脫落細胞學(xué)檢驗（臨床檢驗課件）

細胞病理學(xué)檢驗技術(shù)任務(wù)一脫落細胞形態(tài)識別概念脫落細胞學(xué)（exfoliativecytology）是采集人體各部位，特別是管腔器官表面的脫落細胞，經(jīng)染色后用顯微鏡觀察這些細胞的形態(tài)，并作出診斷的一門臨床檢驗學(xué)科，又名診斷細胞學(xué)或臨床細胞學(xué)。脫落細胞學(xué)歷史

1928年，Papaniculaou首先提出用細胞學(xué)方法可以診斷腫瘤。1943年以后細胞學(xué)方法才逐漸得以推廣。1970年以后已成常規(guī)。并開展細針吸取細胞學(xué)。近年來，有全自動化的液基細胞學(xué)涂片和電腦自動閱片從而提高了診斷率。脫落細胞學(xué)診斷的優(yōu)勢1.安全，病人痛苦少，無不良反應(yīng)可多次重復(fù)取材；2.所需設(shè)備簡單，操作方便，可用于普查；3.癌細胞檢出率較高，一般在60%以上；4.采集的細胞代表范圍較大。脫落細胞學(xué)診斷的不足

1.有一定的誤診率，有10-40%假陰性（惡性診斷為良性）和1-3%的假陽性（良性診斷為惡性）。2.往往不能確定腫瘤的具體部位，需結(jié)合活檢或X線等確診。3.有時不易對癌細胞做出明確組織分型。脫落細胞采集方法

1．自然排出物：體表體腔及各組織器官表面脫落的細胞均是2．體腔抽出液：胸腹腔積液等3．細針穿刺吸取液：囊腫等的抽取液正常脫落細胞形態(tài)1炎癥增生脫落細胞形態(tài)2CONTENTS

腫瘤脫落細胞形態(tài)3標本采集與涂片制作4顯微鏡檢查5脫落細胞學(xué)檢查的

臨床應(yīng)用評價6正常脫落細胞形態(tài)01正常脫落的上皮細胞復(fù)層扁平上皮01基底層細胞：內(nèi)底層細胞：1︰0.5-1外底層細胞：1︰1-203表層細胞角化前細胞：1︰3-5不全角化細胞：1︰5以上完全角化細胞：衰亡細胞02中層細胞1︰2-3

中底層細胞（HE）

外底層細胞（巴氏）

表層角化前細胞（巴氏）

表層完全角化細胞（HE）規(guī)律1.細胞體積由小到大2.胞核由大到小，最后消失3.核染色質(zhì)由細致均勻到粗糙固縮4.核質(zhì)比由大到小5.胞質(zhì)量由少到多復(fù)層扁平上皮01基底層細胞：內(nèi)底層細胞：1︰0.5-1外底層細胞：1︰1-203表層細胞角化前細胞：1︰3-5不全角化細胞：1︰5以上完全角化細胞：衰亡細胞02中層細胞1︰2-3柱狀上皮01纖毛柱狀上皮細胞：03儲備細胞：02粘液柱狀上皮細胞：粘液柱狀上皮細胞

纖毛柱狀上皮細胞及增生的形態(tài)01成團脫落的鱗狀上皮基層細胞呈相嵌鋪磚狀02成團脫落的纖毛柱狀上皮細胞常呈融合狀03成團脫落的粘液柱狀上皮細胞常呈蜂窩狀脫落的上皮細胞團形態(tài)特點02脫落上皮細胞的退化變性01自然退變02涂片固定不及時。細胞從器官內(nèi)粘膜表面脫落后，由于中斷血液供應(yīng)，缺乏氧氣和養(yǎng)料，以及加上粘膜表面酶作用，很快發(fā)生變性直至壞死，稱退化變性。常見于以下幾種情況03固定不佳04有人為擠壓01腫脹性退變：多見于急性炎癥02固縮性退變脫落細胞退變分為腫脹性退變和固縮性退變兩類：與細胞器和染色質(zhì)脫水有關(guān)，表現(xiàn)：整個細胞變小，固縮變形。胞質(zhì)染成紅色。胞核染色質(zhì)致密呈深藍色，胞核與胞質(zhì)之間形成空隙，稱核周暈。最后胞核破裂成碎片或溶解為淡雜的核陰影，稱影細胞03非上皮細胞成分

涂片中脫落的非上皮細胞成分又稱背景成分。包括血細胞（紅細胞和各種炎細胞）、粘液、壞死物及異物等。炎癥增生脫落細胞形態(tài)01炎癥時脫落細胞的一般形態(tài)特征上皮細胞的一般形態(tài)變化上皮細胞增生、再生、化生時的脫落細胞形態(tài)各類型炎癥的脫落細胞特征上皮細胞的一般形態(tài)變化急性炎癥時，上皮細胞主要表現(xiàn)為退化變性和壞死。慢性炎癥時則主要表現(xiàn)增生、再生和化生、并有不同程度的退化變性。01細胞核：核肥大、核固縮、核碎裂02細胞形態(tài)：發(fā)生明顯變異，如呈蝌蚪狀、梭形、星形或不規(guī)則形鱗狀上皮細胞

炎癥時鱗狀上皮細胞改變（巴氏）炎癥時，纖毛柱狀上皮細胞改變較明顯，?？沙膳懦善撀?，細胞以固縮退變?yōu)橹?。黃色：膿性精液，見于前列腺炎或精囊炎柱狀上皮細胞病毒感染上皮細胞增生、再生、化生時的脫落細胞形態(tài)增生（hyperplasia）上皮細胞增生共同特點

鱗狀上皮細胞增生①核增大，可見核仁；②胞質(zhì)嗜堿性；③核與胞質(zhì)比例略大；④核分裂活躍，可見雙核、多核。纖毛柱狀上皮細胞的增生鱗狀上皮增生

柱狀上皮增生再生參考值再生細胞核增大，染色深，見染色質(zhì)結(jié)塊，核仁增大增多，或見有絲分裂。胞質(zhì)略嗜堿性。還可見增生活躍的基底層細胞定義：一種分化成熟轉(zhuǎn)變?yōu)榱硪环N分化成熟的細胞過程。柱狀上皮的儲備細胞增生，逐漸呈多邊形，胞質(zhì)豐富的鱗狀上皮細胞分化再生和化生各類型炎癥的脫落細胞特征涂片中除退變上皮細胞和壞死細胞碎屑外，尚見增生的上皮細胞，中性粒細胞、單核細胞、淋巴細胞及嗜酸粒細胞常同時存在亞急性炎癥02上皮細胞常有明顯退變，有較多壞死細胞碎屑、中性粒細胞和巨噬細胞。急性炎癥01各類型炎癥的脫落細胞特征由類上皮細胞、朗罕巨細胞和淋巴細胞以及干酪樣壞死組成肉芽腫性炎癥04涂片中較多成團的增生上皮細胞。炎癥細胞則以淋巴細胞或漿細胞為主。慢性炎癥03類上皮細胞朗罕巨細胞02核異質(zhì)和角化不良的脫落細胞形態(tài)1．輕度核異質(zhì)細胞：2．重度核異質(zhì)細胞：指脫落的細胞的核異常，表現(xiàn)為核的大小、形態(tài)及染色質(zhì)的分布異常，核邊增厚，核的邊界不整齊，細胞質(zhì)的質(zhì)和量的分化正常核異質(zhì)輕度核異質(zhì)細胞重度核異質(zhì)細胞1．輕度核異質(zhì)細胞：2．重度核異質(zhì)細胞：系指鱗狀上皮非角化層，即表面角化前細胞和中、底層細胞出現(xiàn)一些個別散在的胞質(zhì)內(nèi)角化細胞角化不良腫瘤脫落細胞形態(tài)腫瘤脫落細胞學(xué)主要是研究惡性腫瘤細胞的異型性，并以涂片中背景細胞作為對照比較，作出正確的判斷。01惡性腫瘤細胞的一般形態(tài)特征惡性腫瘤細胞核異型性表現(xiàn)01核增大，大小不等02核染色質(zhì)粗糙深染03核畸形04核與胞質(zhì)比例失常-增加06核仁增大數(shù)目增多07核分裂增多及病理性核分裂05瘤巨細胞和多核巨細胞08裸核

癌細胞的各種異型性惡性腫瘤細胞質(zhì)異型性表現(xiàn)胞質(zhì)豐富，有特征性分化物質(zhì)。高分化惡性腫瘤低分化惡性腫瘤惡性腫瘤細胞胞質(zhì)腫瘤細胞分化愈差，其胞質(zhì)愈少呈嗜酸堿性染色即紅中帶藍。高分化腺癌低分化腺癌低分化鱗癌惡性腫瘤細胞胞質(zhì)上皮細胞組織發(fā)生的惡性腫瘤可見成團脫落的癌細胞；間葉組織發(fā)生的惡性腫瘤，涂片中肉瘤細胞相對一致，散在分布癌細胞團腺癌惡性腫瘤涂片中常見較多壞死碎屑及紅細胞，尚可發(fā)現(xiàn)多少不等的中性粒細胞涂片中背景成分02常見癌細胞的形態(tài)特征鱗狀細胞癌分化較好的鱗癌細胞癌細胞胞漿呈多角形，內(nèi)有角化。常見下列特征性形態(tài)：①蝌蚪形；②纖維形；③癌珠。

分化差的鱗癌細胞涂片中只見相當于中層和底層的癌細胞，多為圓形或不規(guī)則形，散在或成團分布。細胞小，胞質(zhì)少。

蝌蚪形纖維形

腺

癌分化較好的腺癌細胞癌細胞體積較大，呈圓形、卵圓形，胞漿內(nèi)含分泌物，成排脫落者可呈不規(guī)則的柱狀分化差的腺癌細胞癌細胞體積較小，胞質(zhì)少，核嗜堿性染色。成團脫落的細胞使整個癌細胞團呈桑椹狀

食管腺癌細胞胃印戒癌細胞未分化癌1

大細胞型未分化癌2小細胞型未分化癌

03放射治療后的細胞形態(tài)改變放射治療的作用表現(xiàn)為分裂間期殺傷、絲狀分裂期延遲、抑制染色體畸變和基因改變等四方面。細胞形態(tài)改變表現(xiàn)為細胞核增大、空泡變性、核碎裂和核溶解

核增大核碎裂

細胞空泡變性細胞多形性良性上皮細胞的放射性損傷急性放射性改變（1）細胞體積增大（2）核邊增厚，核空泡變，核碎裂溶解。（3）形成多核或分葉核等畸形核上皮細胞持續(xù)性放射改變涂片中可發(fā)現(xiàn)核異質(zhì)細胞，呈纖維或蝌蚪形，胞核與胞質(zhì)比例仍在正常范圍或略大癌細胞的放療后改變o

癌細胞在放療后主要為持續(xù)性改變，表現(xiàn)為胞質(zhì)和胞核內(nèi)空泡形成，繼之出現(xiàn)胞質(zhì)同質(zhì)化，核碎裂和溶解放射敏感性、放療反應(yīng)和敏感反應(yīng)放射敏感性分化愈差，癌細胞的放射敏感性愈高：高度敏感者：精原細胞瘤、甲狀腺癌、惡性淋巴瘤、基底細胞癌等；中度敏感者：有鱗癌；低度敏感者：有各種腺癌；敏感度最差者：纖維肉瘤、骨肉瘤、惡性黑色素瘤等放療反應(yīng)放療反應(yīng)良好：放療以后若有放射后改變的細胞達75%以上者。放療反應(yīng)差：放療以后若有放射后改變的細胞在65%以下者?；颊邔Ψ暖熋舾校A(yù)后亦較好；患者對放療不敏感，預(yù)后較差。標本采集與涂片制作401標本采集直視采集法身體直視部位直接用刮片刮取、吸管吸取、刷洗、刷取等取細胞制片自然分泌液的采集法痰液涂片檢查：尿液涂片檢查：乳頭溢涂片檢查：前列腺液涂片檢查灌洗洗向空腔器官或腹腔、盆腔（剖腹探查時）灌注一定量生理鹽水沖洗，使其細胞成分脫落于液體中，收集灌洗液離心制片，作細胞學(xué)檢查

利用磨擦工具在病變部位磨擦，將擦取物直接涂片。常用磨擦工具有海棉磨擦器、線網(wǎng)套、氣囊等。可分別用于鼻咽部、食管和胃部病灶的取材.磨擦法當有胸腔、腹腔、心包腔及關(guān)節(jié)腔積液時，可用針穿抽吸部分積液作細胞學(xué)檢查。此外某些深部組織器官，如淋巴結(jié)、甲狀腺、軟組織、肝等亦可作細針穿刺吸取部分細胞進行涂片診斷針穿抽吸法02涂片制作方法Aoremipsumdolorsitamet準備工作Part101取材后盡快制片02避免擠壓以防止損傷細胞.涂片前準備工作03涂片要均勻，厚薄要適度

.04玻片要清潔

.05涂片前先在玻片上涂薄層粘附劑.06至少涂兩張玻片，以避免漏診07及時玻片編號

.Boremipsumdolorsitamet制備方法Part11推片法用推片用30度夾角將玻片上檢液輕輕向左推2涂抹法由玻片中心經(jīng)順時針方向外轉(zhuǎn)圈涂抹；或從玻片一端開始平行涂抹3壓拉涂片法將標本夾于橫豎交叉的兩張玻片之間，然后移動兩張玻片，使之重疊，再邊壓邊拉，獲得兩張涂片4吸管推片法5印片法將切取的病變組織用手術(shù)切開，立即將切面平放在玻片上，輕輕按印。此方法為活體組織檢查的輔助方法涂片制備方法（4）：（5）：（6）6噴射法涂片的固定是保持細胞自然形態(tài)，防止細胞自溶和細菌所致的腐敗固定的目的固定液能沉淀和凝固細胞內(nèi)蛋白質(zhì)和破壞細胞內(nèi)溶酶體酶，使細胞保持自然形態(tài)，結(jié)構(gòu)清晰，易于著色固定原理固定液、固定方法及固定時間細胞學(xué)檢查常用的固定液有下列三種：（1）乙醚酒精固定液：該固定液滲透明性較強，固定效果好，適用于于一般細胞學(xué)常規(guī)染色。（2）氯仿酒精固定液：又稱卡諾氏固定液。其優(yōu)點同上。（3）95%酒精固定液：適用于大規(guī)模防癌普查。制備簡單。但滲透作用稍差.固定液（1）帶濕固定：適用于巴氏或HE染色。痰液、陰道分泌物及食管拉網(wǎng)涂片等。（2）干燥固定：適用于稀薄標本如尿液、胃沖洗液等。固定方法一般為15-30min固定時間Coremipsumdolorsitamet染色Part1是借助于一種或多種染料，使組織和細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)分別著不同的染色染色的目的1染色的物理作用是利用毛細管現(xiàn)象，滲透、吸收和吸附作用，使染料的色素顆粒牢固地進入組織細胞，并使其顯色。染色的化學(xué)作用是滲入組織細胞的染料與其相應(yīng)的物質(zhì)起化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生有色的化合物。組織細胞染色原理2染色的目的及組織細胞染色原理01巴氏染色法本法染色特點是細胞具有多色性顏色，色彩鮮艷多彩0203蘇木精—伊紅（HE）染色法該方法染色透明度好，核與胞質(zhì)對比鮮明瑞特—吉姆薩染色法胞質(zhì)內(nèi)顆粒與核染色質(zhì)結(jié)構(gòu)顯示較清晰。染色方法顯微鏡檢查5檢查涂片前必須嚴格核對涂片編號LOREM1了解送檢單上填寫的全部資料LOREM2閱片要全面、認真、細心,由面到點觀察。LOREM3顯微鏡觀察時必須按順序視全張涂片，用推進器從左至右，自上而下移動LOREM4顯微鏡觀察方法錯誤正確根據(jù)細胞學(xué)檢查結(jié)果，直接寫出關(guān)于疾病的診斷直接法1將涂片中細胞學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)的細胞變化，用分級方式表示。它的優(yōu)點是能真實地反映細胞學(xué)所見。目前有三級、四級、和五級分級法3診斷報告方式三級四級Ⅰ級：陰性：無核異質(zhì)細胞，涂片中均為正常細胞或一般退變細胞。Ⅱ級：可疑。涂片中發(fā)現(xiàn)核異質(zhì)細胞，但不能肯定的是腫瘤細胞，應(yīng)重復(fù)送檢。Ⅲ級：陽性。涂片中發(fā)現(xiàn)典型癌細胞，有時根據(jù)癌細胞形態(tài)特征及分布，初步進行分類。將細胞學(xué)檢查結(jié)果分為陰性、核異質(zhì)，可疑和陽性四級。即見到什么描述什么，提出參考意見，但無明確診斷。用于非婦科細胞學(xué)標本和細針穿刺的細胞學(xué)標本描述性診斷法2135246標本采集閱片診斷

復(fù)查會診制片過程理論學(xué)習(xí)定期隨訪細胞學(xué)診斷的質(zhì)量管理體系脫落細胞學(xué)檢查的

臨床應(yīng)用評價6安全，病人痛苦少，無不良反應(yīng)可多次重復(fù)取材

所需設(shè)備簡單，操作方便，可用于普查.癌細胞檢出率較高，一般在60%以上

脫落細胞學(xué)診斷的優(yōu)勢采集的細胞代表范圍較大4有時不易對癌細胞做出明確組織分型.LOREM3往往不能確定腫瘤的具體部位，需結(jié)合活檢或X線等確診.LOREM2有一定的誤診率，有10-40%假陰性（惡性診斷為良性）和1-3%的假陽性（良性診斷為惡性）

LOREM1脫落細胞學(xué)診斷的不足01020304.切實掌握正常、良性病變和惡性腫瘤細胞的形態(tài)特點必須結(jié)合臨床無把握時應(yīng)反復(fù)取材檢查，診斷要客觀無充分把握時，不可輕易下陽性的肯定診斷脫落細胞學(xué)的診斷原則05在實踐中不斷總結(jié)經(jīng)驗，提高診斷水平細胞病理學(xué)檢驗技術(shù)任務(wù)二陰道脫落細胞檢查生殖系統(tǒng)正常脫落細胞形態(tài)1良性病變細胞形態(tài)學(xué)2CONTENTS

陰道上皮細胞與卵巢功能的關(guān)系3陰道炎癥4生殖系統(tǒng)正常脫落細胞形態(tài)女性生殖道主要檢查3種上皮:1.鱗狀上皮，分布于陰道和宮頸外部；2.子宮頸粘膜上皮3.子宮內(nèi)膜上皮01鱗狀上皮細胞底層鱗狀上皮細胞中層鱗狀上皮細胞上層鱗狀上皮細胞外底層細胞01宮頸型外底層細胞：胞質(zhì)內(nèi)有空泡，有時空泡環(huán)繞于核周，形成一透明環(huán)，特殊染色證實空泡內(nèi)含糖原，胞質(zhì)豐富藍染。該型顯示上皮細胞的增生狀態(tài)。常見于青壯年女性的涂片。03萎縮型外底層細胞：細胞常散在，形態(tài)較一致，呈圓形或卵圓形。因胞質(zhì)內(nèi)不含糖原，內(nèi)無或有時含小空泡。核圓形或卵圓形，較一致，染色質(zhì)疏松。見于原發(fā)性閉經(jīng)或絕經(jīng)期女性的陰道涂片02中層細胞產(chǎn)后型外底層細胞：部分細胞體積較大。此型細胞核常受空泡擠壓呈扁長形，多皺折、凹陷成瓢形。見于產(chǎn)婦或晚期流產(chǎn)患者陰道涂片

1內(nèi)底層細胞2萎縮型外底層細胞3宮頸型外底層細4產(chǎn)后型外底層細胞5中層細胞6妊娠期中層細胞7角化前細胞8完全角化細胞中層鱗狀上皮細胞若中層細胞呈船形，說明細胞質(zhì)含大量糖原，巴氏染色成黃色，胞核被擠至細胞邊緣，核大偏位，胞膜增厚，被稱為“妊娠細胞”或“船形”細胞。見于妊娠及絕經(jīng)早期。

1內(nèi)底層細胞2萎縮型外底層細胞3宮頸型外底層細胞4產(chǎn)后型外底層細胞5中層細胞6妊娠期中層細胞7角化前細胞8完全角化細胞表層鱗狀上皮細胞角化前細胞不全角化細胞胞質(zhì)內(nèi)含深褐色小顆粒，偶見大的、淡褐色包涵體，稱為大圓點細胞（polka-dotcells）

卵巢雌激素促進陰道上皮分化成熟

表層底層02柱狀上皮細胞子宮頸內(nèi)膜細胞01子宮頸內(nèi)膜細胞：又稱粘液細胞。保存完好的細胞似杯狀02纖毛柱狀細胞：絕經(jīng)后較多見。似蜂窩狀

子宮內(nèi)膜上皮細胞01基底層細胞02腺細胞子宮內(nèi)膜上皮（常規(guī)涂片）

顯示子宮內(nèi)膜上皮細胞呈單層片狀排列；細胞小，圓形，胞漿少；核小，染色較深。（取自功能性子宮出血涂片）良性病變細胞形態(tài)學(xué)01粘膜白斑：常發(fā)生于子宮頸，癌前病變。02正常：無核鱗狀上皮細胞小于0.5%。03假性角化：涂片中出現(xiàn)大片形態(tài)不規(guī)則的小鱗狀上皮鱗狀上皮細胞鱗化細胞陰道上皮細胞與卵巢功能的關(guān)系陰道上皮受卵巢內(nèi)分泌直接影響，其成熟程度與體內(nèi)雌激素水平呈正相關(guān):雌激素水平高時，涂片中有較多角化細胞，核致密深染；雌激素水平低時，涂片中出現(xiàn)小而圓或卵圓形，核疏松藍染的底層細胞。因此，根據(jù)涂片中上皮細胞的變化可以評價卵巢的功能。雌激素水平對陰道脫落細胞影響雌激素水平脫落細胞變化臨床意義1.極度低落陰道上皮萎縮變薄。脫落細胞以內(nèi)底層細胞為主，核深見于老年人和卵巢切除患者2.高度低落以外底層細胞為主，混雜少數(shù)中層和表層細胞，粘液多。更年期、絕經(jīng)后及輕婦女期卵巢功能缺如者。3.中度低落以中層細胞為主，其細胞擁護。更年期年紀大而未絕經(jīng)者、年輕閉經(jīng)者。4.輕度低落經(jīng)鈍角的角化前細胞為主5.輕度影響細胞全屬表層月經(jīng)后或接受小劑量雌激素治療時。6.中度影響以角化前細胞為主，并有30-40%角化細胞排卵前期，接受中等量雌激素治療7.高度影響角化細胞占60%左右，幾乎無白細胞，背景清晰紅藍相間排卵期或接受大劑量雌激素治療8.極度影響化細胞持續(xù)達60-70%?；蚪腔毎?0%宮內(nèi)膜囊性增生、子宮內(nèi)膜腺癌和子宮肌瘤等青春期女性在13-17歲，卵泡的發(fā)育漸趨成熟而導(dǎo)致正常生理變化，但在青春期內(nèi)分泌系統(tǒng)尚未穩(wěn)定，所以陰道涂片細胞無明顯周期性改變性成熟期青春期后，卵巢發(fā)育成熟，陰道上皮隨卵巢激素水平變化而發(fā)生周期性改變。更年期開始于45歲左右。雌激素水平低落，由于陰道上皮高度萎縮，抵抗力差，常伴有炎癥。涂片中細胞多是內(nèi)、外底層細胞，核深染，見較多中性粒細胞、巨噬細胞和紅細胞。由于炎癥刺激亦可見于增生與退變的中層、表層細胞和鱗狀化生細胞女性各階段的陰道脫落細胞表現(xiàn)1月經(jīng)期持續(xù)