化妝品中羥基癸酸的檢驗方法

附件4化妝品中羥基癸酸的檢驗方法DeterminationofHydroxycapricAcidinCosmetics1范圍本方法規(guī)定了高效液相色譜法測定化妝品中羥基癸酸的含量。本方法適用于液體類、凝膠類、膏霜乳類化妝品中羥基癸酸含量的測定。2方法提要以甲醇提取化妝品中羥基癸酸，用高效液相色譜儀進行分離，二極管陣列檢測器檢測，以保留時間和紫外光譜圖定性，峰面積定量，以標準曲線法計算含量。本方法中羥基癸酸的檢出限為0.125μg、定量下限為0.375μg。取樣量為1.0g，定容體積為10mL時檢出濃度為250μg/g，最低定量濃度為750μg/g。3試劑和材料除另有規(guī)定外，本方法所用試劑均為分析純或以上規(guī)格，水為GB/T6682規(guī)定的一級水。3.1磷酸氫二銨。3.2磷酸，優(yōu)級純。3.3甲醇，色譜純。3.4乙腈，色譜純。3.5甲酸，色譜純。3.60.05mol/L的磷酸氫二銨溶液：稱取6.60g磷酸氫二銨（3.1），加水1000mL溶解，用0.22μm濾膜過濾。3.7標準品：羥基癸酸（英文名稱：Hydroxycapricacid，分子式：C10H20O3，CAS：5393-81-7），純度≥98%。3.8標準儲備溶液精密稱取羥基癸酸標準品（3.7）0.5g（精確到0.0001g）于10mL容量瓶中，加甲醇（3.3）溶解并定容至刻度，搖勻，配制成標準儲備溶液備用，轉(zhuǎn)入棕色儲液瓶中，4℃避光保存，有效期1個月。4儀器和設(shè)備4.1高效液相色譜儀，二極管陣列檢測器。4.2天平，感量分別為0.1mg、0.01mg。4.3超聲波清洗器，功率100W。4.4高速離心機，轉(zhuǎn)速≥14000r/min。4.5pH計，精度0.01。4.6渦旋振蕩器。5分析步驟5.1標準系列溶液的制備精密移取不同體積的標準儲備溶液（3.8），用甲醇（3.3）配制成濃度為0.125、0.25、0.5、1、2.5、5mg/mL的標準系列溶液。5.2樣品處理稱取混合均勻的樣品1.0g（精確到0.001g）于10mL具塞比色管中，加甲醇（3.3）至10mL刻度，充分渦旋混合30s，超聲提取30min，取適量樣品在10000r/min下高速離心15min，取上清液過0.45μm的濾膜，取續(xù)濾液作為待測溶液。5.3參考色譜條件色譜柱：C18柱（250mm×4.6mm，5μm），或等效色譜柱；流動相：甲醇+0.05mol/L的磷酸氫二銨溶液（3.6）[磷酸（3.2）調(diào)pH值為3.0]（70+30）；流速：1.0mL/min；檢測波長：214nm；柱溫：室溫；進樣量：5μL。5.4測定在“5.3”色譜條件下，取標準系列溶液（5.1）分別進樣，進行色譜分析，以標準系列溶液濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線。取“5.2”項下的待測溶液進樣，根據(jù)保留時間和紫外光譜圖定性，測得峰面積，根據(jù)標準曲線得到待測溶液中羥基癸酸的濃度。按“6”計算樣品中羥基癸酸的含量。6分析結(jié)果的表述6.1計算式中：ω——樣品中羥基癸酸的質(zhì)量分數(shù)，μg/g；ρ——從標準曲線得到待測原料的質(zhì)量濃度，mg/mL；V——樣品定容體積，mL；m——樣品取樣量，g；D——稀釋倍數(shù)（不稀釋則取1）。在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測試結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的10%。6.2回收率和精密度方法回收率為85%~115%，相對標準偏差小于10%。7圖譜圖1羥基癸酸標準溶液色譜圖附錄A（規(guī)范性附錄）羥基癸酸陽性結(jié)果的確證因羥基癸酸極性大，紫外吸收接近截止波長，測定時易出現(xiàn)干擾，必要時可采用液相色譜－質(zhì)譜法確證結(jié)果，以排除基質(zhì)中其他組分的干擾。在相同的液相色譜－質(zhì)譜實驗條件下，如果樣品中色譜峰的保留時間和紫外光譜圖與標準溶液中對應(yīng)成分一致（相對偏差在±2.5%之內(nèi)），所選擇的監(jiān)測離子對的相對豐度比與相當(dāng)濃度標準溶液的離子對的相對豐度比的偏差不超過表A.1規(guī)定范圍，則可以判定樣品中存在對應(yīng)的測定成分。表A.1結(jié)果確證時相對離子豐度比的最大允許偏差相對離子豐度（k）k＞50%50%≥k＞20%20%≥k＞10%k≤10%允許的最大偏差±20%±25%±30%±50%A.1儀器參考條件A.1.1色譜條件色譜柱：C18柱（100mm×2.1mm，1.8μm），或等效色譜柱；流動相：A：乙腈（含0.1%甲酸）；B：0.1%甲酸水溶液；表A.2流動相梯度洗脫程序時間/minV（流動相A）/%V（流動相B）/%0010040100159551795517.10100220100流速：0.2mL/min；柱溫：30℃；進樣量：5μL。A.1.2質(zhì)譜條件離子源：電噴霧離子源（ESI源）；監(jiān)測模式：負離子多反應(yīng)監(jiān)測模式；監(jiān)測離子對及相關(guān)電壓參數(shù)設(shè)定見表A.3；鞘氣流速：11L/min；干燥氣流速：14L/min；鞘氣溫度：350℃；干燥氣溫度：230℃；碰撞氣：Ar，20psi；離子源電壓（IS）電壓：負離子：3000V。表A.3羥基