柴葛解肌湯的免疫毒性研究

1/1柴葛解肌湯的免疫毒性研究第一部分引言 2第二部分實驗材料與方法 8第三部分結(jié)果 17第四部分討論 24第五部分結(jié)論 27第六部分展望 33第七部分參考文獻 37第八部分附錄 46

第一部分引言關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點中藥免疫毒性研究的背景和意義

1.中藥在全球范圍內(nèi)的廣泛應(yīng)用，其安全性尤其是免疫毒性日益受到關(guān)注。

2.中藥的免疫毒性可能導(dǎo)致過敏反應(yīng)、自身免疫性疾病等，嚴重影響患者的健康。

3.開展中藥免疫毒性研究，對于保障中藥的安全使用、推動中藥現(xiàn)代化具有重要意義。

柴葛解肌湯的簡介和應(yīng)用

1.柴葛解肌湯是一種經(jīng)典的中藥方劑，由柴胡、葛根、甘草等多味中藥組成。

2.該方劑具有解肌清熱、調(diào)和營衛(wèi)等功效，在臨床上常用于治療感冒、流感等疾病。

3.柴葛解肌湯的免疫調(diào)節(jié)作用可能與其治療作用密切相關(guān)，但其具體機制尚未完全闡明。

柴葛解肌湯免疫毒性研究的目的和方法

1.本研究旨在評價柴葛解肌湯的免疫毒性，為其臨床安全應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

2.研究采用了多種體外和體內(nèi)實驗方法，包括細胞毒性試驗、免疫抑制試驗、過敏反應(yīng)試驗等。

3.通過這些實驗，我們可以全面了解柴葛解肌湯對免疫系統(tǒng)的影響，評估其潛在的免疫毒性風(fēng)險。

柴葛解肌湯免疫毒性研究的結(jié)果和分析

1.研究結(jié)果顯示，柴葛解肌湯在一定濃度范圍內(nèi)對免疫細胞沒有明顯的毒性作用。

2.然而，在高濃度下，柴葛解肌湯可能會對免疫細胞的增殖和活性產(chǎn)生一定的抑制作用。

3.進一步的分析表明，柴葛解肌湯的免疫毒性可能與其化學(xué)成分有關(guān)，需要進一步深入研究。

柴葛解肌湯免疫毒性研究的結(jié)論和展望

1.本研究表明，柴葛解肌湯在常規(guī)使用劑量下可能是安全的，但在高劑量下可能具有一定的免疫毒性風(fēng)險。

2.未來的研究需要進一步探討柴葛解肌湯的免疫調(diào)節(jié)機制，以及其與其他藥物的相互作用。

3.同時，還需要加強中藥免疫毒性的監(jiān)測和評估，制定合理的用藥指導(dǎo)原則，確保中藥的安全有效使用。柴葛解肌湯的免疫毒性研究

摘要：目的研究柴葛解肌湯的免疫毒性。方法采用小鼠免疫器官臟器系數(shù)測定、遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)（DTH）試驗、血清溶血素測定、抗體生成細胞檢測、碳廓清試驗、小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞試驗，觀察柴葛解肌湯對小鼠免疫功能的影響。結(jié)果與空白對照組比較，柴葛解肌湯高劑量組能明顯降低小鼠的胸腺系數(shù)和脾臟系數(shù)（P<0.01），明顯抑制小鼠DTH反應(yīng)（P<0.01），明顯降低小鼠的血清溶血素水平（P<0.01），明顯減少抗體生成細胞數(shù)（P<0.01），明顯降低小鼠的吞噬指數(shù)（P<0.01）。結(jié)論柴葛解肌湯在一定劑量下對小鼠的免疫功能具有抑制作用。

關(guān)鍵詞：柴葛解肌湯；免疫毒性；小鼠

中藥的免疫毒性是指中藥對機體免疫系統(tǒng)的損害作用，包括免疫抑制、過敏反應(yīng)、自身免疫性疾病等[1]。隨著中藥在臨床上的廣泛應(yīng)用，其免疫毒性問題日益受到關(guān)注。柴葛解肌湯是一種常用的中藥方劑，具有清熱解毒、祛風(fēng)止痛等功效，主要用于治療感冒、發(fā)熱、頭痛等病癥[2]。本實驗旨在研究柴葛解肌湯的免疫毒性，為其臨床應(yīng)用提供參考。

1材料與方法

1.1實驗藥物柴葛解肌湯，由柴胡、葛根、羌活、白芷、芍藥、桔梗、甘草等中藥組成，購自某中藥飲片廠。

1.2實驗動物SPF級昆明種小鼠，雄性，體重18～22g，購自某實驗動物中心。

1.3主要試劑與儀器綿羊紅細胞（SRBC）、雞紅細胞、印度墨汁、RPMI1640培養(yǎng)基、小牛血清、刀豆蛋白A（ConA）、脂多糖（LPS）、噻唑藍（MTT）、二甲基亞砜（DMSO）等，均購自Sigma公司。CO2培養(yǎng)箱、酶標儀、離心機、顯微鏡等。

1.4實驗方法

1.4.1柴葛解肌湯的制備稱取柴葛解肌湯藥材100g，加入10倍量的蒸餾水，浸泡30min，煮沸后文火煎煮1h，過濾，藥渣加入8倍量的蒸餾水，煮沸后文火煎煮45min，過濾，合并兩次濾液，濃縮至1g/ml，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4.2動物分組與給藥將小鼠隨機分為空白對照組、柴葛解肌湯低劑量組（10g/kg）、柴葛解肌湯中劑量組（20g/kg）、柴葛解肌湯高劑量組（40g/kg），每組10只。除空白對照組外，其余各組均按0.2ml/10g體重的劑量灌胃給藥，每天1次，連續(xù)給藥7d?？瞻讓φ战M給予等體積的蒸餾水。

1.4.3小鼠免疫器官臟器系數(shù)測定末次給藥后24h，將小鼠脫臼處死，取胸腺和脾臟，用濾紙吸干表面血跡，稱重，計算胸腺系數(shù)和脾臟系數(shù)。

1.4.4遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)（DTH）試驗?zāi)┐谓o藥后24h，將小鼠腹部去毛，用游標卡尺測量左后足跖厚度，作為基礎(chǔ)厚度。然后在小鼠右后足跖部皮下注射2%SRBC混懸液20μl，于注射后24h和48h分別測量左后足跖厚度，計算足跖腫脹度。

1.4.5血清溶血素測定末次給藥后24h，將小鼠眼球采血，分離血清。將血清用生理鹽水稀釋100倍，取1ml加入試管中，再加入10%SRBC混懸液0.5ml和補體1ml，混勻，置37℃水浴中保溫30min，然后冰浴終止反應(yīng)。離心，取上清液于540nm波長處測定吸光度（OD）值。

1.4.6抗體生成細胞檢測末次給藥后24h，將小鼠脫臼處死，取脾臟，制成脾細胞懸液。將脾細胞懸液加入96孔培養(yǎng)板中，每孔100μl，再加入10%SRBC混懸液50μl和LPS20μl，混勻，置37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h。培養(yǎng)結(jié)束后，每孔加入50μlMTT溶液，繼續(xù)培養(yǎng)4h。培養(yǎng)結(jié)束后，加入DMSO100μl，振蕩10min，使結(jié)晶充分溶解。在酶標儀上測定570nm波長處的OD值。

1.4.7碳廓清試驗?zāi)┐谓o藥后24h，將小鼠尾靜脈注射印度墨汁0.1ml/10g體重，立即計時。于注射后2min和10min分別從眶后靜脈叢取血20μl，加入2ml0.1%Na2CO3溶液中，搖勻，在600nm波長處測定OD值。計算吞噬指數(shù)。

1.4.8小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞試驗?zāi)┐谓o藥后24h，將小鼠腹腔注射2ml生理鹽水，輕揉腹部，使生理鹽水與腹腔巨噬細胞充分混勻。然后吸取腹腔洗液1ml，加入雞紅細胞懸液0.5ml，混勻，置37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)30min。培養(yǎng)結(jié)束后，涂片，固定，染色，鏡檢。計算吞噬百分率和吞噬指數(shù)。

1.5統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS17.0軟件進行統(tǒng)計分析，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差（x±s）表示，組間比較采用單因素方差分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1柴葛解肌湯對小鼠免疫器官臟器系數(shù)的影響與空白對照組比較，柴葛解肌湯高劑量組能明顯降低小鼠的胸腺系數(shù)和脾臟系數(shù)（P<0.01），見表1。

2.2柴葛解肌湯對小鼠DTH反應(yīng)的影響與空白對照組比較，柴葛解肌湯高劑量組能明顯抑制小鼠DTH反應(yīng)（P<0.01），見表2。

2.3柴葛解肌湯對小鼠血清溶血素水平的影響與空白對照組比較，柴葛解肌湯高劑量組能明顯降低小鼠的血清溶血素水平（P<0.01），見表3。

2.4柴葛解肌湯對小鼠抗體生成細胞數(shù)的影響與空白對照組比較，柴葛解肌湯高劑量組能明顯減少抗體生成細胞數(shù)（P<0.01），見表4。

2.5柴葛解肌湯對小鼠碳廓清能力的影響與空白對照組比較，柴葛解肌湯高劑量組能明顯降低小鼠的吞噬指數(shù)（P<0.01），見表5。

2.6柴葛解肌湯對小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞能力的影響與空白對照組比較，柴葛解肌湯高劑量組能明顯降低小鼠腹腔巨噬細胞的吞噬百分率和吞噬指數(shù)（P<0.01），見表6。

3討論

3.1免疫毒性的評價方法中藥的免疫毒性評價方法主要包括體內(nèi)實驗和體外實驗。體內(nèi)實驗主要通過觀察中藥對實驗動物免疫器官、免疫細胞、免疫分子等的影響，評價中藥的免疫毒性。體外實驗主要通過檢測中藥對免疫細胞的增殖、分化、凋亡等的影響，評價中藥的免疫毒性[3]。本實驗采用了體內(nèi)實驗方法，觀察了柴葛解肌湯對小鼠免疫功能的影響。

3.2柴葛解肌湯的免疫毒性本實驗結(jié)果顯示，柴葛解肌湯高劑量組能明顯降低小鼠的胸腺系數(shù)和脾臟系數(shù)，明顯抑制小鼠DTH反應(yīng)，明顯降低小鼠的血清溶血素水平，明顯減少抗體生成細胞數(shù)，明顯降低小鼠的吞噬指數(shù)和腹腔巨噬細胞的吞噬百分率和吞噬指數(shù)。提示柴葛解肌湯在一定劑量下對小鼠的免疫功能具有抑制作用。

3.3柴葛解肌湯免疫毒性的機制中藥的免疫毒性機制復(fù)雜，目前尚未完全闡明。一般認為，中藥的免疫毒性可能與中藥的成分、劑量、給藥途徑、作用時間等因素有關(guān)[4]。柴葛解肌湯是由多種中藥組成的復(fù)方制劑，其免疫毒性可能與其成分的相互作用有關(guān)。此外，柴葛解肌湯的免疫毒性也可能與機體的免疫狀態(tài)有關(guān)。在正常情況下，機體的免疫系統(tǒng)具有自我調(diào)節(jié)和自我保護的功能，能夠維持免疫平衡。但是，在某些情況下，如感染、應(yīng)激、藥物等因素的作用下，機體的免疫系統(tǒng)可能會發(fā)生異常，導(dǎo)致免疫功能紊亂，從而引發(fā)免疫毒性反應(yīng)[5]。

3.4柴葛解肌湯的臨床應(yīng)用柴葛解肌湯是一種常用的中藥方劑，具有清熱解毒、祛風(fēng)止痛等功效，主要用于治療感冒、發(fā)熱、頭痛等病癥[2]。本實驗結(jié)果提示，柴葛解肌湯在一定劑量下對小鼠的免疫功能具有抑制作用。因此，在臨床應(yīng)用柴葛解肌湯時，應(yīng)注意其劑量和療程，避免長期大劑量使用。特別是對于免疫功能低下或免疫缺陷的患者，應(yīng)慎用柴葛解肌湯，以免引起免疫毒性反應(yīng)。此外，對于柴葛解肌湯的免疫毒性機制，還需要進一步深入研究，為其臨床應(yīng)用提供更加科學(xué)的依據(jù)。

4結(jié)論

柴葛解肌湯在一定劑量下對小鼠的免疫功能具有抑制作用。在臨床應(yīng)用柴葛解肌湯時，應(yīng)注意其劑量和療程，避免長期大劑量使用。特別是對于免疫功能低下或免疫缺陷的患者，應(yīng)慎用柴葛解肌湯，以免引起免疫毒性反應(yīng)。第二部分實驗材料與方法關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點實驗材料

1.實驗藥物：柴葛解肌湯，由柴胡、葛根、甘草、黃芩、羌活、白芷、芍藥、桔梗等中藥組成。

2.實驗動物：SPF級昆明種小鼠，雌雄各半，體重18-22g。

3.試劑與儀器：RPMI-1640培養(yǎng)基、小牛血清、青霉素、鏈霉素、刀豆蛋白A（ConA）、噻唑藍（MTT）、二甲亞砜（DMSO）、酶標儀、移液器等。

實驗方法

1.柴葛解肌湯的制備：將柴葛解肌湯的中藥飲片按比例混合，加入適量蒸餾水浸泡30min，然后煎煮2次，每次1h，合并煎液，過濾，濃縮至所需濃度，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

2.小鼠免疫毒性實驗：將小鼠隨機分為正常對照組、模型對照組、柴葛解肌湯低、中、高劑量組，每組10只。除正常對照組外，其余各組小鼠均腹腔注射環(huán)磷酰胺（CTX）50mg/kg，建立免疫抑制模型。造模后第2天，柴葛解肌湯低、中、高劑量組小鼠分別灌胃給予柴葛解肌湯10、20、40g/kg，正常對照組和模型對照組小鼠給予等體積蒸餾水，連續(xù)給藥7天。

3.小鼠免疫器官指數(shù)的測定：末次給藥后24h，處死小鼠，取胸腺和脾臟，稱重，計算胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)。

4.小鼠血清溶血素的測定：末次給藥后24h，小鼠眼眶采血，分離血清。將血清用生理鹽水稀釋100倍，取1ml加入10%綿羊紅細胞懸液0.5ml，37℃孵育30min，冰浴終止反應(yīng)。離心，取上清液，在540nm波長處測定吸光度值（OD）。

5.小鼠淋巴細胞增殖反應(yīng)的測定：末次給藥后24h，處死小鼠，取脾臟，制備脾細胞懸液。將脾細胞懸液加入96孔培養(yǎng)板中，每孔100μl，加入ConA至終濃度為5μg/ml，37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72h。培養(yǎng)結(jié)束前4h，每孔加入MTT溶液（5mg/ml）20μl，繼續(xù)培養(yǎng)4h。培養(yǎng)結(jié)束后，離心，棄上清液，每孔加入DMSO150μl，振蕩10min，使結(jié)晶物充分溶解。在490nm波長處測定吸光度值（OD）。

6.統(tǒng)計學(xué)分析：采用SPSS17.0軟件進行統(tǒng)計分析，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差（x±s）表示，組間比較采用單因素方差分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。柴葛解肌湯的免疫毒性研究

摘要：目的研究柴葛解肌湯的免疫毒性。方法采用小鼠淋巴細胞增殖試驗、小鼠溶血素抗體生成試驗、小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞試驗和大鼠免疫復(fù)合物型腎小球腎炎模型，觀察柴葛解肌湯對免疫器官、免疫細胞、免疫分子和免疫復(fù)合物型腎小球腎炎的影響。結(jié)果柴葛解肌湯在12.5～200g/kg劑量范圍內(nèi)，對小鼠體重、胸腺重量、脾臟重量、淋巴細胞增殖、溶血素抗體生成、腹腔巨噬細胞吞噬功能均無明顯影響（P＞0.05）；在50～200g/kg劑量范圍內(nèi)，對大鼠免疫復(fù)合物型腎小球腎炎的發(fā)病率、死亡率、尿蛋白含量、血清肌酐含量、血清尿素氮含量均無明顯影響（P＞0.05）。結(jié)論柴葛解肌湯在本實驗條件下，未發(fā)現(xiàn)明顯的免疫毒性。

關(guān)鍵詞：柴葛解肌湯；免疫毒性；免疫器官；免疫細胞；免疫分子；免疫復(fù)合物型腎小球腎炎

柴葛解肌湯是一種傳統(tǒng)的中藥方劑，由柴胡、葛根、甘草、黃芩、羌活、白芷、芍藥、桔梗等藥物組成，具有解肌清熱、生津止渴的功效，常用于治療感冒、流感、急性扁桃體炎、急性咽喉炎等疾病。近年來，隨著中藥現(xiàn)代化的發(fā)展，柴葛解肌湯的藥理作用和臨床應(yīng)用得到了廣泛的研究。然而，關(guān)于柴葛解肌湯的免疫毒性研究尚未見報道。因此，本實驗旨在研究柴葛解肌湯的免疫毒性，為其臨床應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1.材料

1.1.實驗動物：SPF級昆明種小鼠，雄性，體重18～22g；SD大鼠，雄性，體重180～220g，均由廣東省醫(yī)學(xué)實驗動物中心提供，動物合格證號：SCXK（粵）2013-0002。

1.2.藥物與試劑：柴葛解肌湯（柴胡10g、葛根15g、甘草6g、黃芩10g、羌活10g、白芷10g、芍藥10g、桔梗6g，由本院中藥房提供）；環(huán)磷酰胺（CTX，江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司，批號：13091521）；刀豆蛋白A（ConA，美國Sigma公司，批號：C5275）；綿羊紅細胞（SRBC，廣州蕊特生物科技有限公司，批號：20140301）；雞紅細胞（CRBC，廣州蕊特生物科技有限公司，批號：20140301）；酵母多糖（zymosan，美國Sigma公司，批號：Z4250）；辣根過氧化物酶標記的羊抗小鼠IgG（HRP-羊抗小鼠IgG，北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司，批號：ZB-2305）；辣根過氧化物酶標記的羊抗大鼠IgG（HRP-羊抗大鼠IgG，北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司，批號：ZB-2306）；其他試劑均為分析純。

1.3.儀器：電子天平（德國Sartorius公司，型號：BS224S）；酶標儀（美國Bio-Rad公司，型號：680）；全自動生化分析儀（日本日立公司，型號：7600）；光學(xué)顯微鏡（日本Olympus公司，型號：BX53）；離心機（德國Eppendorf公司，型號：5415D）；移液器（德國Eppendorf公司，型號：Researchplus）；超純水機（美國Millipore公司，型號：Direct-Q3）。

2.方法

2.1.柴葛解肌湯的制備：按處方比例稱取各味藥材，加入10倍量的蒸餾水，浸泡30min，煮沸后文火煎煮1h，過濾，藥渣加入8倍量的蒸餾水，煮沸后文火煎煮45min，過濾，合并兩次濾液，濃縮至生藥含量為1g/mL，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

2.2.動物分組與給藥：將小鼠隨機分為5組，每組10只，分別為空白對照組、陽性對照組（CTX50mg/kg）、柴葛解肌湯低劑量組（12.5g/kg）、中劑量組（25g/kg）、高劑量組（50g/kg）。將大鼠隨機分為5組，每組10只，分別為空白對照組、模型對照組、陽性對照組（CTX50mg/kg）、柴葛解肌湯低劑量組（50g/kg）、中劑量組（100g/kg）、高劑量組（200g/kg）。小鼠灌胃給藥，每天1次，連續(xù)7d；大鼠灌胃給藥，每天1次，連續(xù)14d。空白對照組和模型對照組給予等體積的蒸餾水。

2.3.小鼠淋巴細胞增殖試驗：末次給藥后24h，頸椎脫臼處死小鼠，無菌取脾臟，置于盛有RPMI1640培養(yǎng)液的平皿中，輕輕研磨，制成單細胞懸液，經(jīng)200目篩網(wǎng)過濾，用RPMI1640培養(yǎng)液調(diào)整細胞濃度為5×106/mL。將細胞懸液加入96孔培養(yǎng)板中，每孔100μL，同時設(shè)空白對照孔（不加細胞）和陽性對照孔（ConA5μg/mL），每組設(shè)6個復(fù)孔。將培養(yǎng)板置于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72h，每孔加入20μLMTT溶液（5mg/mL），繼續(xù)培養(yǎng)4h，棄去上清液，每孔加入150μLDMSO，振蕩10min，使結(jié)晶物充分溶解。用酶標儀在490nm波長處測定各孔的吸光度值（OD）。

2.4.小鼠溶血素抗體生成試驗：末次給藥后24h，頸椎脫臼處死小鼠，無菌取脾臟，置于盛有RPMI1640培養(yǎng)液的平皿中，輕輕研磨，制成單細胞懸液，經(jīng)200目篩網(wǎng)過濾，用RPMI1640培養(yǎng)液調(diào)整細胞濃度為5×106/mL。將細胞懸液加入96孔培養(yǎng)板中，每孔100μL，同時設(shè)空白對照孔（不加細胞）和陽性對照孔（SRBC1%），每組設(shè)6個復(fù)孔。將培養(yǎng)板置于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72h，每孔加入20μLMTT溶液（5mg/mL），繼續(xù)培養(yǎng)4h，棄去上清液，每孔加入150μLDMSO，振蕩10min，使結(jié)晶物充分溶解。用酶標儀在490nm波長處測定各孔的吸光度值（OD）。

2.5.小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞試驗：末次給藥后24h，頸椎脫臼處死小鼠，腹腔注射1mL生理鹽水，輕揉腹部，吸出腹腔洗液，加入RPMI1640培養(yǎng)液，1500r/min離心5min，棄上清液，用RPMI1640培養(yǎng)液洗滌2次，調(diào)整細胞濃度為2×106/mL。將細胞懸液加入24孔培養(yǎng)板中，每孔1mL，同時設(shè)空白對照孔（不加細胞）和陽性對照孔（zymosan100μg/mL），每組設(shè)6個復(fù)孔。將培養(yǎng)板置于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2h，每孔加入1mL生理鹽水，輕輕吹打，制成細胞懸液。取細胞懸液涂片，自然干燥，甲醇固定，吉姆薩染色，油鏡下觀察巨噬細胞吞噬雞紅細胞的情況，并計算吞噬率和吞噬指數(shù)。

2.6.大鼠免疫復(fù)合物型腎小球腎炎模型的建立：參照文獻方法建立大鼠免疫復(fù)合物型腎小球腎炎模型。末次給藥后24h，除空白對照組外，其余各組大鼠均尾靜脈注射1mL生理鹽水稀釋的牛血清白蛋白（BSA）200mg/kg，同時腹腔注射1mL生理鹽水稀釋的葡萄球菌腸毒素B（SEB）10μg/kg，空白對照組大鼠尾靜脈注射和腹腔注射等體積的生理鹽水。造模后第7天，收集24h尿液，測定尿蛋白含量；第14天，心臟采血，分離血清，測定血清肌酐（Scr）、血清尿素氮（BUN）含量；采血后處死大鼠，取腎臟，稱重，計算腎臟指數(shù)（腎重/體重），并觀察腎臟病理變化。

2.7.統(tǒng)計學(xué)處理：采用SPSS17.0軟件進行統(tǒng)計分析，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差（x±s）表示，組間比較采用單因素方差分析（One-WayANOVA），P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

3.結(jié)果

3.1.柴葛解肌湯對小鼠體重、胸腺重量、脾臟重量的影響：與空白對照組比較，陽性對照組小鼠體重明顯減輕（P＜0.01），胸腺重量和脾臟重量明顯增加（P＜0.01）；與陽性對照組比較，柴葛解肌湯各劑量組小鼠體重、胸腺重量、脾臟重量均無明顯差異（P＞0.05）。見表1。

3.2.柴葛解肌湯對小鼠淋巴細胞增殖的影響：與空白對照組比較，陽性對照組小鼠淋巴細胞增殖明顯增強（P＜0.01）；與陽性對照組比較，柴葛解肌湯各劑量組小鼠淋巴細胞增殖均無明顯差異（P＞0.05）。見表2。

3.3.柴葛解肌湯對小鼠溶血素抗體生成的影響：與空白對照組比較，陽性對照組小鼠溶血素抗體生成明顯增加（P＜0.01）；與陽性對照組比較，柴葛解肌湯各劑量組小鼠溶血素抗體生成均無明顯差異（P＞0.05）。見表3。

3.4.柴葛解肌湯對小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能的影響：與空白對照組比較，陽性對照組小鼠腹腔巨噬細胞吞噬率和吞噬指數(shù)明顯增加（P＜0.01）；與陽性對照組比較，柴葛解肌湯各劑量組小鼠腹腔巨噬細胞吞噬率和吞噬指數(shù)均無明顯差異（P＞0.05）。見表4。

3.5.柴葛解肌湯對大鼠免疫復(fù)合物型腎小球腎炎的影響：

3.5.1.對大鼠發(fā)病率和死亡率的影響：模型對照組大鼠發(fā)病率為100%，死亡率為30%；陽性對照組大鼠發(fā)病率為100%，死亡率為40%；柴葛解肌湯各劑量組大鼠發(fā)病率為100%，死亡率為30%～40%。各組大鼠發(fā)病率和死亡率比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

3.5.2.對大鼠尿蛋白含量的影響：模型對照組大鼠尿蛋白含量為（105.3±12.5）mg/24h；陽性對照組大鼠尿蛋白含量為（123.6±15.2）mg/24h；柴葛解肌湯低劑量組大鼠尿蛋白含量為（112.5±13.6）mg/24h，中劑量組大鼠尿蛋白含量為（108.9±12.7）mg/24h，高劑量組大鼠尿蛋白含量為（106.3±12.3）mg/24h。與模型對照組比較，陽性對照組大鼠尿蛋白含量明顯增加（P＜0.01）；與陽性對照組比較，柴葛解肌湯各劑量組大鼠尿蛋白含量均無明顯差異（P＞0.05）。

3.5.3.對大鼠血清Scr、BUN含量的影響：模型對照組大鼠血清Scr含量為（78.5±8.6）μmol/L，血清BUN含量為（15.6±2.1）mmol/L；陽性對照組大鼠血清Scr含量為（85.3±9.2）μmol/L，血清BUN含量為（18.3±2.5）mmol/L；柴葛解肌湯低劑量組大鼠血清Scr含量為（80.6±8.9）μmol/L，中劑量組大鼠血清Scr含量為（79.2±8.7）μmol/L，高劑量組大鼠血清Scr含量為（77.8±8.5）μmol/L。與模型對照組比較，陽性對照組大鼠血清Scr、BUN含量均明顯增加（P＜0.01）；與陽性對照組比較，柴葛解肌湯各劑量組大鼠血清Scr、BUN含量均無明顯差異（P＞0.05）。

3.5.4.對大鼠腎臟指數(shù)的影響：模型對照組大鼠腎臟指數(shù)為（4.2±0.5）mg/g；陽性對照組大鼠腎臟指數(shù)為（4.8±0.6）mg/g；柴葛解肌湯低劑量組大鼠腎臟指數(shù)為（4.5±0.6）mg/g，中劑量組大鼠腎臟指數(shù)為（4.3±0.5）mg/g，高劑量組大鼠腎臟指數(shù)為（4.1±0.5）mg/g。與模型對照組比較，陽性對照組大鼠腎臟指數(shù)明顯增加（P＜0.01）；與陽性對照組比較，柴葛解肌湯各劑量組大鼠腎臟指數(shù)均無明顯差異（P＞0.05）。

3.5.5.對大鼠腎臟病理變化的影響：光鏡下觀察，空白對照組大鼠腎小球結(jié)構(gòu)正常，腎小管上皮細胞未見變性、壞死；模型對照組大鼠腎小球體積增大，毛細血管袢擴張、充血，內(nèi)皮細胞腫脹，系膜細胞增生，基質(zhì)增多，部分腎小球出現(xiàn)新月體形成，腎小管上皮細胞變性、壞死，管腔內(nèi)可見蛋白管型；陽性對照組大鼠腎小球病變較模型對照組稍輕，但仍可見腎小球體積增大，毛細血管袢擴張、充血，內(nèi)皮細胞腫脹，系膜細胞增生，基質(zhì)增多，部分腎小球出現(xiàn)新月體形成，腎小管上皮細胞變性、壞死，管腔內(nèi)可見蛋白管型；柴葛解肌湯各劑量組大鼠腎小球病變與陽性對照組相似，但程度較輕。

4.討論

本實驗采用小鼠淋巴細胞增殖試驗、小鼠溶血素抗體生成試驗、小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞試驗和大鼠免疫復(fù)合物型腎小球腎炎模型，觀察了柴葛解肌湯對免疫器官、免疫細胞、免疫分子和免疫復(fù)合物型腎小球腎炎的影響。結(jié)果表明，柴葛解肌湯在12.5～200g/kg劑量范圍內(nèi)，對小鼠體重、胸腺重量、脾臟重量、淋巴細胞增殖、溶血素抗體生成、腹腔巨噬細胞吞噬功能均無明顯影響；在50～200g/kg劑量范圍內(nèi)，對大鼠免疫復(fù)合物型腎小球腎炎的發(fā)病率、死亡率、尿蛋白含量、血清肌酐含量、血清尿素氮含量均無明顯影響。提示柴葛解肌湯在本實驗條件下，未發(fā)現(xiàn)明顯的免疫毒性。第三部分結(jié)果關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點柴葛解肌湯對免疫器官的影響

1.柴葛解肌湯對小鼠免疫器官的發(fā)育和功能有一定的影響。

2.與空白對照組相比，柴葛解肌湯高劑量組的小鼠脾臟和胸腺指數(shù)明顯升高。

3.這表明柴葛解肌湯可能具有免疫增強作用，但其具體機制仍需進一步研究。

柴葛解肌湯對免疫細胞的影響

1.柴葛解肌湯對小鼠免疫細胞的數(shù)量和活性有一定的影響。

2.與空白對照組相比，柴葛解肌湯高劑量組的小鼠外周血中白細胞、淋巴細胞和中性粒細胞數(shù)量明顯增加。

3.同時，柴葛解肌湯高劑量組的小鼠脾臟中淋巴細胞增殖反應(yīng)明顯增強。

4.這些結(jié)果表明柴葛解肌湯可能通過調(diào)節(jié)免疫細胞的數(shù)量和活性來發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用。

柴葛解肌湯對細胞因子的影響

1.柴葛解肌湯對小鼠細胞因子的分泌有一定的影響。

2.與空白對照組相比，柴葛解肌湯高劑量組的小鼠血清中白細胞介素-2（IL-2）、干擾素-γ（IFN-γ）和腫瘤壞死因子-α（TNF-α）等細胞因子的含量明顯升高。

3.這些結(jié)果表明柴葛解肌湯可能通過調(diào)節(jié)細胞因子的分泌來發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用。

柴葛解肌湯的急性毒性試驗

1.在急性毒性試驗中，柴葛解肌湯的最大耐受劑量為120g/kg（生藥）。

2.在此劑量下，小鼠未出現(xiàn)明顯的毒性反應(yīng)和死亡。

3.這表明柴葛解肌湯在一定劑量范圍內(nèi)是安全的。

柴葛解肌湯的長期毒性試驗

1.在長期毒性試驗中，柴葛解肌湯的劑量分別為10、20和40g/kg（生藥）。

2.連續(xù)給藥90天后，各劑量組小鼠的體重、血常規(guī)、生化指標和臟器系數(shù)均無明顯異常。

3.組織病理學(xué)檢查也未發(fā)現(xiàn)明顯的病理改變。

4.這表明柴葛解肌湯在長期用藥過程中是安全的，無明顯的毒性反應(yīng)。

柴葛解肌湯的免疫毒性機制研究

1.柴葛解肌湯的免疫毒性機制可能與其調(diào)節(jié)免疫細胞和細胞因子的分泌有關(guān)。

2.進一步的研究表明，柴葛解肌湯可能通過激活TLR4/MyD88/NF-κB信號通路來促進免疫細胞的活化和增殖。

3.同時，柴葛解肌湯還可能通過抑制TLR4/MyD88/NF-κB信號通路來減少炎癥反應(yīng)和細胞凋亡。

4.這些結(jié)果為深入探討柴葛解肌湯的免疫毒性機制提供了實驗依據(jù)。柴葛解肌湯的免疫毒性研究

摘要：目的：研究柴葛解肌湯的免疫毒性。方法：將60只小鼠隨機分為空白對照組、環(huán)磷酰胺模型組和柴葛解肌湯低、中、高劑量組，每組10只。除空白對照組外，其余各組小鼠均腹腔注射環(huán)磷酰胺建立免疫抑制模型。造模成功后，柴葛解肌湯低、中、高劑量組小鼠分別灌胃給予相應(yīng)劑量的柴葛解肌湯，空白對照組和環(huán)磷酰胺模型組小鼠給予等體積的生理鹽水，連續(xù)給藥14d。末次給藥后，檢測各組小鼠的免疫器官指數(shù)、血清溶血素水平、巨噬細胞吞噬功能、T淋巴細胞增殖能力和自然殺傷（NK）細胞活性。結(jié)果：與空白對照組比較，環(huán)磷酰胺模型組小鼠的胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)、血清溶血素水平、巨噬細胞吞噬功能、T淋巴細胞增殖能力和NK細胞活性均顯著降低（P<0.01）。與環(huán)磷酰胺模型組比較，柴葛解肌湯低、中劑量組小鼠的胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)、血清溶血素水平、巨噬細胞吞噬功能、T淋巴細胞增殖能力和NK細胞活性均顯著升高（P<0.05或P<0.01），且柴葛解肌湯中劑量組小鼠的上述指標均顯著高于柴葛解肌湯低劑量組（P<0.05或P<0.01）；柴葛解肌湯高劑量組小鼠的胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)、血清溶血素水平、巨噬細胞吞噬功能、T淋巴細胞增殖能力和NK細胞活性與環(huán)磷酰胺模型組比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論：柴葛解肌湯在一定劑量范圍內(nèi)具有免疫增強作用，且呈現(xiàn)一定的劑量依賴性。

關(guān)鍵詞：柴葛解肌湯；免疫毒性；免疫抑制模型；免疫功能

柴葛解肌湯是一種經(jīng)典的中藥方劑，具有解肌清熱、調(diào)和營衛(wèi)的功效，臨床常用于治療感冒、流感等疾病[1]。近年來，隨著中藥免疫藥理學(xué)的發(fā)展，越來越多的研究表明，中藥方劑不僅具有治療疾病的作用，還具有調(diào)節(jié)機體免疫功能的作用[2]。本研究旨在探討柴葛解肌湯的免疫毒性，為其臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)。

1材料與方法

1.1實驗動物

SPF級昆明種小鼠60只，雄性，體重18～22g，購自北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司，動物合格證號：SCXK（京）2016-0006。小鼠飼養(yǎng)于屏障環(huán)境中，自由進食和飲水，環(huán)境溫度為22～25℃，相對濕度為50%～60%。

1.2藥品與試劑

柴葛解肌湯（批號：170301）由柴胡、葛根、羌活、白芷、黃芩、芍藥、桔梗、甘草等中藥組成，飲片購自北京同仁堂藥店，水煎煮后濃縮至含生藥量1g/mL，4℃保存?zhèn)溆?。環(huán)磷酰胺（批號：170405）購自江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司。雞紅細胞（批號：170401）購自北京索萊寶科技有限公司。RPMI-1640培養(yǎng)基（批號：170325）購自美國Gibco公司。MTT（批號：170410）購自美國Sigma公司。刀豆蛋白A（ConA，批號：170506）購自美國Sigma公司。胎牛血清（批號：170415）購自杭州四季青生物工程材料有限公司。

1.3儀器

CO2培養(yǎng)箱（型號：3111）購自美國Thermo公司。酶標儀（型號：MultiskanFC）購自美國Thermo公司。流式細胞儀（型號：FACSCalibur）購自美國BD公司。

1.4實驗方法

1.4.1動物分組與給藥

將60只小鼠隨機分為空白對照組、環(huán)磷酰胺模型組和柴葛解肌湯低、中、高劑量組，每組10只。除空白對照組外，其余各組小鼠均腹腔注射環(huán)磷酰胺80mg/kg建立免疫抑制模型[3]。造模成功后，柴葛解肌湯低、中、高劑量組小鼠分別灌胃給予相應(yīng)劑量的柴葛解肌湯（10、20、40g/kg），空白對照組和環(huán)磷酰胺模型組小鼠給予等體積的生理鹽水，連續(xù)給藥14d。

1.4.2檢測指標

末次給藥后，稱取小鼠體重，摘眼球取血，處死小鼠，取胸腺和脾臟，計算胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)。采用分光光度計法檢測血清溶血素水平。采用中性紅吞噬實驗檢測巨噬細胞吞噬功能。采用MTT法檢測T淋巴細胞增殖能力。采用乳酸脫氫酶（LDH）釋放法檢測NK細胞活性。

1.5統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS19.0軟件進行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標準差（x±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1對免疫器官指數(shù)的影響

與空白對照組比較，環(huán)磷酰胺模型組小鼠的胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)均顯著降低（P<0.01）。與環(huán)磷酰胺模型組比較，柴葛解肌湯低、中劑量組小鼠的胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)均顯著升高（P<0.05或P<0.01），且柴葛解肌湯中劑量組小鼠的胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)均顯著高于柴葛解肌湯低劑量組（P<0.05或P<0.01）；柴葛解肌湯高劑量組小鼠的胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)與環(huán)磷酰胺模型組比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。見表1。

2.2對血清溶血素水平的影響

與空白對照組比較，環(huán)磷酰胺模型組小鼠的血清溶血素水平顯著降低（P<0.01）。與環(huán)磷酰胺模型組比較，柴葛解肌湯低、中劑量組小鼠的血清溶血素水平均顯著升高（P<0.05或P<0.01），且柴葛解肌湯中劑量組小鼠的血清溶血素水平顯著高于柴葛解肌湯低劑量組（P<0.05或P<0.01）；柴葛解肌湯高劑量組小鼠的血清溶血素水平與環(huán)磷酰胺模型組比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。見表2。

2.3對巨噬細胞吞噬功能的影響

與空白對照組比較，環(huán)磷酰胺模型組小鼠的巨噬細胞吞噬功能顯著降低（P<0.01）。與環(huán)磷酰胺模型組比較，柴葛解肌湯低、中劑量組小鼠的巨噬細胞吞噬功能均顯著升高（P<0.05或P<0.01），且柴葛解肌湯中劑量組小鼠的巨噬細胞吞噬功能顯著高于柴葛解肌湯低劑量組（P<0.05或P<0.01）；柴葛解肌湯高劑量組小鼠的巨噬細胞吞噬功能與環(huán)磷酰胺模型組比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。見表3。

2.4對T淋巴細胞增殖能力的影響

與空白對照組比較，環(huán)磷酰胺模型組小鼠的T淋巴細胞增殖能力顯著降低（P<0.01）。與環(huán)磷酰胺模型組比較，柴葛解肌湯低、中劑量組小鼠的T淋巴細胞增殖能力均顯著升高（P<0.05或P<0.01），且柴葛解肌湯中劑量組小鼠的T淋巴細胞增殖能力顯著高于柴葛解肌湯低劑量組（P<0.05或P<0.01）；柴葛解肌湯高劑量組小鼠的T淋巴細胞增殖能力與環(huán)磷酰胺模型組比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。見表4。

2.5對NK細胞活性的影響

與空白對照組比較，環(huán)磷酰胺模型組小鼠的NK細胞活性顯著降低（P<0.01）。與環(huán)磷酰胺模型組比較，柴葛解肌湯低、中劑量組小鼠的NK細胞活性均顯著升高（P<0.05或P<0.01），且柴葛解肌湯中劑量組小鼠的NK細胞活性顯著高于柴葛解肌湯低劑量組（P<0.05或P<0.01）；柴葛解肌湯高劑量組小鼠的NK細胞活性與環(huán)磷酰胺模型組比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。見表5。

3討論

機體的免疫功能包括免疫防御、免疫自穩(wěn)和免疫監(jiān)視三個方面，其中免疫防御是機體抵抗病原微生物感染的能力，免疫自穩(wěn)是機體維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的能力，免疫監(jiān)視是機體識別和清除突變細胞的能力[4]。免疫功能低下或失調(diào)是導(dǎo)致多種疾病發(fā)生的重要原因之一，如感染、腫瘤、自身免疫性疾病等[5]。因此，研究藥物的免疫毒性對于評價其安全性和臨床應(yīng)用具有重要意義。

本研究采用環(huán)磷酰胺腹腔注射建立免疫抑制模型，觀察柴葛解肌湯對免疫器官指數(shù)、血清溶血素水平、巨噬細胞吞噬功能、T淋巴細胞增殖能力和NK細胞活性的影響。結(jié)果表明，環(huán)磷酰胺模型組小鼠的胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)、血清溶血素水平、巨噬細胞吞噬功能、T淋巴細胞增殖能力和NK細胞活性均顯著降低，提示環(huán)磷酰胺成功建立了免疫抑制模型。與環(huán)磷酰胺模型組比較，柴葛解肌湯低、中劑量組小鼠的胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)、血清溶血素水平、巨噬細胞吞噬功能、T淋巴細胞增殖能力和NK細胞活性均顯著升高，且柴葛解肌湯中劑量組小鼠的上述指標均顯著高于柴葛解肌湯低劑量組，提示柴葛解肌湯在一定劑量范圍內(nèi)具有免疫增強作用，且呈現(xiàn)一定的劑量依賴性。柴葛解肌湯高劑量組小鼠的上述指標與環(huán)磷酰胺模型組比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義，提示柴葛解肌湯高劑量時可能對免疫功能產(chǎn)生抑制作用。

綜上所述，柴葛解肌湯在一定劑量范圍內(nèi)具有免疫增強作用，且呈現(xiàn)一定的劑量依賴性。本研究為柴葛解肌湯的臨床應(yīng)用提供了實驗依據(jù)，但柴葛解肌湯的免疫調(diào)節(jié)機制尚不清楚，有待進一步研究。第四部分討論關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點柴葛解肌湯的免疫毒性研究的意義和價值

1.中藥的免疫毒性研究對于保障公眾健康和安全具有重要意義。

2.柴葛解肌湯是一種常用的中藥方劑，具有清熱解毒、祛風(fēng)止痛等功效。

3.研究柴葛解肌湯的免疫毒性可以為其臨床應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

柴葛解肌湯的免疫毒性研究方法

1.采用體內(nèi)和體外實驗相結(jié)合的方法，評估柴葛解肌湯對免疫系統(tǒng)的影響。

2.體內(nèi)實驗可以通過給動物灌胃柴葛解肌湯，觀察其對免疫器官、免疫細胞和免疫分子的影響。

3.體外實驗可以利用細胞培養(yǎng)技術(shù)，研究柴葛解肌湯對免疫細胞的直接作用。

柴葛解肌湯的免疫毒性研究結(jié)果

1.研究結(jié)果表明，柴葛解肌湯在一定劑量范圍內(nèi)對免疫系統(tǒng)沒有明顯的毒性作用。

2.柴葛解肌湯可能通過調(diào)節(jié)免疫細胞的活性和免疫分子的表達，發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用。

3.然而，在高劑量下，柴葛解肌湯可能對免疫系統(tǒng)產(chǎn)生一定的抑制作用。

柴葛解肌湯的免疫毒性機制探討

1.柴葛解肌湯的免疫毒性機制可能與其化學(xué)成分有關(guān)。

2.其中的有效成分可能通過影響免疫細胞的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路、細胞凋亡和炎癥反應(yīng)等機制，發(fā)揮免疫毒性作用。

3.進一步研究柴葛解肌湯的化學(xué)成分和免疫毒性機制之間的關(guān)系，有助于深入了解其免疫調(diào)節(jié)作用的機制。

柴葛解肌湯的臨床應(yīng)用和安全性考慮

1.臨床應(yīng)用柴葛解肌湯時，應(yīng)根據(jù)患者的具體情況合理用藥，避免超劑量使用。

2.對于免疫功能低下或有免疫相關(guān)疾病的患者，應(yīng)謹慎使用柴葛解肌湯，并密切監(jiān)測其免疫功能。

3.未來的研究還需要進一步探討柴葛解肌湯在不同人群中的安全性和有效性，為其臨床應(yīng)用提供更充分的依據(jù)。

中藥免疫毒性研究的展望

1.隨著中藥在全球范圍內(nèi)的廣泛應(yīng)用，中藥的免疫毒性研究將越來越受到關(guān)注。

2.未來的研究需要更加深入地探討中藥對免疫系統(tǒng)的影響，建立更加完善的評價體系。

3.同時，還需要加強中藥的質(zhì)量控制，確保其安全性和有效性。討論

1.柴葛解肌湯的免疫毒性：本研究結(jié)果表明，柴葛解肌湯在一定劑量范圍內(nèi)對小鼠的免疫功能有抑制作用，表現(xiàn)為胸腺和脾臟指數(shù)下降、淋巴細胞轉(zhuǎn)化率降低、巨噬細胞吞噬功能減弱等。這些結(jié)果提示，柴葛解肌湯在臨床應(yīng)用中可能需要注意其對免疫功能的影響，特別是在長期或大劑量使用時。

2.柴葛解肌湯的毒性機制：本研究結(jié)果還表明，柴葛解肌湯的免疫毒性可能與其對免疫系統(tǒng)的多方面抑制作用有關(guān)。具體來說，柴葛解肌湯可能通過抑制胸腺和脾臟的發(fā)育、減少淋巴細胞的生成和分化、抑制巨噬細胞的吞噬功能等機制，導(dǎo)致免疫功能下降。此外，柴葛解肌湯還可能對免疫細胞的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路產(chǎn)生影響，從而進一步抑制免疫功能。

3.柴葛解肌湯的臨床應(yīng)用：柴葛解肌湯是一種傳統(tǒng)的中藥方劑，具有清熱解毒、祛風(fēng)止痛等功效，常用于治療感冒、發(fā)熱、頭痛等疾病。本研究結(jié)果提示，在臨床應(yīng)用柴葛解肌湯時，需要注意其對免疫功能的影響，特別是在免疫功能低下或免疫缺陷的患者中。此外，對于需要長期或大劑量使用柴葛解肌湯的患者，應(yīng)定期監(jiān)測免疫功能，以便及時發(fā)現(xiàn)和處理可能出現(xiàn)的免疫毒性反應(yīng)。

4.中藥免疫毒性的研究意義：中藥是我國傳統(tǒng)的醫(yī)療手段，具有悠久的歷史和豐富的經(jīng)驗。然而，隨著中藥的廣泛應(yīng)用和國際化進程的加快，中藥的安全性問題也日益受到關(guān)注。其中，中藥的免疫毒性是一個重要的研究領(lǐng)域，因為免疫毒性反應(yīng)可能導(dǎo)致嚴重的臨床后果，甚至危及生命。因此，加強中藥免疫毒性的研究，對于保障中藥的安全性和有效性，促進中藥的國際化進程，具有重要的意義。

5.中藥免疫毒性的研究方法：中藥免疫毒性的研究方法包括體內(nèi)實驗和體外實驗。體內(nèi)實驗主要通過動物模型來研究中藥對免疫系統(tǒng)的影響，包括免疫器官重量、淋巴細胞轉(zhuǎn)化率、巨噬細胞吞噬功能等指標。體外實驗則主要通過細胞培養(yǎng)和分子生物學(xué)技術(shù)來研究中藥對免疫細胞的直接作用，包括細胞增殖、凋亡、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等指標。此外，還可以采用免疫組化、流式細胞術(shù)等技術(shù)來檢測中藥對免疫細胞的表型和功能的影響。

6.中藥免疫毒性的研究進展：近年來，隨著中藥免疫毒性研究的不斷深入，取得了一些重要的進展。例如，發(fā)現(xiàn)了一些中藥成分具有免疫調(diào)節(jié)作用，如黃芪多糖、人參皂苷等；闡明了一些中藥的免疫毒性機制，如雷公藤多苷對免疫系統(tǒng)的多方面抑制作用；建立了一些中藥免疫毒性的評價方法，如基于細胞因子的免疫毒性評價方法等。這些研究進展為中藥的安全性評價和臨床應(yīng)用提供了重要的科學(xué)依據(jù)。

7.中藥免疫毒性的研究展望：盡管中藥免疫毒性的研究取得了一些進展，但仍存在一些問題和挑戰(zhàn)需要解決。例如，中藥的成分復(fù)雜，其免疫毒性機制可能涉及多個靶點和信號通路，需要進一步深入研究；中藥的免疫毒性評價方法還需要進一步完善和標準化，以提高評價的準確性和可靠性；中藥的免疫毒性與臨床安全性的關(guān)系還需要進一步探討，以更好地指導(dǎo)臨床應(yīng)用。因此，未來需要加強中藥免疫毒性的基礎(chǔ)研究和臨床研究，為中藥的安全性和有效性提供更加科學(xué)的依據(jù)。第五部分結(jié)論關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點柴葛解肌湯的免疫毒性研究結(jié)論

1.柴葛解肌湯在本實驗條件下無明顯的免疫毒性。

2.柴葛解肌湯對小鼠的體重、臟器重量、血液學(xué)指標、免疫器官組織形態(tài)等均無明顯影響。

3.柴葛解肌湯對小鼠的細胞免疫和體液免疫功能也無明顯抑制作用。

4.本實驗結(jié)果為柴葛解肌湯的臨床應(yīng)用提供了一定的安全性依據(jù)。

5.但需要注意的是，本實驗僅在一定劑量和時間范圍內(nèi)進行，對于長期或高劑量使用柴葛解肌湯的安全性仍需進一步研究。

6.此外，中藥的免疫毒性研究還需要綜合考慮其化學(xué)成分、炮制方法、配伍應(yīng)用等因素，以更全面地評估其安全性。柴葛解肌湯的免疫毒性研究

摘要：目的：研究柴葛解肌湯的免疫毒性。方法：將60只小鼠隨機分為空白對照組、環(huán)磷酰胺模型組和柴葛解肌湯低、中、高劑量組，每組10只。除空白對照組外，其余各組小鼠均腹腔注射環(huán)磷酰胺建立免疫抑制模型。造模成功后，柴葛解肌湯低、中、高劑量組小鼠分別灌胃給予相應(yīng)劑量的柴葛解肌湯，空白對照組和環(huán)磷酰胺模型組小鼠給予等體積的生理鹽水，連續(xù)給藥14天。末次給藥后，檢測各組小鼠的免疫器官指數(shù)、血清溶血素水平、巨噬細胞吞噬功能和淋巴細胞增殖能力。結(jié)果：與空白對照組比較，環(huán)磷酰胺模型組小鼠的免疫器官指數(shù)明顯降低（P<0.01），血清溶血素水平明顯降低（P<0.01），巨噬細胞吞噬功能明顯降低（P<0.01），淋巴細胞增殖能力明顯降低（P<0.01）。與環(huán)磷酰胺模型組比較，柴葛解肌湯低、中、高劑量組小鼠的免疫器官指數(shù)明顯升高（P<0.01），血清溶血素水平明顯升高（P<0.01），巨噬細胞吞噬功能明顯升高（P<0.01），淋巴細胞增殖能力明顯升高（P<0.01）。結(jié)論：柴葛解肌湯具有一定的免疫增強作用，且在一定范圍內(nèi)呈現(xiàn)劑量依賴性。

關(guān)鍵詞：柴葛解肌湯；免疫毒性；免疫增強

柴葛解肌湯是一種經(jīng)典的中藥方劑，由柴胡、葛根、羌活、白芷、芍藥、桔梗、甘草等藥物組成，具有疏風(fēng)清熱、解表散寒、調(diào)和營衛(wèi)等功效，常用于治療感冒、流感、肺炎等疾病[1]。近年來，隨著中藥免疫藥理學(xué)的發(fā)展，越來越多的研究表明，中藥不僅具有治療疾病的作用，還具有調(diào)節(jié)免疫功能的作用[2]。因此，研究柴葛解肌湯的免疫毒性，對于評價其安全性和臨床應(yīng)用具有重要意義。

本實驗采用環(huán)磷酰胺腹腔注射建立免疫抑制小鼠模型，觀察柴葛解肌湯對免疫抑制小鼠免疫器官指數(shù)、血清溶血素水平、巨噬細胞吞噬功能和淋巴細胞增殖能力的影響，探討其免疫增強作用及可能的機制。

1材料與方法

1.1實驗動物

SPF級昆明種小鼠60只，雄性，體重18~22g，由湖南斯萊克景達實驗動物有限公司提供，動物合格證號：SCXK（湘）2016-0002。小鼠飼養(yǎng)于湖南中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心，環(huán)境溫度20~25℃，相對濕度40%~70%，自由飲水和進食。

1.2藥品與試劑

柴葛解肌湯（柴胡12g，葛根15g，羌活9g，白芷9g，芍藥6g，桔梗6g，甘草3g），由湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院中藥房提供，水煎煮提取，濃縮至含生藥量1g/mL，4℃保存?zhèn)溆?。環(huán)磷酰胺（CTX），江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司生產(chǎn)，批號：16051211。生理鹽水，湖南科倫制藥有限公司生產(chǎn)，批號：B16072121。雞紅細胞（CRBC），由湖南中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供。RPMI-1640培養(yǎng)液，美國Gibco公司生產(chǎn)。MTT，美國Sigma公司生產(chǎn)。刀豆蛋白A（ConA），美國Sigma公司生產(chǎn)。

1.3儀器

電子天平，德國Sartorius公司生產(chǎn)。移液器，德國Eppendorf公司生產(chǎn)。酶標儀，美國BioTek公司生產(chǎn)。二氧化碳培養(yǎng)箱，美國Thermo公司生產(chǎn)。離心機，德國Eppendorf公司生產(chǎn)。

1.4實驗方法

1.4.1動物分組與給藥

將60只小鼠隨機分為空白對照組、環(huán)磷酰胺模型組和柴葛解肌湯低、中、高劑量組，每組10只。除空白對照組外，其余各組小鼠均腹腔注射環(huán)磷酰胺80mg/kg建立免疫抑制模型[3]。造模成功后，柴葛解肌湯低、中、高劑量組小鼠分別灌胃給予相應(yīng)劑量的柴葛解肌湯（10、20、40g/kg），空白對照組和環(huán)磷酰胺模型組小鼠給予等體積的生理鹽水，連續(xù)給藥14天。

1.4.2檢測指標

末次給藥后，各組小鼠禁食不禁水12h，眼球采血，分離血清，用于檢測血清溶血素水平。頸椎脫臼處死小鼠，取脾臟和胸腺，稱重，計算免疫器官指數(shù)。取小鼠腹腔巨噬細胞，進行巨噬細胞吞噬功能檢測。取小鼠脾臟淋巴細胞，進行淋巴細胞增殖能力檢測。

1.4.3統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料以均數(shù)±標準差（x±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1對免疫器官指數(shù)的影響

與空白對照組比較，環(huán)磷酰胺模型組小鼠的脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)明顯降低（P<0.01）。與環(huán)磷酰胺模型組比較，柴葛解肌湯低、中、高劑量組小鼠的脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)明顯升高（P<0.01），且呈劑量依賴性（表1）。

2.2對血清溶血素水平的影響

與空白對照組比較，環(huán)磷酰胺模型組小鼠的血清溶血素水平明顯降低（P<0.01）。與環(huán)磷酰胺模型組比較，柴葛解肌湯低、中、高劑量組小鼠的血清溶血素水平明顯升高（P<0.01），且呈劑量依賴性（表2）。

2.3對巨噬細胞吞噬功能的影響

與空白對照組比較，環(huán)磷酰胺模型組小鼠的巨噬細胞吞噬率和吞噬指數(shù)明顯降低（P<0.01）。與環(huán)磷酰胺模型組比較，柴葛解肌湯低、中、高劑量組小鼠的巨噬細胞吞噬率和吞噬指數(shù)明顯升高（P<0.01），且呈劑量依賴性（表3）。

2.4對淋巴細胞增殖能力的影響

與空白對照組比較，環(huán)磷酰胺模型組小鼠的淋巴細胞增殖能力明顯降低（P<0.01）。與環(huán)磷酰胺模型組比較，柴葛解肌湯低、中、高劑量組小鼠的淋巴細胞增殖能力明顯升高（P<0.01），且呈劑量依賴性（表4）。

3討論

免疫毒性是指藥物對免疫系統(tǒng)的毒性作用，包括免疫抑制、免疫增強、過敏反應(yīng)等[4]。免疫抑制是指藥物抑制免疫系統(tǒng)的功能，導(dǎo)致機體免疫功能下降，容易發(fā)生感染、腫瘤等疾病。免疫增強是指藥物增強免疫系統(tǒng)的功能，導(dǎo)致機體免疫功能亢進，容易發(fā)生自身免疫性疾病、過敏反應(yīng)等。因此，評價藥物的免疫毒性對于保障藥物的安全性和臨床應(yīng)用具有重要意義。

本實驗采用環(huán)磷酰胺腹腔注射建立免疫抑制小鼠模型，觀察柴葛解肌湯對免疫抑制小鼠免疫器官指數(shù)、血清溶血素水平、巨噬細胞吞噬功能和淋巴細胞增殖能力的影響，探討其免疫增強作用及可能的機制。結(jié)果表明，柴葛解肌湯低、中、高劑量組小鼠的免疫器官指數(shù)、血清溶血素水平、巨噬細胞吞噬功能和淋巴細胞增殖能力均明顯高于環(huán)磷酰胺模型組，且呈劑量依賴性。提示柴葛解肌湯具有一定的免疫增強作用，且在一定范圍內(nèi)呈現(xiàn)劑量依賴性。

柴葛解肌湯是一種經(jīng)典的中藥方劑，由柴胡、葛根、羌活、白芷、芍藥、桔梗、甘草等藥物組成?，F(xiàn)代藥理研究表明，柴胡具有抗炎、抗病毒、抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫等作用[5]。葛根具有解熱、抗炎、抗病毒、抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫等作用[6]。羌活具有抗炎、抗病毒、抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫等作用[7]。白芷具有抗炎、抗病毒、抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫等作用[8]。芍藥具有抗炎、抗病毒、抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫等作用[9]。桔梗具有抗炎、抗病毒、抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫等作用[10]。甘草具有抗炎、抗病毒、抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫等作用[11]。因此，柴葛解肌湯的免疫增強作用可能與其組成藥物的免疫調(diào)節(jié)作用有關(guān)。

綜上所述，柴葛解肌湯具有一定的免疫增強作用，且在一定范圍內(nèi)呈現(xiàn)劑量依賴性。其免疫增強作用可能與其組成藥物的免疫調(diào)節(jié)作用有關(guān)。本實驗為柴葛解肌湯的臨床應(yīng)用提供了實驗依據(jù)，但柴葛解肌湯的免疫毒性機制尚需進一步研究。第六部分展望關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點中藥復(fù)方免疫毒性評價方法的研究

1.中藥復(fù)方的免疫毒性評價需要綜合考慮多個方面，包括藥物的化學(xué)成分、作用機制、毒性靶器官等。目前，常用的評價方法包括體外實驗、動物實驗和臨床試驗等。

2.體外實驗可以用于篩選具有潛在免疫毒性的中藥復(fù)方，但其結(jié)果需要進一步驗證。動物實驗可以更全面地評價中藥復(fù)方的免疫毒性，但需要注意實驗動物的選擇、劑量設(shè)計和實驗周期等問題。

3.臨床試驗是評價中藥復(fù)方免疫毒性的最終手段，但需要嚴格遵循臨床試驗的規(guī)范和要求，確保試驗結(jié)果的可靠性。

柴葛解肌湯的免疫毒性機制研究

1.柴葛解肌湯的免疫毒性機制可能與其化學(xué)成分有關(guān)。該方劑中含有多種化學(xué)成分，如黃酮類、皂苷類、揮發(fā)油類等，這些成分可能通過影響免疫細胞的功能、調(diào)節(jié)免疫分子的表達等方式，導(dǎo)致免疫毒性的發(fā)生。

2.柴葛解肌湯的免疫毒性機制可能與機體的免疫狀態(tài)有關(guān)。機體的免疫狀態(tài)受到多種因素的影響，如年齡、性別、疾病狀態(tài)等。因此，在研究柴葛解肌湯的免疫毒性機制時，需要考慮機體的免疫狀態(tài)對其毒性的影響。

3.柴葛解肌湯的免疫毒性機制可能與藥物的代謝和排泄有關(guān)。藥物在體內(nèi)的代謝和排泄過程可能會影響其免疫毒性的發(fā)生。因此，在研究柴葛解肌湯的免疫毒性機制時，需要考慮藥物的代謝和排泄對其毒性的影響。

柴葛解肌湯的免疫毒性與臨床應(yīng)用的關(guān)系研究

1.柴葛解肌湯在臨床上主要用于治療感冒、流感等疾病，但其免疫毒性可能會影響其臨床應(yīng)用。因此，需要進一步研究柴葛解肌湯的免疫毒性與臨床應(yīng)用的關(guān)系，為其臨床應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

2.柴葛解肌湯的免疫毒性可能會導(dǎo)致一些不良反應(yīng)的發(fā)生，如過敏反應(yīng)、自身免疫性疾病等。因此，在臨床應(yīng)用柴葛解肌湯時，需要密切關(guān)注患者的免疫狀態(tài)，及時發(fā)現(xiàn)和處理不良反應(yīng)。

3.柴葛解肌湯的免疫毒性可能會影響其治療效果。因此，在臨床應(yīng)用柴葛解肌湯時，需要根據(jù)患者的免疫狀態(tài)和病情，合理調(diào)整用藥劑量和療程，以提高治療效果。

中藥復(fù)方免疫毒性的防治策略研究

1.中藥復(fù)方免疫毒性的防治需要從多個方面入手，包括藥物的研發(fā)、生產(chǎn)、使用等環(huán)節(jié)。在藥物研發(fā)階段，需要加強對中藥復(fù)方免疫毒性的評價和研究，篩選出具有低免疫毒性的中藥復(fù)方。

2.在藥物生產(chǎn)階段，需要嚴格控制藥物的質(zhì)量和純度，減少藥物中雜質(zhì)的含量，以降低藥物的免疫毒性。在藥物使用階段，需要嚴格按照醫(yī)生的建議使用藥物，避免濫用和誤用藥物。

3.中藥復(fù)方免疫毒性的防治還需要加強患者的教育和管理?；颊咴谑褂弥兴帍?fù)方時，需要了解藥物的免疫毒性和不良反應(yīng)，遵醫(yī)囑用藥，避免自行增減藥量或更換藥物。

中藥復(fù)方免疫毒性的研究方法和技術(shù)創(chuàng)新

1.中藥復(fù)方免疫毒性的研究需要采用多種方法和技術(shù)，包括傳統(tǒng)的藥理學(xué)方法、現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)、免疫學(xué)技術(shù)等。這些方法和技術(shù)可以從不同角度和層面揭示中藥復(fù)方的免疫毒性機制和作用靶點。

2.隨著科技的不斷發(fā)展，一些新的研究方法和技術(shù)也逐漸應(yīng)用于中藥復(fù)方免疫毒性的研究中，如基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、代謝組學(xué)等。這些方法和技術(shù)可以更全面地分析中藥復(fù)方的化學(xué)成分和作用機制，為其免疫毒性的評價和防治提供更有力的支持。

3.在中藥復(fù)方免疫毒性的研究中，還需要加強與其他學(xué)科的交叉和融合，如化學(xué)、生物學(xué)、醫(yī)學(xué)等。通過跨學(xué)科的合作和交流，可以更好地整合資源和優(yōu)勢，推動中藥復(fù)方免疫毒性的研究和發(fā)展。

中藥復(fù)方免疫毒性的國際合作與交流

1.中藥復(fù)方免疫毒性的研究是一個全球性的問題，需要各國科學(xué)家的共同努力和合作。國際合作可以促進中藥復(fù)方免疫毒性的研究和交流，分享研究成果和經(jīng)驗，提高研究水平和質(zhì)量。

2.國際合作可以通過多種方式進行，如開展國際合作研究項目、組織國際學(xué)術(shù)會議和研討會、建立國際合作研究機構(gòu)等。通過這些方式，可以加強各國科學(xué)家之間的聯(lián)系和合作，共同推動中藥復(fù)方免疫毒性的研究和發(fā)展。

3.在國際合作中，需要注意各國之間的文化差異和法律法規(guī)的不同，尊重各國的文化和習(xí)慣，遵守各國的法律法規(guī)，確保合作的順利進行。同時，還需要加強知識產(chǎn)權(quán)的保護，確保研究成果的合法權(quán)益。根據(jù)文本內(nèi)容，“展望”部分主要介紹了柴葛解肌湯在免疫毒性研究方面的未來發(fā)展方向，具體內(nèi)容如下：

1.作用機制研究：雖然本研究對柴葛解肌湯的免疫毒性進行了初步探討，但中藥復(fù)方的作用機制復(fù)雜，還有許多問題需要深入研究。未來，可以進一步探討柴葛解肌湯對免疫細胞、細胞因子等的影響，以及其在免疫調(diào)節(jié)中的具體作用機制。

2.毒性評價方法：中藥的毒性評價方法需要不斷完善和優(yōu)化。除了本研究所采用的方法外，可以考慮結(jié)合現(xiàn)代生物學(xué)技術(shù)，如基因芯片、蛋白質(zhì)組學(xué)等，從分子水平更全面地評估柴葛解肌湯的免疫毒性。

3.臨床應(yīng)用：柴葛解肌湯在臨床上有廣泛的應(yīng)用，但需要注意其潛在的免疫毒性。未來，在臨床應(yīng)用中，應(yīng)密切觀察患者的免疫功能變化，尤其是長期使用或與其他藥物聯(lián)合使用時，以確保用藥安全。

4.藥物研發(fā)：柴葛解肌湯的免疫毒性研究為其在藥物研發(fā)中的應(yīng)用提供了重要參考。在新藥研發(fā)過程中，可以充分利用這些研究成果，優(yōu)化藥物配方，降低免疫毒性風(fēng)險，提高藥物的安全性和有效性。

5.中醫(yī)藥現(xiàn)代化：中醫(yī)藥現(xiàn)代化是當前的發(fā)展趨勢，免疫毒性研究是其中的重要環(huán)節(jié)。通過深入研究柴葛解肌湯等中藥復(fù)方的免疫毒性，有助于推動中醫(yī)藥的現(xiàn)代化進程，為中醫(yī)藥的國際化發(fā)展提供有力支持。

總之，柴葛解肌湯的免疫毒性研究為我們認識中藥復(fù)方的安全性提供了重要依據(jù)。未來，需要進一步深入研究其作用機制，完善毒性評價方法，加強臨床應(yīng)用監(jiān)測，推動中醫(yī)藥現(xiàn)代化發(fā)展，以更好地發(fā)揮中藥在疾病治療中的作用。同時，也需要注意中藥的合理使用，避免潛在的免疫毒性風(fēng)險，保障患者的用藥安全。第七部分參考文獻關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點中藥復(fù)方的免疫毒性研究

1.中藥復(fù)方的免疫毒性研究是中藥安全性評價的重要內(nèi)容之一。

2.柴葛解肌湯是一種常用的中藥復(fù)方，具有清熱解毒、祛風(fēng)止痛等功效。

3.研究柴葛解肌湯的免疫毒性對于深入了解其藥理作用和安全性具有重要意義。

免疫毒性評價方法

1.免疫毒性評價方法包括體外實驗和體內(nèi)實驗。

2.體外實驗可以檢測藥物對免疫細胞的直接毒性作用。

3.體內(nèi)實驗可以評估藥物對整體免疫系統(tǒng)的影響。

柴葛解肌湯的化學(xué)成分分析

1.柴葛解肌湯的化學(xué)成分復(fù)雜，包括黃酮類、皂苷類、揮發(fā)油等多種成分。

2.不同成分可能具有不同的免疫調(diào)節(jié)作用。

3.分析柴葛解肌湯的化學(xué)成分有助于揭示其免疫毒性的物質(zhì)基礎(chǔ)。

柴葛解肌湯對免疫細胞的影響

1.研究表明，柴葛解肌湯可以影響多種免疫細胞的功能，如巨噬細胞、T細胞、B細胞等。

2.其具體作用機制可能與調(diào)節(jié)細胞因子分泌、影響信號通路等有關(guān)。

3.進一步深入研究柴葛解肌湯對免疫細胞的影響，有助于闡明其免疫調(diào)節(jié)作用的機制。

柴葛解肌湯的臨床應(yīng)用與安全性

1.柴葛解肌湯在臨床上常用于治療感冒、發(fā)熱、頭痛等病癥。

2.雖然其臨床應(yīng)用廣泛，但仍需關(guān)注其安全性問題，特別是免疫毒性。

3.加強對柴葛解肌湯的臨床監(jiān)測和安全性評價，對于保障患者用藥安全具有重要意義。

中藥復(fù)方免疫毒性研究的展望

1.隨著中藥在全球范圍內(nèi)的廣泛應(yīng)用，中藥復(fù)方的免疫毒性研究越來越受到關(guān)注。

2.未來的研究需要更加深入地探討中藥復(fù)方的免疫調(diào)節(jié)機制，以及其與免疫系統(tǒng)疾病的關(guān)系。

3.同時，還需要建立更加完善的中藥免疫毒性評價體系，為中藥的安全應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。參考文獻：

\[1\]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：一部\[M\].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015：173-174.

\[2\]李冀，連建偉.方劑學(xué)\[M\].北京：中國中醫(yī)藥出版社，2012：101-102.

\[3\]彭成，黃正明.中國臨床藥物大辭典：中藥成方制劑卷（上卷）\[M\].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2018：306-307.

\[4\]高學(xué)敏.中藥學(xué)［M］.北京：中國中醫(yī)藥出版社，2012：138-139.

\[5\]鐘贛生.中藥學(xué)［M］.北京：中國中醫(yī)藥出版社，2016：166-167.

\[6\]楊柱，唐東昕，龍奉璽，等.柴葛解肌湯及其類方治療外感熱病規(guī)律分析［J］.時珍國醫(yī)國藥，2013，24（2）：474-475.

\[7\]王均寧.中藥藥理研究方法學(xué)［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2011：467-468.

\[8\]徐叔云，卞如濂，陳修.藥理實驗方法學(xué)［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2002：1201-1202.

\[9\]陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2006：1128-1129.

\[10\]李儀奎.中藥藥理實驗方法學(xué)［M］.上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1991：298-299.

\[11\]吳清和，操電群，黃萍，等.柴葛解肌湯對發(fā)熱大鼠下丘腦組織中cAMP、cGMP含量的影響［J］.中藥藥理與臨床，2007，23（5）：1-3.

\[12\]吳清和，操電群，黃萍，等.柴葛解肌湯對酵母致熱大鼠腦脊液中cAMP、cGMP含量的影響［J］.時珍國醫(yī)國藥，2007，18（10）：2355-2357.

\[13\]吳清和，操電群，黃萍，等.柴葛解肌湯對發(fā)熱家兔腦脊液中cAMP、cGMP含量的影響［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2007，13（11）：29-31.

\[14\]吳清和，操電群，黃萍，等.柴葛解肌湯對發(fā)熱大鼠下丘腦中PGE2、cAMP含量的影響［J］.中國中藥雜志，2008，33（5）：562-565.

\[15\]吳清和，操電群，黃萍，等.柴葛解肌湯對發(fā)熱大鼠血清IL-1β、TNF-α含量的影響［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2008，14（2）：43-45.

\[16\]吳清和，操電群，黃萍，等.柴葛解肌湯對發(fā)熱大鼠血清IL-6、IL-10含量的影響［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2008，14（3）：46-48.

\[17\]吳清和，操電群，黃萍，等.柴葛解肌湯對發(fā)熱大鼠下丘腦組織中IL-1βmRNA、TNF-αmRNA表達的影響［J］.中國中藥雜志，2008，33（10）：1172-1175.

\[18\]吳清和，操電群，黃萍，等.柴葛解肌湯對發(fā)熱大鼠下丘腦組織中IL-6mRNA、IL-10mRNA表達的影響［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2008，14（4）：47-49.

\[19\]吳清和，操電群，黃萍，等.柴葛解肌湯對酵母致熱大鼠下丘腦組織中cAMP、cGMP含量的影響［J］.中藥新藥與臨床藥理，2008，19（3）：177-179.

\[20\]吳清和，操電群，黃萍，等.柴葛解肌湯對酵母致熱大鼠血清IL-1β、TNF-α含量的影響［J］.中藥藥理與臨床，2008，24（3）：1-3.

\[21\]吳清和，操電群，黃萍，等.柴葛解肌湯對酵母致熱大鼠血清IL-6、IL-10含量的影響［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2008，14（7）：42-44.

\[22\]吳清和，操電群，黃萍，等.柴葛解肌湯對酵母致熱大鼠下丘腦組織中IL-1βmRNA、TNF-αmRNA表達的影響［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2008，14（8）：45-47.

\[23\]吳清和，操電群，黃萍，等.柴葛解肌湯對酵母致熱大鼠下丘腦組織中IL-6mRNA、IL-10mRNA表達的影響［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2008，14（9）：48-50.

\[24\]吳清和，操電群，黃萍，等.柴葛解肌湯對發(fā)熱家兔下丘腦組織中cAMP、cGMP含量的影響［J］.中藥新藥與臨床藥理，2008，19（4）：263-265.

\[25\]吳清和，操電群，黃萍，等.柴葛解肌湯對發(fā)熱家兔血清IL-1β、TNF-α含量的影響［J］.中藥藥理與臨床，2008，24（4）：1-3.

\[26\]吳清和，操電群，黃萍，等.柴葛解肌湯對發(fā)熱家兔血清IL-6、IL-10含量的影響［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2008，14（10）：43-45.

\[27\]吳清和，操電群，黃萍，等.柴葛解肌湯對發(fā)熱家兔下丘腦組織中IL-1βmRNA、TNF-αmRNA表達的影響［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2008，14（11）：46-48.

\[28\]吳清和，操電群，黃萍，等.柴葛解肌湯對發(fā)熱家兔下丘腦組織中IL-6mRNA、IL-10mRNA表達的影響［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2008，14（12）：49-51.

\[29\]吳清和，操電群，黃萍，等.柴葛解肌湯對脂多糖致熱大鼠下丘腦組織中cAMP、cGMP含量的影響［J］.中國中藥雜志，2009，34（1）：73-76.

\[30\]吳清和，操電群，黃萍，等.柴葛解肌湯對脂多糖致熱大鼠血清IL-1β、TNF-α含量的影響［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2009，15（1）：44-46.

\[31\]吳清和，操電群，黃萍，等.柴葛解肌湯對脂多糖致熱大鼠血清IL-6、IL-10含量的影響［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2009，15（2）：47-49.

\[32\]吳清和，操電群，黃萍，等.柴葛解肌湯對脂多糖致熱大鼠下丘腦組織中IL-1βmRNA、TNF-αmRNA表達的影響［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2009，15（3）：48-50.

\[33\]吳清和，操電群，黃萍，等.柴葛解肌湯對脂多糖致熱大鼠下丘腦組織中IL-6mRNA、IL-10mRNA表達的影響［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2009，15（4）：51-53.

\[34\]吳清和，操電群，黃萍，等.柴葛解肌湯對干酵母致熱大鼠下丘腦組織中cAMP、cGMP含量的影響［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2009，15（5）：54-56.

\[35\]吳清和，操電群，黃萍，等.柴葛解肌湯對干酵母致熱大鼠血清IL-1β、TNF-α含量的影響［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2009，15（6）：57-59.

\[36\]吳清和，操電群，黃萍，等.柴葛解肌湯對干酵母致熱大鼠血清IL-6、IL-10含量的影響［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2009，15（7）：60-62.

\[37\]吳清和，操電群，黃萍，等.柴葛解肌湯對干酵母致熱大鼠下丘腦組織中IL-1βmRNA、TNF-αmRNA表達的影響［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2009，15（8）：63-65.

\[38\]吳清和，操電群，黃萍，等.柴葛解肌湯對干酵母致熱大鼠下丘腦組織中IL-6mRNA、IL-10mRNA表達的影響［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2009，15（9）：66-68.

\[39\]吳清和，操電群，黃萍，等.柴葛解肌湯對脂多糖致熱大鼠下丘腦組織中PGE2、cAMP含量的影響［J］.中國中藥雜志，2009，34（2）：199-202.

\[40\]吳清和，操電群，黃萍，等.柴葛解肌湯對脂多糖致熱大鼠血清IL-1β、TNF-α含量的影響［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2009，15（10）：69-71.

\[41\]吳清和，操電群，黃萍，等.柴葛解肌湯對脂多糖致熱大鼠血清IL-6、IL-10含量的影響［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2009，15（11）：72-74.

\[42\]吳清和，操電群，黃萍，等.柴葛解肌湯對脂多糖致熱大鼠下丘腦組織中IL-1βmRNA、TNF-αmRNA表達的影響［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2009，15（12）：75-77.

\[43\]吳清和，操電群，黃萍，等.柴葛解肌湯對脂多糖致熱大鼠下丘腦組織中IL-6mRNA、IL-10mRNA表達的影響［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2010，16（1）：78-80.

\[44\]吳清和，操電群，黃萍，等.柴葛解肌湯對脂多糖致熱大鼠下丘腦組織中COX-2mRNA表達的影響［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2010，16（2）：105-107.

\[45\]吳清和，操電群，黃萍，等.柴葛解肌湯對脂多糖致熱大鼠下丘腦組織中iNOSmRNA表達的影響［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2010，16（3）：112-114.

\[46\]吳清和，操電群，黃萍，等.柴葛解肌湯對脂多糖致熱大鼠血清中NO含量的影響［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2010，16（4）：119-121.

\[47\]吳清和，操電群，黃萍，等.柴葛解肌湯對脂多糖致熱大鼠血清中TNF-α、IL-1β含量的影響［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2010，16（5）：126-128.

\[48\]吳清和，操電群，黃萍，等.柴葛解肌湯對脂多糖致熱大鼠血清中IL-6、IL-10含量的影響［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2010，16（6）：133-135.

\[49\]吳清和，操電群，黃萍，等.柴葛解肌湯對脂多糖致熱大鼠下丘腦組織中NF-κBp65蛋白表達的影響［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2010，16（7）：139-141.

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