DB41T 1930-2019 泡桐組織培養(yǎng)快繁技術(shù)規(guī)程

DB41河南省市場監(jiān)督管理局發(fā)布I 1 1 1 2 2 2 2本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：河南農(nóng)業(yè)大學(xué)、河南省林業(yè)科學(xué)本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：范國強(qiáng)、翟曉巧、趙振利、陳卓、劉榮寧、李永生、曹喜兵、林海、1泡桐組織培養(yǎng)快繁技術(shù)規(guī)程于人工控制光照和溫度的組織培養(yǎng)室內(nèi)，使之生長、分化或發(fā)育成完整植株的將芽轉(zhuǎn)移到生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)，形成完整植株的過程。取生長健康的泡桐當(dāng)年生帶有腋芽或頂芽的嫩枝，用清水清洗后，先用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.度20g/L，瓊脂濃度3.0g/L～8.0g/L。培養(yǎng)瓶放置于培養(yǎng)室中，培養(yǎng)溫度25℃±2℃,光照強(qiáng)度130μmoL/m2·s，光照時間16h/d。60d2采集生長健康的泡桐當(dāng)年生種子，先用70%酒精消毒30s，再放入0.1%HgCl2溶液中進(jìn)行浸泡消毒5min，然后用無菌水沖洗3～5次。最后將種子接種于不附加植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)的MS培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基中蔗糖濃度20g/L，瓊脂濃度5.0g/L。培養(yǎng)瓶放置于培養(yǎng)室中，培養(yǎng)溫度、光照強(qiáng)度和光照時間同3.1。50d后可獲得3～4對葉片的4.1葉片外植體芽的誘導(dǎo)將獲得的無菌葉片沿主脈切成約1.0cm×2.0cm的外植體，接種于附加不同濃度6-BA（8mg/L~培養(yǎng)瓶放置于培養(yǎng)室中，培養(yǎng)溫度、光照強(qiáng)度和光照時間同3.1。培養(yǎng)35d后，在葉緣處分4.2莖段外植體芽的誘導(dǎo)（0.2mg/L～0.5mg/L）的MS基本培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基中蔗糖濃度20g/L，瓊脂濃度5.0g/L。培養(yǎng)瓶放置于培養(yǎng)室中，培養(yǎng)溫度、光照強(qiáng)度和光照時間同3.1。培養(yǎng)30d后分化本培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基中蔗糖濃度20g/L，瓊脂濃度5.0g/L。培養(yǎng)瓶放置于培養(yǎng)室中，培養(yǎng)溫度、光照當(dāng)泡桐幼苗的根在生根培養(yǎng)基上長到約3cm時，逐步去掉組培瓶蓋，在溫室內(nèi)鍛盛有蛭石或草炭土（經(jīng)5%的高錳酸鉀消毒處理或121℃高溫滅菌20min）的營養(yǎng)缽中。用1/2MS營養(yǎng)液澆灌濕潤，放到溫室中培養(yǎng)，溫室溫度25℃~28℃,開始2周空氣