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DB34DB34/T3407—2019豬流行性腹瀉病毒IgA抗體間接ELISA檢測IndirectELISAtodetectantidodyagainstporcineepidemicdiarrheavirus2019-11-04發(fā)布2019-12-04實施安徽省市場監(jiān)督管理局發(fā)布I1PEDV：豬流行性腹瀉病毒（PorcineEpidemicELISA：酶聯(lián)免疫吸附試驗（Enzyme-LinkedImmu將第30代PEDV-HX株（TCID50=107.35/0.1mL）接種VERO單層細胞，接毒后72小時收集病毒振蕩10min，6000r/min4℃高速min。棄去上清液，沉淀用0.01mol/LpH為7.4的P積的1/20即為PEDV純化濃縮抗原（測得24.6磷酸鹽緩沖液15min高壓滅菌后，室溫存放備用。使用前，％～％）用1.5毫升的高壓滅菌消毒離心管采集母豬產(chǎn)后3日內(nèi)的初乳，樣本量不少于500μL，120003用包被液將PEDV純化濃縮抗原稀釋至每孔加入新鮮配制的封閉液300μL/孔，37℃封閉3小時將待測檢樣本用稀釋液作1:10稀釋后，加入抗原包被板中，100μ用稀釋液將酶結(jié)合物稀釋至工作濃度，加入抗原包被板中，100μL將底物液A和底物液B等體積混合，混合后立即加入抗原包被板中，每孔

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