對乙酰氨基酚供試品含量合格。第39頁,共47頁，星期六，2024年，5月思考與交流1.你能根據(jù)所學(xué)說出采用紫外分光光度法測定對乙酰氨基酚含量的優(yōu)點(diǎn)嗎？2.試比較對乙酰氨基酚及其制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的不同。3.試比較新版藥典與《中國藥典》2005年版對乙酰氨基酚質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)做了怎樣的改進(jìn)？為什么？第40頁,共47頁，星期六，2024年，5月測試題1.下列藥物中，可以發(fā)生重氮化-偶合反應(yīng)的是（）A.鹽酸普魯卡因B.腎上腺素C.苯佐卡因D.鹽酸丁卡因E.鹽酸利多卡因一、選擇題A型題：每道考題有A、B、C、D、E五個(gè)備選答案，請從中選擇一個(gè)最佳答案。第41頁,共47頁，星期六，2024年，5月2.下列藥物中，經(jīng)水解后可以發(fā)生重氮化—偶合反應(yīng)的是（）A.苯佐卡因B.腎上腺素C.對乙酰氨基酚D.鹽酸普魯卡因E.鹽酸丁卡因3.在下列藥物的水溶液中，加入三氯化鐵試液，即顯藍(lán)紫色，該藥物應(yīng)是（）A.苯佐卡因B.醋氨苯砜C.對乙酰氨基酚D.鹽酸普魯卡因E.鹽酸利多卡因測試題第42頁,共47頁，星期六，2024年，5月4.《中國藥典》2010年版規(guī)定，鹽酸普魯卡因注射液應(yīng)檢查的特殊雜質(zhì)是（）A.對氨基酚B.對氨基苯甲酸C.對氨基苯乙酸D.氨基苯E.硝基苯5.亞硝酸鈉滴定法中，常加入溴化鉀的作用是（）A.防止亞硝酸逸失B.增加亞硝酸鈉的穩(wěn)定性C.抑制生成的重氮鹽分解D.避免溫度的影響E.加快重氮化反應(yīng)的速度測試題第43頁,共47頁，星期六，2024年，5月6.亞硝酸鈉滴定法