DB2308T 198-2024三江平原大豆種質(zhì)花葉病毒病抗性鑒定及評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)程

ICS65.020.01CCSB05DB2308佳木斯市市場監(jiān)督管理局發(fā)布IDB2308/T198—2024本文件按照GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由佳木斯市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局提出并歸口。本文件由佳木斯市市場監(jiān)督管理局批準(zhǔn)發(fā)布。本文件起草單位：黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院佳木斯分院。本文件主要起草人：楊曉賀、姚亮亮、丁俊杰、邱磊、王自杰。本文件為2024年首次發(fā)布。1DB2308/T198—2024三江平原大豆種質(zhì)花葉病毒病抗性鑒定及評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)程本文件規(guī)定了佳木斯市三江平原地區(qū)大豆花葉病毒田間鑒定與抗性評(píng)價(jià)的術(shù)語和定義、田間鑒定圃的設(shè)置、病毒株系的制備與保存、接種與病情調(diào)查、抗性評(píng)價(jià)、鑒定結(jié)果記載等技術(shù)規(guī)程。本文件適用于黑龍江省佳木斯市大豆花葉病毒病田間鑒定圃的設(shè)置、抗性鑒定與評(píng)價(jià)。2規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB4404.2-2010糧食作物種子第2部分：豆類GB/T8321農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則（所有部分）NY/T1276農(nóng)藥安全使用規(guī)范總則NY/T3428-2019大豆品種大豆花葉病毒病抗性鑒定技術(shù)規(guī)程N(yùn)Y/T5010-2016無公害農(nóng)產(chǎn)品種植業(yè)產(chǎn)地環(huán)境條件DB23/T018-2007大豆生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。3.1大豆成株抗性植物生長期間所表現(xiàn)的能減輕或克服病原物致病作用的可遺傳性狀。3.2大豆種?？剐灾参矬w在籽粒上所表現(xiàn)的能減輕或克服病原物致病作用的可遺傳性狀。3.3大豆種粒斑駁大豆因花葉病毒的侵染在籽粒的種皮上形成的由臍部向外擴(kuò)散的斑紋。3.4侵染型根據(jù)大豆接種花葉病毒后對(duì)花葉病毒的反應(yīng)部位和癥狀不同劃分的侵染類型，分花葉型、壞死型、種粒斑駁型。3.5抗性評(píng)價(jià)根據(jù)采用的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)判別大豆對(duì)大豆花葉病毒病反應(yīng)程度和抵抗水平的定性描述。4田間鑒定圃的設(shè)置2DB2308/T198—20244.1田間鑒定圃的選址田間鑒定圃選擇具備良好自然發(fā)病環(huán)境和可控灌溉條件、符合NY/T5010標(biāo)準(zhǔn)地塊，與大田隔離要達(dá)到200米；或在防蟲溫室、防蚜網(wǎng)室內(nèi)進(jìn)行亦可。4.2田間鑒定圃配置鑒定圃采用壟作單播、行長3m，行距65cm～70cm，單行區(qū)，重復(fù)3次，順序編號(hào)，間比法排列，逢20的倍數(shù)設(shè)置一行對(duì)照，鑒定圃四周設(shè)保護(hù)區(qū)，保護(hù)區(qū)為5m或4行。4.3田間播種4.3.1田間播種時(shí)間播種時(shí)間5月10日～20日為宜，或適當(dāng)調(diào)整不同材料的播期以使植株接種期和發(fā)病期能夠與適宜的氣候條件（濕度與溫度）相遇。4.3.2田間播種方式及播種量采用人工開溝，條播方式播種。每份材料播種1行，每隔19份鑒定材料播種1行感病對(duì)照品種，試驗(yàn)每行均勻播種45粒種子。種子符合GB4404.2標(biāo)準(zhǔn)播種時(shí)間5月10日～20日為宜，或適當(dāng)調(diào)整不同材料的播期以使植株接種期和發(fā)病期能夠與適宜的氣候條件（濕度與溫度）相遇。4.3.3田間管理按GB/T8321、NY/T1276、DB23/T018技術(shù)規(guī)程進(jìn)行田間管理和病蟲草防治。及時(shí)灌水、及時(shí)防治大豆蚜蟲，以免蚜蟲傳毒造成交叉感染。5病毒株系的制備和保存參見NY/T3428-2019制備病原物接種體并保存。具體方法：采集田間典型大豆花葉病毒病癥狀的植株葉片，人工汁液摩擦接種法在感病大豆上分離純化大豆花葉病毒病分離物，分離物經(jīng)生物學(xué)和血清學(xué)鑒定，確認(rèn)其為大豆花葉病毒，對(duì)陽性大豆花葉病毒分離物進(jìn)行致病性測定，根據(jù)不同抗性的鑒別寄主品種引發(fā)的癥狀反應(yīng)劃分SMV株系，具有典型癥狀的病葉保存在-20℃以下冰箱中。6接種與病情調(diào)查6.1接種期和接種方法接種期：幼苗第一片真葉期開始接種。接種方法：摩擦接種法。具體方法：充分消毒的普通油畫筆刷子蘸取接種懸浮液，在葉面輕度摩擦造成微傷，每株接種2片真葉。接種兩次，間隔5d～7d。6.2調(diào)查方法及項(xiàng)目調(diào)查時(shí)每份材料隨機(jī)抽樣20株掛牌標(biāo)記，分別調(diào)查記載侵染型、發(fā)病級(jí)別和發(fā)病株數(shù)，進(jìn)行病情分級(jí)和病情指數(shù)的計(jì)算。6.3籽粒侵染型記載及標(biāo)準(zhǔn)3DB2308/T198—2024籽粒侵染型調(diào)查在大豆成熟期進(jìn)行，每份材料隨機(jī)抽樣20株，種粒斑駁按0、1、3、5、7五個(gè)級(jí)別劃分。6.4病情級(jí)別劃分接種病株病情級(jí)別及其相應(yīng)的癥狀描述見表1。表1大豆花葉病毒引起的大豆病毒病病情級(jí)別的劃分012346.5病情記載調(diào)查記載每一鑒定植株的病情級(jí)別，并計(jì)算病情指數(shù)。病情指數(shù)按公式（1）計(jì)算：DI=∑(s×n)/(N×S)×100(1)式中：DI——病情指數(shù)；s——各病情級(jí)別的代表數(shù)值；n——各病情級(jí)別的指數(shù)數(shù)；N——調(diào)查總植株數(shù)；S——最高病情級(jí)別的代表數(shù)值。7抗性評(píng)價(jià)依據(jù)鑒定材料3次重復(fù)的病情指數(shù)平均值確定其成株期抗性水平，劃分見表2。表2大豆對(duì)花葉病毒病抗性的成株期評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)病情指數(shù)（DI）DI=0RS籽粒斑