化妝品中羥基癸酸的檢驗方法

附件4化妝品中羥基癸酸的檢驗方法DeterminationofHydroxycapricAcidinCosmetics1范圍本方法規(guī)定了高效液相色譜法測定化妝品中羥基癸酸的含量。本方法適用于液體類、凝膠類、膏霜乳類化妝品中羥基癸酸含量的測定。2方法提要以甲醇提取化妝品中羥基癸酸，用高效液相色譜儀進行分離，二極管陣列檢測器檢測，以保留時間和紫外光譜圖定性，峰面積定量，以標準曲線法計算含量。本方法中羥基癸酸的檢出限為0.125μg、定量下限為0.375μg。取樣量為1.0g，定容體積為10mL時檢出濃度為250μg/g，最低定量濃度為750μg/g。3試劑和材料除另有規(guī)定外，本方法所用試劑均為分析純或以上規(guī)格，水為GB/T6682規(guī)定的一級水。3.1磷酸氫二銨。3.2磷酸，優(yōu)級純。3.3甲醇，色譜純。3.4乙腈，色譜純。3.5甲酸，色譜純。3.60.05mol/L的磷酸氫二銨溶液：稱取6.60g磷酸氫二銨（3.1），加水1000mL溶解，用0.22μm濾膜過濾。3.7標準品：羥基癸酸（英文名稱：Hydroxycapricacid，分子式：C10H20O3，CAS：5393-81-7），純度≥98%。3.8標準儲備溶液精密稱取羥基癸酸標準品（3.7）0.5g（精確到0.0001g）于10mL容量瓶中，加甲醇（3.3）溶解并定容至刻度，搖勻，配制成標準儲備溶液備用，轉入棕色儲液瓶中，4℃避光保存，有效期1個月。4儀器和設備4.1高效液相色譜儀，二極管陣列檢測器。4.2天平，感量分別為0.1mg、0.01mg。4.3超聲波清洗器，功率100W。4.4高速離心機，轉速≥14000r/min。4.5pH計，精度0.01。4.6渦旋振蕩器。5分析步驟5.1標準系列溶液的制備精密移取不同體積的標準儲備溶液（3.8），用甲醇（3.3）配制成濃度為0.125、0.25、0.5、1、2.5、5mg/mL的標準系列溶液。5.2樣品處理稱取混合均勻的樣品1.0g（精確到0.001g）于10mL具塞比色管中，加甲醇（3.3）至10mL刻度，充分渦旋混合30s，超聲提取30min，取適量樣品在10000r/min下高速離心15min，取上清液過0.45μm的濾膜，取續(xù)濾液作為待測溶液。5.3參考色譜條件色譜柱：C18柱（250mm×4.6mm，5μm），或等效色譜柱；流動相：甲醇+0.05mol/L的磷酸氫二銨溶液（3.6）[磷酸（3.2）調pH值為3.0]（70+30）；流速：1.0mL/min；檢測波長：214nm；柱溫：室溫；進樣量：5μL。5.4測定在“5.3”色譜條件下，取標準系列溶液（5.1）分別進樣，進行色譜分析，以標準系列溶液濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線。取“5.2”項下的待測溶液進樣，根據(jù)保留時間和紫外光譜圖定性，測得峰面積，根據(jù)標準曲線得到待測溶液中羥基癸酸的濃度。按“6”計算樣品中羥基癸酸的含量。6分析結果的表述6.1計算式中：ω——樣品中羥基癸酸的質量分數(shù)，μg/g；ρ——從標準曲線得到待測原料的質量濃度，mg/mL；V——樣品定容體積，mL；m——樣品取樣量，g；D——稀釋倍數(shù)（不稀釋則取1）。在重復性條件下獲得的兩次獨立測試結果的絕對差值不得超過算術平均值的10%。6.2回收率和精密度方法回收率為85%~115%，相對標準偏差小于10%。7圖譜圖1羥基癸酸標準溶液色譜圖附錄A（規(guī)范性附錄）羥基癸酸陽性結果的確證因羥基癸酸極性大，紫外吸收接近截止波長，測定時易出現(xiàn)干擾，必要時可采用液相色譜－質譜法確證結果，以排除基質中其他組分的干擾。在相同的液相色譜－質譜實驗條件下，如果樣品中色譜峰的保留時間和紫外光譜圖與標準溶液中對應成分一致（相對偏差在±2.5%之內），所選擇的監(jiān)測離子對的相對豐度比與相當濃度標準溶液的離子對的相對豐度比的偏差不超過表A.1規(guī)定范圍，則可以判定樣品中存在對應的測定成分。表A.1結果確證時相對離子豐度比的最大允許偏差相對離子豐度（k）k＞50%50%≥k＞20%20%≥k＞10%k≤10%允許的最大偏差±20%±25%±30%±50%A.1儀器參考條件A.1.1色譜條件色譜柱：C18柱（100mm×2.1mm，1.8μm），或等效色譜柱；流動相：A：乙腈（含0.1%甲酸）；B：0.1%甲酸水溶液；表A.2流動相梯度洗脫程序時間/minV（流動相A）/%V（流動相B）/%0010040100159551795517.10100220100流速：0.2mL/min；柱溫：30℃；進樣量：5μL。A.1.2質譜條件離子源：電噴霧離子源（ESI源）；監(jiān)測模式：負離子多反應監(jiān)測模式；監(jiān)測離子對及相關電壓參數(shù)設定見表A.3；鞘氣流速：11L/min；干燥氣流速：14L/min；鞘氣溫度：350℃；干燥氣溫度：230℃；碰撞氣：Ar，20psi；離子源電壓（IS）電壓：負離子：3000V。表A.3羥基