藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究課件

藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究專(zhuān)題講座

藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究第一部分

2010版GMP

實(shí)施指南—— QC實(shí)驗(yàn)室

原料藥藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究3質(zhì)量控制體系與質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)室關(guān)鍵質(zhì)量控制原料藥無(wú)菌藥品

口服固體制劑中藥制劑生物制品/血液制品/疫苗2010版GMP質(zhì)量控制藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究4全面的藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理體系模型,包括:管理職責(zé)產(chǎn)品質(zhì)量實(shí)現(xiàn)質(zhì)量保證要素變更管理GMP實(shí)施指南:質(zhì)量管理體系系統(tǒng)持續(xù)改進(jìn)質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)管理質(zhì)量管理系統(tǒng)文件術(shù)語(yǔ)/關(guān)鍵詞藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究5GC實(shí)驗(yàn)室:GC實(shí)驗(yàn)室總體描述取樣試劑及試液的管理標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品分析儀器的確認(rèn)分析儀器的校準(zhǔn)/維護(hù)GMP實(shí)施指南:質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)室分析方法的驗(yàn)證和確認(rèn)穩(wěn)定性試驗(yàn)超出標(biāo)準(zhǔn)及超趨勢(shì)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果調(diào)查原始數(shù)據(jù)的管理物料及產(chǎn)品的檢驗(yàn)微生物檢驗(yàn)藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究6GMP實(shí)施指南:原料藥前言質(zhì)量管理人員廠(chǎng)房與設(shè)施設(shè)備文件與記錄物料管理生產(chǎn)和過(guò)程控制原料藥和中間體的包裝和貼簽儲(chǔ)存和分發(fā)實(shí)驗(yàn)室控制驗(yàn)證變更控制拒收和物料的再利用投訴與召回委托生產(chǎn)和委托檢驗(yàn)代理/中間/貿(mào)易/分銷(xiāo)/分裝/再貼簽商采用發(fā)酵工藝生產(chǎn)原料藥的特殊要求用于臨床研究的原料藥無(wú)菌原料藥藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究7一、QC實(shí)驗(yàn)室分析方法的驗(yàn)證與確認(rèn)分析方法方法驗(yàn)證方法確認(rèn)適用范圍方法驗(yàn)證的一般原則需要驗(yàn)證的檢驗(yàn)項(xiàng)目方法驗(yàn)證內(nèi)容7.1準(zhǔn)確度;7.2

精密度;7.3專(zhuān)屬性;7.4檢測(cè)限;7.5定量限;7.6/7線(xiàn)性與范圍;7.8耐用性方法確認(rèn)方法再驗(yàn)證文件管理藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究8分析方法驗(yàn)證相關(guān)指南藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究91.分析方法分析方法

——詳細(xì)描述完成分析檢驗(yàn)的每一步驟,一般包括:方法原理;儀器及其參數(shù);試劑;供試品溶液與對(duì)照溶液的制備;計(jì)算公式及檢測(cè)限度

——可采用化學(xué)分析法和儀器分析法同一方法用于不同的檢驗(yàn)項(xiàng)目時(shí),驗(yàn)證內(nèi)容不同HPLC:鑒別:專(zhuān)屬性 有關(guān)物質(zhì)檢查:專(zhuān)屬性,準(zhǔn)確度,定量限等藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究10方法驗(yàn)證 ——新方法的建立定義:

依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)項(xiàng)目的要求,設(shè)定驗(yàn)證的內(nèi)容,

設(shè)計(jì)合理的試驗(yàn)方案并完成操作的過(guò)程目的: 證明方法能夠滿(mǎn)足檢驗(yàn)項(xiàng)目的要求作用:

方法建立的依據(jù);制定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)方法確認(rèn) ——已驗(yàn)證(如藥典)方法的應(yīng)用/方法轉(zhuǎn)移目的:

證明在本實(shí)驗(yàn)室條件下的適用性,部分驗(yàn)證:

?鑒別(專(zhuān)屬性);含量測(cè)定(+重現(xiàn)性);雜質(zhì)檢查(+靈/重)2.分析方法驗(yàn)證與確認(rèn)藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究11適用于化學(xué)藥品質(zhì)量控制的理化分析法驗(yàn)證

——物料,中間體與中間過(guò)程控制;產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)清潔驗(yàn)證方法的驗(yàn)證不適用于化學(xué)藥品質(zhì)量控制的微生物分析法(參見(jiàn)第17章)生物制品質(zhì)量控制方法驗(yàn)證3.適用范圍藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究12需驗(yàn)證的方法鑒別;雜質(zhì)檢查(限度或定量);含量測(cè)定(檢查性定量)驗(yàn)證內(nèi)容根據(jù)檢驗(yàn)項(xiàng)目要求與分析方法特點(diǎn)確定無(wú)需驗(yàn)證的檢驗(yàn)項(xiàng)目與方法外觀,密度,酸值,pH,……氯化物,硫酸鹽,干燥失重,熾灼殘?jiān)?……重量差異,崩解時(shí)限,裝量,裝量差異,……需特殊或非常規(guī)驗(yàn)證的方法粒度分布;旋光度;熔點(diǎn);硬度4.方法驗(yàn)證的一般原則藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究135.需要驗(yàn)證的檢驗(yàn)項(xiàng)目鑒別定性方法——專(zhuān)屬性,耐用性檢查限度檢查——專(zhuān)屬性,檢測(cè)限,耐用性定量測(cè)定——微量分析:所有項(xiàng)目(檢測(cè)限)含量測(cè)定常量定量分析——除定量限與檢測(cè)限外所有項(xiàng)目藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究14表11-1《中國(guó)藥典》2010版中規(guī)定的檢驗(yàn)項(xiàng)目與驗(yàn)證內(nèi)容驗(yàn)證內(nèi)容檢驗(yàn)項(xiàng)目鑒別雜質(zhì)測(cè)定含量/含量均勻度/溶出度測(cè)定限度定量準(zhǔn)確度××√√精密度重復(fù)性××√√中間精密度××√(1)√(1)專(zhuān)屬性(2)√√√√檢測(cè)限×√√(3)×定量限××√×線(xiàn)性××√√范圍××√√耐用性√√√√

有重現(xiàn)性驗(yàn)證，不需驗(yàn)證中間精密度；一種方法專(zhuān)屬性不夠，可有其他方法予以補(bǔ)充；視具體情況予以驗(yàn)證。藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究15表11-2EC,WHO,USP,ICH和ChP(2010)方法驗(yàn)證內(nèi)容對(duì)比驗(yàn)證項(xiàng)目鑒別試驗(yàn)雜質(zhì)含量測(cè)定限度檢查定量測(cè)定EWUICEWUICEWUICEWUIC精密度RRRRRRRRR準(zhǔn)確度TTTRRRRRRRRR專(zhuān)屬性RRRRRRRRRRRRRRRRRRR檢測(cè)限RRRRRRRTT定量限RRRR線(xiàn)性RRRRRRRRR范圍RRTRRRRRRRRR耐用性RRRRRRRRRRRRRRRR=需驗(yàn)證內(nèi)容；T=可視具體檢測(cè)而定的內(nèi)容E=EC:分析方法驗(yàn)證,指南,III,844/87,最終版,1989(歐共體)（1993,EU）W=WHO:分析方法驗(yàn)證-用于原料藥的測(cè)定,1992U=USP:USP<1225>I=ICH:分析方法驗(yàn)證Q2（R1）C=ChP:藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則,ChP（2010）附錄XIXA5.需要驗(yàn)證的檢驗(yàn)項(xiàng)目藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究166.方法驗(yàn)證內(nèi)容方法驗(yàn)證內(nèi)容主要依據(jù)《中國(guó)藥典》(2010年版)附錄XIXA“藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則”藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究176.方法驗(yàn)證內(nèi)容6-1準(zhǔn)確度測(cè)定結(jié)果與真實(shí)值/參考值接近的程度用回收率(%)表示在規(guī)定范圍內(nèi)驗(yàn)證(限度±20%)驗(yàn)證方法80%,100%(限度),120%×3;方法見(jiàn)下表(11-3)數(shù)據(jù)要求9次測(cè)量值的平均回收率%及RSD%或平均值的RE(回收率%-100%)及測(cè)量值的RSD%或可信限藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究18表11-3準(zhǔn)確度驗(yàn)證方法檢驗(yàn)項(xiàng)目原料藥制劑備注主成分含量測(cè)定方法1：用已知純度的對(duì)照品或供試品進(jìn)行測(cè)試方法2：用本法所得結(jié)果與已知準(zhǔn)確度的另一方法測(cè)定結(jié)果比較方法1：用已知含量待測(cè)物的各組分混合物進(jìn)行測(cè)試方法2：如不能得到制劑處方組分，向制劑中加入已知量待測(cè)物進(jìn)行測(cè)定方法3：用本法所得結(jié)果與已知準(zhǔn)確度方法的測(cè)定結(jié)果比較如方法已經(jīng)測(cè)試并求出精密度、線(xiàn)性和專(zhuān)屬性，在準(zhǔn)確度(無(wú)法直接驗(yàn)證但)可推算的情況下，準(zhǔn)確度可不必驗(yàn)證雜質(zhì)定量測(cè)定方法1：可在原料藥或制劑中加入已知量雜質(zhì)進(jìn)行測(cè)試方法2：如不能得到雜質(zhì)或降解產(chǎn)物，可用本法測(cè)定結(jié)果與另一方法（如藥典方法或經(jīng)驗(yàn)證的方法）測(cè)定的結(jié)果比較如不能得到雜質(zhì)或降解產(chǎn)物的響應(yīng)因子或?qū)υ纤幍南鄬?duì)響應(yīng)因子，可用原料藥的響應(yīng)因子明確單個(gè)雜質(zhì)和總量相當(dāng)于主成分的重量比或面積比6.方法驗(yàn)證內(nèi)容藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究196.方法驗(yàn)證內(nèi)容6-2精密度多次測(cè)定同一均勻樣品的結(jié)果之間的接近程度用SD或RSD%表示在規(guī)定范圍內(nèi)驗(yàn)證(限度±20%)驗(yàn)證方法同一實(shí)驗(yàn)室:

重復(fù)性(連續(xù));中間精密度(不連續(xù));不同實(shí)驗(yàn)室:

重現(xiàn)性(方法轉(zhuǎn)移);方法見(jiàn)下表(11-4)數(shù)據(jù)要求9次測(cè)量值的SD或RSD%或平均值的可信限藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究206.方法驗(yàn)證內(nèi)容藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究216.方法驗(yàn)證內(nèi)容藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究226.方法驗(yàn)證內(nèi)容6-3專(zhuān)屬性其它成分(如:有關(guān)物質(zhì),降解產(chǎn)物,制劑輔料)存在時(shí),方法的響應(yīng)信號(hào)不受干擾的特性如,手性異構(gòu)體:手性色譜/非手性色譜+旋光度驗(yàn)證方法方法見(jiàn)下表(11-5)應(yīng)用所有項(xiàng)目:鑒別,檢查,含量測(cè)定均驗(yàn)證專(zhuān)屬性藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究236.方法驗(yàn)證內(nèi)容雜質(zhì)檢查已知并可獲得雜質(zhì)(中間體)——樣品中加入雜質(zhì)未知或不能獲得雜質(zhì)(副產(chǎn)物,降解產(chǎn)物)與標(biāo)準(zhǔn)方法比較雜質(zhì)數(shù)——粗品/結(jié)晶母液擬驗(yàn)證方法峰分離——粗品/結(jié)晶母液;降解樣品藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究24含量測(cè)定已知并可獲得雜質(zhì)雜質(zhì)的分離——樣品加雜質(zhì)后主峰與各雜質(zhì)峰分離?主峰的純度——樣品加雜質(zhì)前后的含量,DAD/MS未知或不能獲得雜質(zhì)與標(biāo)準(zhǔn)方法比較含量——粗品/降解樣品(?滴定/色譜)驗(yàn)證方法峰分離——粗品/降解樣品;峰參數(shù)/DAD,MS6.方法驗(yàn)證內(nèi)容藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究25驗(yàn)證方法目視法——非儀器法:TLC法;顯色等化學(xué)法信噪比法——可直觀顯示噪音強(qiáng)度的儀器法:HPLC法標(biāo)準(zhǔn)偏差法——無(wú)法顯示噪音強(qiáng)度的儀器法:UV法6.方法驗(yàn)證內(nèi)容6-4檢測(cè)限(LOD)定義:

樣品中被分析物可檢出的最低量應(yīng)用:雜質(zhì)檢查項(xiàng),根據(jù)具體情況確定是否驗(yàn)證限度試驗(yàn)——驗(yàn)證定量測(cè)定——根據(jù)定量限(LOQ)與報(bào)告限確定驗(yàn)證方法:方法見(jiàn)下表(11-6)藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究266.方法驗(yàn)證內(nèi)容標(biāo)準(zhǔn)偏差法ICHQ2R1:LOD=3.3s/f(s=響應(yīng)值標(biāo)準(zhǔn)差;f=曲線(xiàn)斜率)響應(yīng)值s的獲取:空白響應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)偏差樣品曲線(xiàn)截距標(biāo)準(zhǔn)偏差/剩余標(biāo)準(zhǔn)偏差數(shù)據(jù)要求:測(cè)試結(jié)果與圖譜藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究276.方法驗(yàn)證內(nèi)容6-5定量限(LOQ)定義:

樣品中被分析物可定量測(cè)定的最低量

——測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確度與精密度符合要求應(yīng)用:雜質(zhì)定量測(cè)定(有關(guān)物質(zhì)檢查方法學(xué)研究)驗(yàn)證方法:信噪比法——S/N≥10標(biāo)準(zhǔn)偏差法——LOQ=10s/f藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究286-6線(xiàn)性與范圍定義:線(xiàn)性:

項(xiàng)目要求的濃度范圍內(nèi),信號(hào)呈正比例程度范圍:

滿(mǎn)足準(zhǔn)確度,精密度和線(xiàn)性要求的濃度區(qū)間應(yīng)用:定量分析項(xiàng)目(雜質(zhì)定量測(cè)定與主成份含量測(cè)定)驗(yàn)證方法:5~6濃度×3？濃度x,信號(hào)強(qiáng)度y,最小二乘法含量(均勻度)測(cè)定——40%~200%(50%~150%)溶出度(釋放度)測(cè)定——下限-20%~上限+20%雜質(zhì)測(cè)定——10%/LOQ~150%(20%/LOQ~120%)6.方法驗(yàn)證內(nèi)容藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究296.方法驗(yàn)證內(nèi)容藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究306.方法驗(yàn)證內(nèi)容6-8耐用性定義:

測(cè)定結(jié)果不受影響,條件允許變動(dòng)范圍

——測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確度與精密度符合要求應(yīng)用:所有項(xiàng)目(與專(zhuān)屬性一樣)結(jié)果體現(xiàn):范圍窄——如HPLC柱溫25±2℃,標(biāo)注為25℃范圍寬——如HPLC柱溫10~30℃,無(wú)需標(biāo)注藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究316.方法驗(yàn)證內(nèi)容藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究326-8-1溶液穩(wěn)定性示例對(duì)照溶液:

室溫,冰箱冷藏/進(jìn)樣室溫度(2~8℃)供試溶液:室溫/進(jìn)樣室溫度(2~8℃)方法:與新制對(duì)照溶液比較——對(duì)照溶液穩(wěn)定性與初始測(cè)定結(jié)果比較——供試溶液穩(wěn)定性6.方法驗(yàn)證內(nèi)容藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究33有機(jī)相±5%(~10%)柱溫±5℃(~10℃)pH±0.5(~1.0)填料同一型號(hào),如:hypersil(無(wú)定形硅膠基質(zhì));SpherisorbODS1(球形硅膠基質(zhì),不封端)6.方法驗(yàn)證內(nèi)容6-8-2HPLC條件示例藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究347.實(shí)例分析下表為某制藥公司分析方法驗(yàn)證的接受標(biāo)準(zhǔn)藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究357.實(shí)例分析表11-11分析方法驗(yàn)證接受標(biāo)準(zhǔn)示例檢驗(yàn)項(xiàng)目驗(yàn)證內(nèi)容接受標(biāo)準(zhǔn)鑒別專(zhuān)屬性HPLC/TLC:色譜峰/斑點(diǎn)分離IR/UV:與標(biāo)準(zhǔn)相同;類(lèi)似物區(qū)分溶出度檢查精密度重復(fù)性RSD≤2.0%(n≥6)中間精密度同上專(zhuān)屬性色譜法:峰分離UV法:空白片≤3.0%線(xiàn)性r≥0.990(n≥6)截距≤5.0%(1)剩余標(biāo)準(zhǔn)差≤2.5%(2)范圍限度-20%~標(biāo)示量120%準(zhǔn)確度(回收率%)95%~105%(RSD≤2.5%)穩(wěn)定性對(duì)照溶液/供試溶液≤2.0%截距的絕對(duì)值相當(dāng)于標(biāo)示量(100%溶出)的回歸值y的百分?jǐn)?shù)剩余標(biāo)準(zhǔn)偏差值相當(dāng)于標(biāo)示量的回歸值y的百分?jǐn)?shù)藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究367.實(shí)例分析表11-11分析方法驗(yàn)證接受標(biāo)準(zhǔn)示例檢驗(yàn)項(xiàng)目驗(yàn)證內(nèi)容接受標(biāo)準(zhǔn)含量測(cè)定(HPLC/UV)精密度重復(fù)性RSD≤2.0%(制劑)/1.0%(原料藥)(n≥6)中間精密度RSD≤2.0%(n≥4)專(zhuān)屬性(必要時(shí)峰純度)色譜法:峰分離UV法:空白片≤3.0%線(xiàn)性r≥0.998(n≥6)截距≤2.0%剩余標(biāo)準(zhǔn)差≤2.0%

(相當(dāng)于r2≥0.999)范圍標(biāo)示量80%~120%準(zhǔn)確度(制劑回收率%)98%~102%(RSD≤2.0%;n=3×3)穩(wěn)定性對(duì)照溶液/供試溶液≤2.0%耐用性方法通過(guò)系統(tǒng)適用性試驗(yàn)藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究377.實(shí)例分析表11-11分析方法驗(yàn)證接受標(biāo)準(zhǔn)示例檢驗(yàn)項(xiàng)目驗(yàn)證內(nèi)容接受標(biāo)準(zhǔn)含量均勻度(HPLC/UV)精密度重復(fù)性RSD≤2.0%(n≥6)中間精密度RSD≤3.0%(n≥4)專(zhuān)屬性(必要時(shí)峰純度)色譜法:峰分離UV法:空白片≤3.0%線(xiàn)性r≥0.990(n≥6)截距≤5.0%剩余標(biāo)準(zhǔn)差≤2.0%

(相當(dāng)于r2≥0.999)范圍標(biāo)示量70%~130%準(zhǔn)確度(制劑回收率%)98%~102%(RSD≤2.0%;n=3×3)穩(wěn)定性對(duì)照溶液/供試溶液≤2.0%耐用性方法通過(guò)系統(tǒng)適用性試驗(yàn)藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究387.實(shí)例分析表11-11分析方法驗(yàn)證接受標(biāo)準(zhǔn)示例檢驗(yàn)項(xiàng)目驗(yàn)證內(nèi)容接受標(biāo)準(zhǔn)雜質(zhì)定量(HPLC)精密度重復(fù)性(n≥6)L＜0.1%;RSD≤30%0.1≤L＜0.2%;RSD≤20%0.2≤L＜0.5%;RSD≤10%0.5≤L＜5.0%;RSD≤5.0%L≥5.0%;RSD≤2.5%中間精密度L＜0.1%;RSD≤40%0.1≤L＜0.2%;RSD≤30%0.2≤L＜0.5%;RSD≤15%0.5≤L＜5.0%;RSD≤7.5%L≥5.0%;RSD≤4.0%專(zhuān)屬性(必要時(shí)峰純度)色譜峰基線(xiàn)分離藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究39表11-11分析方法驗(yàn)證接受標(biāo)準(zhǔn)示例檢驗(yàn)項(xiàng)目驗(yàn)證內(nèi)容接受標(biāo)準(zhǔn)雜質(zhì)定量(HPLC)線(xiàn)性r≥0.990(制劑);r=0.998(原料藥)截距≤25%(3)剩余標(biāo)準(zhǔn)差≤10%(L＜0.5%)≤5.0%(0.5%≤L＜5.0%)≤2.5%(L≥5.0%)范圍雜質(zhì)報(bào)告限/LOQ~質(zhì)控限度+20%檢測(cè)限(LOD)RSD≤20%(S/N≥3,n≥5)定量限(LOQ)RSD≤10%(S/N≥10,n≥5)截距的絕對(duì)值相當(dāng)于雜質(zhì)限量(100%限度)的回歸值y的百分?jǐn)?shù)7.實(shí)例分析藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究40表11-11分析方法驗(yàn)證接受標(biāo)準(zhǔn)示例檢驗(yàn)項(xiàng)目驗(yàn)證內(nèi)容接受標(biāo)準(zhǔn)雜質(zhì)定量(HPLC)準(zhǔn)確度(n≥3×3)平均回收率L＜0.5%;80%~120%0.5≤L＜5.0%;90%~110%L≥5.0%;95%~105%RSD%L＜0.5%;RSD≤10%0.5≤L＜5.0%;RSD≤5.0%L≥5.0%;RSD≤2.5%穩(wěn)定性供試溶液L＜0.5%;RSD≤20%0.5≤L＜5.0%;RSD≤10%L≥5.0%;RSD≤5.0%沒(méi)有新的色譜峰出現(xiàn)對(duì)照溶液RE≤±5.0%;RSD≤5.0%7.實(shí)例分析藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究417.實(shí)例分析FDA質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)室檢查指南“15.方法驗(yàn)證”中指出,許多含量測(cè)定和雜質(zhì)檢查的方法采用HPLC法,對(duì)于這些方法的精密度的要求希望小于或等于系統(tǒng)適用性試驗(yàn)的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差USP<621>色譜法中系統(tǒng)適用性試驗(yàn)RSD要求:——含量測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)溶液或其他標(biāo)準(zhǔn)溶液連續(xù)進(jìn)樣5次,除另有規(guī)定外,其峰面積測(cè)量值的相對(duì)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不大于2.0%;若大于2.0%,可連續(xù)進(jìn)洋6次,其峰面積測(cè)量值的相對(duì)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不大于2.0%藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究428.方法確認(rèn)與再驗(yàn)證(p12)藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究438.方法確認(rèn)與再驗(yàn)證藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究449.文件管理藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究45【實(shí)例分析】

以下為某制藥公司分析方法驗(yàn)證/確認(rèn)的文件管理流程，僅供參考。藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究469.文件管理藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究479.文件管理藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究489.文件管理藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究499.文件管理FDA關(guān)于分析方法驗(yàn)證內(nèi)容設(shè)置不合理的警告信依據(jù)統(tǒng)計(jì),FDA發(fā)給中國(guó)企業(yè)的警告信涉及分析方法驗(yàn)證和清潔驗(yàn)證;其中,最多的是分析方法驗(yàn)證,尤以驗(yàn)證內(nèi)容設(shè)置不合理或缺少最為常見(jiàn)如:2000年FDA發(fā)給中國(guó)一企業(yè)的警告信: …… (2)用于穩(wěn)定性檢測(cè)的分析方法不指示穩(wěn)定性;另外,沒(méi)有確立XX的雜質(zhì)譜 調(diào)查顯示你們公司用于檢測(cè)XX的USP滴定法不是一個(gè)穩(wěn)定性指示的方法;另外,你們公司沒(méi)有確立這個(gè)API的雜質(zhì)譜雜質(zhì)譜——鑒定或定性分析界定(tR)及可檢測(cè)到雜質(zhì)的范圍和每個(gè)鑒定雜質(zhì)的分類(lèi)(無(wú)機(jī),有機(jī),溶劑等)藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究5010.要點(diǎn)【要點(diǎn)備忘】在進(jìn)行方法驗(yàn)證或確認(rèn)前,應(yīng)已建立分析方法分析方法應(yīng)經(jīng)驗(yàn)證或確認(rèn)分析方法驗(yàn)證或確認(rèn)的方案與報(bào)告應(yīng)長(zhǎng)期保存分析方法在實(shí)際使用過(guò)程中,應(yīng)與驗(yàn)證或確認(rèn)報(bào)告的內(nèi)容一致藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究51二、原料藥質(zhì)量控制前言質(zhì)量管理人員廠(chǎng)房與設(shè)施設(shè)備文件與記錄物料管理生產(chǎn)和過(guò)程控制原料藥和中間體的包裝和貼簽儲(chǔ)存和分發(fā)實(shí)驗(yàn)室控制驗(yàn)證變更控制拒收和物料的再利用投訴與召回委托生產(chǎn)和委托檢驗(yàn)代理/中間/貿(mào)易/分銷(xiāo)/分裝/再貼簽商采用發(fā)酵工藝生產(chǎn)原料藥的特殊要求用于臨床研究的原料藥無(wú)菌原料藥藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究52原料生產(chǎn)中GMP適用范圍藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究53原料藥合成的起始物料藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究54起始物料藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究55起始物料藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究56起始物料藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究57起始物料藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究58起始物料藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究59起始物料藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究60實(shí)驗(yàn)室控制藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究61實(shí)驗(yàn)室控制藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究621.質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)【背景介紹】質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)是質(zhì)量評(píng)價(jià)的基礎(chǔ),質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)以工藝開(kāi)發(fā)為基礎(chǔ)制定;企業(yè)可以制定高于注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)的內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn),最低限度與注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)一致原料藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)包括:常規(guī)的檢測(cè)項(xiàng)目:性狀,鑒別,檢查,含量測(cè)定專(zhuān)屬性檢測(cè)項(xiàng)目:物理常數(shù),粒度,多晶型,手性原料藥試驗(yàn),水分,無(wú)機(jī)雜質(zhì),微生物限度雜質(zhì)通常分為有機(jī)雜質(zhì),無(wú)機(jī)雜質(zhì)和殘留溶劑藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究631.質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)【實(shí)施指導(dǎo)】D.有機(jī)雜質(zhì)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn):原料藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中關(guān)于有機(jī)雜質(zhì)的內(nèi)容包括但不限于:特定的已鑒定雜質(zhì)的鑒別與限量;未鑒定雜質(zhì)的限量;任何不大于(小于或等于)鑒定閾值認(rèn)可標(biāo)準(zhǔn)的非特定雜質(zhì)的限量;雜質(zhì)總和限量藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究641.質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)【實(shí)施指導(dǎo)】E.殘留溶劑的限度:按照ICHQ3C中的定義,溶劑分為3類(lèi):第一類(lèi):可導(dǎo)致不被接受的毒性,避免使用;第二類(lèi):有一定毒性,限制使用;第三類(lèi):低毒溶劑;關(guān)于苯在原料藥中的殘留量工藝不產(chǎn)生苯——工藝使用溶劑的標(biāo)準(zhǔn)中限制苯工藝可能產(chǎn)生苯——原料藥標(biāo)準(zhǔn)增加限量控制藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究651.質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)——【實(shí)例分析】藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究661.質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)——【要點(diǎn)備忘】藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究672.分析方法驗(yàn)證藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究682.分析方法驗(yàn)證——【實(shí)施指導(dǎo)】藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究692.分析方法驗(yàn)證——【實(shí)施指導(dǎo)】藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究702.分析方法驗(yàn)證——【實(shí)施指導(dǎo)】藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究712.分析方法驗(yàn)證——【實(shí)施指導(dǎo)】藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究722.分析方法驗(yàn)證——【實(shí)施指導(dǎo)】藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究732.分析方法驗(yàn)證——【實(shí)施指導(dǎo)】藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究742.分析方法驗(yàn)證——【實(shí)例分析】藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究752.分析方法驗(yàn)證——【要點(diǎn)備忘】藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究第二部分

藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定

研究工作——有關(guān)物質(zhì)檢查

殘留溶劑檢查

含量測(cè)定藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究77

藥品標(biāo)準(zhǔn)的建立

基礎(chǔ)——藥物的系統(tǒng)藥學(xué)研究 目的——保證藥品生產(chǎn)過(guò)程質(zhì)量可控 藥品臨床使用安全有效藥品標(biāo)準(zhǔn)獲得批準(zhǔn),即具有法律效力藥品標(biāo)準(zhǔn)制定的原則:

科學(xué)性;先進(jìn)性;規(guī)范性;權(quán)威性一、藥品標(biāo)準(zhǔn)藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究78科學(xué)性：充分考慮生產(chǎn),流通等環(huán)節(jié)影響藥品質(zhì)量的因素設(shè)置科學(xué)的檢測(cè)項(xiàng)目

建立可靠的檢測(cè)方法

規(guī)定合理的判斷標(biāo)準(zhǔn)/限度先進(jìn)性：充分反映現(xiàn)階段國(guó)內(nèi)外藥品質(zhì)量控制最新水平

1.藥品標(biāo)準(zhǔn)制定原則藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究79規(guī)范性：研究過(guò)程規(guī)范:照SFDA規(guī)范/指導(dǎo)原則要求進(jìn)行文本規(guī)范:體例格式,術(shù)語(yǔ),檢測(cè)方法等規(guī)范化權(quán)威性：國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)具有法律效力1.藥品標(biāo)準(zhǔn)制定原則藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究802.原料藥和制劑質(zhì)量研究的特點(diǎn)制劑的質(zhì)量研究:

根據(jù)原料藥的研究結(jié)果結(jié)合制劑處方工藝進(jìn)行 更注重藥品的安全性,有效性,均一性和穩(wěn)定性原料藥的質(zhì)量研究:

在確證化學(xué)結(jié)構(gòu)/組分的基礎(chǔ)上進(jìn)行 注重理化特性,穩(wěn)定性,雜質(zhì)與純度控制藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究81ChP2010與藥品質(zhì)量研究相關(guān)的指導(dǎo)原則藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證原料藥與藥物制劑穩(wěn)定性試驗(yàn)藥品雜質(zhì)分析藥物引濕性3.相關(guān)指導(dǎo)原則藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究82原料藥的結(jié)構(gòu)確證——波譜分析藥物的命名——INN藥物的性狀——溶解度;引濕性;物理常數(shù)藥物的鑒別——化學(xué);UV;IR;TLC;HPLC藥物的檢查——有關(guān)物質(zhì)(HPLC)

殘留溶劑(GC)藥物的含量/效價(jià)測(cè)定——滴定;HPLC二、藥品質(zhì)量研究藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究83(一)原料藥的結(jié)構(gòu)確證樣品要求采用精制品純度應(yīng)大于99.0%,雜質(zhì)總量應(yīng)小于0.5%結(jié)構(gòu)確證方案一般項(xiàng)目:有機(jī)光譜分析法,結(jié)構(gòu)特征手性藥物:立體選擇性方法,確證絕對(duì)構(gòu)型晶型測(cè)定:粉末X-衍射,IR,熔點(diǎn),熱分析,偏光顯微鏡法等,反映晶型特征結(jié)晶溶劑:熱分析,水分(干燥失重),或單晶X-衍射藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究84

特定雜質(zhì)的研究特定雜質(zhì)的研究規(guī)范特定雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)確定有機(jī)雜質(zhì)的檢查雜質(zhì)的檢查方法雜質(zhì)檢查方法的建立雜質(zhì)的歸屬雜質(zhì)的定量方法與限度確定(二)有機(jī)雜質(zhì)的檢查藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究85

特定雜質(zhì)的研究規(guī)范特定雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)確認(rèn)1.特定雜質(zhì)的研究藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究86(1)特定雜質(zhì)的研究規(guī)范

獲得有關(guān)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)信息,分析其形成過(guò)程 合成時(shí)可設(shè)法避免該雜質(zhì)的形成 或經(jīng)純化使之降至可接受的水平 貯藏條件的控制特定雜質(zhì)研究的意義藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究87

表觀含量在0.1%及以上(等于或高于鑒定限度)的雜質(zhì)表觀含量在0.1%以下,具強(qiáng)烈生物作用或毒性的雜質(zhì)需定性/確證結(jié)構(gòu)的特定雜質(zhì)(1)特定雜質(zhì)的研究規(guī)范藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究88(2)特定雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)確證①合成雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)確認(rèn)

當(dāng)樣品中的雜質(zhì)量小且制備困難時(shí),可根據(jù)雜質(zhì)的初步信息和藥物的結(jié)構(gòu)特性與工藝路線(xiàn)合成可能的雜質(zhì) 通過(guò)比較合成品與樣品中雜質(zhì)的色譜性質(zhì)(HPLC),紫外光譜特征(LC-DAD)和質(zhì)譜信息(LC-MS),

判斷合成品與雜質(zhì)是否是同一化合物

——確定合成品與藥物中雜質(zhì)結(jié)構(gòu)的一致性藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究89

鹽酸非索非那定中雜質(zhì)結(jié)構(gòu)確證色譜條件: 色譜柱:ODSC18柱(4.6mm×250mm,5μm)

流動(dòng)相:0.01mol/L乙酸銨液-乙腈(40:60,pH6.0)質(zhì)譜條件: 4.25kV電噴霧正離子化 掃描范圍(m/z)100~1000

鞘氣N2,流速7.5L/min;毛細(xì)管溫度150℃藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究90非索非那定和雜質(zhì)2的二級(jí)質(zhì)譜比較藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究91定向合成雜質(zhì)2

合成雜質(zhì)2的[M+H]+的碎片峰分析藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究92

當(dāng)藥物中特定雜質(zhì)的量較大時(shí),可通過(guò)化學(xué)分離得到特定雜質(zhì),然后再通過(guò)元素分析,UV,IR,NMR和MS來(lái)確定該特定雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)②分離雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)確證藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究93

雜質(zhì)1的歸一化分?jǐn)?shù)1.1%

在穩(wěn)定性試驗(yàn)中:

隨溫度升高,雜質(zhì)1相對(duì)含量由2%上升到9%

需要進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定炎琥寧中有關(guān)物質(zhì)HPLC-UV色譜圖A-溶劑;B-炎琥寧供試品溶液

炎琥寧中主要有關(guān)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)確證炎琥寧中有關(guān)物質(zhì)的檢查藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究94炎琥寧供試品中雜質(zhì)1的制備收集含有雜質(zhì)1的流份乙酸乙酯萃取乙酸乙酯萃取液40℃揮干溶劑雜質(zhì)1炎琥寧供試品制備HPLC分離

炎琥寧中主要有關(guān)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)確證藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究95雜質(zhì)1的結(jié)構(gòu)確證雜質(zhì)1的離子碎片圖譜炎琥寧:脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯

精確分子量為m/z532.23100雜質(zhì)1:精確分子量為m/z564.22216(31.99116/2=15.99558)

比炎琥寧多兩個(gè)氧原子,提示雜質(zhì)1可能是其氧化產(chǎn)物[M+Na]587.2

炎琥寧中主要有關(guān)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)確證LC-ESI/TOF-MS藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究96雜質(zhì)1紫外吸收光譜最大吸收波長(zhǎng)為264nm

相比炎琥寧最大吸收波長(zhǎng)(251nm),明顯紅移 系雜質(zhì)1的15C形成羧基,共軛體系增長(zhǎng)所致炎琥寧中雜質(zhì)1的結(jié)構(gòu)確證紫外分光光度法藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究97雜質(zhì)1的主要的吸收峰(cm-1):3444(νOH) 2927(νC-H) 2854(νC-H)1719(νC=O)

1614(νC=C)

1407(νC-O)1165(νC-O-C)

與炎琥寧相比,雜質(zhì)1結(jié)構(gòu)上的變化主要是內(nèi)酯環(huán)開(kāi)環(huán)并形成兩個(gè)羧基炎琥寧中雜質(zhì)1的結(jié)構(gòu)確證紅外分光光度法藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究9813C-NMR譜: 6個(gè)羰基碳信號(hào)(C15,C16,C1’,C4’,C1’’,C4’’)

與炎琥寧比多1個(gè):C15被氧化形成的羧基信號(hào) 由原來(lái)的δ70.4移至δ166.41H-NMR譜:

活潑氫信號(hào)為4個(gè) 與炎琥寧比多出2個(gè),內(nèi)酯環(huán)開(kāi)環(huán)生成2個(gè)羧基氫炎琥寧中雜質(zhì)1的結(jié)構(gòu)確證核磁共振分析法藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究99雜質(zhì)1與炎琥寧母核一致的特征官能團(tuán):

6個(gè)烯碳(C8,C11,C12,C13,C14,C17) 2個(gè)CH3(C18,C20) 3組單質(zhì)子烯氫信號(hào)(δ6.25,5.98,5.79)

說(shuō)明雜質(zhì)1的母核結(jié)構(gòu)與炎琥寧一致,僅內(nèi)酯環(huán)部分發(fā)生了改變

炎琥寧中主要有關(guān)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)確證藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究100

炎琥寧中主要有關(guān)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)確證藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究101雜質(zhì)1的MS2裂解圖藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究1022.有機(jī)雜質(zhì)的檢查雜質(zhì)的檢查方法雜質(zhì)檢查方法的建立與驗(yàn)證雜質(zhì)的歸屬雜質(zhì)的定量方法與限度確定藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究103(1)雜質(zhì)的檢查方法

各種分析方法均具有一定的局限性,應(yīng)注意不同原理的分析方法間的相互驗(yàn)證,如:

反相HPLC系統(tǒng)與正相HPLC系統(tǒng)

HPLC與TLCHPLC不同檢測(cè)波長(zhǎng)/檢測(cè)器檢測(cè)結(jié)果的相互驗(yàn)證

HPLC首選等度洗脫方式,亦可采用梯度洗脫方式單一方法不能滿(mǎn)足多個(gè)雜質(zhì)的檢測(cè)時(shí),可采用兩種或兩種以上的方法互為補(bǔ)充(不同條件HPLC;HPLC+TLC)藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究104(2)雜質(zhì)檢查方法的建立與驗(yàn)證用于雜質(zhì)檢查的分析方法要求專(zhuān)屬,靈敏,耐用

專(zhuān)屬性:

主成分加合成原料,

中間體,已知特定雜質(zhì) 合成粗品,重結(jié)晶母液 強(qiáng)制破壞樣品(熱,強(qiáng)酸,強(qiáng)堿,氧化,強(qiáng)光)

主成分70%~80%(避免降解產(chǎn)物的進(jìn)一步分解)色譜柱/柱溫,流動(dòng)相組成/流速:

主成分峰與相鄰雜質(zhì)峰

雜質(zhì)峰相互間的分離度

藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究105(2)雜質(zhì)檢查方法的建立與驗(yàn)證

精密度——重復(fù)性/中間精密度雜質(zhì)對(duì)照——連續(xù)進(jìn)樣6次,峰面積

RSD ≤5.0%/7.5%(L＜0.5%) ≤2.0%/5.0%(0.5%≤L＜5.0%) ≤2.0%(L≥5.0%)

樣品——連續(xù)測(cè)定6次,雜質(zhì)含量

RSD ≤10%/15%(L＜0.5%) ≤5.0%/7.5%(0.5%≤L＜5.0%) ≤2.0%/5.0%(L≥5.0%)藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究106(2)雜質(zhì)檢查方法的建立與驗(yàn)證

準(zhǔn)確度樣品中加入限度量雜質(zhì)(80%,100%,120%×3)

測(cè)定9樣品回收率%:L＜0.5%: 80%~120%(RSD≤10%)0.5%≤L＜5%: 90%~110%(RSD≤5.0%)L≥5.0%: 95%~105%(RSD≤2.0%)藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究107(2)雜質(zhì)檢查方法的建立與驗(yàn)證

定量限(S/N≥10)與檢測(cè)限(S/N≥3)LOQ≤報(bào)告限; RSD≤10%(n=5~6)LOD

若LOQ遠(yuǎn)離報(bào)告限(如1/10),無(wú)需驗(yàn)證LOD

若LOQ~報(bào)告限,LOD≤1/5報(bào)告限度(無(wú)需計(jì)算RSD)藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究108(2)雜質(zhì)檢查方法的建立與驗(yàn)證

線(xiàn)性相關(guān)系數(shù): r2≥0.996(r≥0.998)

截距: a/y(100%限度)≤20%

剩余標(biāo)準(zhǔn)偏差: s≤10%(限度＜0.5%) s≤5.0%(0.5%≤限度＜5%) s≤2.0%(限度≥5%)

范圍

20%(報(bào)告限:50%)~200%質(zhì)控限度藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究109(2)雜質(zhì)檢查方法的建立與驗(yàn)證

耐用性(不得出現(xiàn)新的雜質(zhì)峰,現(xiàn)有峰面積/含量差異)

溶液穩(wěn)定性(2,4,8,12,24h;7,15,30d)峰面積變化對(duì)照溶液: RE/RSD≤5.0%

樣品溶液: RSD≤20%(L＜0.5%) RSD≤10%(0.5%≤L＜5%) RSD≤5.0%(L≥5.0%)

樣品:色譜柱(3~5)/柱溫(±5℃);

流動(dòng)相組成(±5%)/pH(±0.5)/流速(±0.2)

含量變化要求同樣品溶液穩(wěn)定性藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究110(3)雜質(zhì)的歸屬

雜質(zhì)來(lái)源歸屬

合成工藝引入雜質(zhì)的歸屬?gòu)?qiáng)制破壞試驗(yàn)/穩(wěn)定性試驗(yàn)新增雜質(zhì)的歸屬多種分析方法(HPLC/TLC/CE),檢測(cè)手段(不同檢測(cè)器/多波長(zhǎng)),特別是HPLC-MS聯(lián)用技術(shù)

HPLC-MS聯(lián)用技術(shù):

雜質(zhì)的分子離子峰與主藥碎片離子峰的比較雜質(zhì)裂解規(guī)律與主藥碎片離子二級(jí)MS比較藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究111

定量分析方法

已知的毒性/強(qiáng)生物活性雜質(zhì)——雜質(zhì)對(duì)照品法使用系統(tǒng)適用性溶液/混合雜質(zhì)對(duì)照品溶液 或?qū)φ請(qǐng)D譜/相對(duì)保留時(shí)間——標(biāo)明雜質(zhì)位置

——雜質(zhì)對(duì)照法(已知雜質(zhì))與不加校正因子的主成分自身對(duì)照法(未知雜質(zhì)) ——加(已知雜質(zhì))/不加(未知雜質(zhì))校正因子的主成分自身對(duì)照法(4)雜質(zhì)的定量方法與限度確定藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究112

限度確定原則:合理性創(chuàng)新藥:

根據(jù)每日劑量制訂質(zhì)控限度包括:每一個(gè)已知雜質(zhì),未知雜質(zhì)及總雜質(zhì)仿制藥:

與已上市的原研產(chǎn)品進(jìn)行質(zhì)量對(duì)比研究若雜質(zhì)譜相同:不低于原標(biāo)準(zhǔn)若雜質(zhì)譜不同:照創(chuàng)新藥要求(4)雜質(zhì)的定量方法與限度確定藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究113

創(chuàng)新藥 已知雜質(zhì)限度確定——用藥安全有效,質(zhì)量可控雜質(zhì)特性:毒性,生物活性藥品自身的穩(wěn)定性生產(chǎn)的可行性及批間的正常波動(dòng) 未知雜質(zhì)限度確定——見(jiàn)下表(4)雜質(zhì)的定量方法與限度確定藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究114原料藥與制劑的雜質(zhì)限度(日劑量25mg為例)藥物最大日劑量報(bào)告限度a鑒定限度b質(zhì)控限度c原料藥(25mg)≤2g＞2g0.05%0.03%0.10%或1.0mg0.05%0.15%或1.0mg0.05%制劑(25mg)≤1g＞1g＜1mg1~10mg＞10mg-2g＞2g＜10mg10mg-100mg＞100mg-2g＞2g0.1%0.05%1.0%或5μg0.5%或20μg0.2%或2mg0.10%1.0%或50μg0.5%或200μg0.2%或3mg0.15%報(bào)告限度(reportingthreshold):超出限度的雜質(zhì)應(yīng)在檢測(cè)報(bào)告中報(bào)告,并提供檢測(cè)數(shù)據(jù)(≥LLOQ)鑒定限度(identificationthreshold):超出限度的雜質(zhì)應(yīng)進(jìn)行定性分析,并確定化學(xué)結(jié)構(gòu)質(zhì)控限度(qualificationthreshold):質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中允許的雜質(zhì)限度(制定標(biāo)準(zhǔn))如制訂的限度高于此限度,應(yīng)有充分的依據(jù)藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究115

溶劑的分類(lèi)與殘留溶劑的確定有機(jī)溶劑的分類(lèi)殘留溶劑的確定需要關(guān)注的問(wèn)題溶劑殘留量檢查方法的建立與驗(yàn)證檢查方法的建立(色譜柱;進(jìn)樣方式)檢查方法的驗(yàn)證(驗(yàn)證內(nèi)容與要求)(三)殘留溶劑檢查藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究116

第一類(lèi):應(yīng)該避免使用第二類(lèi):應(yīng)該限制使用第三類(lèi):GMP或其他質(zhì)控要求限制使用第四類(lèi):尚無(wú)足夠毒理學(xué)資料(1)有機(jī)溶劑的分類(lèi)1.溶劑的分類(lèi)與殘留溶劑的確定藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究117(1)有機(jī)溶劑的分類(lèi)第一類(lèi)溶劑

——人體致癌物,疑為人體致癌物或環(huán)境危害物的有機(jī)溶劑

——具有不可接受的毒性或?qū)Νh(huán)境造成公害,在原料藥、輔料以及制劑生產(chǎn)中應(yīng)該避免使用如不可替代

——無(wú)論在工藝哪一步使用,均需將殘留量檢查訂入標(biāo)準(zhǔn),限度符合規(guī)定藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究118(1)有機(jī)溶劑的分類(lèi)第一類(lèi)溶劑

限度 苯 0.0002%(2ppm) 1,1-二氯乙烯 0.0008%(8ppm) 1,2-二氯乙烷 0.0005%(5ppm) 1,1,1-三氯乙烷 0.15%四氯化碳 0.0004%(4ppm)藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究119(1)有機(jī)溶劑的分類(lèi)

第二類(lèi)溶劑

——有非遺傳毒性致癌(動(dòng)物實(shí)驗(yàn)),或可能導(dǎo)致其他不可逆毒性(如神經(jīng)毒性或致畸),或可能具有其他嚴(yán)重但可逆毒性的有機(jī)溶劑

——具有一定的毒性,但和第一類(lèi)相比毒性較小,限制使用,防止對(duì)病人潛在不良影響藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究120(1)有機(jī)溶劑的分類(lèi)第二類(lèi)溶劑 乙腈,氯苯,三氯甲烷,環(huán)己烷,二氯甲烷,二氧六環(huán),乙二醇,甲酰胺,正己烷,甲醇,吡啶,四氫呋喃,甲苯等26種限度:

0.005%(硝基甲烷)0.3%(甲醇)藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究121(1)有機(jī)溶劑的分類(lèi)如工藝中使用第二類(lèi)溶劑,需進(jìn)行殘留量的研究,并根據(jù)研究結(jié)果,訂入臨床用質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)中試和規(guī)模產(chǎn)品的殘留情況訂入注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)若檢測(cè)結(jié)果提示已無(wú)殘留,可不訂入標(biāo)準(zhǔn)若檢測(cè)結(jié)果提示仍有殘留,需訂入標(biāo)準(zhǔn)藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究122(1)有機(jī)溶劑的分類(lèi)第三類(lèi)溶劑

——GMP或其他質(zhì)量要求限制使用

——屬于低毒性溶劑,對(duì)人體或環(huán)境的危害較小,人體可接受的限度為0.5% ——可僅對(duì)終產(chǎn)品精制工藝使用的第三類(lèi)溶劑進(jìn)行研究藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究123(1)有機(jī)溶劑的分類(lèi)第三類(lèi)溶劑

乙酸丁酯,丙酮,正丁醇,乙醇,乙醚,甲酸,異丙醇等28種限度:

0.5%藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究124(1)有機(jī)溶劑的分類(lèi)第四類(lèi)溶劑

——在藥物的生產(chǎn)過(guò)程中可能會(huì)使用到,但目前尚無(wú)足夠的毒理學(xué)資料的溶劑

——可根據(jù)生產(chǎn)工藝和溶劑的特點(diǎn),必要時(shí)進(jìn)行殘留量的研究

——石油醚,異辛烷,異丙醚,三氯醋酸,三氟醋酸等10種藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究125藥物制備過(guò)程中使用的所有有機(jī)溶劑,均應(yīng)進(jìn)行殘留量的研究殘留溶劑與制備工藝合成路線(xiàn)中使用有機(jī)溶劑的步驟后續(xù)步驟中使用的溶劑對(duì)之前溶劑的影響中間體的純化方法,干燥條件粗品精制方法和條件等(2)殘留溶劑的確定藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究126①多種有機(jī)溶劑的綜合影響目前對(duì)有機(jī)溶劑殘留量的控制控制單一溶劑的殘留量不超過(guò)各自規(guī)定的限度尚未控制總量——多種有機(jī)溶劑的綜合影響②中間體的有機(jī)溶劑殘留量控制中間體的第一、二類(lèi)溶劑殘留量尤其適用于合成路線(xiàn)較長(zhǎng)的產(chǎn)品(3)需要關(guān)注的問(wèn)題藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究127常用的檢測(cè)方法

GC;HPLC;LC-MS;GC-MS干燥失重法——低沸點(diǎn),第三類(lèi)或四類(lèi)溶劑2.殘留溶劑檢查方法的建立與驗(yàn)證藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究1282.殘留溶劑檢查方法的建立與驗(yàn)證GC檢查方法的建立與驗(yàn)證測(cè)定方法的選擇進(jìn)樣方式溶液制備方法色譜柱的選擇頂空條件的選擇系統(tǒng)適用性試驗(yàn)方法驗(yàn)證的內(nèi)容與要求藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究129

第一法:毛細(xì)管柱頂空進(jìn)樣等溫法適用于所需要檢查的有機(jī)溶劑數(shù)量不多,并且極性差異較小的情況第二法:毛細(xì)管柱頂空進(jìn)樣程序升溫法適用于所需要檢查的有機(jī)溶劑數(shù)量較多,并且極性差異較大的情況第三法:溶液直接進(jìn)樣法采用填充柱,亦可采用適宜極性的毛細(xì)管柱(1)測(cè)定方法的選擇藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究130

低沸點(diǎn)溶劑盡量同時(shí)檢測(cè)——首選頂空法高沸點(diǎn)溶劑單獨(dú)檢測(cè), 低于DMF——頂空 高于DMF——甲醇直接進(jìn)樣藥物高溫分解干擾檢測(cè)——頂空二氯甲烷,三氯甲烷——DMF頂空-ECD檢測(cè)若只有二氯甲烷——與其他溶劑同時(shí)FID檢測(cè)①進(jìn)樣方式選擇藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究131采用溶液直接進(jìn)樣法用水或合適的溶劑使固體原料藥溶解采用頂空進(jìn)樣法通常以水作溶劑不溶于水不揮發(fā)酸或堿液(不用鹽酸溶液或氨水)N,N-二甲基甲酰胺或二甲基亞砜為溶劑②溶液制備方法藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究132色譜柱類(lèi)型固定液/固定相毛細(xì)管柱非極性100％的二甲基聚硅氧烷極性聚乙二醇（PEG-20M）中極性(35%)二苯基-(65%)甲基聚氧硅烷(50%)二苯基-(50%)二甲基聚氧硅烷(35%)二苯基-(65%)二甲基亞芳基聚氧硅烷(14%)氰丙基苯基-(86%)二甲基聚氧硅烷(6%)氰丙基苯基-(94%)二甲基聚氧硅烷弱極性(5%)苯基-(95%)甲基聚氧硅烷(5%)二苯基-(95%)二甲基亞芳基硅氧烷共聚物填充柱乙二烯苯-乙基乙烯苯型高分子多孔小球或其他填料③色譜柱的選擇藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究133時(shí)間:

通常平衡30~45min溫度:

通常80~90℃

沸點(diǎn)較高的殘留溶劑

——通常選擇較高的頂空平衡溫度

——應(yīng)兼顧試品的熱分解特性④頂空條件的選擇藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究134

用待測(cè)物的色譜峰計(jì)算

毛細(xì)管色譜柱N≥5000;填充柱的N≥1000

待測(cè)色譜峰與其相鄰色譜峰的分離度R≥1.5

對(duì)照品溶液連續(xù)進(jìn)樣5次

內(nèi)標(biāo)法:

待測(cè)物與內(nèi)標(biāo)物峰面積比的RSD≤5%

外標(biāo)法:

待測(cè)物峰面積的RSD≤10%(2)系統(tǒng)適用性試驗(yàn)要求①柱效②分離度③重復(fù)性藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究135同“雜質(zhì)檢查”的分析方法驗(yàn)證要求

專(zhuān)屬性:

藥物;溶媒(DMF);待檢溶劑 混合物擬定色譜條件下:

待檢溶劑峰與溶媒及藥物峰

待檢溶劑峰相互間的分離度

(3)方法驗(yàn)證的內(nèi)容與要求藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究136

精密度——重復(fù)性雜質(zhì)對(duì)照:連續(xù)進(jìn)樣5~6次,RSD≤5.0%~10%

樣品: 測(cè)定6次,含量RSD≤10%~20%

精密度——中間精密度樣品: 測(cè)定6次(天),含量RSD≤10%~20%(3)方法驗(yàn)證的內(nèi)容與要求藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究137

準(zhǔn)確度樣品中加入限度量溶劑(80%,100%,120%×3) 9樣品回收率%: 90%~110%(80%~120%)超出范圍,改用標(biāo)準(zhǔn)加入法(消除基質(zhì)效應(yīng))

定量限(S/N≥10)與檢測(cè)限(S/N≥3)LOQ≤50%限度(RSD≤20%,n=5~6)LOD≤10%限度(若LOQ≤10%限度,可不測(cè))(3)方法驗(yàn)證的內(nèi)容與要求藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究138

線(xiàn)性相關(guān)系數(shù): r2≥0.996(r≥0.998)

截距: a/y(100%限度)≤25%

剩余標(biāo)準(zhǔn)偏差: s≤10%

范圍

50%(20%)~150%(200%)質(zhì)控限度(3)方法驗(yàn)證的內(nèi)容與要求藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究139

耐用性(不得出現(xiàn)新的雜質(zhì)峰,現(xiàn)有峰面積/含量差異)

溶液穩(wěn)定性(0,1,2,4,8,12/24h)峰面積變化